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联合净化法结合高效液相色谱-串联质谱同时测定鸽蛋中5类24种兽药残留

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中国家禽 2024年

作者：张静马丽娜刘茵茵周倩唐修君陆俊贤樊艳凤赵敏高玉时江苏省家禽科学研究所

为建立一种可同时检测鸽蛋中多类兽药残留的高通量液相色谱-串联质谱法，试验采用正己烷去脂，联合QuEChERS净化结合冷冻脂质过滤法，建立检测鸽蛋中5类24种兽药残留的高效液相色谱-串联质谱法。样品中的5类兽药（氯霉素类、磺胺类、硝... 详细信息

为建立一种可同时检测鸽蛋中多类兽药残留的高通量液相色谱-串联质谱法，试验采用正己烷去脂，联合QuEChERS净化结合冷冻脂质过滤法，建立检测鸽蛋中5类24种兽药残留的高效液相色谱-串联质谱法。样品中的5类兽药（氯霉素类、磺胺类、硝基咪唑类、喹诺酮类和抗病毒类）经1.0%乙酸乙腈溶液提取，氮气吹干，冷冻过夜后，结合QuEChERS净化和正己烷去脂，采用1 mL 0.1%甲酸水-乙腈溶液（v/v,90∶10）复溶；高效液相色谱-串联质谱测定，内标法定量，采用实际样品建立方法的初步应用。结果显示：24种兽药在2.0～200 μg/mL线性关系良好（R2>0.99），该方法的定量限为2μg/kg，平均回收率为62.2%～117.1%，相对标准偏差4.3%～18.9%；实际样品检出的7种目标化合物与标准方法相比的相对标准偏差为1.34%～5.20%。研究表明，建立的检测鸽蛋中多类兽药残留的高通量液相色谱-串联质谱法省去固相萃取步骤，成本较低，灵敏高效，回收率优良、重复性稳定，适用于鸽蛋中多类兽药的快速监测分析。

关键词：联合净化法高效液相色谱-串联质谱 QuEChERS 兽药残留鸽蛋

编辑ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因的串联DsRed荧光表达盒的CRISPR/Cas9系统的构建及验证

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作物学报 2024年第8期50卷 1961-1970页

作者：曹晓晴祁显涛刘昌林谢传晓中国农业科学院作物科学研究所北京100081

CCT家族基因影响植物开花,在玉米中,ZmCCT10、ZmCCT9基因是光周期敏感基因,ZmGhd7基因是与开花期相关的基因。利用CRISPR/Cas9技术靶向编辑ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因为研究基因的功能和快速改良玉米的开花期提供了可能。本研究以玉米... 详细信息

CCT家族基因影响植物开花,在玉米中,ZmCCT10、ZmCCT9基因是光周期敏感基因,ZmGhd7基因是与开花期相关的基因。利用CRISPR/Cas9技术靶向编辑ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因为研究基因的功能和快速改良玉米的开花期提供了可能。本研究以玉米ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因为编辑对象,以KN5585为稳定转化受体、以CML312SR、LCL-1、LCL-2为预改良的晚熟材料受体,首先通过Sanger测序验证了3个基因靶标区域在4份玉米材料中的保守性,其次根据sgRNA设计原则选择了1个sgRNA复合编辑3个基因,并利用同源重组方法构建了将由胚特异性启动子Zm3896驱动的DsRed表达盒和由ZmU6-2启动子驱动的sgRNA表达盒串联的CRISPR/Cas9基因编辑敲除载体CCT-CPD,然后采用酶切法和Sanger测序法分析T0代KN5585中3个基因的突变率和突变类型,验证了该系统的基因编辑效果,最后通过对稳定遗传转化植株所结籽粒在籽粒水平、组织水平进行DsRed荧光标记表型鉴定,验证了该系统中DsRed荧光筛选标记的有效性。在此基础上,通过杂交育种法以晚熟材料为母本、以T1代KN5585阳性株为父本获得F1并经过DsRed荧光筛选获得含有有效编辑转基因元件的晚熟材料。本研究构建的编辑ZmCCT10/ZmCCT9/ZmGhd7基因的串联DsRed荧光表达盒的CRISPR/Cas9系统为创制单基因突变体,双基因突变体,三基因突变体奠定了基础,该系统中DsRed荧光筛选标记的应用可以快速筛选区分有无转基因成分的玉米籽粒,成本低,鉴定效率高,具有大规模籽粒筛选的潜力,本研究为鉴定ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7三个基因的功能和创制玉米光周期钝感材料奠定了材料基础和高效的技术基础。

关键词： CRISPR/Cas9技术 DsRed荧光 ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因玉米

铺地木蓝对肇庆地区柑橘园土壤养分及细菌群落的影响

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广东农业科学 2024年第1期51卷 73-84页

作者：李霜霜钟春燕黄美华黄益强郑木辉邓沛飞肇庆市农业科学研究所广东肇庆526000

【目的】探究铺地木蓝在柑橘果园种植1年后对杂草、0~20 cm土层土壤养分含量和土壤细菌多样性的影响。【方法】设置自然生草(CK1)、土壤覆盖遮草布(PD1)、土壤覆盖银黑地膜+种植铺地木蓝(PD2)、种植铺地木蓝(PD3)4个处理,1年后调查杂草... 详细信息

【目的】探究铺地木蓝在柑橘果园种植1年后对杂草、0~20 cm土层土壤养分含量和土壤细菌多样性的影响。【方法】设置自然生草(CK1)、土壤覆盖遮草布(PD1)、土壤覆盖银黑地膜+种植铺地木蓝(PD2)、种植铺地木蓝(PD3)4个处理,1年后调查杂草种类、测定土壤理化性质(pH、有机质、全氮、碱解氮、全磷、速效磷、全钾和速效钾)和土壤细菌群落情况。【结果】PD2处理土壤全氮(0.86 mg/g)、全磷(0.78 g/kg)、速效磷(23.84 mg/kg)、全钾(11.91 g/kg)、有机质(34.82 g/kg)含量最高;PD2处理土壤全氮和碱解氮含量比PD1处理的分别增加了0.37、27.43 mg/kg,PD1处理土壤全磷含量最低(0.41 g/kg),PD3处理速效磷(10.67 mg/kg)和有机质(25.99 g/kg)含量最低;PD1~PD3处理的土壤全钾含量均大于CK1处理,速效钾含量则相反;杂草调查结果表明PD1、PD2处理均可很好地抑制杂草的生长。与CK1相比,PD1~PD3处理均可降低土壤细菌群落多样性,但不影响细菌群落分布均匀性。PD2和PD3处理的土壤细菌群落结构和丰度较相似,表现为变形菌门(Proteobacteria)相对丰度降低,绿弯菌门(Chloroflexi)、酸杆菌门(Acidobacteria)、浮霉菌门(Planctomycetes)、罗库菌门(Rokubacteria)、芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)等有益细菌的相对丰度增加;其中PD2处理的优势菌属为MND1(3.47%)、Sh765B-TzT-35(4.37%),PD3处理的优势菌属为MND1(4.29%)。从PD1处理土壤中检测到视为土壤环境恶化的标志类群异常球菌-栖热菌门(5.10%)。【结论】柑橘果园行间道覆盖地膜后再种植铺地木蓝的综合表现最好,可以增加土壤养分和土壤中有益细菌群落的相对丰度。

关键词：果园生草铺地木蓝土壤养分土壤细菌多样性 16r DNA高通量测序

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基于磁性多壁碳纳米管的磁性固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定农产品中22种真菌毒素

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分析化学 2024年第04期52卷 550-558页

作者：马帅梁刚满燕靳欣欣李安北京市农林科学院质量标准与检测技术研究所

以磁性多壁碳纳米管（Fe3O4-MWCNTs）为吸附剂，建立了简单、快速和高效的磁性固相萃取方法，结合超高效液相色谱-串联质谱实现了对农产品中22种真菌毒素的同时检测。将Fe3O4纳米颗粒引入MWCNTs中制备Fe3O4-MWCNTs作为吸附剂，不仅可以... 详细信息

以磁性多壁碳纳米管（Fe3O4-MWCNTs）为吸附剂，建立了简单、快速和高效的磁性固相萃取方法，结合超高效液相色谱-串联质谱实现了对农产品中22种真菌毒素的同时检测。将Fe3O4纳米颗粒引入MWCNTs中制备Fe3O4-MWCNTs作为吸附剂，不仅可以提高多种目标真菌毒素的富集效率，还可通过外磁场进行分离，有效缩短了样品前处理时间。对影响磁性固相萃取前处理效率的提取溶液、吸附剂类型、吸附剂用量和洗脱溶液类型进行了优化。在最佳前处理条件下，结合超高效液相色谱-串联质谱进行检测，结果表明，22种真菌毒素在各自的浓度范围内均具有良好的线性关系（R2≥0.9966），方法检出限（LOD, S/N=3）为0.0008～1.6337 ng/g，定量限（LOQ, S/N=10）为0.0025～5.4457 ng/g，低、中、高3个浓度水平的加标回收率为71.5%～118.4%，日内精密度为1.3%～10.9%（n=6），日间精密度为2.3%～11.6%（n=3）。本方法前处理过程简单快速、有机溶剂消耗少、基质净化效率高，并且方法的线性范围宽、准确度和灵敏度高，可用于大批量农产品中多种真菌毒素的同时检测，对于保障粮食安全具有重要意义。

关键词：真菌毒素磁性多壁碳纳米管磁性固相萃取超高效液相色谱-串联质谱

来源：博看期刊

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施硫时期对强筋小麦产量和生理特性的影响

华北农学报 2024年第05期 102-109页

作者：刘志连傅晓艺王爽马洁云李东晓李瑞奇河北农业大学农学院石家庄市藁城区农业科学研究所石家庄市农林科学研究院

为明确不同时期施硫对强筋小麦产量和光合特性的影响，确定强筋小麦适宜的硫肥施用时间，于2019—2021年2个小麦生长季，以强筋小麦藁优2018为试验材料，设置底施（S60-b）、拔节期追施（S60-j）、开花期追施（S60-a）3个施硫时期，施... 详细信息

为明确不同时期施硫对强筋小麦产量和光合特性的影响，确定强筋小麦适宜的硫肥施用时间，于2019—2021年2个小麦生长季，以强筋小麦藁优2018为试验材料，设置底施（S60-b）、拔节期追施（S60-j）、开花期追施（S60-a）3个施硫时期，施硫量为60 kg/hm2,以不施硫（CK）为对照，系统研究了不同施硫时期对强筋小麦叶面积指数（LAI）、旗叶叶绿素相对含量（SPAD）、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、产量及构成因素等方面的影响。结果表明，与CK相比，S60-b、S60-j和S60-a处理都能显著提高藁优2018的千粒质量、籽粒最大灌浆速率和产量；2个生长季，千粒质量平均增幅分别为6.23%,4.27%,7.04%,其中花后35 d千粒质量增幅最大，分别为5.51%,3.17%,6.12%。最大灌浆速率增幅分别为2.84%,1.76%,3.49%;单产平均增幅分别为9.20%,2.73%,5.71%。施硫对藁优2018的穗数和穗粒数影响不显著。不同时期施硫处理都会对强筋小麦光合、生理特性有显著影响。S60-b和S60-a处理显著提高了生育中后期叶面积指数、旗叶叶绿素相对含量、花后22 d和29 d旗叶可溶性蛋白含量、花后35 d旗叶可溶性糖含量，上述5个指标增幅分别达26.16%,7.38%,16.90%,55.29%,81.11%以上。综合2 a结果，底施和开花追施硫肥都能够显著提高生育中后期旗叶的LAI,并使旗叶维持较高SPAD值，延缓旗叶衰老，提高了旗叶可溶性蛋白和可溶性糖含量、千粒质量和灌浆末期的灌浆速率，表现出较高的产量。综上，施硫对强筋小麦的产量具有正向调控效应，底施和开花期追施均具有较好的调控效果。

关键词：强筋小麦硫产量生理特性光合特性

构建特色田园示范区框架推动乡村价值势能转化

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城乡建设 2024年第6期 48-51页

作者：姜伟萍夏珊珊黄婷婷盐城市城乡建设与园林科学研究所

特色田园乡村建设行动和苏北农房改善工作被认为是结合江苏省情开展乡村建设行动的先行实践和有益探索，也是推动乡村振兴战略实施的有效路径。江苏省第十四次党代会报告明确提出大力实施乡村建设行动，扎实推进特色田园乡村高质量发展...

特色田园乡村建设行动和苏北农房改善工作被认为是结合江苏省情开展乡村建设行动的先行实践和有益探索，也是推动乡村振兴战略实施的有效路径。江苏省第十四次党代会报告明确提出大力实施乡村建设行动，扎实推进特色田园乡村高质量发展、持续改善农民住房条件，创建让城市更向往的美丽田园乡村。特色田园乡村彰显了新时代乡村的多元价值。江苏省盐城市按照《关于开展江苏省特色田园乡村创建有关工作的通知》

关键词：

玉米秸秆饲粮模式下不同NFC/NDF的比值对肉羊瘤胃发酵特性及血清生化指标的影响

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饲料研究 2024年第1期47卷 5-10页

作者：红敏兰向莉王丽萍王宏宇孙亚楠李洪磊乌仁图雅刘志友赤峰市农牧科学研究所内蒙古赤峰024031

试验旨在研究玉米秸秆饲粮模式下不同非纤维性碳水化合物(NFC)/中性洗涤纤维(NDF)比值对肉羊瘤胃发酵特性及血清生化指标的影响。选取15只健康、体重50 kg左右装有永久瘤胃瘘管的肉羊,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组试验羊分别饲喂NFC/NDF比值为0... 详细信息

试验旨在研究玉米秸秆饲粮模式下不同非纤维性碳水化合物(NFC)/中性洗涤纤维(NDF)比值对肉羊瘤胃发酵特性及血清生化指标的影响。选取15只健康、体重50 kg左右装有永久瘤胃瘘管的肉羊,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组试验羊分别饲喂NFC/NDF比值为0.65、1.02和1.57的全混合饲粮。预试期15 d,正式试验期7 d。结果显示,随着NFC/NDF比值的升高,瘤胃pH值有下降的趋势;而瘤胃液氨态氮(NH3-N)含量呈现先升高后降低的趋势。随着采食时间的增加,瘤胃菌体蛋白(MCP)含量呈现先降低后升高的趋势。随饲粮NFC/NDF比值的升高,采食6 h后,总挥发性脂肪酸(TVFA)有上升的趋势;试验Ⅰ组肉羊血清总蛋白(TP)含量显著高于其他组(P研究表明,在玉米秸秆饲粮模式下NFC/NDF为1.02时,可改善肉羊瘤胃内环境,提高机体抗氧化水平。

关键词：肉羊 NFC/NDF 瘤胃发酵特性抗氧化能力

番石榴杂交F代基于SRAP标记的鉴定及果实性状的遗传倾向分析

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果树学报 2024年

作者：黄婉莉张冬敏符喜喜陈心怡张朝坤漳州市农业科学研究所福建农林大学

【目的】通过鉴定番石榴杂交F1代真实性以及探究其果实主要性状的遗传倾向，丰富番石榴遗传规律研究，以期为番石榴杂交育种亲本选配提供参考依据。【方法】以母本红香1号番石榴、父本帝王番石榴及其104个杂交F1代单株为研究材料，应用S... 详细信息

【目的】通过鉴定番石榴杂交F1代真实性以及探究其果实主要性状的遗传倾向，丰富番石榴遗传规律研究，以期为番石榴杂交育种亲本选配提供参考依据。【方法】以母本红香1号番石榴、父本帝王番石榴及其104个杂交F1代单株为研究材料，应用SRAP分子标记鉴定杂种的真实性，并对亲本与F1代群体遗传多样性、遗传关系和果实品质的遗传倾向进行分析。【结果】利用SRAP标记对杂交F1代群体进行鉴定，真杂种率为98.08%。聚类分析图谱显示，在0.90阈值处可将父母本及杂交F1代群体分为6类；杂交F1代单果质量、果实纵径、横径、果形指数、果心直径、果肉厚度、果实可滴定酸（TA）含量和可溶性固形物（TSS）含量等8个性状都表现为较典型的正态分布，属于由多个基因控制的数量性状；杂交F1代单果质量、果实纵径、横径、果形指数和TSS含量呈增大变异的遗传趋势，果实TA含量呈现趋小变异的遗传趋势；杂交F1代果实6个质量性状果实形状、果面质地、果皮颜色、果肉颜色、果肉质地以及果实香气离散幅度较大，多样性指数较高。6种质量性状受不同的基因控制，其中果实形状、果面质地、果皮颜色、果肉颜色受父本影响较大，果肉质地和果实香气主要遗受母本影响。【结论】番石榴8个数量性状中，单果质量、果实纵径、横径和果形指数，超亲优势明显，表明番石榴果实大小的遗传受加性效应的影响；番石榴6个质量性状中，果实形状、果面质地、果皮颜色、果肉颜色受父本影响较大，果肉质地和果实香气主要遗受母本影响。

关键词：番石榴杂交后代 SRAP分子标记果实品质遗传规律

转食饲料对大口黑鲈幼鱼的存活率、抗氧化酶和消化酶活性及肠道菌群的影响

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中国水产科学 2024年第4期31卷 403-415页

作者：马兴宇唐忠林陈树桥周国勤徐钢春南京市水产科学研究所中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

转食配合饲料是大口黑鲈(Micropterussalmoides)幼鱼培育的一个重要环节,为了找到大口黑鲈幼鱼适宜转食的规格以及转食对幼鱼生理生化的影响,本研究探讨了摄食丰年虫(Artemia salina)幼鱼转食饲料后,其存活率、组织抗氧化酶和消化酶活... 详细信息

转食配合饲料是大口黑鲈(Micropterussalmoides)幼鱼培育的一个重要环节,为了找到大口黑鲈幼鱼适宜转食的规格以及转食对幼鱼生理生化的影响,本研究探讨了摄食丰年虫(Artemia salina)幼鱼转食饲料后,其存活率、组织抗氧化酶和消化酶活性及肠道菌群的变化。实验选取了平均体长分别为(1.06±0.02)cm、(2.04±0.03)cm、(3.02±0.04) cm、(4.05±0.04) cm、(5.01±0.04) cm共5种规格幼鱼,设为体长1 cm、2 cm、3 cm、4 cm、5 cm组进行转食实验,统计了幼鱼自然死亡率、存活率和残食率。通过酶活测定方法对比分析了转食前后幼鱼肝脏与肌肉组织的抗氧化酶活性变化及胃、肠道和幽门盲囊组织的消化酶活性变化。通过高通量测序方法对比分析了转食前后幼鱼肠道菌群的变化。结果显示:(1)体长1cm幼鱼转食死亡率、残食率最高,存活率最低,分别为60.31%、30.85%和8.84%;体长4cm、5cm幼鱼死亡率和残食率为0,存活率为100%,表明规格越大死亡率和残食率越低,存活率越高。(2)转食后肝脏与肌肉的过氧化物歧化酶(SOD)活性分别升高了86.97%和16.62%(P研究可为提高大口黑鲈幼鱼转食存活率及添加外源辅助消化物质研究提供参考。

关键词：大口黑鲈幼鱼转食存活率抗氧化酶消化酶肠道菌群