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EGR3通过抑制PRMT1/p-STAT3通路减轻肥胖相关性肾病足细胞炎症损伤

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中南大学学报（医学版） 2024年第3期49卷 349-358页

作者：彭琳孙晓滢易璇王舟琪陈科长沙市第一医院肾内科长沙410005 中南大学湘雅三医院内分泌科长沙410013

目的:肥胖会导致肥胖相关性肾病(obesity related glomerulopathy,ORG),但其发病机制并不明确。本研究拟检测早期生长反应蛋白3(early growth response protein 3,EGR3)在ORG患者和高脂饮食诱导的肥胖小鼠肾皮质组织中的表达,并探讨EGR... 详细信息

目的:肥胖会导致肥胖相关性肾病(obesity related glomerulopathy,ORG),但其发病机制并不明确。本研究拟检测早期生长反应蛋白3(early growth response protein 3,EGR3)在ORG患者和高脂饮食诱导的肥胖小鼠肾皮质组织中的表达,并探讨EGR3抑制棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的人足细胞炎症损伤的分子机制。方法:收集排除其他疾病导致的肾损害并经组织病理学证实的ORG患者(n=6)和高脂饮食诱导的肥胖小鼠的肾皮质组织(n=10)。使用150μmol/L PA干预人和小鼠足细胞48 h;人足细胞中分别过表达或沉默EGR3。采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测白细胞介素(interleukin,IL)-6和IL-1β的含量;real-time RT-PCR检测EGR3、足细胞分子标志NPHS1(nephrosis1)、NPHS2(nephrosis2)、足糖萼蛋白(podocalyxin,PODXL)、平足蛋白(podoplanin,PDPN)mRNA的表达;RNA-seq检测人足细胞过表达EGR3并150μmol/L PA干预后与对照组的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)+液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS)检测EGR3可能的相互作用蛋白质,并与RNA-seq的结果取交集;Co-IP验证EGR3与蛋白精氨酸甲基转移酶1(protein arginine methyltransferases 1,PRMT1)的相互作用;沉默EGR3和PRMT1抑制剂干预后检测PA诱导的足细胞培养液中IL-6和IL-1β的含量;蛋白质印迹法检测分别过表达或沉默EGR3后磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3,p-STAT3)的蛋白质表达。结果:EGR3在ORG患者和高脂饮食诱导的肥胖小鼠肾皮质组织中的表达均显著上调(均P分泌,并分别上调或下调NPHS1、PODXL、NPHS2及PDPN的表达(均P分泌(均P<0.05);此外,过表达或沉默EGR3负调控PRMT1及p-STAT3的表达。结论:EGR3可能通过抑制PRMT1/p-STAT3通路减轻ORG足细胞炎症损伤。

关键词：早期生长反应蛋白3 棕榈酸肥胖相关性肾病足细胞炎症因子

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EGR3抑制PRMT1-p-STAT3通路减少肥胖相关性肾病足细胞炎症损伤

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中南大学学报(医学版) 2024年

作者：彭琳孙晓滢易璇王舟琪陈科中南大学湘雅三医院内分泌科长沙市第一医院肾内科

目的：肥胖导致肥胖相关性肾病(obesity related glomerulopathy, ORG)，但发病机制并不明确。本研究拟探讨早期生长反应蛋白3(early growth response protein 3, EGR3)在ORG患者及高脂饮食诱导的肥胖小鼠肾脏皮质组织中表达，并探讨EGR... 详细信息

目的：肥胖导致肥胖相关性肾病(obesity related glomerulopathy, ORG)，但发病机制并不明确。本研究拟探讨早期生长反应蛋白3(early growth response protein 3, EGR3)在ORG患者及高脂饮食诱导的肥胖小鼠肾脏皮质组织中表达，并探讨EGR3在抑制棕榈酸(palmitic acid, PA)诱导的人足细胞炎症损伤的分子机制。方法：收集排除其他疾病导致的肾损害并病理证实的ORG患者(n=6)及高脂饮食诱导的肥胖小鼠肾脏皮质组织(n=6),PCR检测EGR3的表达；150μmol/L PA干预人及小鼠足细胞48h,PCR检测EGR3的表达；人足细胞中分别过表达或沉默EGR3，酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测150μmol/L PA诱导48 h后细胞培养液中白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)及白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)的含量，并PCR检测足细胞分子标志肾病蛋白(nephrin,NPHS1)、足细胞标记蛋白(podocalyxin, PODXL)、足蛋白(podocin, NPHS2)、肾小球足突细胞膜黏蛋白(podoplanin,PDPN)的表达；RNA-seq检测人足细胞过表达EGR3并150μmol/L PA干预后与对照组的差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)；免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation, Co-IP)+液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS)检测EGR3可能的相互作用蛋白，并与RNA-seq结果取交集；Co-IP验证EGR3与PRMT1的相互作用；沉默EGR3及PRMT1抑制剂干预后检测PA诱导的足细胞IL-6及IL-1β分泌；Western blotting检测分别过表达或沉默EGR3后磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription3, p-STAT3)的表达。结果：EGR3分别在ORG患者及高脂饮食诱导的肥胖小鼠肾脏皮质组织中表达显著上调(均P分泌及分别上调或下调NPHS1、PODXL、NPHS2及PDPN的表达(均P分泌；此外，过表达或沉默EGR3负调控PRMT1及p-STAT3的表达。结论：EGR3可能通过抑制PRMT1-p-STAT3通路减少ORG足细胞炎症损伤。

关键词： EGR3 棕榈酸肥胖症相关性肾病足细胞炎症因子

寻常型银屑病患者皮损组织中DNA去甲基化酶TET3过表达介导转录因子KLF4显著高表达

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陆军军医大学学报 2024年第6期46卷 637-643页

作者：张帅罗雯张莲殷秀琴罗宏长沙市第一医院皮肤科长沙410000

目的探讨银屑病患者皮损组织中Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4, KLF)异常高表达的DNA甲基化分子机制。方法以20例寻常型银屑病患者病理检查所取皮损组织为实验组,13例眼外伤手术患者所取眼睑皮肤组织为对照组。采用亚硫酸氢... 详细信息

目的探讨银屑病患者皮损组织中Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4, KLF)异常高表达的DNA甲基化分子机制。方法以20例寻常型银屑病患者病理检查所取皮损组织为实验组,13例眼外伤手术患者所取眼睑皮肤组织为对照组。采用亚硫酸氢盐测序(bisulfite sequencing, BSP)检测各组皮肤样本及转染十-十一转位3(ten-eleven translocation 3, TET3)过表达及干扰质粒的人永生化角质形成细胞HaCat中转录因子Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4, KLF4)启动子区DNA甲基化水平,RT-qPCR和Western blotting检测各组皮肤组织样本及转染HaCat细胞中KLF4、TET1(ten-eleven translocation1)、TET2、TET3的表达水平。结果实验组KLF4启动子DNA甲基化水平显著低于对照组(P<0.01),实验组KLF4的mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.01)。实验组KLF4启动子DNA甲基化水平与mRNA表达水平呈显著负相关(r=-0.649,P=0.002)。实验组TET3表达水平显著高于对照组(P<0.01), TET1及TET2表达水平差异无统计学意义。实验组TET3表达水平与KLF4启动子DNA甲基化水平呈显著负相关(r=-0.688,P=0.001)。HaCat细胞中过表达TET3后,KLF4启动子DNA甲基化水平明显下调(P<0.01),KLF4表达水平显著上调(P<0.01)。HaCat细胞中干扰TET3表达后,KLF4启动子DNA甲基化水平明显上调(P<0.01),KLF4表达水平显著下调(P<0.01)。结论过度表达的TET3通过下调KLF4启动子DNA甲基化水平,介导银屑病患者皮损组织中KLF4过度表达。

关键词：银屑病角质形成细胞 DNA甲基化 TET家族蛋白3 kruppel样因子4

2022—2023年长沙市活禽批发市场家禽及环境中人兽共患病病原体监测

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现代预防医学 2024年第11期51卷 2088-2093页

作者：张如胜扶会媛罗璨黄政裴瑞青狄宇朱彩英刘琰彭佳熠胡慧琪王波周谨薇陈姗陈静芳徐明忠杨人贵长沙市疾病预防控制中心南华大学公共卫生学院长沙市中医医院(长沙市第八医院)

目的了解长沙市活禽批发市场家禽及环境中病原体污染情况。方法采集2022—2023年长沙市长沙县活禽批发市场家禽及环境样品817份，利用实时荧光PCR方法进行AIV、NDV、C. psittaci、Brucella和***核酸检测，然后对检测结果进行统计学分... 详细信息

目的了解长沙市活禽批发市场家禽及环境中病原体污染情况。方法采集2022—2023年长沙市长沙县活禽批发市场家禽及环境样品817份，利用实时荧光PCR方法进行AIV、NDV、C. psittaci、Brucella和***核酸检测，然后对检测结果进行统计学分析。结果市场家禽及环境中AIV、NDV、C. psittaci、Brucella和S. suis的总体阳性率分别为64.01%、32.19%、6.36%、0.24%、17.75%,2023年NDV和***的阳性率高于2022年，五种病原体阳性率最高的月份为10月或12月。不同年份的NDV（χ2=6.23,P=0.01）和S. suis（χ2=45.40,P长沙市活禽批发市场家禽及环境中AIV、NDV、C. psittaci、***核酸污染较为常见，提示该活禽批发市场需要加强场所消毒、健康宣教和疫病监测等相关人兽共患病防控措施。

关键词：活禽市场家禽环境人兽共患病病原体

乙酸灌肠联合束缚夹尾应激诱导肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征大鼠模型的制备

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中国实验动物学报 2024年第3期32卷 317-328页

作者：赖碧玉洪梦颖李兴何永嘉陈瑶李新伍石佳田子寒李丹聂晶佘畅湖南中医药大学研究生院长沙410208 长沙市中医医院(长沙市第八医院)针灸康复科长沙410100 中南大学长沙410083

目的建立理想的大鼠肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable bowel syndrome, IBS-D)的造模方法,为IBS-D伴焦虑抑郁状态的临床研究提供动物模型基础。方法本研究共用60只大鼠:(1)首先将20只大鼠随机分为空白组... 详细信息

目的建立理想的大鼠肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable bowel syndrome, IBS-D)的造模方法,为IBS-D伴焦虑抑郁状态的临床研究提供动物模型基础。方法本研究共用60只大鼠:(1)首先将20只大鼠随机分为空白组、3%乙酸灌肠组、4%乙酸灌肠组、5%乙酸灌肠组,造模及观察期结束后,通过腹泻相关指数、结肠病理组织学等观察不同造模浓度引起的腹泻状态及结肠损伤程度。(2)评估出较优造模浓度后,将另外40只大鼠随机分为对照组(a组)、单纯乙酸灌肠组(b组)、乙酸+束缚组(c组)、乙酸+束缚+夹尾组(d组),分别予以不同干预,共干预8 d。干预结束后对大鼠一般情况、腹泻相关指数、旷场实验(open-field test, OFT)评分、结肠病理组织学等指标进行评价。结果 (1)与空白组比较,4%乙酸灌肠组干预后第1~3天粪便性状评分升高(P0.05),体重相对较低(P0.05)。结肠病理组织显示,与空白组相比,4%乙酸灌肠组黏膜结构完整,有少量炎症细胞浸润,病理组织评分无显著性差异(P>0.05),5%乙酸灌肠组有中量-大量炎症细胞浸润,病理组织评分升高(P<0.01)。(2)与a组比较,b组体重较低(P<0.001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P<0.01),与a组及b组比较,c组和d组,体重较低(P<0.001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P<0.01),结肠运转时间减少(P<0.01);与c组相比,d组粪便含水量较高(P<0.001)。在OFT评分方面,与a组及b组相比,c组及d组OFT评分在总距离、站立次数、直立次数均减少(P<0.05);与c组相比,d组在OFT评分总距离、站立次数、直立次数均减少(P<0.05)。结肠病理组织显示,4组黏膜结构均完整,有不同程度的炎症细胞浸润,病理组织评分上,与a组及b组相比,c组和d组较高(P<0.05)。结论 4%乙酸浓度为IBS-D造模适宜浓度,叠加束缚后,能更好地模拟IBS-D腹泻、内脏高敏感特征性状态,叠加夹尾后能成功制备出肝郁脾虚型IBS-D模型。

关键词：腹泻型肠易激综合征 4%乙酸灌肠慢性束缚夹尾应激造模

FABP4沉默通过调节PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路对妊娠糖尿病大鼠内质网应激和胰岛素抵抗的影响

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中国免疫学杂志 2024年第4期40卷 705-713页

作者：李贞余冬平罗武陶婷陈辉王宁长沙市第一医院病理科长沙410005 南昌市第一医院骨科南昌330008 长沙市第一医院检验科长沙410005 长沙市第一医院感染与免疫科长沙410005

目的:探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)沉默通过调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核细胞启动因子2α(eIF2α)/转录因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对妊娠糖尿病(GDM)大鼠内质网应激(ERS)和胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:腹腔注射... 详细信息

目的:探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)沉默通过调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核细胞启动因子2α(eIF2α)/转录因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对妊娠糖尿病(GDM)大鼠内质网应激(ERS)和胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立GDM大鼠模型。通过尾静脉注射FABP4 siRNA质粒(si-FABP4)、阴性对照质粒(NC)和PERK激活剂(CCT020312),将大鼠随机分为Normal组、GDM组、GDM+NC组、GDM+si-FABP4组、GDM+si-FABP4+CCT020312组。检测胰腺组织中FABP4含量、血脂水平、炎症标志物水平和氧化应激标志物水平,检测胰腺组织中PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路相关蛋白表达。HTR-8/SVneo细胞分为5组:对照(Control)组、高糖(HG)组、HG+NC组、HG+si-FABP4组、HG+si-FABP4+CCT020312组,24 h后检测细胞中FABP4及PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路相关蛋白表达。结果:与Normal组相比,GDM组大鼠血清和胰腺组织中FABP4水平显著上调(P<0.05)。FABP4沉默显著降低了FBG和IR,并伴有血脂、CRP、TNF-α、IL-6及MDA水平降低和SOD、CAT水平升高(P<0.05)。此外,FABP4沉默减轻了胰腺和胎盘组织损伤。而CCT020312上调PERK、eIF2α磷酸化水平和ATF4、CHOP蛋白表达后,FABP4沉默对GDM大鼠IR、炎症、氧化应激以及胰腺和胎盘损伤的抑制作用均被逆转(P<0.05)。FABP4在HG诱导的HTR-8/SVneo细胞中上调表达,沉默FABP4可抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路蛋白表达,CCT020312则逆转这种变化(P<0.05)。结论:FABP4沉默通过抑制炎症和氧化应激,改善GDM大鼠的IR和ERS,其机制与抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路有关。

关键词： FABP4 PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路妊娠糖尿病内质网应激胰岛素抵抗

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6例大脑深静脉病变累及双侧丘脑MRI表现

中国医学影像技术 2024年第7期40卷 1112-1114页

作者：陆喜红段蓉有慧罗春长沙市中医医院(长沙市第八医院)放射科湖南长沙410100 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院放射科北京100730 山东平邑县中医医院放射科山东临沂273300

大脑深静脉病变包括脑深脑静脉血栓(deep cerebral venous system thrombosis,DCVT)和硬脑膜动静脉瘘(dural arteriovenous fistula,DAVF)等。DCVT发病率低,临床表现多样。本文报告6例大脑深静脉病变累及双侧丘脑MRI表现。

关键词：脑静脉血栓形成动静脉瘘丘脑磁共振成像

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肺宁颗粒联合乌美溴铵维兰特罗吸入粉雾剂对AECOPD患者血清白三烯B_(4)、胱抑素C的影响

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临床合理用药杂志 2024年第18期17卷 57-60页

作者：陈维晶谢园长沙市中医医院/长沙市第八医院 410000

目的观察肺宁颗粒联合乌美溴铵维兰特罗吸入粉雾剂对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清白三烯B_(4)、胱抑素C的影响。方法选取2021年2月—2023年2月长沙市中医医院收治的AECOPD患者88例,按抽签法分为单一西药组(44例)与联... 详细信息

目的观察肺宁颗粒联合乌美溴铵维兰特罗吸入粉雾剂对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清白三烯B_(4)、胱抑素C的影响。方法选取2021年2月—2023年2月长沙市中医医院收治的AECOPD患者88例,按抽签法分为单一西药组(44例)与联合中药组(44例)。单一西药组给予乌美溴铵维兰特罗吸入粉雾剂治疗,联合中药组在单一西药组基础上联合肺宁颗粒治疗,2组均连续用药14 d。比较2组临床疗效,用药前后肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)/FVC]、血清学指标、圣乔治呼吸问卷(SGRQ)评分及不良反应。结果联合中药组治疗总有效率高于单一西药组(97.73%vs. 81.82%,χ^(2)=4.456,P=0.035)。用药14 d后,2组FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC高于用药前,且联合中药组高于单一西药组(P均<0.01);2组血清白三烯B_(4)、胱抑素C水平低于用药前,且联合中药组低于单一西药组(P均<0.01);2组SGRQ评分低于用药前,且联合中药组低于单一西药组(P均<0.01)。联合中药组不良反应总发生率低于单一西药组(6.82%vs. 22.73%,χ^(2)=4.423,P=0.035)。结论临床治疗AECOPD使用肺宁颗粒与乌美溴铵维兰特罗吸入粉雾剂联合疗法能够显著改善患者肺功能,缓解肺部炎性反应,提高生活质量,且具有较高的安全性。

关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重期肺宁颗粒乌美溴铵维兰特罗吸入粉雾剂白三烯B_(4) 胱抑素C

柔肝化纤解毒颗粒联合TACE对原发性肝癌患者血清指标及免疫功能的影响

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临床合理用药杂志 2024年第16期17卷 90-92页

作者：叶浩长沙市中医医院(长沙市第八医院) 410100

目的观察柔肝化纤解毒颗粒联合肝动脉化疗栓塞术(TACE)对原发性肝癌患者血清指标及免疫功能的影响。方法选取2020年4月—2021年4月长沙市中医医院(长沙市第八医院)收治的原发性肝癌患者100例,以随机数字表法分为观察组和对照组,各50... 详细信息

目的观察柔肝化纤解毒颗粒联合肝动脉化疗栓塞术(TACE)对原发性肝癌患者血清指标及免疫功能的影响。方法选取2020年4月—2021年4月长沙市中医医院(长沙市第八医院)收治的原发性肝癌患者100例,以随机数字表法分为观察组和对照组,各50例。观察组给予柔肝化纤解毒颗粒联合TACE治疗,对照组给予TACE治疗。比较2组治疗前后中医证候积分、血清相关指标[缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、胰岛素生长因子-2(IGF-2)]及免疫功能指标[CD4^(+)、CD8^(+)、免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM]。结果治疗后,2组肝区疼痛、纳差、腹部胀满、腹泻便溏、倦怠乏力、发热、黄疸、口干口苦积分与HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9、IGF-2水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05或P<0.01);CD4^(+)、IgA、IgG、IgM水平高于治疗前,CD8^(+)水平低于治疗前,且观察组高/低于对照组(P均<0.01)。结论柔肝化纤解毒颗粒联合TACE治疗原发性肝癌可更有效缓解临床症状,改善血清相关指标水平,提升免疫功能。

关键词：原发性肝癌柔肝化纤解毒颗粒肝动脉化疗栓塞术血清指标免疫功能