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植物外泌体样纳米囊泡的研究进展

中国现代应用药学 2023年第24期40卷 3459-3466页

作者：李文婧谢睿石杨松任李梅赵悦名王佳雯长春中医药大学吉林省人参科学研究院长春130117 长春中医药大学药学院长春130117

植物外泌体样纳米囊泡(plantexocrine-likenano-vesicles,PELNs)是一种新兴的纳米治疗剂及传递平台,不但具有疾病治疗潜力,而且可以作为药物的载体靶向疾病位点,起到治疗递送双重作用,更重要的是PELNs具有绿色天然和低免疫原性等特点。... 详细信息

植物外泌体样纳米囊泡(plantexocrine-likenano-vesicles,PELNs)是一种新兴的纳米治疗剂及传递平台,不但具有疾病治疗潜力,而且可以作为药物的载体靶向疾病位点,起到治疗递送双重作用,更重要的是PELNs具有绿色天然和低免疫原性等特点。本综述系统介绍了PELNs的外囊阳性细胞器、多囊泡体、液泡和自噬小体几种分泌机制;脂质、蛋白质和核酸3种组成成分;离心法、超滤法、尺寸排阻色谱法、流场-流分馏法、免疫磁珠法、聚合物沉淀法等分离方法及其抗炎、抗肿瘤、保护再生、抗病毒、保肝等生物学功能,整理了PELNs作为治疗剂及分子传递平台目前已发现的潜在机制,提出了PELNs研究过程中存在的产量化、机制研究及临床试验少等问题,并展望了其未来的发展潜力。

关键词：植物外泌体样纳米囊泡提取分离生物学功能治疗分子递送新兴纳米治疗技术

铁皮石斛蛋白提取工艺优化、活性成分筛选及结构研究

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食品工业科技 2022年第19期43卷 228-237页

作者：曾婧白雪媛王悦赵大庆王思明长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130000

探究对提取工艺优化后筛选的铁皮石斛蛋白对损伤的大鼠胃黏膜上皮细胞的修复作用。通过单因素考察提取时间、料液比和硫酸铵饱和度对铁皮石斛水溶性总蛋白收率的影响,以铁皮石斛水溶性总蛋白收率为响应值考察最佳提取工艺。采用蛋白纯... 详细信息

探究对提取工艺优化后筛选的铁皮石斛蛋白对损伤的大鼠胃黏膜上皮细胞的修复作用。通过单因素考察提取时间、料液比和硫酸铵饱和度对铁皮石斛水溶性总蛋白收率的影响,以铁皮石斛水溶性总蛋白收率为响应值考察最佳提取工艺。采用蛋白纯化技术,用DEAE弱阴离子交换柱层析法分离铁皮石斛水溶性总蛋白,以大鼠胃黏膜上皮细胞(GECs-1)建立损伤模型并进行活性筛选。采用紫外扫描、红外光谱及圆二色谱进行结构表征。结果显示,铁皮石斛水溶性总蛋白最佳提取工艺为:提取时间6 h,料液比1:27 g/mL,硫酸铵饱和度80%,此条件下铁皮石斛蛋白收率可达8.65%±0.13%,与预测值接近;铁皮石斛水溶性总蛋白在优化提取工艺的基础上纯化得到三种蛋白,其中,TPSHP-2(铁皮石斛蛋白-2)在280 nm处有最大吸收峰,主要为β-折叠结构,且对乙醇损伤的大鼠胃黏膜上皮细胞的修复效果最好。优化提取工艺后纯化得到的TPSHP-2对损伤的大鼠胃黏膜上皮细胞具有修复作用。

关键词：铁皮石斛蛋白响应面提取收率纯化体外活性

基于网络药理学探讨消癥活络方通过ERK5通路抗大鼠肝纤维化的机制

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临床肝胆病杂志 2021年第3期37卷 582-589页

作者：田乐王颖航潘志长春中医药大学人参科学研究院长春130117 长春中医药大学附属医院风湿科长春130117

目的基于网络药理学方法探索消癥活络方(XZHLF)防治肝纤维化的作用机制。方法通过TCMSP数据库、化学专业数据库、ETCM数据库、化源网数据库、PubChem数据库以及文献查阅,收集XZHLF各中药化学成分,利用Swiss ADME数据库筛选出XZHLF各中... 详细信息

目的基于网络药理学方法探索消癥活络方(XZHLF)防治肝纤维化的作用机制。方法通过TCMSP数据库、化学专业数据库、ETCM数据库、化源网数据库、PubChem数据库以及文献查阅,收集XZHLF各中药化学成分,利用Swiss ADME数据库筛选出XZHLF各中药活性成分,利用Swiss Target Prediction数据库预测XZHLF各中药活性成分靶点;通过GeneCards、OMIN数据库收集肝纤维化疾病靶点,利用韦恩图获得XZHLF防治肝纤维化的潜在作用靶点。使用Cytoscape 3.7.1软件建立XZHLF“药物-活性成分”网络和XZHLF防治肝纤维化的“活性成分-潜在作用靶点”网络。在Metascape数据库对潜在作用靶点进行GO和KEGG富集分析,选取富集基因数最多的前20条绘制气泡图。对前20条KEGG通路中的MAPK信号通路进行分析,绘制“活性成分-潜在作用靶点-通路”网络图。将健康的SD大鼠随机分为6组,分别为空白对照组(K组)、模型组(M组)、秋水仙碱阳性对照组(Y组)、XZHLF高(G组)、中(Z组)、低(D组)剂量组,利用CCl4诱导大鼠肝纤维化进行造模,造模同时给药,共8周。通过Western Blot法检测各组大鼠肝组织内ERK5、p-ERK5、MEK5、MEKK3蛋白的相对含量和表达情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果从XZHLF中筛选出110个活性成分,作用于923个活性成分靶点,与6823个肝纤维化疾病靶点相映射得到潜在作用靶点647个。XZHLF可能通过MAPK信号通路等通路,通过MAPK级联反应的调控等生物过程,作用于EGFR、AKT1、IKBKB、MAPK8、PDGFRB等多个蛋白靶点,从而发挥防治肝纤维化的作用。M组的大鼠肝组织内ERK5、p-ERK5、MEK5和MEKK3蛋白水平较K、Y、G、Z、D组明显增加,差异均有统计学意(P值均<0.05);K组的大鼠肝组织内ERK5、p-ERK5、MEK5和MEKK3蛋白水平较Y、G、Z、D组明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论基于网络药理学的方法预测出XZHLF可能通过MAPK信号通路防治肝纤维化,通过实验验证XZHLF是通过MAPK信号通路家族中ERK5通路抗肝纤维化。XZHLF高剂量组的抗肝纤维化作用效果最为明显。

关键词：网络药理学消癥活络方肝硬化细胞外信号调节激酶5

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中药栀子保肝和肝毒性双重作用研究进展

吉林中医药 2022年第11期42卷 1337-1340页

作者：李春楠吕经纬兰梦程端端赵峻璐张辉长春中医药大学人参科学研究院长春130117

栀子为临床常见的药食同源药材,现代药理研究表明栀子具有清热解毒、保肝利胆、消炎等功效,但近年研究发现栀子存在一定的不良反应,剂量较大或服用不当对肝脏影响较大。栀子既保肝又伤肝,通过对文献进行查阅总结,对栀子在护肝的药理作... 详细信息

栀子为临床常见的药食同源药材,现代药理研究表明栀子具有清热解毒、保肝利胆、消炎等功效,但近年研究发现栀子存在一定的不良反应,剂量较大或服用不当对肝脏影响较大。栀子既保肝又伤肝,通过对文献进行查阅总结,对栀子在护肝的药理作用及不良反应进行概述,阐明栀子物质基础和机制,为其合理安全应用及临床配伍提供一定参考,充分发挥药效而避免其不良反应。

关键词：栀子护肝不良反应肝毒性

UPLC-MS法分析红参中人参皂苷及在2型糖尿病大鼠体内代谢研究

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质谱学报 2021年第6期42卷 1091-1099页

作者：王和宇黄仁嵩焦传新李慧焦丽丽刘淑莹吴巍长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117

采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)法结合串联质谱(MS/MS)碎片离子信息,对红参中的皂苷类成分进行定性、定量分析,并分析了灌胃红参总皂苷后大鼠粪便及血清中的人参皂苷随给药时间增加而发生的含量变化。选用Thermo Syncronis C18色谱柱... 详细信息

采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)法结合串联质谱(MS/MS)碎片离子信息,对红参中的皂苷类成分进行定性、定量分析,并分析了灌胃红参总皂苷后大鼠粪便及血清中的人参皂苷随给药时间增加而发生的含量变化。选用Thermo Syncronis C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×1.7μm),流动相A为0.1%甲酸水溶液,B为乙腈,流速0.2 mL/min,进样量5μL,二元线性梯度洗脱分离,电喷雾负离子模式检测,并进行方法学考察。结果表明,本方法可快速、准确检测到大鼠的粪便及血清中人参皂苷Noto-R_(1)、Rg_(1)、Re、Rf、Rg_(2)、Rh_(1)、Rb_(1)、Rc、Ro、Rb_(2)、Rb_(3)、Rd、Rg_(3)、Rk_(1),并分析随着干预时间的增加,大鼠粪便中人参皂苷代谢产物含量的变化规律,为人参皂苷药效物质基础研究提供了依据。

关键词：红参人参皂苷代谢超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)

基于UPLC Orbitrap MS/MS分析锦灯笼中化学成分

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质谱学报 2021年第3期42卷 253-260,I0002页

作者：杨迪李方彤刘明宋凤媛葛岩戴雨霖郑飞越皓长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117

利用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC Orbitrap HRMS)法分析锦灯笼干燥果实和宿萼的提取物的化学成分。采用Thermo Syncronis C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,电喷雾电离源负离子模式下... 详细信息

利用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC Orbitrap HRMS)法分析锦灯笼干燥果实和宿萼的提取物的化学成分。采用Thermo Syncronis C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,电喷雾电离源负离子模式下利用轨道阱质量分析器检测。根据高分辨质谱提供的精确相对分子质量和串联碎片离子等信息,结合对照品、保留时间和相关文献,共鉴定出23种化学成分,包括5种有机酸类、12种黄酮类、6种酸浆苦素类化合物,其中山奈甲黄素-3-O-葡萄糖苷和锦葵色素-3-O-葡萄糖苷是首次在锦灯笼中发现。通过快速分析鉴定锦灯笼中化学成分,可为锦灯笼的药食两用提供物质基础。

关键词：锦灯笼超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC Orbitrap HRMS) 化学成分

基于液质联用和分子对接技术对薄蒴草抗炎活性成分的筛选

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食品工业科技 2022年第17期43卷 19-25页

作者：吴孟雅张楠茜张凯月吕经纬兰梦张辉孙佳明长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117

目的:基于液质联用及分子对接技术筛选薄蒴草中的抗炎活性成分。方法:通过研究薄蒴草不同极性萃取部位对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7产生一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,筛选薄蒴草抗炎... 详细信息

目的:基于液质联用及分子对接技术筛选薄蒴草中的抗炎活性成分。方法:通过研究薄蒴草不同极性萃取部位对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7产生一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,筛选薄蒴草抗炎活性部位。通过高效液相色谱-质谱联用技术(high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS)分析抗炎活性部位的化学成分。选择5个重要的炎症因子TNF-α、IL-6、白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))、核转录因子-κB(NF-κB)分别与活性部位中的有效成分通过Autodock Vina软件进行分子对接。结果:体外抗炎实验结果显示薄蒴草的乙酸乙酯萃取部位具有一定的抗炎活性,与模型组相比在最高实验浓度75μg/mL下对NO、TNF-α、IL-6的产生均有极显著抑制作用(P<0.01),抑制率分别为63.53%、34.23%、34.58%;液质联用鉴定出11个化学成分,包括8个黄酮类成分芦丁、牡荆素、山奈酚、鼠李秦素、槲皮素、芹菜素、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷、槲皮苷和3个香豆素类成分伞形花内酯、7-甲氧基香豆素、5,7-二羟基香豆素;分子对接结果显示,与TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE_(2)、NF-κB结合最好的成分分别是槲皮苷、山奈酚、芦丁、槲皮苷、牡荆素,结合能为-8.5、-7.8、-8.0、-7.2和-10.0 kcal/mol,均优于阳性对照地塞米松,说明这些成分与5个靶点具有较好的亲和力。结论:薄蒴草的乙酸乙酯萃取部位为抗炎活性部位,通过液质联用结合分子对接技术能快速、便捷地筛选出薄蒴草的抗炎活性成分。

关键词：薄蒴草高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS) 分子对接抗炎黄酮类成分

基于细胞代谢组学技术的人参皂苷Rb1对SH-SY5Y细胞保护机制研究

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分析化学 2019年第1期47卷 49-58页

作者：杨银平律广富张乔姚梦杰梁新合李茎张辉孙佳明长春中医药大学吉林省人参科学研究院

采用基于1H NMR的细胞代谢组学技术探讨人参皂苷Rb1对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用机制。应用MTT比色法及流式细胞术分析SH-SY5Y细胞在造模和给药前后的细胞存活率和凋亡率,利用1H NMR技术平台结合多元统计分析对细胞代谢的动... 详细信息

采用基于1H NMR的细胞代谢组学技术探讨人参皂苷Rb1对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用机制。应用MTT比色法及流式细胞术分析SH-SY5Y细胞在造模和给药前后的细胞存活率和凋亡率,利用1H NMR技术平台结合多元统计分析对细胞代谢的动态变化进行研究,揭示SH-SY5Y细胞在造模和给药前后内源性代谢物变化情况。结果表明,人参皂苷Rb1能通过减少谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡而产生保护作用,结合正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)共鉴定出谷氨酸、牛磺酸、乙酸、精氨酸、肌酸、丙氨酸和脯氨酸共7个差异代谢物。经Metaboanalyst分析,主要涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢、丙酮酸代谢共5条能量代谢及氨基酸代谢途径。结果表明,人参皂苷Rb1主要通过影响多种能量及氨基酸代谢对氧化损伤的神经细胞产生保护作用。

关键词：人参皂苷Rb1 细胞代谢组学 1H核磁共振凋亡保护正交偏最小二乘法判别分析

N-苄基十六碳酰胺促小鼠Leydig细胞增殖和分泌睾酮的~1H NMR代谢组学研究

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高等学校化学学报 2019年第9期40卷 1832-1839页

作者：张楠茜吕经纬金平李晶峰边学峰张辉孙佳明长春中医药大学吉林省人参科学研究院

采用基于核磁共振氢谱(~1H NMR)的细胞代谢组学技术探讨了玛咖有效成分N-苄基十六碳酰胺(NBH)促进小鼠Leydig细胞增殖和分泌睾酮的作用机制.测定了小鼠Leydig细胞在给药前后的细胞增殖率和细胞培养液中的睾酮含量,采用主成分分析和正交... 详细信息

采用基于核磁共振氢谱(~1H NMR)的细胞代谢组学技术探讨了玛咖有效成分N-苄基十六碳酰胺(NBH)促进小鼠Leydig细胞增殖和分泌睾酮的作用机制.测定了小鼠Leydig细胞在给药前后的细胞增殖率和细胞培养液中的睾酮含量,采用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,研究了小鼠Leydig细胞在给药前后细胞破碎液中的代谢物差异,并进行了代谢通路分析.实验结果表明, NBH能提高小鼠Leydig细胞增殖率和睾酮分泌量,给药后小鼠Leydig细胞破碎液中的代谢轮廓明显改变,共鉴定亮氨酸、赖氨酸、鲨肌醇、缬氨酸和丙氨酸等24种差异代谢物.经Metaboanalyst分析发现,差异代谢物主要涉及丙氨酸/天冬氨酸/谷氨酸代谢、甘氨酸/丝氨酸/苏氨酸代谢、谷胱甘肽代谢及丙酮酸代谢等10条新陈代谢和遗传信息处理代谢通路,初步阐明了NBH通过调节上述代谢通路的相关节点发挥促进小鼠Leydig细胞增殖和分泌睾酮作用.

关键词：细胞代谢组学核磁共振氢谱 N-苄基十六碳酰胺小鼠Leydig细胞