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靶向c-Met的CAR-T细胞构建及其对人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3的体外杀伤性

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生理学报 2025年

作者：杜娜娜张艳君李艳秋张露安然甄翔程闵静婷李正红蚌埠医科大学基础医学院蚌埠医科大学生命科学院蚌埠医科大学公共基础学院蚌埠医科大学临床医学院蚌埠医科大学安徽省肿瘤演进及智能诊疗重点实验室

本研究旨在构建靶向细胞间质上皮转换因子(c-mesenchymal-epithelial transition factor, c-Met)的第二代和第三代嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells, CAR-T)，观察其对人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3的体外杀伤作用。采用生物信息学分析MET基因在卵巢浆液性囊腺癌中的表达情况、MET基因表达与免疫细胞浸润丰度的相关性及其对卵巢浆液性囊腺癌组织功能的影响；免疫组织化学染色法检测浆液性卵巢癌组织以及癌旁组织中c-Met的表达情况；流式细胞术检测SKOV-3表面c-Met蛋白的表达；通过慢病毒感染制备第二代和第三代c-Met CAR-T细胞，流式细胞术检测细胞亚群和感染效率。以CD19 CART和活化T细胞为对照组，以c-Met阴性表达的人卵巢癌细胞A2780细胞设置Non target组，通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放、ELISA、CCK-8等功能实验探究第二代[c-Met CAR-T(2G)]和第三代[c-Met CAR-T(3G)] c-Met CAR-T对c-Met阳性表达的SKOV-3细胞的杀伤效果、细胞因子分泌和增殖能力。生物信息学分析与免疫组织化学染色结果显示，与正常组织相比，卵巢癌组织的MET基因表达显著上调，而在各病理阶段MET表达无明显差异，且MET基因表达与卵巢癌患者的种族、年龄均没有相关性。成功构建第二代和第三代cMet CAR-T细胞，且在慢病毒感染后c-Met CAR-T(2G)的CD8+T细胞比例有所上调，c-Met CAR-T(3G)细胞亚群无明显变化；LDH释放实验显示，第二代和第三代c-Met CAR-T对靶细胞SKOV-3的杀伤效率随效靶比提高而上升，效靶比为20:1时，c-Met CAR-T(2G)的杀伤效率达到(42.02±5.17)%(P<0.05),c-Met CAR-T(3G)的杀伤效率达到(51.4±2.71)%(P<0.05);ELISA结果显示，c-Met CAR-T相较于CD19 CAR-T和活化T细胞能释放更多细胞因子(P<0.05)，并且，c-Met CAR-T(3G)的释放量高于c-Met CAR-T(2G)(P<0.01);CCK-8结果显示，在48 h后，c-Met CAR-T(2G)细胞数量显著多于c-Met CAR-T(3G)(P<0.01)。以上结果提示，第二代和第三代c-Met CAR-T均能靶向识别并杀伤c-Met阳性的人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3，两者的细胞毒性无明显差异，c-Met CAR-T(2G)的增殖能力更强，c-Met CAR-T(3G)释放细胞因子的水平更高。

关键词：浆液性卵巢癌 c-Met CAR-T 生物信息学

信息生态理论视域下医患有效沟通目标及策略研究

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中国医学伦理学 2025年第1期38卷 109-115页

作者：孙华阳赵冬梅任素娟锦州医科大学健康管理现代产业学院辽宁锦州121001 锦州医科大学医学人文学院辽宁锦州121001

医患沟通不仅取决于医方群体,还受到患方群体和具体情境的影响,医患之间有效的沟通需要医方提高沟通能力,也需要患方具有某一症状或疾病的相关知识以及医患双方的相互信任。信息生态理论主要从生态系统视角分析信息活动过程中各生态要... 详细信息

医患沟通不仅取决于医方群体,还受到患方群体和具体情境的影响,医患之间有效的沟通需要医方提高沟通能力,也需要患方具有某一症状或疾病的相关知识以及医患双方的相互信任。信息生态理论主要从生态系统视角分析信息活动过程中各生态要素关系以及生态发展机理,重视系统内信息主客体、信息内容、信息环境、信息技术等的相互影响和作用,这与医患沟通的影响因素有着一致性。基于信息生态理论,从信息主客体、信息本身、信息情境、信息技术四个维度,分析信息技术环境下医患沟通面临的新问题,提出医患有效沟通需要重新审视医患沟通的影响因素,构建医患共同体,包括知识共同体、交流共同体、情感共同体和利益共同体,使医患沟通四因子在动态发展中形成新的平衡,以期为医患信任、医患有效沟通提供实践指导。

关键词：信息生态理论医患沟通信息技术医患共同体

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skMLCK基因对成肌细胞C2C12肌纤维组成及信号通路的影响

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畜牧与兽医 2025年第3期57卷 47-57页

作者：李孝涵朱弘焱韩佳琪张尚松田玉民苏玉虹锦州医科大学畜牧兽医学院辽宁锦州121000 锦州医科大学基础医学院辽宁锦州121000 锦州医科大学食品与健康学院辽宁锦州121000

旨在研究高、低表达骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(skMLCK)基因对肌纤维组成成分和信号通路关键分子的影响。采用高表达和RNAi技术,获得skMLCK高、低表达稳转成肌细胞C2C12细胞株,提取细胞总RNA和总蛋白质,采用实时定量PCR和Western blot方法... 详细信息

旨在研究高、低表达骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(skMLCK)基因对肌纤维组成成分和信号通路关键分子的影响。采用高表达和RNAi技术,获得skMLCK高、低表达稳转成肌细胞C2C12细胞株,提取细胞总RNA和总蛋白质,采用实时定量PCR和Western blot方法检测skMLCK高、低表达后C2C12中skMLCK基因,5种肌纤维组成成分肌球蛋白轻链(MLC)、肌球蛋白重链(MyHC)slow、MyHC 2a、MyHC 2x和MyHC 2b和6种信号通路关键因子肌球蛋白增强因子2C(MEF2C)、钙调蛋白(CaM)、促分裂原活化蛋白激酶p38(MAPKp38)、AMPK激活性蛋白激酶α2(AMPKα2)、RhoA和丝切蛋白2(CFL2)的表达情况。结果:在高、低表达稳转株中信号通路关键分子MAPKp38与skMLCK蛋白和mRNA表达量变化相同;2种肌纤维组成成分(MyHC 2x和MyHC 2b)和3种信号通路关键分子(CFL2、AMPKα2和RhoA)与skMLCK基因mRNA表达量变化相反;2种肌纤维组成成分(MyHC 2x和MyHC 2b)和4种信号通路关键分子(MEF2C、CaM、AMPKα2和CFL2)与skMLCK蛋白表达量变化相反,其余组分结果均一致;将所有蛋白质表达结果合并进行统计学分析发现,skMLCK基因与信号通路RhoA高度相关。综上,skMLCK基因可能通过改变C2C12细胞中RhoA信号通路来影响肌纤维的组成,skMLCK基因可以抑制CFL2的表达和肌纤维的生长。

关键词：骨骼肌肌球蛋白轻链激酶 C2C12细胞株肌纤维信号通路

融合语义感知与模型生成的异常医疗数据识别算法设计

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现代电子技术 2025年第4期48卷 159-163页

作者：高昱韩智涌锦州医科大学辽宁锦州121000

为了能够对海量电子诊疗信息中的异常数据进行识别,提出一种融合语义感知与模型生成的异常医疗数据识别算法。通过融入胶囊神经网络并改进Transformer网络,实现了对医疗电子病历结构和生成语义特征的感知提取;结合胶囊神经网络和Transfo... 详细信息

为了能够对海量电子诊疗信息中的异常数据进行识别,提出一种融合语义感知与模型生成的异常医疗数据识别算法。通过融入胶囊神经网络并改进Transformer网络,实现了对医疗电子病历结构和生成语义特征的感知提取;结合胶囊神经网络和Transformer网络的损失函数,加速了模型的收敛,从而提高了模型的异常数据识别准确率。在电子病历数据集上进行的实验结果表明,所提模型的准确率可达94.2%,高于多种现有的主流异常数据识别诊断模型。证明该模型算法能够对医疗电子病历实现语义感知和异常数据识别,为实现智能化的辅助诊疗提供了技术基础。

关键词：电子病历异常数据识别语义感知模型生成胶囊神经网络 Transformer网络语义特征提取

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基于Citespace对人工智能在骨创伤研究的可视化分析

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中国组织工程研究 2025年第3期29卷 493-502页

作者：宋浩然张玉强谷娜智晓东王伟锦州医科大学附属第一医院骨科辽宁省锦州市121000 锦州医科大学骨外科学研究所辽宁省锦州市121000 锦州医科大学附属第一医院放射科辽宁省锦州市121000

背景:人工智能在医疗领域的发展日益迅速,在骨创伤领域的应用研究不断增多。文章旨在通过文献计量学分析,分析近年来人工智能在骨创伤领域中的研究热点,并预测未来的研究趋势。目的:总结人工智能技术在骨创伤领域的应用发展历程、研究... 详细信息

背景:人工智能在医疗领域的发展日益迅速,在骨创伤领域的应用研究不断增多。文章旨在通过文献计量学分析,分析近年来人工智能在骨创伤领域中的研究热点,并预测未来的研究趋势。目的:总结人工智能技术在骨创伤领域的应用发展历程、研究现状、热点和未来发展趋势,以期为今后的研究提供新的见解。方法:选择Web of Science核心集数据库中,时间跨度设为自建库至2023年8月,检索人工智能、机器学习、深度学习应用于骨创伤相关的文献420篇。通过人工筛选,导出与文章相关的文献共202篇,采用Citespace软件进行国家、机构、被引期刊和引文分析等的合作和关键词的共现等可视化分析。结果与结论:①分析筛选后纳入的202篇文献,总体发文量呈上升趋势,且在未来研究潜力巨大。研究中心性最高和发文量排名第一的国家均为美国。加州大学(美国)是发文量最多的研究机构。②人工智能在骨创伤研究中最常用的前5个关键词是深度学习、人工智能、骨密度、机器学习、诊断,中心性最高的关键词为骨密度,关键词数量最多的为深度学习。③共被引频次前10位的参考文献分别从多个方面介绍了人工智能技术应用于骨创伤领域诊断的可行性研究,其中8篇涉及骨关节损伤与深卷积神经网络,1篇涉及深度学习在CT检查中检测骨质疏松从而预防脆性骨折,1篇通过人工智能识别皮肤纹理变的特征应用于骨的特征性识别的相关性研究。④今后,人工智能的研究热点将主要集中在骨关节创伤和骨质疏松引发的骨折特异性研究上,未来研究趋势主要集中在提升人工智能算法的性能上,使用人工智能新技术对骨损伤进行精准划分和快速高效诊断,尤其是针对复杂和隐匿性骨折的诊断,通过建立有限元分析模型,实现对骨创伤的更加标准化评估。

关键词：人工智能骨创伤骨折机器学习深度学习文献计量学 Web of Science 影像诊断 Citespace 可视化分析

淫羊藿苷对糖尿病大鼠骨质疏松症的作用及其机制

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中国医科大学学报 2025年第1期54卷 12-17,23页

作者：满超王岩松锦州医科大学第一临床学院辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第一医院骨外科辽宁锦州121001

目的探讨淫羊藿苷通过调控雌激素受体1(ER1)改善糖尿病大鼠骨质疏松症的作用机制。方法50只SPF级SD大鼠随机分为5组:对照组(Control组)、糖尿病组(构建糖尿病大鼠模型,STZ组)、低剂量淫羊藿苷组[糖尿病模型大鼠构建成功4周后50 mg/(kg... 详细信息

目的探讨淫羊藿苷通过调控雌激素受体1(ER1)改善糖尿病大鼠骨质疏松症的作用机制。方法50只SPF级SD大鼠随机分为5组:对照组(Control组)、糖尿病组(构建糖尿病大鼠模型,STZ组)、低剂量淫羊藿苷组[糖尿病模型大鼠构建成功4周后50 mg/(kg·d)淫羊藿苷灌胃,连续8周]、高剂量淫羊藿苷组[糖尿病模型大鼠构建成功4周后100 mg/(kg·d)淫羊藿苷灌胃,连续8周]、高剂量淫羊藿苷+ER1-siRNA组[糖尿病模型大鼠构建成功4周后100 mg/(kg·d)淫羊藿苷灌胃,连续8周;10μL ER1-siRNA尾静脉注射,1次/4周,共2次],每组10只。HE染色检测各组大鼠股骨组织病理形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平和血钙浓度。蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析预测淫羊藿苷核心靶点及分子对接并验证。Western blotting检测大鼠股骨组织ER1、PDE5A、Wnt和β-cantenin表达情况。结果与对照组比较,STZ组大鼠软骨下区空骨陷窝增多,ALP水平和血钙浓度下降(P<0.01),TRAP水平升高(P<0.01)。与STZ组比较,低剂量、高剂量淫羊藿苷组血糖降低(P<0.01),软骨下区空骨陷窝减少,ALP和血钙浓度升高(均P<0.01),TRAP表达降低(均P<0.01)。PPI网络分析及分子对接显示淫羊藿苷可以稳定地结合到ER1蛋白结构上。Western blotting检测结果显示,与Control组比较,STZ组ER1、Wnt和β-cantenin蛋白表达水平降低(均P<0.01);与STZ组比较,高剂量淫羊藿苷组ER1、Wnt和β-cantenin蛋白表达水平升高(均P<0.01);与高剂量淫羊藿苷组比较,高剂量淫羊藿苷+ER1-siRNA组ER1、Wnt和β-cantenin蛋白表达水平降低(均P<0.01),淫羊藿苷的保护作用被逆转。结论淫羊藿苷能够明显改善糖尿病大鼠骨质疏松症状,其作用机制可能与激活ER1介导的Wnt/β-cantenin信号通路有关。

关键词：淫羊藿苷糖尿病性骨质疏松症雌激素受体1 Wnt/β-catenin信号通路

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食品生物技术导论课程实践教学研究

中国食品工业 2025年第2期 156-158页

作者：盛治勇毛颖基李强梁猛蚌埠医科大学生命科学院安徽蚌埠233030

为进一步提高食品生物技术导论课程教学水平,本文分析了现有的教学体系方式和课程内容设置存在的不足,并通过对不同年级学生进行问卷调查分析,调整实践教学和课程内容设置,大大提升了教学效果,获得了学生的广泛认可。

关键词：实践能力食品质量与安全课程内容

基于网络药理学及体外实验探讨香蒲新苷对肺腺癌的作用及其机制

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解放军医学杂志 2025年

作者：刘梦茹阎雪锦州医科大学附属第一医院呼吸内科

目的　基于网络药理学及体外实验探讨香蒲新苷（TYP）对肺腺癌的作用及其潜在的分子机制。方法　通过预测靶点网站SwissTargetPrediction、癌症基因组图谱（TCGA）数据库、GeneCards数据库和基因表达综合数据库（GEO）获得TYP—肺腺癌... 详细信息

目的　基于网络药理学及体外实验探讨香蒲新苷（TYP）对肺腺癌的作用及其潜在的分子机制。方法　通过预测靶点网站SwissTargetPrediction、癌症基因组图谱（TCGA）数据库、GeneCards数据库和基因表达综合数据库（GEO）获得TYP—肺腺癌相关靶点基因，对得到的TYP—肺腺癌相关基因进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析，应用String数据库进行蛋白互作网络分析，应用Vina软件进行分子对接，通过这些网络药理学分析方法探索TYP对肺腺癌的理论作用通路。取PC9细胞，设置对照组（正常培养）、低TYP组（50 μmol/L TYP处理48 h）、高TYP组（100 μmol/L TYP处理48 h）与铁抑制剂-1（Fer-1）+TYP组（1 μmol/L Fer-1+100 μmol/L TYP处理48 h），采用CCK-8法检测细胞活力，EdU实验检测细胞增殖能力，划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力，采用还原型谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒、活性氧（ROS）检测试剂盒、线粒体膜电位检测试剂盒、亚铁离子荧光探针、透射电镜检测铁死亡的发生，Western blotting和反转录-定量PCR（RT-qPCR）检测铁死亡关键分子溶质载体家族7成员11（SLC7A11）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白和mRNA的表达情况。应用SLC7A11过表达质粒转染PC9细胞，设置Vector组（空载质粒转染）、Vector+TYP组（空载质粒转染+100 μmol/L TYP处理48 h）、OE-SLC7A11组（SLC7A11过表达质粒转染）与OE-SLC7A11+TYP组（SLC7A11过表达质粒转染+100 μmol/L TYP处理48 h），通过CCK-8法、亚铁离子荧光探针、铁死亡关键分子SLC7A11和GPX4蛋白表达情况验证SLC7A11在TYP作用于PC9细胞时的分子机制。结果　通过靶点预测网站SwissTargetPrediction及基因数据库（TCGA、GeneCards和GEO）共预测了73个TYP—肺腺癌相关靶点基因。GO分析结果表明靶基因主要参与激酶活性的正向调节等生物过程，且主要富集于转移酶复合物（转移含磷基团）等细胞组分，揭示了跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性等分子功能；KEGG分析共获得124个相关途径，主要包括表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂的抗药性等途径。蛋白互作网络分析获得丝氨酸/苏氨酸激酶1（Akt1）等7个核心靶点，分子对接结果显示，TYP与核心靶点基因及铁死亡相关蛋白SLC7A11和GPX4的结合能均≤-5.0 kcal/mol，表明它们具有显著的结合活性。CCK-8法检测结果显示，TYP可明显抑制PC9细胞活力（P<0.05）；EdU实验结果显示，与对照组相比，TYP组增殖期细胞比例明显降低（P<0.05）；划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验结果显示，与对照组相比，TYP组细胞迁移和侵袭能力明显降低（P<0.05）；与对照组相比，TYP组细胞GSH含量、线粒体膜电位明显降低（P<0.05），ROS、Fe2+含量明显增加（P<0.01），SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA表达水平明显降低（P<0.05）；透射电镜观察显示，与对照组相比，TYP组细胞发生了线粒体嵴减少及膜密度增加等铁死亡特异性变化。与Vector+TYP组相比，OE-SLC7A11+TYP组细胞活力明显升高（P<0.05），Fe2+含量明显降低（P<0.05），SLC7A11、GPX4蛋白表达水平明显增高（P<0.05）。结论　TYP可能通过调节SLC7A11-GPX4轴诱导肺腺癌细胞发生铁死亡，并抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性行为。

关键词：铁死亡香蒲新苷肺腺癌网络药理分子对接上皮-间质转化

基于分段反投影张量退化特征编码的牙科CBCT运动伪影校正

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南方医科大学学报 2025年

作者：曾智雄王永波林宗悦边兆英马建华南方医科大学生物医学工程学院西安交通大学生命科学与技术学院

目的为了去除患者在牙科CBCT扫描过程中发生躯体运动导致的伪影，提升重建图像质量，提出一种基于分段反投影张量退化特征编码的运动伪影校正模型（SBP-MAC）。方法该模型由一个生成器和一个退化编码器构成。将分段有限角度重建的子... 详细信息

目的为了去除患者在牙科CBCT扫描过程中发生躯体运动导致的伪影，提升重建图像质量，提出一种基于分段反投影张量退化特征编码的运动伪影校正模型（SBP-MAC）。方法该模型由一个生成器和一个退化编码器构成。将分段有限角度重建的子图像堆叠成张量并作为模型输入；用退化编码器提取张量中空间变化的运动信息，自适应调制生成器的各级跳跃连接特征，从而指导模型校正不同运动波形导致的伪影；最后设计伪影一致性损失来简化生成器的学习任务。结果该模型能有效地去除运动伪影，提升重建图像质量。在仿真数据上的峰值信噪比提升了8.28%，结构相似度提升了2.29%，均方根误差降低了23.84%；在真实数据上的专家评分最高4.4221(5分制)，与所有对比方法之间的评分差异具有统计学意义（P<0.05）。结论本文提出的SBP-MAC模型能够有效提取张量中空间变化的运动信息，实现从张量域到图像域的自适应伪影校正，提升牙科CBCT图像质量。

关键词：运动伪影校正牙科CBCT 分段反投影张量