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羊痘病毒与羊口疮病毒双重RPA-LFD检测方法的建立与应用

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生物技术通报 2024年第5期40卷 103-111页

作者：王玲玲马爱红宋前进王小龙曹晓真刘治凤陈亚飞李继东宁夏大学动物科技学院银川750021 银川市畜牧技术推广服务中心银川750006

【目的】旨在建立一种基于重组聚合酶(recombinase polymerase amplification,RPA)检测技术结合测流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)快速鉴别检测羊痘病毒(capripox virus,CaPV)与羊口疮病毒(orf virus,ORFV)的双重RPA-LFD检测方法。【方法】选取CaPV P32基因及ORFV 011基因的保守片段,进行目的片段扩增并构建重组质粒;设计CaPV及ORFV RPA引物各3对,CaPV-HP、ORFV-HP探针各1条;进行单重基础RPA引物筛选试验;对双重RPA-LFD的反应时间及反应温度进行优化;探索双重RPA-LFD最佳引物配比体系及最佳探针配比体系;进行双重RPA-LFD灵敏度、特异性及重复性试验;用所建立的方法对采集的55份临床样品进行检测。【结果】引物筛选试验结果显示,引物对CaPV-RPA-F3/R3、ORFV-RPA-F1/R1的特异性最强、扩增效率最高;该方法在反应温度为39℃、反应时间为11 min的反应条件下扩增效率最佳;CaPV-RPA-F3/R3、ORFV-RPA-F1/R1的最佳引物配比为0.8 μL∶1.6 μL,CaPV-HP、ORFV-HP的最佳探针配比为0.1 μL∶0.9 μL;双重RPA-LFD灵敏性试验最低检出限为CaPV/ORFV 4.65/3.94×10~0 copies/μL;特异性试验结果显示与PPRV、IBRV、Sau、SPN均无交叉反应;临床样品检测结果显示RPA-LFD检测阳性率与PCR检测阳性率相符合。【结论】成功建立了CaPV与ORFV双重RPA-LFD快速检测方法,可用于临床中CaPV与ORFV混合感染的快速鉴别诊断。

关键词：羊痘病毒羊口疮病毒 RPA-LFD 鉴别诊断混合感染

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桂北槟榔芋高效栽培技术及潜力品种推荐

长江蔬菜 2025年第1期 19-21页

作者：李小琼陆剑波唐尚芳韦凤玲于琴芝桂林临桂区五通镇农业服务中心广西桂林54110 桂林全州县农业技术中心站桂林市经济作物技术推广站广西桂林541109

槟榔芋可菜可粮可加工,是桂北主要特色产业之一,已基本实现全产业链开发,加工产品市场需求大,经济效益好。但生产上以荔浦芋、安和香芋和五通香芋等优良品种为主,存在规范性栽培技术相对缺乏,栽培技术标准化程度不高,管理技术水平参差... 详细信息

槟榔芋可菜可粮可加工,是桂北主要特色产业之一,已基本实现全产业链开发,加工产品市场需求大,经济效益好。但生产上以荔浦芋、安和香芋和五通香芋等优良品种为主,存在规范性栽培技术相对缺乏,栽培技术标准化程度不高,管理技术水平参差不齐等问题,影响产品的产量和品质,较大程度制约了桂北槟榔芋产业的发展壮大。规范槟榔芋生产管理,可有效助推槟榔芋产业可持续健康发展,助力乡村振兴和城乡建设。

关键词：槟榔芋特性高效栽培技术

多不饱和脂肪酸组合对滩羊肉品质、血清抗氧化指标及背最长肌共轭亚油酸含量的影响

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动物营养学报 2022年第1期34卷 457-466页

作者：马秀花扈志强齐明江周玉香杨万宗宁夏大学农学院银川750021 彭阳县畜牧技术推广服务中心彭阳756500

本试验为了探究多不饱和脂肪酸组合对滩羊肉品质、血清抗氧化指标及背最长肌共轭亚油酸含量等的影响,选取4月龄左右的滩羊公羔27只,随机分为3组,分别为对照组(基础饲粮)、试验Ⅰ组(基础饲粮+1%大豆油+1%裂壶藻粉)、试验Ⅱ组(基础饲粮+1... 详细信息

本试验为了探究多不饱和脂肪酸组合对滩羊肉品质、血清抗氧化指标及背最长肌共轭亚油酸含量等的影响,选取4月龄左右的滩羊公羔27只,随机分为3组,分别为对照组(基础饲粮)、试验Ⅰ组(基础饲粮+1%大豆油+1%裂壶藻粉)、试验Ⅱ组(基础饲粮+1%亚麻油+1%裂壶藻粉),测定每组平均日增重、肉品质、血清抗氧化指标以及背最长肌共轭亚油酸含量。预试期15 d,正试期60 d。结果表明:与对照组相比,在饲粮中添加富含多不饱和脂肪酸(PUFA)的油脂组合对滩羊平均日增重影响不显著(P>0.05);试验Ⅰ组、试验Ⅱ组剪切力显著低于对照组(P0.05);试验Ⅱ组背最长肌反11-油酸含量较其他2组高,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组共轭亚油酸(CLA)含量显著高于其他2组(P0.05),试验Ⅰ组C18∶3n-3含量较其他组高,试验Ⅱ组C20∶3n-6含量也较其他组高。综上所述,在饲粮中添加大豆油+裂壶藻粉、亚麻油+裂壶藻粉富含PUFA的油脂组合在不影响滩羊生长性能、血清抗氧化指标的情况下,可提高滩羊肉质嫩度、改善肉色,亦能使肌内脂肪分布更加均匀且有利于肌内CLA的含量增加。

关键词：多不饱和脂肪酸组合滩羊共轭亚油酸肉品质血清抗氧化指标

牛支原体P48膜蛋白的原核表达及生物信息学分析

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中国兽医学报 2020年第6期40卷 1124-1130页

作者：郭亚男罗海峰司朵朵曹晓真段洪威何生虎宁夏大学农学院宁夏银川750021 银川市畜牧技术推广服务中心宁夏银川750021

对牛支原体(***)主要免疫蛋白P48蛋白的保守性和蛋白结构与功能进行分析,为进一步对P48蛋白的免疫特性和致病机制研究奠定基础。本研究通过获取*** Ningxia-1菌株P48蛋白基因序列,构建pET28a-P48质粒并导入大肠杆菌BL21感受态细胞进行... 详细信息

对牛支原体(***)主要免疫蛋白P48蛋白的保守性和蛋白结构与功能进行分析,为进一步对P48蛋白的免疫特性和致病机制研究奠定基础。本研究通过获取*** Ningxia-1菌株P48蛋白基因序列,构建pET28a-P48质粒并导入大肠杆菌BL21感受态细胞进行原核表达,并通过Ni柱进行重组蛋白纯化、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠试验进行验证;利用生物信息学工具分析P48蛋白核酸序列的保守性和蛋白序列的理化性质、二级结构、疏水区、跨膜区、信号肽、亚细胞定位、抗原表位、三级结构及不同碱基的突变对该蛋白功能的影响。结果表明,通过大肠杆菌原核表达系统可以成功表达重组P48蛋白,并且该蛋白可以激发小鼠产生较高水平的抗体;P48蛋白核酸序列保守,在不同***菌株中碱基序列无差异;P48蛋白相对分子质量为51159.08,含有468个氨基酸,其中强酸性氨基酸57个,强碱性氨基酸63个,极性氨基酸116个,疏水氨基酸169个,等电点为8.776;1~24位为P48蛋白的信号肽,具有较强的疏水性,并且为跨膜螺旋区;二级结构包含alpha helix、beta sheet、beta turn、random coil 4种形式;抗原表位有13个区域;P48蛋白位于细胞内膜上,是膜脂蛋白家族中ABC转运体的溶质结合蛋白2;该蛋白存在多个突变敏感区域,该区域的改变可能直接影响P48蛋白的功能。本研究的开展为*** P48蛋白的免疫特性和致病机制研究奠定了基础,为***抗体检测试剂的研制和***病原的诊断提供了科学的依据。

关键词：牛支原体 P48蛋白原核表达生物信息学

全基因组关联分析与转录组学联合分析静原鸡蛋壳颜色的调控机制

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中国畜牧兽医 2023年第11期50卷 4403-4413页

作者：魏榕邓占钊曹国伟朱红芳禹保军赵薇陈亚飞张统张娟宁夏大学农学院银川750021 彭阳县畜牧技术推广服务中心固原756599 彭阳县动物卫生监督所固原756599 银川市畜牧技术推广服务中心银川750021

【目的】利用全基因组关联分析与转录组学联合分析筛选调控静原鸡蛋壳颜色的候选基因,探究静原鸡蛋壳颜色调控机制。【方法】选择180日龄产绿壳蛋和产粉壳蛋静原鸡母鸡各50只,采集血液并进行简化基因组测序,通过全基因组关联分析筛选候... 详细信息

【目的】利用全基因组关联分析与转录组学联合分析筛选调控静原鸡蛋壳颜色的候选基因,探究静原鸡蛋壳颜色调控机制。【方法】选择180日龄产绿壳蛋和产粉壳蛋静原鸡母鸡各50只,采集血液并进行简化基因组测序,通过全基因组关联分析筛选候选基因;采集300日龄产绿壳蛋和产粉壳蛋母鸡的蛋壳腺组织进行转录组测序,筛选差异表达基因并进行GO功能与KEGG通路富集分析;通过全基因组和转录组学联合分析,筛选调控蛋壳颜色相关基因并进行蛋白互作网络分析。【结果】简化基因组测序结果显示,从产粉壳蛋和产绿壳蛋静原鸡中分别筛选到232465和241008个SNPs标记,利用全基因组关联分析共筛选出溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1A2(SLCO1A2)、SLCO 1 C 1和磷脂酰肌醇-4-磷酸3-激酶催化亚基2型γ(PIK3C2G)等54个与蛋壳颜色相关的候选基因。转录组测序筛选到277个差异表达基因,其中85个上调,192个下调。GO功能和KEGG通路富集分析发现,差异表达基因主要在亚油酸新陈代谢、亚麻酸代谢和花生四烯酸代谢、酪氨酸代谢、黑色素生成、黏着斑以及钙信号等相关通路中显著富集。全基因组和转录组学联合分析鉴定到内皮素3(EDN3)和锌指蛋白831(ZNF831)2个与蛋壳颜色显著相关的基因。【结论】通过全基因组关联分析与转录组学联合分析发现EDN 3、ZNF 831基因可能是调控蛋壳颜色的候选基因。研究结果为蛋壳颜色调控机制研究提供理论基础,为静原鸡蛋壳颜色选育提供分子遗传标记。

关键词：静原鸡蛋壳颜色全基因组关联分析转录组测序

耕作措施对缓坡耕地土壤养分分布及肥料利用率的影响

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农业工程学报 2020年第18期36卷 127-134页

作者：雷金银雷晓婷周丽娜何进勤贾爱平余建军张慧路芳宁夏农林科学院农业资源与环境研究所银川750002 宁夏银川市农业技术推广服务中心银川750002 固原市原州区官厅镇农业服务中心固原756000

为研究不同耕作措施对坡耕地土壤养分坡面分布特征及作物产量与肥料利用率的影响,该研究在2017—2018年期间,以宁南山区10°缓坡耕地为研究对象,开展传统平作(CK)、垄沟种植(NH)、垄沟+秸秆覆盖(SM)和垄沟+地膜覆盖(PM)4种不同耕作措施... 详细信息

为研究不同耕作措施对坡耕地土壤养分坡面分布特征及作物产量与肥料利用率的影响,该研究在2017—2018年期间,以宁南山区10°缓坡耕地为研究对象,开展传统平作(CK)、垄沟种植(NH)、垄沟+秸秆覆盖(SM)和垄沟+地膜覆盖(PM)4种不同耕作措施对坡耕地耕层养分、作物产量的影响及其坡位效应分析研究,探讨不同耕作措施下作物肥料利用率。结果表明,相较于CK,NH、SM和PM 3种耕作措施显著提高耕层土壤有机质和土壤速效氮含量,分别提高了18.50%和14.47%、18.22%和17.64%、21.75%和18.71%,3种耕作措施之间差异并不显著。CK处理下耕层土壤有机质含量和速效氮随着坡位自上而下的变化而增加,表现出流失风险,而PM、SM和NH 3种措施表现出能够削弱坡位效应的作用,由高到低顺序为坡中、坡下、坡上。相对于CK,其他3种耕作措施下坡耕地土壤有效磷、速效钾有所降低,其中PM措施下土壤有效磷显著低于其他耕作处理。NH、SM和PM显著增加作物产量,玉米和马铃薯产量比CK分别增加27.03%和2.89%、12.85%和8.50%、204.56%和2.52%,且具有显著的坡位效应。2个覆盖措施SM和PM显著提高作物肥料利用率,种植玉米N、P利用率分别提高7.92%和16.83%、217.03%和241.59%,种植马铃薯分别提高89.43%和44.62%、97.31%和49.66%。由此可知,以垄沟、覆盖为核心的保护性耕作措施能够有效阻断养分损失途径,阻控土壤养分的坡面运移,提高肥料利用率和作物产量。

关键词：土壤侵蚀耕作措施缓坡耕地坡位效应肥料利用率

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石嘴山市三北防护林建设存在问题及对策

现代园艺 2025年第3期48卷 204-206页

作者：王红宁夏石嘴山市林业草原发展服务中心宁夏石嘴山753000

石嘴山市是全国生态安全战略格局“两屏三带一区多点”的重要组成单元。对石嘴山市三北防护林体系建设工程基本情况和取得的成效进行了阐述,分析了石嘴山市在工程建设中存在的绿量增长难度大、用水矛盾突出、管护资金压力大、科技成果... 详细信息

石嘴山市是全国生态安全战略格局“两屏三带一区多点”的重要组成单元。对石嘴山市三北防护林体系建设工程基本情况和取得的成效进行了阐述,分析了石嘴山市在工程建设中存在的绿量增长难度大、用水矛盾突出、管护资金压力大、科技成果应用不足等问题,从争取资金项目、保障生态灌溉、科学绿化、提升林草资源管理、加快山林地赋能增效、加大新技术推广等方面提出了解决问题的对策,旨在为石嘴山市实施好“三北”工程六期建设,推动三北工程高质量发展提供参考和借鉴。

关键词：三北防护林建设问题对策

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银川市高架草莓发展现状与对策

北方园艺 2022年第9期 130-135页

作者：赵智明贾爱平金徽项生施文艺银川市农业技术推广服务中心宁夏银川750002

草莓果实果肉多汁、外观鲜丽、风味浓郁、营养丰富,种植效益高,深受生产者和消费者的青睐。高架草莓栽培模式能克服土传病虫害、解决连作障碍等问题,不仅充分利用了设施内部空间,而且游客的采摘体验乐趣远高于传统地面栽培,符合消费升... 详细信息

草莓果实果肉多汁、外观鲜丽、风味浓郁、营养丰富,种植效益高,深受生产者和消费者的青睐。高架草莓栽培模式能克服土传病虫害、解决连作障碍等问题,不仅充分利用了设施内部空间,而且游客的采摘体验乐趣远高于传统地面栽培,符合消费升级的趋势,近年来在银川市发展速度较快。该研究从产业发展现状、生产中存在的主要问题、进一步的发展建议方面进行了阐述,以期为高架草莓产业在银川市的持续良性发展提供参考依据。

关键词：银川市草莓栽培调研

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固原鸡遗传资源调查

中国畜牧兽医 2010年第3期37卷 238-239页

作者：白军民宁夏固原市原州区畜牧技术推广服务中心

1 品种来源及发展1.1 品种来源固原鸡为蛋、肉兼用型品种,以原州区河川乡、官厅乡、寨科等乡镇为中心产区,原州区东部山区均有分布.由于原州区东部山区气候凉爽,山地辽阔,青饲料及动物性饲料来源丰富,当地群众有放牧饲养的习惯,使鸡能... 详细信息

1 品种来源及发展1.1 品种来源固原鸡为蛋、肉兼用型品种,以原州区河川乡、官厅乡、寨科等乡镇为中心产区,原州区东部山区均有分布.由于原州区东部山区气候凉爽,山地辽阔,青饲料及动物性饲料来源丰富,当地群众有放牧饲养的习惯,使鸡能够自由觅食,获取完全的天然优质饲料,充分活动,增强体质,加上产区回族占半数,鸡肉是他们生活中不可缺少的肉食之一,是传统的开斋节及亲朋好友往来的均需品,因此回民群众家家养鸡,加强了对固原鸡的选择,促进了数量的发展,从而形成了该品种.

关键词：固原鸡资源调查遗传品种来源兼用型品种原州区东部山区山区气候