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嗅三针对帕金森病痴呆小鼠海马CA1区载脂蛋白E和病理底物表达的影响

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中国康复医学杂志 2024年第1期39卷 31-38页

作者：郭婕赵颖倩李华王渊马雪王强陕西中医药大学第二临床医学院陕西省咸阳市712046 陕西中医药大学针灸推拿学院陕西省针药结合重点实验室

目的:观察嗅三针干预对帕金森病痴呆(Parkinson’s disease dementia,PDD)小鼠海马CA1区载脂蛋白E(apolipoprotein E,Apo E)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)以及相关核心病理底物表达的影响,探讨嗅三针改善PDD认知功能的部分作用机制。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组(Control)、假手术组(Sham)、模型组(Model)和电针组(AE),每组10只;采用单侧内侧前脑束(medial forebrain tract,MFB)注射6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)建立PD模型并筛选PDD小鼠。建模筛选成功后,电针组选取嗅三针进行电针治疗,各组小鼠干预14天后采用Morris水迷宫实验和穿梭箱实验评估各组小鼠学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区细胞病理改变;免疫印迹法检测海马CA1区α-syn、Aβ、Apo E蛋白的表达;免疫荧光双标观察海马CA1区Apo E与GFAP的共定位率。结果:与模型组比较,电针组小鼠水迷宫逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.05),穿梭箱主动回避次数增加(P<0.05),电击刺激平均时间减少(P<0.01)。模型组小鼠海马CA1区神经细胞排列稀疏、变性坏死,细胞核体积变小、浓染、结构不清,呈核固缩表现;而电针组小鼠海马CA1区神经元病变有明显改善,大部分细胞排列规则,细胞核圆而大,染色浅,形态清晰。电针组小鼠海马CA1区α-syn、Aβ、Apo E蛋白以及Apo E与GFAP共定位率均较模型组减少(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论:嗅三针可提高PDD小鼠认知能力并改善神经元形态结构与功能,机制可能与其抑制星形胶质细胞Apo E表达从而减少海马CA1区α-syn、Aβ沉积有关。

关键词：帕金森病痴呆嗅三针载脂蛋白E 胶质纤维酸性蛋白 α-突触核蛋白淀粉样蛋白-β

电针早期干预对肌萎缩侧索硬化症小鼠大脑皮层TDP-43及HMGB1/RhoA信号通路的影响

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中国康复医学杂志 2024年第3期39卷 312-319页

作者：卢苑蓉刘隽阳郭婕李华王渊赵颖倩李杰王强陕西中医药大学第二临床医学院陕西省咸阳市712046 陕西中医药大学针灸推拿学院陕西省针药结合重点实验室

目的:观察电针早期干预对肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)小鼠大脑皮层TARDNA结合蛋白43(TARDNA binding protein,TDP-43)及HMGB1/RhoA信号通路表达的影响,探究电针早期干预改善ALS小鼠运动功能的潜在机制。方法:... 详细信息

目的:观察电针早期干预对肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)小鼠大脑皮层TARDNA结合蛋白43(TARDNA binding protein,TDP-43)及HMGB1/RhoA信号通路表达的影响,探究电针早期干预改善ALS小鼠运动功能的潜在机制。方法:符合SOD1G93A基因表型小鼠按随机数字表法分为模型组(SOD1G93A)、针刺干预组(electroacupuncture,EA)、利鲁唑组(Riluzole),同窝SOD1G93A阴性小鼠为空白对照组(control),每组15只。电针组针刺干预百会穴、双侧天柱穴、双侧天枢穴,5次/7d,7d为一个疗程,共治疗4个疗程。利鲁唑组予利鲁唑30mg/(kg·d)灌胃治疗,1次/d,5次/周,持续2周。采用后肢功能神经学评分和转棒疲劳实验评估各组小鼠运动功能,免疫荧光法观察大脑皮层TDP-43阳性细胞率;Western Blot法检测大脑皮质离子钙结合接头分子1(Iba-1)、HMGB1、RhoA蛋白相对表达量;Elisa法检测血清TNF-α及MCP-1的含量;透射电镜观察大脑皮层神经元形态变化。结果:与对照组比较,模型组转棒潜伏期时间减少和神经学评分增高(P<0.01),血清MCP-1、TNF-α含量和大脑皮层Iba-1、HMGB1、RhoA蛋白表达以及TDP-43阳性细胞率均升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组和利鲁唑组转棒潜伏期时间增加和神经学评分降低(P<0.01,P<0.05),血清MCP-1、TNF-α含量和大脑皮质Iba-1、HMGB1、RhoA蛋白表达以及TDP-43阳性细胞率均降低(P<0.01,P<0.05)。电镜结果显示,对照组小鼠皮层神经元细胞结构正常,模型组小鼠神经细胞有明显病理变化,电针组和利鲁唑组神经细胞损伤减轻,结构较完整,可见部分正常细胞器。结论:电针干预可改善ALS模型小鼠的运动功能,其机制可能与抑制HMGB1/RhoA信号通路进而减轻小胶质细胞诱导的神经炎症有关,并推测其对于减少ALS病理底物TDP-43的沉积具有正相关作用。

关键词：肌萎缩侧索硬化症电针神经炎症单核细胞趋化蛋白-1 Ras同源基因家族成员A TARDNA结合蛋白-43

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乳酸化调控肿瘤发生发展的研究现状

中国肿瘤临床 2024年第5期51卷 247-252页

作者：张博兴王树楷杨好(综述) 宋亮(审校) 陕西中医药大学第二临床医学院陕西省咸阳市712046 陕西中医药大学医学科研实验中心

乳酸化是一种新颖的依赖乳酸的蛋白质翻译后修饰方式,其可以通过将乳酰基与蛋白质赖氨酸残基共价耦联,改变蛋白质结构和功能,调控基因表达,从而参与细胞代谢和生长过程。近期研究发现肿瘤组织中的乳酸化能够通过调控细胞内信号转导、基... 详细信息

乳酸化是一种新颖的依赖乳酸的蛋白质翻译后修饰方式,其可以通过将乳酰基与蛋白质赖氨酸残基共价耦联,改变蛋白质结构和功能,调控基因表达,从而参与细胞代谢和生长过程。近期研究发现肿瘤组织中的乳酸化能够通过调控细胞内信号转导、基因表达和蛋白功能,进而影响肿瘤发生发展。本文综述乳酸化的发现过程及其在肿瘤中的研究进展,旨在为肿瘤的预防和治疗提供新思路。

关键词：乳酸化肿瘤翻译后修饰

靳三针调神针法治疗卒中后焦虑的疗效观察及对下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

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针刺研究 2024年第1期49卷 57-63页

作者：李美晨王毓婷李柯谊许小燕庄礼兴广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广州中医药大学针灸康复临床医学院广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院康复中心广州510405

目的:观察靳三针调神针法治疗卒中后焦虑的临床疗效,从下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的角度探讨其作用机制。方法:将54例卒中后焦虑患者按照随机数字表法分为假针组(26例)和靳三针调神针组(28例)。两组患者均接受基础药物治疗及康复治疗,... 详细信息

目的:观察靳三针调神针法治疗卒中后焦虑的临床疗效,从下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的角度探讨其作用机制。方法:将54例卒中后焦虑患者按照随机数字表法分为假针组(26例)和靳三针调神针组(28例)。两组患者均接受基础药物治疗及康复治疗,两组均取四神针、神庭、印堂及双侧神门、三阴交、合谷、太冲,靳三针调神针组予真实针刺,假针组予假针刺,每次30 min,每日1次,每周连续针刺5次,共治疗3周。比较两组治疗前、开始治疗后第10天及治疗后第21天汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的变化,ELISA法检测血清促肾上腺皮质激素(ACTH)及血清皮质醇(CORT)含量,并记录不良反应。结果:与本组治疗前比较,靳三针调神针组治疗第10、21天HAMA评分及NIHSS评分降低(P<0.05);假针组治疗第21天HAMA评分及NIHSS评分降低(P<0.05)。治疗第21天,靳三针调神针组HAMA评分及NIHSS评分较假针组下降更明显(P<0.05)。治疗第21天靳三针调神针组血清ACTH含量及血清CORT含量较本组治疗前及假针组治疗后降低(P<0.05)。靳三针调神针组及假针组均未发生明显不良事件。结论:采用假针刺作为对照,初步证实了靳三针调神针法治疗卒中后焦虑的有效性,进一步结合血清学指标的下降趋势,推测其作用机制可能与调节HPA轴有关。

关键词：卒中后焦虑靳三针调神针法假针刺下丘脑-垂体-肾上腺轴

盐酸青藤碱诱导黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞凋亡的机制研究

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生物化学与生物物理进展 2024年第4期51卷 959-968页

作者：侯新聚雷洪峰陈勇黎芙希孙敬宁刘佳铭马红梅南昌市洪都中医院南昌330008 广州中医药大学第四临床医学院广州510006 广州中医药大学第二临床医学院广州510006

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞... 详细信息

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞增殖的情况;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测经过盐酸青藤碱处理后,成纤维细胞相关基因mRNA表达的改变,用ELISA法检测药物的作用对血清中炎症因子等水平的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白质的表达。结果盐酸青藤碱能降低成纤维细胞存活率,且随浓度升高存活率逐渐降低。盐酸青藤碱中各个组的效果均十分明显(P<0.05)。在相关基因的mRNA表达层面,与对照组比较,盐酸青藤碱各组炎症因子均显著下调(P<0.05),凋亡蛋白的表达量显著上升、Bcl-2的mRNA表达量下降(P<0.05),而PI3K/mTOR/AKT3信号通路分子的mRNA表达量均下降(P<0.05)。在蛋白质表达层面,与对照组相比较,中、高剂量盐酸青藤碱组血清中炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、TGF-β的水平均明显下调(P<0.05),凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达量均上调,并且与给药剂量成正相关,而抗凋亡蛋白Bcl-2、PI3K/AKT3/mTOR信号通路的表达量则与给药剂量成负相关。盐酸青藤碱对家兔膝关节成纤维细胞的存活表现为显著的抑制作用,作用机制或与下调炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β的表达,并促进凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,抑制其下游PI3K/AKT3/mTOR信号通路的基因表达有关。结论盐酸青藤碱可抑制黏连性膝关节强直家兔膝关节成纤维细胞的炎症反应和加速成纤维细胞的凋亡,或可通过该机制为改善和治疗黏连性膝关节强直提供新的方法。

关键词：盐酸青藤碱黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞

诃子水提物通过上调PD-1/PD-L1表达调节胶原蛋白诱发关节炎(CIA)大鼠脾脏中细胞的细胞免疫减轻关节炎症

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第6期 494-500页

作者：吴茜徐娥娥董家博全嘉运杨潇兰州大学第二临床医学院陕西中医药大学医学技术学院

目的研究诃子水提取物(TCWE)对胶原蛋白诱发关节炎(CIA)大鼠细胞免疫及程序性死亡蛋白1/程序性死亡蛋白1配体1(PD-1/PD-L1)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、 CIA组、 TCWE处理组、甲氨蝶呤(MTX)处理组，每组15只。除对照组外... 详细信息

目的研究诃子水提取物(TCWE)对胶原蛋白诱发关节炎(CIA)大鼠细胞免疫及程序性死亡蛋白1/程序性死亡蛋白1配体1(PD-1/PD-L1)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、 CIA组、 TCWE处理组、甲氨蝶呤(MTX)处理组，每组15只。除对照组外，其余各组SD大鼠皮下注射Ⅱ型胶原蛋白制备胶原蛋白诱发关节炎(CIA)模型，TCWE组大鼠采用[20 mg/(kg·d)] TCWE处理，MTX组大鼠采用[1.67 mg/(kg·d)]MTX处理。处理14 d后，通过HE染色检查软骨形态，流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞凋亡和调节性T细胞(Treg)/Th17细胞比率，反转录PCR检测脾脏中的维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)和叉头盒转录因子P3(FOXP3)、 PD-1和PD-L1的mRNA表达，免疫组织化学染色检测RORγt、 FOXP3的表达和定位。Western blot法检测脾脏淋巴细胞的PD-1和PD-L1的蛋白表达，ELISA检测大鼠血清白细胞介素17(IL-17)和转化生长因子β(TGF-β)水平。结果与CIA组相比，TCWE组和MTX组的软骨和滑膜病变明显减轻，脾脏中的T淋巴细胞凋亡率增加，Treg/Th17细胞比率上调，RORγt的表达降低，FOXP3、 PD-1和PD-L1的表达增加。血清IL-17水平降低，血清TGF-β水平升高。结论 TCWE处理可能激活脾脏细胞的PD-1/PD-L1通路调节CIA大鼠脾脏中细胞的细胞免疫，减轻软骨损伤。

关键词：诃子水提取物胶原蛋白诱发关节炎(CIA) 软骨细胞免疫程序性细胞死亡蛋白1(PD-1) 程序性细胞死亡蛋白1配体1(PD-L1)

中医药调控肿瘤微环境治疗脑胶质瘤的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：齐帆赵晓平范小璇孟凯强吕晶黄岚侯玉冯照群 1.陕西中医药大学第一临床医学院 2.陕西中医药大学附属医院 3.群山国立大学陕西中医药大学第一临床医学院陕西中医药大学附属医院群山国立大学

脑胶质瘤作为全球病死率最高的恶性肿瘤之一，其发病机制尚不明确。尽管手术、放疗、化疗、免疫治疗和电场治疗等在治疗脑胶质瘤方面取得了较好的临床疗效，但这些治疗方法存在不良反应大、患者经济和心理负担重等问题。近年来，中医凭... 详细信息

脑胶质瘤作为全球病死率最高的恶性肿瘤之一，其发病机制尚不明确。尽管手术、放疗、化疗、免疫治疗和电场治疗等在治疗脑胶质瘤方面取得了较好的临床疗效，但这些治疗方法存在不良反应大、患者经济和心理负担重等问题。近年来，中医凭借多成分、多靶点、多途径的特点在肿瘤治疗中成为亮点，且其不良反应小，可与西医在治疗上优势互补。多项研究表明，中药单体活性成分和中药复方可通过重塑肿瘤微环境（TME），抑制脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭、迁移、血管新生，促进脑胶质瘤细胞的凋亡、自噬，从而延缓脑胶质瘤发展进程，达到治疗脑胶质瘤的作用。近几年与此相关的研究成果颇多，现存的总结文献纳入不完全，缺乏系统的整理，故而该文从TME与脑胶质瘤相关性出发，旨在系统总结中医药干预TME治疗脑胶质瘤的相关作用机制，以期为脑胶质瘤的治疗提供新的靶点、新的视角和新的思路，促进中医药现代化发展。

关键词：肿瘤微环境脑胶质瘤中医药分子机制研究进展

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基于药物代谢酶的附子配伍减毒研究进展

中药药理与临床 2024年第5期 97-102页

作者：王婧李星雨陈思凯卫培峰陕西中医药大学陕西中医药大学第二附属医院

附子为毛茛科多年生草本植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根加工品，具有回阳救逆、散寒止痛、温阳化气的功效，在我国有着悠久的历史和独特的应用体系。由于附子存在“效毒二重性”,当过量服用和配伍不当时，其中所含的二萜类... 详细信息

附子为毛茛科多年生草本植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根加工品，具有回阳救逆、散寒止痛、温阳化气的功效，在我国有着悠久的历史和独特的应用体系。由于附子存在“效毒二重性”,当过量服用和配伍不当时，其中所含的二萜类生物碱会对机体的心脏和神经系统造成严重的损坏，但其潜在机制是否与肝脏药物代谢酶的代谢相互作用有关仍不明确。本文从肝脏药物代谢酶角度阐述附子活性成分的代谢特性及其配伍对药物代谢酶的亲和作用和机制，扩大附子的用药范围，降低毒副作用，促进附子合理开发和临床安全应用，以期为附子配伍减毒增效研究提供创新思路及其合理有效应用提供参考。

关键词：附子药物代谢酶 CYP450 配伍减毒

基于RNA-Seq技术探讨青藤碱干预膝骨关节炎大鼠的作用机制

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中国中西医结合杂志 2024年第1期44卷 77-83页

作者：马阿雪寇久社鲁晓红陕西中医药大学第二临床医学院陕西712046 陕西中医药大学第二附属医院疼痛科陕西712000 陕西中医药大学附属医院第二手术麻醉科陕西712000

目的观察青藤碱对于碘乙酸钠诱导的膝骨关节炎(KOA)大鼠关节软骨的转录组影响。方法按随机数表法将30只SD大鼠分为空白(CK)组、模型(M)组和治疗(T)组3组,每组10只。M、T组大鼠右下肢关节腔内单次注射碘乙酸钠(1 mg/50μL生理盐水)建立KO... 详细信息

目的观察青藤碱对于碘乙酸钠诱导的膝骨关节炎(KOA)大鼠关节软骨的转录组影响。方法按随机数表法将30只SD大鼠分为空白(CK)组、模型(M)组和治疗(T)组3组,每组10只。M、T组大鼠右下肢关节腔内单次注射碘乙酸钠(1 mg/50μL生理盐水)建立KOA模型,注射后每周测量全部大鼠右下肢膝关节直径。造模21天后T组开始注射青藤碱(60 mg/kg),每天1次,连续10天。末次给药后8 h,对3组大鼠进行取材,麻醉后剖开大鼠右下肢关节,取下一部分关节后固定脱钙进行组织病理学分析;一部分关节软骨进行总RNA提取后测序,检测3组大鼠软骨组织中转录组基因表达情况,再对测序数据进行分析,包括差异基因表达分析、基因本体论联合会建立的数据库(GO)功能富集分析以及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果青藤碱干预能够使大鼠膝关节直径减小(P<0.05),减轻关节软骨的损伤,降低Mankin’s评分(P<0.05);3组大鼠共有24个具有显著性差异的基因,显著富集于GO功能分类中的单核细胞趋化、CCR趋化因子受体结合和KEGG富集的细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路等,其中主要作用的靶点基因为C-C基序趋化因子配体(CCL)4、CCL9、Prkag3等。结论青藤碱可通过多途径、多靶点对KOA发挥疗效,关键靶点CCL4、CCL9、Prkag3及其相关的信号通路可能是青藤碱干预KOA的主要作用机制。

关键词：青藤碱膝骨关节炎转录组测序 C-C基序趋化因子配体中药单体