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circRTN4通过调节单核细胞源性TNF-α参与狼疮性肾炎肾小球硬化

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中国免疫学杂志 2024年第8期40卷 1634-1639页

作者：苗心妍张诗琪剧一田月新刘金熹封晓娟河北医科大学病理教研室石家庄050017 河北医科大学石家庄050017 河北工程大学医学院邯郸056000

目的:探讨环状RNA-0054595(circRTN4)是否通过调控单核细胞源性肿瘤坏死因子α(TNF-α)参与狼疮性肾炎(LN)肾小球硬化过程及其作用机制。方法:RT-qPCR和免疫荧光技术检测LN患者单核细胞中TNF-α的表达,荧光原位杂交技术(FISH)检测circR... 详细信息

目的:探讨环状RNA-0054595(circRTN4)是否通过调控单核细胞源性肿瘤坏死因子α(TNF-α)参与狼疮性肾炎(LN)肾小球硬化过程及其作用机制。方法:RT-qPCR和免疫荧光技术检测LN患者单核细胞中TNF-α的表达,荧光原位杂交技术(FISH)检测circRTN4的表达。THP1细胞中分别转染circRTN4-siRNA及阴性对照NC-siRNA,RT-qPCR和Western blot检测THP1细胞中TNF-α的表达,ELISA检测THP1培养上清中TNF-α的表达水平。THP1细胞中分别转染miR-RNA的模拟物,Western blot检测细胞中TNF-α的表达。回复实验及双荧光素酶报告基因实验验证miR-486-3p与TNF-α及circRTN4的直接结合。MRL/lpr狼疮模型小鼠通过尾静脉注射敲低circRTN4重组腺相关病毒,RT-qPCR检测circRTN4在小鼠外周血单核细胞中的表达;ELISA检测小鼠血清中TNF-α表达水平;HE染色、PAS染色观察肾脏组织病理改变,免疫荧光检测纤连蛋白FN表达。结果:LN患者单核细胞中TNF-α及circRTN4表达水平升高(P<0.05);LN组THP1中TNF-α表达显著升高(P<0.01),敲低circRTN4可抑制TNF-α的合成与分泌(P<0.05),并且该效应是通过结合miR-486-3p实现的(P<0.01)。体内实验中,敲低MRL/lpr小鼠外周血单核细胞circRTN4可减少血清中TNF-α的表达(P<0.05),并改善肾小球细胞过度增殖及细胞外基质蛋白FN的沉积。结论:在LN单核细胞中,高表达的circRTN4通过结合miR-486-3p促进下游靶基因TNF-α的表达,参与肾小球硬化发生和发展。

关键词：狼疮性肾炎单核细胞环状RNA-0054595 肿瘤坏死因子α

基于铜死亡相关基因构建结肠腺癌临床预后模型并验证

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牡丹江医学院学报 2024年第3期45卷 31-42页

作者：林昕乐钱格格杨亚雯卢广涛王俊杰章雯陶香香陈麒霖赵森陈冰皖南医学院病理教研室安徽医学高等专科学校基础医学院安徽芜湖241002

目的旨在构建结肠腺癌(colonic adenocarcinoma,COAD)中铜死亡相关基因(Cuproptosis-related genes,CRGs)的预后模型,探讨CRGs在COAD中的表达与预后的关系。方法从TCGA数据库下载了正常和COAD患者的转录组和临床数据,并从GEO数据库下载... 详细信息

目的旨在构建结肠腺癌(colonic adenocarcinoma,COAD)中铜死亡相关基因(Cuproptosis-related genes,CRGs)的预后模型,探讨CRGs在COAD中的表达与预后的关系。方法从TCGA数据库下载了正常和COAD患者的转录组和临床数据,并从GEO数据库下载数据集GSE39582作为外部验证集。基于铜死亡相关基因表达量,对TCGA数据进行共识聚类以确定新的肿瘤亚型。采用单因素Cox回归分析、LASSO回归分析筛选预后基因并构建预后风险模型。并通过Kaplan-Meier生存分析、受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下的面积(area under the curve,AUC)和一致性指数(concordance index,C-index)对模型进行评价。用GSE44001数据集对模型进行外部验证。基于风险评分及临床因素构建列线图,预测患者的生存率。并进行免疫浸润、GSEA分析、免疫检查点、药敏分析、肿瘤微环境和干细胞指数的研究,系统地阐述COAD中CRGs和免疫的相关性。结果21个CRGs在COAD组织及正常组织中差异表达。单变量Cox回归及Lasso回归分析确定了五个预后相关基因(SDHB,CCS,DLAT,FDX1,CP)并构建模型。Kaplan-Meier分析表明,高风险患者OS显著低于低风险患者(P<0.01),并在GEO队列中取得了验证(P<0.05)。风险模型的AUC值为0.734,表明预后值有统计学意义,模型具有一定的准确性。一致性分析和ROC结果表明,列线图模型有较好的预后预测准确性。这5个CRGs主要参与线粒体、免疫应答和代谢途径,是COAD预后的独立因素,并与免疫细胞浸润、免疫检查点以及肿瘤微环境和干细胞指数密切相关。结论构建了5个铜死亡相关基因的结肠腺癌预后模型,有可能作为未来临床实践中有效的预后标志物。

关键词：铜死亡结肠腺癌预后列线图免疫浸润药物敏感性

淫羊藿苷对大鼠正畸牙移动后保持期核因子κB受体活化因子配体表达的影响

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成都医学院学报 2024年第5期19卷 769-773页

作者：李雪周芳翟莎菲黄硕张佳西安医学院口腔医学院口腔正畸学教研室西安710021 西安医学院口腔医学院口腔组织病理学教研室西安710021 西安医学院口腔医学院口腔颌面外科学教研室西安710021

目的探讨淫羊藿苷对大鼠正畸牙移动后保持期牙周组织的改建和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法采用40只6周龄雄性SD大鼠建立正畸牙移动模型,在牙移动21 d后进入保持期,随机将大鼠分为4组,淫羊藿苷组、对照组、淫羊藿苷... 详细信息

目的探讨淫羊藿苷对大鼠正畸牙移动后保持期牙周组织的改建和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法采用40只6周龄雄性SD大鼠建立正畸牙移动模型,在牙移动21 d后进入保持期,随机将大鼠分为4组,淫羊藿苷组、对照组、淫羊藿苷+保持丝组、保持丝对照组,每组10只。淫羊藿苷组和淫羊藿苷+保持丝组通过灌胃方式给予大鼠淫羊藿苷20 mg/(kg·d),对照组和保持丝对照组灌注等量生理盐水。在实验第1、3、7、14、21天处死大鼠,采集其上颌骨样本进行检测,确定出上颌第一磨牙远中移动复发距离。全部样本脱钙后制成切片,给予苏木精-伊红染色法(HE)染色和免疫组化染色,观察RANKL表达的变化。结果淫羊藿苷及淫羊藿苷+保持丝组在第7、14和21天,牙移动复发距离小于对照组。免疫组化显示,在保持阶段给药期间,从第1天至21天,淫羊藿苷+保持丝组牙周膜组织中RANKL表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论淫羊藿苷影响牙槽骨的改建,可以降低破骨细胞活性,有利于正畸牙移动到位后的保持。

关键词：淫羊藿苷正畸牙移动保持期牙槽骨改建

贝母素乙通过下调CDK2/CDK4/CDK6和cyclin D1表达抑制人结肠腺癌SW480细胞活力

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中国病理生理杂志 2024年第6期40卷 1070-1077页

作者：杨霞李雅茹李玥毛泓月白冰李一权韩继成万怡宁谢诗敏朱羿龙金宁一延边大学医学院病理学与病理生理学教研室吉林延吉136200 长春中医药大学院士工作室吉林长春130117 中国农业科学研究院长春兽医研究所吉林长春130122

目的:探究贝母素乙(peiminine)对人结肠腺癌细胞(SW480)活力、迁移和侵袭的抑制作用并探讨其抑制SW480增殖的作用机制。方法:用不同剂量的贝母素乙处理人结肠腺癌细胞SW480和人正常结肠上皮细胞CCD-841CoN,通过CCK-8实验确定贝母素乙抑... 详细信息

目的:探究贝母素乙(peiminine)对人结肠腺癌细胞(SW480)活力、迁移和侵袭的抑制作用并探讨其抑制SW480增殖的作用机制。方法:用不同剂量的贝母素乙处理人结肠腺癌细胞SW480和人正常结肠上皮细胞CCD-841CoN,通过CCK-8实验确定贝母素乙抑制SW480活力的最适剂量和最佳作用时间;划痕和Transwell实验检测贝母素乙对SW480迁移与侵袭能力的影响;流式细胞术和Western blot检测贝母素乙对SW480细胞周期及细胞周期相关蛋白表达的影响;构建SW480移植瘤裸鼠模型,在体内分析贝母素乙对SW480活力及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,当贝母素乙作用浓度为110 mg/L时能够显著抑制SW480细胞活力、迁移和侵袭能力(P<0.01),并诱导SW480细胞周期G1期阻滞,周期相关蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、CDK4、CDK6、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p-Rb/Rb、E2F1、E2F3和E2F4的表达水平受到显著抑制(P<0.05);在体内,贝母素乙抑制SW480移植瘤的活力、延长荷瘤裸鼠的生存周期,影响肿瘤组织中CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达。结论:贝母素乙通过下调CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达,引起SW480细胞的G1期阻滞,进而抑制人结肠腺癌细胞SW480增殖。

关键词： SW480细胞贝母素乙周期蛋白依赖性激酶细胞周期

miR-122-5p通过靶向Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中的分子机制研究

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生物医学 2024年第1期14卷 72-80页

作者：姚福纯李彬蔡艳黄俊文王振生王海鑫刘贵旻锦州医科大学基础医学院基础医学系辽宁锦州锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁锦州

目的:研究微小核糖核酸microRNA-122-5p (miR-122-5p)对HBV感染相关肝纤维化的作用及分子机制。方法:分别用采用HBsAg、HBeAg酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HBV表面抗原(HBsAg)、抗原(HBeAg)... 详细信息

目的:研究微小核糖核酸microRNA-122-5p (miR-122-5p)对HBV感染相关肝纤维化的作用及分子机制。方法:分别用采用HBsAg、HBeAg酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HBV表面抗原(HBsAg)、抗原(HBeAg)水平以及HBV DNA、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)水平,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测相应蛋白水平。RT-qPCR检测人肝星状细胞(LX-2细胞)和HBV相关肝纤维化组织细胞中Circ_MTM1、miR-122-5p的表达情况。应用生物信息学软件StarBaseV3.0预测miR-122-5p的可能靶基因,并应用双荧光素酶检测方法判定miR-122-5p对其靶基因Circ_MTM1表达的调节作用。结果:miR-122-5p在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中低表达,而Circ_MTM1在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中高表达。miR-122-5p靶向下调Circ_MTM1的表达,通过下调Circ_MTM1可抑制HBV相关肝纤维化的进程。结论:miR-122-5p与Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中存在靶向关系,Circ_MTM1通过调控肝纤维化相关蛋白的水平在HBV相关肝纤维化进程中起到启动子作用。

关键词：微小核糖核酸122-5p (miR-122-5p) Circ_MTM1 乙型肝炎病毒(HBV) 肝纤维化

慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1沉默调控子宫内膜基质细胞蜕膜化与自噬

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解剖学报 2024年第2期55卷 188-195页

作者：任健陈晓燕江苏大学医学院病理学教研室江苏镇江212000 无锡市康复医院心肺康复科江苏无锡214000 重庆市中医院妇产科重庆400000

目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况... 详细信息

目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况。从正常妊娠者的子宫内膜组织中分离并鉴定hESCs,将hESCs分为对照组、雌二醇(E_(2))+孕酮(P4)组、短发夹RNA(shRNA,sh)-正常对照(NC)+E_(2)+P4组、sh-SF-1+E_(2)+P4组,进行对应处理后,倒置显微镜下观察hESCs形态变化,Real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、泌乳素(PRL)的mRNA表达水平和蛋白表达水平,流式细胞术测定细胞周期分布,免疫荧光染色观察细胞内自噬标记物微管相关蛋白轻链3(LC3)表达情况,Western blotting测定细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平。结果EM患者子宫内膜组织中SF-1 mRNA相对表达量和SF-1蛋白阳性率均高于正常妊娠者子宫内膜组织(P<0.05)。与sh-NC+E_(2)+P4组比较,sh-SF-1+E_(2)+P4组细胞多为长梭形,未见明显蜕膜化,IGFBP1、PRL的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞比例显著减少而S期细胞比例显著增加(P<0.05),细胞内LC3荧光表达增强,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高,Beclin-1蛋白相对表达量也显著上调(P<0.05)。结论EM患者子宫内膜组织内SF-1表达升高,通过慢病毒载体介导的SF-1沉默能够抑制hESCs蜕膜化过程,该作用可能与调控细胞自噬水平相关。

关键词：子宫内膜基质细胞类固醇生成因子-1 蜕膜化自噬免疫印迹法人

单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）在阿尔兹海默病发病机制中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：徐艺铭李秋萍毛司懿杨琨杨舒雅空军军医大学基础医学院免疫教研室空军军医大学基础医学院学员四大队

阿尔兹海默病（AD）是一种起病隐匿的神经退行性疾病，其主要表现为认知功能的进行性减退。单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）是一种对单核细胞有趋化作用的细胞因子，可调节单核细胞的迁移和浸润，参与疾病进展。越来越多的证据表明，MCP-1... 详细信息

阿尔兹海默病（AD）是一种起病隐匿的神经退行性疾病，其主要表现为认知功能的进行性减退。单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）是一种对单核细胞有趋化作用的细胞因子，可调节单核细胞的迁移和浸润，参与疾病进展。越来越多的证据表明，MCP-1在AD的病程中起关键作用，并且具有作为早期诊断标志物和干预靶点的潜能。本文总结了MCP-1在神经炎症、β淀粉样蛋白（Aβ）沉积和Tau病理等过程中的调节作用，探讨MCP-1作为AD早期诊断生物标志物和干预靶点的潜力。

关键词：单核细胞趋化蛋白1(MCP-1) 阿尔兹海默病(AD) β淀粉样蛋白(Aβ) 神经炎症 Tau磷酸化综述

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原发性肺淋巴上皮癌7例临床病理学分析

诊断病理学杂志 2024年第6期31卷 517-520,526页

作者：牟联军海南医学院病理学教研室/海南医学院第一附属医院病理科海口571199

目的探讨原发性肺淋巴上皮癌的临床病理特点。方法回顾性分析海南医学院第一附属医院2016-06—2022-10期间诊断的病例7例,分析其临床特征,组织学形态,免疫表型及分子检测结果。结果男性患者1例,女性6例,患者年龄33~63岁(平均49岁,中位年... 详细信息

目的探讨原发性肺淋巴上皮癌的临床病理特点。方法回顾性分析海南医学院第一附属医院2016-06—2022-10期间诊断的病例7例,分析其临床特征,组织学形态,免疫表型及分子检测结果。结果男性患者1例,女性6例,患者年龄33~63岁(平均49岁,中位年龄50岁),2例为肺门型,4例为周围型肿块。镜下所见,所有病例肿瘤细胞呈巢状或弥漫散在排列,胞质淡染或嗜酸,细胞核圆或椭圆形,染色质较细呈空泡状,部分肿瘤细胞呈合胞体样,有较显著的嗜酸性核仁,癌巢内及癌巢之间有多少不等的淋巴细胞及浆细胞浸润。免疫组化检测显示所有肿瘤细胞均表达panCK+,5例CK5/6+、p40+and p63(70%),不表达CK7、TTF-1、NapsinA,Ki-67增殖指数介于20%~80%,原位杂交分子检测显示所有病例EBER均为阳性。结论原发性肺淋巴上皮癌好发于中年人群,病理形态上与多种肿瘤具有重叠的表现,易于误诊,EBER检测有利于提高本病的诊断率。

关键词：原发性淋巴上皮癌肺癌诊断鉴别

鼻腔黏膜恶性黑色素瘤6例临床病理学及分子特征分析

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诊断病理学杂志 2024年第8期31卷 737-740,751页

作者：牟联军牛海艳海南医学院病理学教研室/海南医学院第一附属医院病理科海口570102

目的探讨原发性鼻腔恶性黑色素瘤的临床病理及分子特点。方法回顾性分析海南医学院第一附属医院2014年6月至2023年10月期间诊断的病例6例原发性鼻腔亚性黑色素瘤患者,分析其临床特征,组织学形态,免疫表型及分子检测结果。结果男性患者3... 详细信息

目的探讨原发性鼻腔恶性黑色素瘤的临床病理及分子特点。方法回顾性分析海南医学院第一附属医院2014年6月至2023年10月期间诊断的病例6例原发性鼻腔亚性黑色素瘤患者,分析其临床特征,组织学形态,免疫表型及分子检测结果。结果男性患者3例,女性3例,患者年龄43~70岁(平均58.6岁,中位年龄61.5岁),左侧鼻腔2例,右侧鼻腔3例,鼻中隔1例,伴有鼻窦受累1例;就诊时2例有颈部淋巴结转移。镜下所见,肿瘤细胞呈圆形、断梭形或多边型,核仁明显,呈弥漫散在分布或巢团状排列,仅1例可见黑色素。免疫组化显示,SOX10、S100、HMB45、MelanA阳性,Ki-67增殖指数介于30%~60%之间。分子检测:4例病例进行了分子检测,其中2例检测出NRAS的2号外显子突变,1例C-KIT扩增,1例BRAF-V600E突变。结论原发性鼻黏膜恶性黑色素瘤好发于中年以上人群,发病没有明显的性别倾向,临床上常表现为鼻息肉,影像学检查的鉴别诊断价值有限。本病的诊断主要依赖于病理检查及免疫组化检测。分子突变检测有助于临床治疗策略的选择,应推荐所有患者进行基因检测。

关键词：原发性恶性黑色素瘤诊断鉴别