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黄芩种子质量的分级标准

安徽农业大学学报 2019年第3期46卷 504-509页

作者：葛人杰李璐含李柳柳简宇凡张岗彭亮颜永刚陕西中医药大学药学院/陕西秦岭中草药应用开发工程技术研究中心

为了研究黄芩种子的质量分级标准,对20个不同产地不同年份的黄芩种子的品质进行净度、千粒重、形态大小、含水量、饱满度、生活力和发芽率7项指标检测,并将各项数据进行主成分分析、k-均值聚类分析,以此作为分级参考依据,建立了黄芩种... 详细信息

为了研究黄芩种子的质量分级标准,对20个不同产地不同年份的黄芩种子的品质进行净度、千粒重、形态大小、含水量、饱满度、生活力和发芽率7项指标检测,并将各项数据进行主成分分析、k-均值聚类分析,以此作为分级参考依据,建立了黄芩种子Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级各级指标范围。其中,发芽率和种子活力作为主要分级依据,净度、千粒重、形态大小、含水量、饱满度作为次要分级依据。制定了的黄芩种子质量分级标准为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级,其质量分级标准符合实际情况,为黄芩种子的质量评价和人工栽培提供了参考和指导。

关键词：黄芩种子质量分级标准

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竹亚科单枝竹属芸香竹花枝和花特征补充描述

广西植物 2022年第10期42卷 1641-1644页

作者：张雨曲杨新杰程虎印高静彭亮张明英张岗陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室西安712046

繁殖器官在竹类植物的分类学研究中具有重要意义,研究组在广西马山县观察到竹亚科单枝竹属芸香竹正在开花,该文根据观察到的开花状况和采集到的标本解剖观察结果,对其花枝和繁殖器官特征做了详细的中文及拉丁文补充描述。经对比芸香竹... 详细信息

繁殖器官在竹类植物的分类学研究中具有重要意义,研究组在广西马山县观察到竹亚科单枝竹属芸香竹正在开花,该文根据观察到的开花状况和采集到的标本解剖观察结果,对其花枝和繁殖器官特征做了详细的中文及拉丁文补充描述。经对比芸香竹与属内已知繁殖器官结构的单枝竹和小花单枝竹的繁殖器官,3个竹种有相同的繁殖器官结构特征,但在小花数目和大小等方面具有差异。繁殖器官比较表明该属竹种的繁殖器官对喀斯特地貌环境有特殊的适应性,也支持依据营养器官差异划分为3个独立竹种。

关键词：竹亚科单枝竹属芸香竹花补充描述

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丹参总黄酮提取工艺的优化及其抑菌活性研究

化学与生物工程 2023年第1期40卷 25-29,47页

作者：龙旭王蕾萌龚莉雷亚婷郭惠靳如意陕西中医药大学陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

通过单因素实验对超声提取法和热回流提取法提取丹参总黄酮工艺进行了比较研究,确定超声提取法优于热回流提取法,再通过响应面法进一步优化丹参总黄酮的超声提取工艺,并研究了丹参总黄酮对革兰氏菌的抑制活性。结果表明,最佳超声提取工... 详细信息

通过单因素实验对超声提取法和热回流提取法提取丹参总黄酮工艺进行了比较研究,确定超声提取法优于热回流提取法,再通过响应面法进一步优化丹参总黄酮的超声提取工艺,并研究了丹参总黄酮对革兰氏菌的抑制活性。结果表明,最佳超声提取工艺条件为:料液比1∶10(g∶mL)、提取时间22 min、提取温度68℃、乙醇体积分数86%,在此条件下,丹参总黄酮提取率为4.140 mg·g^(-1);丹参总黄酮对革兰氏菌的抑制作用大小为:大肠埃希菌>金黄色葡萄球菌>铜绿假单胞菌。

关键词：丹参总黄酮超声提取抑菌活性响应面法

掌叶大黄(RheumpalmatumL.)WRKY基因家族鉴定与分析

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生物技术通报 2024年第1期40卷 250-261页

作者：吴圳张明英闫锋李依民高静颜永刚张岗陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心西安712046 咸阳712083 陕西中医药大学陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室西安712046

【目的】本研究为开展WRKY基因功能验证提供基础,进而为大黄药材品质形成的转录调控机制研究提供科学依据。【方法】基于掌叶大黄(R.palmatum L.)的全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定掌叶大黄WRKY基因家族成员,分析其蛋白理化性质... 详细信息

【目的】本研究为开展WRKY基因功能验证提供基础,进而为大黄药材品质形成的转录调控机制研究提供科学依据。【方法】基于掌叶大黄(R.palmatum L.)的全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定掌叶大黄WRKY基因家族成员,分析其蛋白理化性质、结构域、系统发育关系、蛋白互作,结合转录组数据进行不同组织和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理的表达谱分析。【结果】掌叶大黄WRKY基因家族包含53个成员,编码蛋白氨基酸数量为192-748,均为亲水性蛋白,预测定位均在细胞核。掌叶大黄WRKY基因家族与拟南芥WRKY基因家族成员进化树可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个亚族,其中Ⅱ亚族WRKY占比最高(58.49%)。转录组数据分析显示掌叶大黄WRKY基因家族成员在掌叶大黄根、根茎和叶中差异表达,其中7个基因在根和根茎中表达量较高,12个基因响应MeJA处理呈差异表达,其中10个被MeJA显著诱导,4个候选基因RpWRKY5/6/9/33的qPCR分析与其转录组结果基本一致。蛋白互作网络显示RpWRKY2/16/20/22/23与查尔酮合酶(chalconesynthase,CHS)发生相互作用。【结论】获得53个掌叶大黄WRKY基因、生物信息、组织及响应MeJA的表达特征,其中5个可能与大黄蒽醌类物质的合成有关。

关键词：掌叶大黄 WRKY 转录因子基因表达茉莉酸甲酯

芸苔素对铅胁迫下远志种子萌发和幼苗生长生理特征的影响

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西北植物学报 2022年第12期42卷 2093-2102页

作者：姬海月胡本祥杨冰月罗瑶颜永刚彭亮陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心/“秦药”研发重点实验室西安712046 陕西国际商贸学院西安712046

以远志(Polygala tenuifolia Willd.)为研究对象,采用3 mmol·L^(-1)醋酸铅溶液模拟铅胁迫,探讨两种处理方式(预浸种、拌种)不同浓度(0~100μmol·L^(-1))芸苔素(EBL)对远志种子萌发、幼苗生长、生理生化特性及铅含量的影响。结果表明:... 详细信息

以远志(Polygala tenuifolia Willd.)为研究对象,采用3 mmol·L^(-1)醋酸铅溶液模拟铅胁迫,探讨两种处理方式(预浸种、拌种)不同浓度(0~100μmol·L^(-1))芸苔素(EBL)对远志种子萌发、幼苗生长、生理生化特性及铅含量的影响。结果表明:(1)远志种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和幼苗的胚芽长度、鲜重、干重在铅胁迫下显著降低,EBL预浸种和拌种处理可有效缓解远志种子和幼苗遭受铅胁迫的伤害且具有剂量效应。(2)在铅胁迫下,远志幼苗游离脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量随EBL浓度的增加而先升后降,它们在0.01μmol·L^(-1) EBL拌种处理下分别为0μmol·L^(-1) EBL处理的1.99、2.31、1.95倍,且拌种处理影响较浸种处理更为显著。(3)在铅胁迫下,远志幼苗超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性均随EBL浓度的增加而先上升后下降,且预浸种和拌种处理的酶活性均在0.01μmol·L^(-1) EBL浓度下最强。(4)在铅胁迫下,远志幼苗MDA和H 2O 2含量均随着EBL浓度增加而先下降后上升,均与空白对照(CK)差异显著,且预浸种和拌种处理的含量均在0.01μmol·L^(-1) EBL浓度下最低。(5)远志种子和幼苗中Pb含量在铅胁迫处理后均大幅显著增加,拌种处理种子中铅含量增幅远大于浸种处理,而幼苗中铅含量增幅在两种处理间无显著差异;铅胁迫种子中铅含量在0.0001μmol·L^(-1) EBL预浸种处理后显著升高,在0.0001~1.0μmol·L^(-1) EBL拌种处理后显著降低,而幼苗中铅含量在各浓度EBL拌种和浸种处理后均显著升高,并均在0.01μmol·L^(-1) EBL处理下最高。研究发现,铅胁迫致使远志幼苗抗氧化酶防御系统受损,严重抑制了远志种子萌发及幼苗生长;适宜浓度(0.01μmol·L^(-1))EBL能通过调节铅胁迫下远志幼苗渗透调节物质含量、保护酶系统活性而有效缓解过氧化伤害,增强植株抵抗铅胁迫伤害的能力,显著促进种子萌发和幼苗生长,从而表现出较好的抗逆性,但却显著促进了幼苗中铅的积累。

关键词：远志铅胁迫芸苔素种子萌发幼苗生长抗氧化酶活性

基于HS-GC-IMS技术分析款冬花蜜炙前后挥发性有机物的差异性

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中草药 2022年第6期53卷 1854-1861页

作者：杨冰月罗瑶姬海月净易尧陈国良张岗颜永刚胡本祥彭亮陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046 “秦药”研发重点实验室陕西西安712046 陕西广济堂医药集团陕西榆林719000

目的获得款冬花Farfarae Flos炮制前、后生品和蜜炙品中挥发性有机物的特征及其变化规律。方法采用顶空-气相色谱-离子迁移质谱(HS-GC-IMS)测定款冬花生品和蜜炙品的挥发性有机物,构建HS-GC-IMS指纹图谱,VOCal软件对检测到的成分进行定... 详细信息

目的获得款冬花Farfarae Flos炮制前、后生品和蜜炙品中挥发性有机物的特征及其变化规律。方法采用顶空-气相色谱-离子迁移质谱(HS-GC-IMS)测定款冬花生品和蜜炙品的挥发性有机物,构建HS-GC-IMS指纹图谱,VOCal软件对检测到的成分进行定性和定量分析,运用主成分分析(principal component analysis,PCA)和邻近距离法对样品进行差异性分析。结果基于HS-GC-IMS技术从款冬花生品和蜜炙品中共获得了61种挥发性有机物,定性鉴别出53种;构建了款冬花生品和蜜炙品的HS-GC-IMS指纹图谱,通过PCA和邻近距离法分析可将款冬花生品与蜜炙品进行区分,甲硫醚(dimethyl sulfide)、2-甲基丙烯醛(2-methyl-2-propenal)等9种物质可作为款冬花生品的特征性成分;乙酸D(acetic acid D)、乙酸M(acetic acid M)等14种物质可作为款冬花蜜炙品的特征性成分。结论 HS-GC-IMS指纹图谱可用于识别与评价款冬花生品和蜜炙品挥发性有机物的种类和差异,为款冬花饮片的质量控制及临床应用提供参考。

关键词：款冬花生品蜜炙品顶空-气相色谱-离子迁移谱甲硫醚 2-甲基丙烯醛乙酸D 乙酸M

大黄酒蒸前后对便秘模型小鼠肠道菌群及免疫环境的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：白亚亚田睿史亚军赵重博孙静张丽颜永刚唐于平张桥陕西中医药大学陕西省中药饮片工程技术研究中心陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西省中医药管理局中药配伍重点研究室南京中医药大学翰林学院

目的：研究大黄酒蒸前后对便秘模型小鼠治疗的作用差异及潜在的作用机制。方法：将54只雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、乳果糖组、生、熟大黄(8、4、1 g·kg-1)剂量组，除空白组外，其余各组采用盐酸咯哌丁胺复制便秘模型。造模2... 详细信息

目的：研究大黄酒蒸前后对便秘模型小鼠治疗的作用差异及潜在的作用机制。方法：将54只雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、乳果糖组、生、熟大黄(8、4、1 g·kg-1)剂量组，除空白组外，其余各组采用盐酸咯哌丁胺复制便秘模型。造模2周后，空白组及模型组给予等体积的0.9%生理盐水，乳果糖组给予乳果糖(6 mg·kg-1)，生、熟大黄组给予相应水提物，1次/d，连续2周，给药结束后，收集粪便用于肠道菌群的16S rRNA测序，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结肠组织中胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、白细胞介素-6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)含量，采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学变化，采用流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+及Treg细胞比例变化。结果：与空白组比较，模型组24 h粪便粒数、质量及粪便含水率显著降低(P<0.01)，生、熟大黄高剂量组干预后有明显的升高(P<0.05，P<0.01)。与空白组比较，模型组结肠表现出一定的病理损伤，而生、熟大黄各剂量有不同程度的缓解。与空白组比较，模型组中GAS及MTL含量显著降低(P<0.01)，IL-6、IFN-γ含量明显升高(P<0.05，P<0.01)，生、熟大黄各组表现出不同程度的回调。与空白组比较，模型组中CD4+、CD8+及Treg细胞比例显著下降(P<0.01)，生、熟大黄干预后CD4+、CD8+比例有显著的回调(P<0.01)，Treg细胞比例虽有升高趋势，但差异无统计学意义。与空白组比较，模型组中扩增子序列变体(ASV)数及Alpha多样性降低，生、熟大黄干预后有一定的升高；此外，模型组中乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度降低，芽胞杆菌属(Bacillus)及螺杆菌属(Helicobacter)相对丰度升高，生、熟大黄均可升高乳杆菌属，降低芽胞杆菌属及螺杆菌属相对丰度。结论：生、熟大黄可能通过改善肠道菌群失调，促进免疫系统激活，抑制炎症因子释放，提升胃肠功能，这可能是其治疗便秘的潜在作用机制之一。

关键词：大黄酒蒸模型小鼠肠道菌群细胞免疫炎症因子胃肠激素

基于全长转录组测序的掌叶大黄NAC基因家族鉴定分析

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基因组学与应用生物学 2023年第7期42卷 684-697页

作者：郝高鑫王艳李依民张明英高静颜永刚张岗陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心西安712046 咸阳712083 陕西中医药大学陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室西安712046

NAC是植物特有的转录因子家族,本研究基于全长转录组测序分析,系统筛选掌叶大黄(Rheum palmatum)NAC家族,进行编码蛋白理化性质、结构域及系统进化等生物信息分析,利用RNA-seq进行基因组织表达和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)处... 详细信息

NAC是植物特有的转录因子家族,本研究基于全长转录组测序分析,系统筛选掌叶大黄(Rheum palmatum)NAC家族,进行编码蛋白理化性质、结构域及系统进化等生物信息分析,利用RNA-seq进行基因组织表达和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)处理的表达分析,并用RT-qPCR进行候选基因表达模式验证。结果表明,掌叶大黄NAC基因家族包含32个成员,编码蛋白主要为热稳定性好的亲水性蛋白,大多定位于叶绿体或细胞核,二级结构中α-螺旋与无规则卷曲所占比例大,多数蛋白都含有NAC特有的5个亚结构域。掌叶大黄RpNACs与拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtNAC家族成员的系统进化树一致,被分为11个亚家族,NAC2亚家族中成员数量最高。RNA-seq分析揭示RpNACs基因在掌叶大黄叶、根和根茎中差异表达,其中,11个基因在根茎中显著上调、 12个在根中显著上调;MeJA处理12 h后,RpNAC18、RpNAC20、RpNAC23、RpNAC25、RpNAC27、RpNAC30等6个基因显著上调。RT-qPCR检测显示,其中4个候选基因RpNAC20、RpNAC23、RpNAC25、RpNAC27均受MeJA处理诱导,与转录组数据基本一致。本文系统分析掌叶大黄NAC基因家族,为后续深入进行基因功能验证及其在药材品质形成中的作用机制研究提供科学依据。

关键词：掌叶大黄 NAC 转录因子基因表达

远志细胞色素P450家族PtCYP72A546克隆、亚细胞定位与表达分析

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中草药 2024年第3期55卷 919-927页

作者：罗瑶净易尧胡本祥杨冰月姬海月颜永刚张岗赵璠彭亮陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心/“秦药”研发重点实验室陕西咸阳712046 陕西国际商贸学院陕西咸阳712046 榆林市第五医院陕西榆林719000

目的旨在克隆获得远志Polygala tenuifolia细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)基因CYP72A546的基因开放阅读框(open reading frame,ORF),并对其理化特性、系统进化关系、组织表达、激素与非生物胁迫下的表达等展开分析。方法基于远... 详细信息

目的旨在克隆获得远志Polygala tenuifolia细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)基因CYP72A546的基因开放阅读框(open reading frame,ORF),并对其理化特性、系统进化关系、组织表达、激素与非生物胁迫下的表达等展开分析。方法基于远志全长转录组文库筛选并克隆远志细胞色素P450家族基因PtCYP72A546,通过生物信息学在线软件分析其编码的氨基酸序列,预测蛋白理化性质、结构域等分子特征;利用MEGA11分析进化关系,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测不同组织、激素及非生物胁迫的相对表达量。结果从远志中成功克隆得到远志细胞色素P450家族基因PtCYP72A546,其ORF序列全长共计1560 bp,编码519个氨基酸,相对分子质量为59770,系疏水性稳定蛋白,含有1个保守结构域,不具有跨膜结构,二级结构主要为α-螺旋和无规卷曲,亚细胞定位分析表明PtCYP72A546-GFP融合蛋白定位于内质网。qPCR结果显示,远志根中CYP72A546表达量显著高于茎和叶片;200μmol/L脱落酸(abscisic acid,ABA)和200μmol/L壳聚糖(chitosan,CHT)处理下,CYP72A546均于12 h达峰值,分别为空白对照的7.45倍和5.49倍;在非生物(干旱、盐)胁迫处理下,CYP72A546的表达均先受抑制(6 h),再上调后缓慢下降。结论通过对远志CYP72A546基因的克隆、鉴定与分析,为深入研究其在远志三萜皂苷合成途径的功能奠定基础。

关键词：远志细胞色素P450 亚细胞定位生物信息学分析基因表达