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趁鲜与传统切制人参饮片标准汤剂量值传递规律分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 132-140页

作者：张雪晶徐梦丹刘小康邵娟鲁梦琪谢晓燕蔡广知贡济宇长春中医药大学药学院长春130117 长春中医药大学附属第三临床医院长春130118

目的:通过对人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律进行分析,为人参趁鲜切制饮片的质量控制及应用开发研究提供参考。方法:经标准工艺分别制备10批具代表性的人参趁鲜与传统切制饮片及其标准汤剂,采用Agilent EC-C18色谱柱(... 详细信息

目的:通过对人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律进行分析,为人参趁鲜切制饮片的质量控制及应用开发研究提供参考。方法:经标准工艺分别制备10批具代表性的人参趁鲜与传统切制饮片及其标准汤剂,采用Agilent EC-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~23 min,18%~21%A;23~35 min,21%~28%A;35~80 min,28%~32%A),检测波长203 nm,建立标准汤剂的指纹图谱,并进行相似度评价、主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1筛选差异成分,对筛选出的已知差异成分进行定量分析,结合出膏率、转移率等指标,探讨人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律差异。结果:人参趁鲜切制饮片与传统切制饮片标准汤剂指纹图谱相似度均>0.950,分别确定了18个共有峰,指认了其中9个共有峰;PCA及PLS-DA结果表明,2种饮片标准汤剂中指标成分的含量存在一定差异,人参趁鲜切制饮片中人参皂苷Rg_(1)、Re、Ro含量高于传统切制饮片,而人参皂苷Rb_(1)、Rc、Rb_(2)、Rd含量低于传统切制饮片,人参趁鲜切制饮片标准汤剂中人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)、Ro含量高于传统切制饮片标准汤剂,而人参皂苷Rc、Rb_(2)、Rd在2种饮片标准汤剂中的含量相当。人参趁鲜切制饮片标准汤剂中人参皂苷Rg_(1)、Rb_(1)、Rc、Rb_(2)平均转移率均明显高于传统切制饮片标准汤剂(P<0.05);人参皂苷Re、Rd平均转移率有所升高,但差异无统计学意义;人参皂苷Ro平均转移率差异无统计学意义,趁鲜切制饮片标准汤剂的出膏率明显高于传统切制饮片标准汤剂(P<0.05)。结论:趁鲜切制饮片标准汤剂的出膏率、指标成分含量及转移率均优于传统切制饮片标准汤剂,可为趁鲜切制饮片后续临床应用提供数据支持。

关键词：人参趁鲜切制标准汤剂量值传递转移率人参皂苷出膏率质量标准

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短链脂肪酸在2型糖尿病中的作用研究进展

中国全科医学 2024年第24期27卷 3031-3037页

作者：姜荣生张龙管其凡张静吴元丰刘明军长春中医药大学针灸推拿学院吉林省长春市130117

短链脂肪酸(SCFAs)在肠道微生物群调控宿主代谢中起到了主要介导作用,且与2型糖尿病(T2DM)密切相关,可改善T2DM患者的血糖、体质量和血脂指标。尽管有学者认为SCFAs有望成为T2DM的新型治疗靶点,但目前尚未有相关综述。本文总结了短链脂... 详细信息

短链脂肪酸(SCFAs)在肠道微生物群调控宿主代谢中起到了主要介导作用,且与2型糖尿病(T2DM)密切相关,可改善T2DM患者的血糖、体质量和血脂指标。尽管有学者认为SCFAs有望成为T2DM的新型治疗靶点,但目前尚未有相关综述。本文总结了短链脂肪酸的生物学特性,讨论了SCFAs调节食欲、炎症、胰岛β细胞、脂质代谢与肝脏糖原代谢的证据,进一步明确调控SCFAs在T2DM中的作用及其研究进展,探讨了调控SCFAs治疗T2DM的潜力。

关键词：糖尿病,2型短链脂肪酸胃肠道微生物组代谢研究进展

逍遥散治疗大鼠糖尿病性勃起功能障碍的分析及实验

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中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 122-130页

作者：卯银辉王卓孙军涛魏志涛王明星杨勇长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021

目的:探讨逍遥散治疗大鼠糖尿病性勃起功能障碍(DMED)的作用机制及其主要的活性成分。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,通过海绵体内压/平均动脉压(ICP/MAP)的测量及马松染色对逍遥散进行疗效评价。然后,通过网络药理学和... 详细信息

目的:探讨逍遥散治疗大鼠糖尿病性勃起功能障碍(DMED)的作用机制及其主要的活性成分。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,通过海绵体内压/平均动脉压(ICP/MAP)的测量及马松染色对逍遥散进行疗效评价。然后,通过网络药理学和分子对接预测逍遥散治疗DMED的主要活性成分、关键靶点和潜在的信号通路。最后,对预测的结果进行体内外实验验证。结果:ICP/MAP和马松染色的检测结果表明,与正常组比较,模型组大鼠的勃起功能显著降低(P<0.01),平滑肌/胶原纤维显著降低(P<0.01);经过逍遥散治疗后,与模型组比较,糖尿病大鼠的ICP/MAP显著升高(P<0.01),平滑肌/胶原纤维显著升高(P<0.01)。网络药理学结果表明,逍遥散通过槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇和豆甾醇等主要活性成分作用于白蛋白(ALB)、蛋白激酶B1(Akt1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF)等核心靶点,参与糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物(AGE)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路和膦脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路的调节。分子对接结果显示,逍遥散的关键成分与核心靶点具有较好的结合能力,其中β-谷甾醇与ALB的结合能力最强。体内实验表明,逍遥散能够显著提高ALB和Akt1在血清中及mRNA的表达,抑制IL-6和TNF-α的表达;显著提高磷酸化(p)-PI3K和p-Akt的蛋白及mRNA的表达,抑制RAGE的表达。细胞热迁移实验(CETSA)结果表明,β-谷甾醇可以显著抑制ALB蛋白的降解。结论:逍遥散可能通过调节ALB、Akt1、IL-6、TNF等靶点及RAGE/PI3K/Akt信号通路恢复糖尿病大鼠的勃起功能,其主要的活性成分可能是β-谷甾醇。

关键词：逍遥散糖尿病性勃起功能障碍网络药理学分子对接细胞热迁移

基于指纹图谱的加味葛根颗粒6种指标成分含量测定及多元统计分析

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中国新药杂志 2024年第9期33卷 934-941页

作者：李文莉李军鸽朱凯王永春楚云杰长春中医药大学附属医院长春130117 长春中医药大学长春130117

目的:建立加味葛根颗粒的指纹图谱,测定其中6种成分的含量,并进行正交偏最小二乘判别法分析(OPLS-DA)。方法:采用HPLC法,色谱柱为Tech Mate-C18柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为254 nm,柱温为35℃,流速为1 mL·min^(... 详细信息

目的:建立加味葛根颗粒的指纹图谱,测定其中6种成分的含量,并进行正交偏最小二乘判别法分析(OPLS-DA)。方法:采用HPLC法,色谱柱为Tech Mate-C18柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为254 nm,柱温为35℃,流速为1 mL·min^(-1)。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2012年版进行相似度评价,确定共有峰,并测定其中6种成分的含量;采用SIMCA 14.0软件进行OPLS-DA分析,并利用分析变量重要性投影值(VIP)筛选影响其质量的标志物。结果:10批加味葛根颗粒共有14个共有峰,相似度均>0.9;共指认了6个色谱峰并分别测定了含量,各成分在考察范围内线性良好,r值在0.999 0~0.999 9之间。OPLS-DA筛选得到了6个VIP>1的共有峰(峰13、峰7、峰12、峰2、峰8、峰9),经对照品指认了其中3个差异性标志物(肉桂酸、原儿茶酸、芍药苷)。结论:结合多元统计分析,建立的指纹图谱和含量测定方法准确、稳定、可行,可用于加味葛根颗粒的质量控制。

关键词：加味葛根颗粒指纹图谱含量测定聚类分析

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3种抑郁症大鼠模型代谢组学的比较

中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 149-159页

作者：刘萌萌路静李唯嘉张文静陈鸿雁王雨辰林贺林喆律广富长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130117

目的:通过比较抑郁状态,以及脑、肝、肾组织中的代谢物差异,评价3种不同方式建立的抑郁症大鼠模型,为抑郁症动物模型的制备和抑郁症标准化诊断、治疗及研究提供参考。方法:40只健康雄性大鼠,随机分为空白组(K组)、慢性不可预知组(GY组)... 详细信息

目的:通过比较抑郁状态,以及脑、肝、肾组织中的代谢物差异,评价3种不同方式建立的抑郁症大鼠模型,为抑郁症动物模型的制备和抑郁症标准化诊断、治疗及研究提供参考。方法:40只健康雄性大鼠,随机分为空白组(K组)、慢性不可预知组(GY组)、肾虚型抑郁症组(SM组)和脾虚型抑郁症组(PM组)。K组正常饲养;GY组采用慢性不可预知性温和刺激(CUMS)联合孤养造模;SM组采用CUMS联合皮下注射氢化可的松(25 mg·kg^(-1))孤养造模;PM组采用CUMS联合腹腔注射利血平(0.5 mg·kg^(-1))孤养造模,造模时间均持续4周。采用行为学实验评估动物抑郁程度;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)的水平;采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOFMS)分别对各组大鼠的脑、肝脏、肾脏组织进行代谢组学分析,并进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),通过变量重要性投影(VIP)值>1筛选差异代谢物,并进一步通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对各组大鼠脑、肝、肾组织进行通路富集分析。结果:大鼠行为学结果显示,与K组比较,3种模型组大鼠的糖水消耗率均显著下降(P中医证候特点的抑郁症模型。3种抑郁模型大鼠脑、肝、肾组织代谢组学呈明显差异,肾虚型和脾虚型抑郁症模型大鼠的肝、肾差异代谢物均存在相反的变化趋势。可为中医抑郁症研究提供实验基础。

关键词：抑郁症中医证候模型代谢组学差异代谢物模型评价氢化可的松利血平超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)

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中药调控MAPK通路治疗肥胖的研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 254-262页

作者：曹雷刘明军吴春炜陈海龙王若琳包扬何泽长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021

伴随着肥胖患病率在全世界范围内的急剧提升,目前已成为全人类需要共同面对的重要公共卫生问题。肥胖以脂肪细胞数量增多及体积扩张为主要特征,并伴有不同程度的代谢紊乱。同时肥胖又是糖尿病、高血压、中风、癌症及心脑血管疾病的危险... 详细信息

伴随着肥胖患病率在全世界范围内的急剧提升,目前已成为全人类需要共同面对的重要公共卫生问题。肥胖以脂肪细胞数量增多及体积扩张为主要特征,并伴有不同程度的代谢紊乱。同时肥胖又是糖尿病、高血压、中风、癌症及心脑血管疾病的危险因素,为社会及家庭带来极大负担。肥胖受生活方式、环境、行为及遗传等因素影响,是多因素相互作用的结果,其病理过程复杂涉及炎症、自噬、肠菌紊乱等多种机制。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联反应作为信号传导的关键通路,参与到细胞增殖、分化、凋亡及应激反应等多个过程中。国内外研究表明MAPK信号通路可通过多途径调控肥胖,如调控脂肪细胞分化及凋亡、调节食欲、改善炎症等。中药在防治肥胖方面效果显著且存在多靶点、多成分、不良反应小等优势,且研究发现MAPK信号通路亦是其重点调控的主要通路之一,但此领域尚未进行系统总结。故该文通过检索国内外最新研究,简要概述MAPK通路基本结构,重点总结了中药通过干预MAPK通路治疗肥胖的最新研究进展。结果表明,调控脂肪组织生成,分化及产热,降低炎症及氧化应激水平,改善胰岛素敏感性及代谢紊乱似乎为中药调控MAPK通路防治肥胖的主要途径。但后续仍需丰富研究方法,重点探索中药复方基于MAPK通路防治肥胖的潜在机制。

关键词：中药肥胖丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路研究进展机制

人参醇溶蛋白提取工艺优化、结构表征及体外抗氧化活性分析

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食品工业科技 2024年第8期45卷 1-10页

作者：郭浩白雪媛陈宇宋文博刘那王思明长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进... 详细信息

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进行结构表征,并对其在不同pH条件下的体外抗氧化活性开展一系列研究。通过测定DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、铁离子还原能力,评价人参醇溶蛋白的体外抗氧化活性。结果表明,人参中醇溶蛋白最佳提取工艺为:提取时间2 h、提取料液比1:10 g/mL、提取pH为7,此时人参醇溶蛋白得率为0.319%,蛋白含量为75%。通过紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成成分分析试验结果表明,人参醇溶蛋白氨基酸总量为82.3 g/100 g,其中人体必需氨基酸含量为26.46 g/100 g,药用氨基酸含量为30.51 g/100 g,验证了该人参醇提物主要成分确为蛋白质,分子量约为3.3 kDa,SEM扫描电镜结果显示,该人参醇溶蛋白结构完整,表面稀疏且有不规则的脊形凸起以及少量孔隙,蛋白质颗粒呈现蜂窝聚集状态,具有稳定有序的网状结构。体外抗氧化试验结果表明,该蛋白在强酸性条件下具有较强的体外抗氧化活性,当pH=1时,人参醇溶蛋白对DPPH自由基的清除率为96%,对羟基自由基的清除率为79%,对铁离子的还原能力为0.86。

关键词：人参醇溶蛋白响应面结构表征抗氧化活性

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3种桑螵蛸炮制前后抗氧化活性及免疫学研究

中国新药杂志 2024年第2期33卷 168-176页

作者：刘雨冬冀国鑫王仁广胡德闫茂颖王淑敏长春中医药大学长春130117

目的:比较3种桑螵蛸生品、盐制品对小鼠免疫功能和体外抗氧化能力的影响.方法:实验采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)2种方法,考察3种桑螵蛸炮制前后体外抗氧化活性的变化规律.通过... 详细信息

目的:比较3种桑螵蛸生品、盐制品对小鼠免疫功能和体外抗氧化能力的影响.方法:实验采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)2种方法,考察3种桑螵蛸炮制前后体外抗氧化活性的变化规律.通过腹腔注射环磷酰胺建立小鼠免疫力低下模型,测定小鼠体重变化率、免疫器官脏器指数和肾脏指数.通过酶联免疫法检测血清中白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、免疫球蛋白M(lgM)的水平.采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠胸腺、脾脏、肾脏病理改变情况.用Western blot法检测小鼠脾组织中核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)(P65),NF-κB(PP65),核因子κB抑制蛋白(IKB-α)的相对表达量.结果:体外抗氧化结果表明,3种桑螵蛸及盐制品均具有一定的自由基清除效果.盐制团螵蛸体外抗氧化活性最强,其清除DPPH,ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为0.507,0.705 mg·mL-1.免疫活性结果表明,3种桑螵蛸及盐制品对于免疫力低下模型小鼠体重变化率、胸腺指数、脾脏指数均有不同程度的提高,以盐制团螵蛸效果最佳,与模型组体重变化率、脾脏指数相比差异极显著(P<0.05,P<0.001,P<0.01).模型组细胞因子IL-2,TNF-α,IFN-γ及免疫球蛋白IgM含量与对照组比均下降(P<0.001).与模型组比较,团螵蛸生品及盐制品IL-2的含量回调,具有显著性差异(P<0.05),3种桑螵蛸生品及盐制品TNF-α的含量均升高,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001),盐制团螵蛸、盐制长螵蛸及团螵蛸的IFN-γ的含量升高,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01),团螵蛸与盐制团螵蛸IgM的含量升高,具有显著性差异(P<0.01).盐制团螵蛸可以改善胸腺、脾脏、肾脏的损伤,在3种桑螵蛸及炮制品中效果最优.桑螵蛸可使NF-κB(P65),NF-κB(PP65),IKB-α的相对表达回调到正常状态(P<0.001,P<0.0001).结论:3种桑螵蛸生品、盐制品均可以改善小鼠免疫功能,且具有体外抗氧化活性,盐制品优于生品.盐制团螵蛸清除自由基能力最强,对环磷酰胺所致小鼠的免疫低下恢复效果最佳.

关键词：桑螵蛸环磷酰胺免疫调节抗氧化活性

山药总蛋白对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激的保护作用及机制研究

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食品工业科技 2024年第11期45卷 307-315页

作者：姜蕾蕾冯佳宝刘颖金辰蓉刘美辰王思明赵大庆于士婷长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117

探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机分为对照组、模型组、山药总蛋白低剂量组(0.5 mg/mL)以及山药总蛋白高剂量组(1 mg/mL),评估山药总蛋白对HG处理的HUVECs的细胞活力、细胞形态及血管生成能力的影响;检测细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活力;以及培养基上清液中一氧化氮(Nitric oxide,NO)、8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的水平;测定B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(Cleaved caspase-1)和IL-1β蛋白的表达水平。结果显示,山药总蛋白能显著提高HG处理后的HUVECs的细胞活力(P<0.01),改善细胞凋亡形态,并显著升高SOD和CAT的活力(P<0.05或P<0.01)以及凋亡相关蛋白(Bcl-2/Bax)的比值、血管形成能力、NO分泌量。此外,山药总蛋白还显著降低了HUVECs的ROS、MDA、8-OHdG、IL-1β和IL-6的水平(P<0.05或P<0.01)及炎症相关蛋白(Txnip、NLRP3、cleaved Caspase-1、IL-1β)的表达水平(P<0.05或P<0.01),并且上述指标的变化均呈现明显的浓度依赖性。本研究结果表明,山药总蛋白可能通过抑制Txnip/NLRP3信号通路从而保护HUVECs拮抗HG诱导的氧化应激,恢复HUVECs内的氧化平衡,进一步减轻细胞的炎症反应。

关键词：山药总蛋白人脐静脉内皮细胞氧化应激炎症反应 Txnip/NLRP3 信号通路

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