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趁鲜与传统切制人参饮片标准汤剂量值传递规律分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 132-140页

作者：张雪晶徐梦丹刘小康邵娟鲁梦琪谢晓燕蔡广知贡济宇长春中医药大学药学院长春130117 长春中医药大学附属第三临床医院长春130118

目的:通过对人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律进行分析,为人参趁鲜切制饮片的质量控制及应用开发研究提供参考。方法:经标准工艺分别制备10批具代表性的人参趁鲜与传统切制饮片及其标准汤剂,采用Agilent EC-C18色谱柱(... 详细信息

目的:通过对人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律进行分析,为人参趁鲜切制饮片的质量控制及应用开发研究提供参考。方法:经标准工艺分别制备10批具代表性的人参趁鲜与传统切制饮片及其标准汤剂,采用Agilent EC-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~23 min,18%~21%A;23~35 min,21%~28%A;35~80 min,28%~32%A),检测波长203 nm,建立标准汤剂的指纹图谱,并进行相似度评价、主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1筛选差异成分,对筛选出的已知差异成分进行定量分析,结合出膏率、转移率等指标,探讨人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律差异。结果:人参趁鲜切制饮片与传统切制饮片标准汤剂指纹图谱相似度均>0.950,分别确定了18个共有峰,指认了其中9个共有峰;PCA及PLS-DA结果表明,2种饮片标准汤剂中指标成分的含量存在一定差异,人参趁鲜切制饮片中人参皂苷Rg_(1)、Re、Ro含量高于传统切制饮片,而人参皂苷Rb_(1)、Rc、Rb_(2)、Rd含量低于传统切制饮片,人参趁鲜切制饮片标准汤剂中人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)、Ro含量高于传统切制饮片标准汤剂,而人参皂苷Rc、Rb_(2)、Rd在2种饮片标准汤剂中的含量相当。人参趁鲜切制饮片标准汤剂中人参皂苷Rg_(1)、Rb_(1)、Rc、Rb_(2)平均转移率均明显高于传统切制饮片标准汤剂(P<0.05);人参皂苷Re、Rd平均转移率有所升高,但差异无统计学意义;人参皂苷Ro平均转移率差异无统计学意义,趁鲜切制饮片标准汤剂的出膏率明显高于传统切制饮片标准汤剂(P<0.05)。结论:趁鲜切制饮片标准汤剂的出膏率、指标成分含量及转移率均优于传统切制饮片标准汤剂,可为趁鲜切制饮片后续临床应用提供数据支持。

关键词：人参趁鲜切制标准汤剂量值传递转移率人参皂苷出膏率质量标准

逍遥散治疗大鼠糖尿病性勃起功能障碍的分析及实验

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中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 122-130页

作者：卯银辉王卓孙军涛魏志涛王明星杨勇长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021

目的:探讨逍遥散治疗大鼠糖尿病性勃起功能障碍(DMED)的作用机制及其主要的活性成分。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,通过海绵体内压/平均动脉压(ICP/MAP)的测量及马松染色对逍遥散进行疗效评价。然后,通过网络药理学和... 详细信息

目的:探讨逍遥散治疗大鼠糖尿病性勃起功能障碍(DMED)的作用机制及其主要的活性成分。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,通过海绵体内压/平均动脉压(ICP/MAP)的测量及马松染色对逍遥散进行疗效评价。然后,通过网络药理学和分子对接预测逍遥散治疗DMED的主要活性成分、关键靶点和潜在的信号通路。最后,对预测的结果进行体内外实验验证。结果:ICP/MAP和马松染色的检测结果表明,与正常组比较,模型组大鼠的勃起功能显著降低(P<0.01),平滑肌/胶原纤维显著降低(P<0.01);经过逍遥散治疗后,与模型组比较,糖尿病大鼠的ICP/MAP显著升高(P<0.01),平滑肌/胶原纤维显著升高(P<0.01)。网络药理学结果表明,逍遥散通过槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇和豆甾醇等主要活性成分作用于白蛋白(ALB)、蛋白激酶B1(Akt1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF)等核心靶点,参与糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物(AGE)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路和膦脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路的调节。分子对接结果显示,逍遥散的关键成分与核心靶点具有较好的结合能力,其中β-谷甾醇与ALB的结合能力最强。体内实验表明,逍遥散能够显著提高ALB和Akt1在血清中及mRNA的表达,抑制IL-6和TNF-α的表达;显著提高磷酸化(p)-PI3K和p-Akt的蛋白及mRNA的表达,抑制RAGE的表达。细胞热迁移实验(CETSA)结果表明,β-谷甾醇可以显著抑制ALB蛋白的降解。结论:逍遥散可能通过调节ALB、Akt1、IL-6、TNF等靶点及RAGE/PI3K/Akt信号通路恢复糖尿病大鼠的勃起功能,其主要的活性成分可能是β-谷甾醇。

关键词：逍遥散糖尿病性勃起功能障碍网络药理学分子对接细胞热迁移

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3种抑郁症大鼠模型代谢组学的比较

中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 149-159页

作者：刘萌萌路静李唯嘉张文静陈鸿雁王雨辰林贺林喆律广富长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130117

目的:通过比较抑郁状态,以及脑、肝、肾组织中的代谢物差异,评价3种不同方式建立的抑郁症大鼠模型,为抑郁症动物模型的制备和抑郁症标准化诊断、治疗及研究提供参考。方法:40只健康雄性大鼠,随机分为空白组(K组)、慢性不可预知组(GY组)... 详细信息

目的:通过比较抑郁状态,以及脑、肝、肾组织中的代谢物差异,评价3种不同方式建立的抑郁症大鼠模型,为抑郁症动物模型的制备和抑郁症标准化诊断、治疗及研究提供参考。方法:40只健康雄性大鼠,随机分为空白组(K组)、慢性不可预知组(GY组)、肾虚型抑郁症组(SM组)和脾虚型抑郁症组(PM组)。K组正常饲养;GY组采用慢性不可预知性温和刺激(CUMS)联合孤养造模;SM组采用CUMS联合皮下注射氢化可的松(25 mg·kg^(-1))孤养造模;PM组采用CUMS联合腹腔注射利血平(0.5 mg·kg^(-1))孤养造模,造模时间均持续4周。采用行为学实验评估动物抑郁程度;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)的水平;采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOFMS)分别对各组大鼠的脑、肝脏、肾脏组织进行代谢组学分析,并进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),通过变量重要性投影(VIP)值>1筛选差异代谢物,并进一步通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对各组大鼠脑、肝、肾组织进行通路富集分析。结果:大鼠行为学结果显示,与K组比较,3种模型组大鼠的糖水消耗率均显著下降(P中医证候特点的抑郁症模型。3种抑郁模型大鼠脑、肝、肾组织代谢组学呈明显差异,肾虚型和脾虚型抑郁症模型大鼠的肝、肾差异代谢物均存在相反的变化趋势。可为中医抑郁症研究提供实验基础。

关键词：抑郁症中医证候模型代谢组学差异代谢物模型评价氢化可的松利血平超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)

基于指纹图谱的加味葛根颗粒6种指标成分含量测定及多元统计分析

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中国新药杂志 2024年第9期33卷 934-941页

作者：李文莉李军鸽朱凯王永春楚云杰长春中医药大学附属医院长春130117 长春中医药大学长春130117

目的:建立加味葛根颗粒的指纹图谱,测定其中6种成分的含量,并进行正交偏最小二乘判别法分析(OPLS-DA)。方法:采用HPLC法,色谱柱为Tech Mate-C18柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为254 nm,柱温为35℃,流速为1 mL·min^(... 详细信息

目的:建立加味葛根颗粒的指纹图谱,测定其中6种成分的含量,并进行正交偏最小二乘判别法分析(OPLS-DA)。方法:采用HPLC法,色谱柱为Tech Mate-C18柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为254 nm,柱温为35℃,流速为1 mL·min^(-1)。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2012年版进行相似度评价,确定共有峰,并测定其中6种成分的含量;采用SIMCA 14.0软件进行OPLS-DA分析,并利用分析变量重要性投影值(VIP)筛选影响其质量的标志物。结果:10批加味葛根颗粒共有14个共有峰,相似度均>0.9;共指认了6个色谱峰并分别测定了含量,各成分在考察范围内线性良好,r值在0.999 0~0.999 9之间。OPLS-DA筛选得到了6个VIP>1的共有峰(峰13、峰7、峰12、峰2、峰8、峰9),经对照品指认了其中3个差异性标志物(肉桂酸、原儿茶酸、芍药苷)。结论:结合多元统计分析,建立的指纹图谱和含量测定方法准确、稳定、可行,可用于加味葛根颗粒的质量控制。

关键词：加味葛根颗粒指纹图谱含量测定聚类分析

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中药调控MAPK通路治疗肥胖的研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 254-262页

作者：曹雷刘明军吴春炜陈海龙王若琳包扬何泽长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021

伴随着肥胖患病率在全世界范围内的急剧提升,目前已成为全人类需要共同面对的重要公共卫生问题。肥胖以脂肪细胞数量增多及体积扩张为主要特征,并伴有不同程度的代谢紊乱。同时肥胖又是糖尿病、高血压、中风、癌症及心脑血管疾病的危险... 详细信息

伴随着肥胖患病率在全世界范围内的急剧提升,目前已成为全人类需要共同面对的重要公共卫生问题。肥胖以脂肪细胞数量增多及体积扩张为主要特征,并伴有不同程度的代谢紊乱。同时肥胖又是糖尿病、高血压、中风、癌症及心脑血管疾病的危险因素,为社会及家庭带来极大负担。肥胖受生活方式、环境、行为及遗传等因素影响,是多因素相互作用的结果,其病理过程复杂涉及炎症、自噬、肠菌紊乱等多种机制。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联反应作为信号传导的关键通路,参与到细胞增殖、分化、凋亡及应激反应等多个过程中。国内外研究表明MAPK信号通路可通过多途径调控肥胖,如调控脂肪细胞分化及凋亡、调节食欲、改善炎症等。中药在防治肥胖方面效果显著且存在多靶点、多成分、不良反应小等优势,且研究发现MAPK信号通路亦是其重点调控的主要通路之一,但此领域尚未进行系统总结。故该文通过检索国内外最新研究,简要概述MAPK通路基本结构,重点总结了中药通过干预MAPK通路治疗肥胖的最新研究进展。结果表明,调控脂肪组织生成,分化及产热,降低炎症及氧化应激水平,改善胰岛素敏感性及代谢紊乱似乎为中药调控MAPK通路防治肥胖的主要途径。但后续仍需丰富研究方法,重点探索中药复方基于MAPK通路防治肥胖的潜在机制。

关键词：中药肥胖丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路研究进展机制

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3种桑螵蛸炮制前后抗氧化活性及免疫学研究

中国新药杂志 2024年第2期33卷 168-176页

作者：刘雨冬冀国鑫王仁广胡德闫茂颖王淑敏长春中医药大学长春130117

目的:比较3种桑螵蛸生品、盐制品对小鼠免疫功能和体外抗氧化能力的影响.方法:实验采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)2种方法,考察3种桑螵蛸炮制前后体外抗氧化活性的变化规律.通过... 详细信息

目的:比较3种桑螵蛸生品、盐制品对小鼠免疫功能和体外抗氧化能力的影响.方法:实验采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)2种方法,考察3种桑螵蛸炮制前后体外抗氧化活性的变化规律.通过腹腔注射环磷酰胺建立小鼠免疫力低下模型,测定小鼠体重变化率、免疫器官脏器指数和肾脏指数.通过酶联免疫法检测血清中白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、免疫球蛋白M(lgM)的水平.采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠胸腺、脾脏、肾脏病理改变情况.用Western blot法检测小鼠脾组织中核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)(P65),NF-κB(PP65),核因子κB抑制蛋白(IKB-α)的相对表达量.结果:体外抗氧化结果表明,3种桑螵蛸及盐制品均具有一定的自由基清除效果.盐制团螵蛸体外抗氧化活性最强,其清除DPPH,ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为0.507,0.705 mg·mL-1.免疫活性结果表明,3种桑螵蛸及盐制品对于免疫力低下模型小鼠体重变化率、胸腺指数、脾脏指数均有不同程度的提高,以盐制团螵蛸效果最佳,与模型组体重变化率、脾脏指数相比差异极显著(P<0.05,P<0.001,P<0.01).模型组细胞因子IL-2,TNF-α,IFN-γ及免疫球蛋白IgM含量与对照组比均下降(P<0.001).与模型组比较,团螵蛸生品及盐制品IL-2的含量回调,具有显著性差异(P<0.05),3种桑螵蛸生品及盐制品TNF-α的含量均升高,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001),盐制团螵蛸、盐制长螵蛸及团螵蛸的IFN-γ的含量升高,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01),团螵蛸与盐制团螵蛸IgM的含量升高,具有显著性差异(P<0.01).盐制团螵蛸可以改善胸腺、脾脏、肾脏的损伤,在3种桑螵蛸及炮制品中效果最优.桑螵蛸可使NF-κB(P65),NF-κB(PP65),IKB-α的相对表达回调到正常状态(P<0.001,P<0.0001).结论:3种桑螵蛸生品、盐制品均可以改善小鼠免疫功能,且具有体外抗氧化活性,盐制品优于生品.盐制团螵蛸清除自由基能力最强,对环磷酰胺所致小鼠的免疫低下恢复效果最佳.

关键词：桑螵蛸环磷酰胺免疫调节抗氧化活性

基于UHPLC-Q-Orbitrap/MS鉴定当归四逆颗粒化学成分

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质谱学报 2024年第3期45卷 432-446,I0005页

作者：郭倩池王康宇张龄月郭云龙贡济宇高文义长春中医药大学药学院吉林长春130117

本研究运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UHPLC-Q-Orbitrap/MS)技术快速鉴定当归四逆颗粒的化学成分。采用SUPELCO C18色谱柱(100 mm×4.6 mm×2.7μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,正、负离子模式下采集数... 详细信息

本研究运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UHPLC-Q-Orbitrap/MS)技术快速鉴定当归四逆颗粒的化学成分。采用SUPELCO C18色谱柱(100 mm×4.6 mm×2.7μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,正、负离子模式下采集数据。根据精确质荷比和二级质谱碎片离子信息,结合相关文献快速鉴定当归四逆颗粒的成分,并对化合物的药味来源进行归属。结果表明,在正、负离子模式下,分别从当归四逆颗粒鉴定出34、38种化合物,其中包括20种黄酮类、15种有机酸类、11种皂苷类、9种萜类、5种苯酞类、1种苯丙素类、1种醛类、1种核苷类、1种木脂素类及8种其他类化合物。本研究可为阐释当归四逆颗粒的药效物质基础提供依据。

关键词：经典名方当归四逆颗粒超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UHPLC-Q-Orbitrap/MS) 化学成分裂解规律

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基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子κB信号通路探讨针刺“蝶腭穴”改善变应性鼻炎大鼠免疫炎性反应的机制

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针刺研究 2024年第5期49卷 456-462页

作者：田美慧张亚男孙维芳刘欢汤勇长春中医药大学中医学院长春130117 长春中医药大学临床医学院长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021

目的:探讨针刺“蝶腭穴”对变应性鼻炎(AR)大鼠Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)、转录因子T-bet(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)的蛋白表达水平及相关炎性细胞因子的影响。方法:SD大鼠随机分为空白... 详细信息

目的:探讨针刺“蝶腭穴”对变应性鼻炎(AR)大鼠Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)、转录因子T-bet(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)的蛋白表达水平及相关炎性细胞因子的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、假针刺组,每组6只。采用卵清蛋白诱导建立AR大鼠模型。针刺组大鼠行双侧“蝶腭穴”针刺,假针刺组仅行假针刺,均每日1次,共6次。记录各组大鼠行为学评分;HE染色法观察大鼠鼻黏膜形态变化;ELISA法检测大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-17的含量;Western blot法检测大鼠鼻黏膜中TLR4、MyD88、NF-κB p65、T-bet、GATA-3蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组行为学评分升高(P<0.05),血清IgE、OVA-sIgE、IL-4、IL-17的含量及鼻黏膜中GATA-3、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05),血清IFN-γ、IL-10含量及鼻黏膜T-bet蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,针刺组行为学评分降低(P<0.05),血清IgE、OVA-sIgE、IL-4、IL-17的含量及鼻黏膜中GATA-3、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05),血清IFN-γ、IL-10的含量及鼻黏膜T-bet蛋白表达水平升高(P<0.05);假针刺组以上指标差异均无统计学意义。模型组和假针刺组可见鼻黏膜炎性浸润,针刺组鼻黏膜炎性反应明显减轻。结论:针刺“蝶腭穴”可减轻OVA诱导的AR大鼠的症状,改善鼻黏膜炎性反应,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,有效调控Th1/Th2、Treg/Th17细胞因子及T-bet/GATA-3的平衡有关。

关键词：蝶腭穴变应性鼻炎免疫炎性反应 Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子κB信号通路

人参醇溶蛋白提取工艺优化、结构表征及体外抗氧化活性分析

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食品工业科技 2024年第8期45卷 1-10页

作者：郭浩白雪媛陈宇宋文博刘那王思明长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进... 详细信息

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进行结构表征,并对其在不同pH条件下的体外抗氧化活性开展一系列研究。通过测定DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、铁离子还原能力,评价人参醇溶蛋白的体外抗氧化活性。结果表明,人参中醇溶蛋白最佳提取工艺为:提取时间2 h、提取料液比1:10 g/mL、提取pH为7,此时人参醇溶蛋白得率为0.319%,蛋白含量为75%。通过紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成成分分析试验结果表明,人参醇溶蛋白氨基酸总量为82.3 g/100 g,其中人体必需氨基酸含量为26.46 g/100 g,药用氨基酸含量为30.51 g/100 g,验证了该人参醇提物主要成分确为蛋白质,分子量约为3.3 kDa,SEM扫描电镜结果显示,该人参醇溶蛋白结构完整,表面稀疏且有不规则的脊形凸起以及少量孔隙,蛋白质颗粒呈现蜂窝聚集状态,具有稳定有序的网状结构。体外抗氧化试验结果表明,该蛋白在强酸性条件下具有较强的体外抗氧化活性,当pH=1时,人参醇溶蛋白对DPPH自由基的清除率为96%,对羟基自由基的清除率为79%,对铁离子的还原能力为0.86。

关键词：人参醇溶蛋白响应面结构表征抗氧化活性

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