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牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR方法的建立与应用

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中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 146-150页

作者：刘存刘孟超张月王晓玲赵梦姣李云岗兰邹然孙圣福刘砚涵山东省动物疫病预防与控制中心济南250100 北京市农业农村局北京100053 烟台市动物疫病预防与控制中心烟台264003

为了建立牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的快速诊断方法,本试验依据LSDV GCPR基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速诊断LSDV的荧光定量PCR方法。结果表明,建立的LSDV荧光定量PCR方法在3.67×10^(1)~3.67×10^(7) co... 详细信息

为了建立牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的快速诊断方法,本试验依据LSDV GCPR基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速诊断LSDV的荧光定量PCR方法。结果表明,建立的LSDV荧光定量PCR方法在3.67×10^(1)~3.67×10^(7) copies/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9905;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为3.67×10 copies/μL;该方法特异性良好,与山羊痘病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒等病毒不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内和批间的变异系数均介于0.133%~1.81%。该方法,临床样品的检测符合率达90%。本试验所建立的LSDV荧光定量PCR方法为临床诊断牛结节性皮肤病提供了一种快速、灵敏的检测方法,为LSDV流行病学调查和监测提供了技术支持。

关键词：牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR GPCR基因诊断

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大蒜秸秆饲喂对肉羊增重及羊肉品质的影响

中国饲料 2024年第4期 129-132页

作者：张熙艳济南市动物疫病预防与控制中心山东济南250099

文章旨在探究日粮添加大蒜秸秆对肉羊增重及羊肉品质的影响。试验将120只健康、生长状况良好的平均体重为(20.89±0.35)kg的寒杂公羔羊随机分为4组,每组5个重复,每个重复6只。分别用0、3%、6%和12%的大蒜秸秆替代基础日粮中的玉米秸秆,... 详细信息

文章旨在探究日粮添加大蒜秸秆对肉羊增重及羊肉品质的影响。试验将120只健康、生长状况良好的平均体重为(20.89±0.35)kg的寒杂公羔羊随机分为4组,每组5个重复,每个重复6只。分别用0、3%、6%和12%的大蒜秸秆替代基础日粮中的玉米秸秆,试验为期100 d,其中预饲期7 d,正试期93 d。试验结果表明,日粮添加6%的大蒜秸秆可显著提高肉羊平均日增重和终末体重(P0.05)。日粮添加6%的大蒜秸秆可显著提高肉羊背最长肌的pH24 h和a*值(P0.05)。总之,在本试验条件下,肉羊日粮大蒜秸秆最适添加量为6%。

关键词：肉羊大蒜秸秆生长性能肉品质

延边地区羊腹泻大肠杆菌分离鉴定、毒力基因与耐药性分析

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内蒙古农业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：陈明泽朴春光朴春浩张颖卢世豪崔京花芦静孟凡奇梁晚枫赵达卓延边大学农学院动物医学系和龙动物疫病预防控制中心汪清动物疫病预防控制中心延边州动物疫病预防控制中心南票区动物疫病预防控制中心

（目的）为解决困扰延边地区养殖户的羊大肠杆菌感染引起的腹泻问题，分离鉴定延边地区引起羊腹泻的大肠杆菌，并研究其致病性，耐药性以及毒力基因携带情况，为该病的治疗和预防提供参考依据。（方法）试验采集了反复发病羊场患病羊肛... 详细信息

（目的）为解决困扰延边地区养殖户的羊大肠杆菌感染引起的腹泻问题，分离鉴定延边地区引起羊腹泻的大肠杆菌，并研究其致病性，耐药性以及毒力基因携带情况，为该病的治疗和预防提供参考依据。（方法）试验采集了反复发病羊场患病羊肛拭子10份，对其进行培养、分离、鉴定，并利用荧光PCR 确定其致病性。对分离菌株进行毒力基因检测及K-B 纸片法耐药性分析。（结果）结果显示，从10份样品中分离出的10株大肠杆菌有9 株为致病性大肠杆菌；携带irp2、fyuA、stx1、FimC 等多种致病性较强的毒力因子；对磺胺异噁唑、多西环素、四环素等耐药，且部分分离株对其它药物也存在不同程度的耐药。（结论）延边地区羊腹泻大肠杆菌携带多种毒力基因且耐药性严重，这一现象需引起我们的高度重视，对延边地区养羊业临床上规范和合理使用抗生素治疗大肠杆菌具有指导意义。

关键词：羊大肠杆菌分离鉴定毒力基因耐药性

上海5家宠物医院环境不动杆菌的耐药性检测及一株皮特不动杆菌的测序分析

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微生物学通报 2024年

作者：张玉杰王晓旭徐锋沈莉萍鞠龚讷唐聪圣齐新永徐平王建上海市动物疫病预防控制中心

【背景】不动杆菌属细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性分析。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境样品，经细菌... 详细信息

【背景】不动杆菌属细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性分析。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境样品，经细菌分离、纯化后利用细菌鉴定质谱仪鉴定分离株种属，并通过微量肉汤稀释法检测不动杆菌属分离株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration， MIC)，并对其中1株耐碳青霉烯类分离菌进行基因组测序及遗传特征分析。【结果】730份环境样品共分离获得124株革兰氏阴性菌，经鉴定14株属于不动杆菌属(Acinetobacter spp.)，其中9株为鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)。14株不动杆菌对米诺环素均敏感，但其中2株皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)和2株鲁氏不动杆菌为碳青霉烯类多重耐药不动杆菌，5株鲁氏不动杆菌对复方新诺明耐药，1株约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii)对环丙沙星耐药。基因组测序结果表明，碳青霉烯类多重耐药皮特不动杆菌携带NDM-1、OXA-500和OXA-727等相关耐药基因，多位点序列分型(multilocus sequence typing， MLST)结果表明分离株为ST1037型，单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism， SNP)分析该菌株与来源于浙江省的临床尿液分离株A. pittii AP43的进化距离最近。【结论】上海市5家宠物医院环境中的不动杆菌分离株耐药率较低(<40%)，存在多重耐药现象(5株不动杆菌分别耐≥3种药物)且皮特不动杆菌携带多种耐药基因。

关键词：宠物医院不动杆菌属碳青霉烯耐药性测序

乳酸菌肽聚糖对雏鸭饲粮中黄曲霉毒素B 1的脱毒效果研究

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动物营养学报 2024年第7期36卷 4339-4349页

作者：邵怡豪王煜琦张宇豪张广明肖发沂李庆梅山东畜牧兽医职业学院动物科技学院潍坊261061 烟台市牟平区动物疫病预防与控制中心烟台264100

本试验旨在探究乳酸菌肽聚糖对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))的吸附作用,为乳酸菌肽聚糖的制备和饲粮中AFB_(1)的脱毒提供科学依据及理论基础。试验以4种乳酸菌(嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、罗伊氏乳杆菌和植物乳杆菌)为原料提取乳酸菌肽聚糖,... 详细信息

本试验旨在探究乳酸菌肽聚糖对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))的吸附作用,为乳酸菌肽聚糖的制备和饲粮中AFB_(1)的脱毒提供科学依据及理论基础。试验以4种乳酸菌(嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、罗伊氏乳杆菌和植物乳杆菌)为原料提取乳酸菌肽聚糖,采用高效液相色谱法比较4种乳酸菌肽聚糖对AFB_(1)的体外吸附率,选取体外吸附效果最好的罗伊氏乳杆菌肽聚糖进行动物试验。选择1日龄健康樱桃谷鸭120只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复6只。对照组饲喂基础饲粮,AFB_(1)组在基础饲粮中添加0.10 mg/kg AFB_(1),试验组在AFB_(1)组饲粮中分别添加0.10%(Ⅰ组)、0.15%(Ⅱ组)和0.20%(Ⅲ组)罗伊氏乳杆菌肽聚糖。预试期3 d,正试期21 d。结果表明:1)乳酸菌肽聚糖种类、添加量及二者的交互作用均能够显著影响AFB_(1)的体外吸附率(P<0.05),其中10.0 mg/mL罗伊氏乳杆菌肽聚糖对AFB_(1)的体外吸附率最高,达75.29%。2)与对照组相比,AFB_(1)组的平均日增重、平均日采食量显著降低(P<0.05),料重比显著升高(P<0.05);血浆谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)活性及丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05),肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊指数显著升高(P<0.05),血浆免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化能力(T-AOC)显著降低(P<0.05)。3)与AFB_(1)组相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的平均日增重显著升高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的血浆IgG、IFN-γ、IL-2、IL-4含量和SOD、GSH-Px活性显著升高(P<0.05),血浆AST、AKP、ALT活性及MDA含量显著降低(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ组的胸腺和法氏囊指数显著降低(P<0.05)。由此可见,不同乳酸菌肽聚糖对AFB_(1)体外吸附效果不同,饲粮中添加罗伊氏乳杆菌肽聚糖能够部分消除AFB_(1)对雏鸭造成的生长性能下降,改善AFB_(1)所导致的免疫功能降低以及肝脏毒性。

关键词：肽聚糖乳酸菌黄曲霉毒素B 1 生长性能脱毒效果

猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析

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动物医学进展 2024年第8期45卷 28-34页

作者：张启龙李振河程敏姮栗云鹏高晓龙傅彩霞王林高敏余琦周德刚张玮李志军北京市动物疫病预防控制中心北京102629 北京市平谷区动物疫病预防控制中心北京101200

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,... 详细信息

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。

关键词：猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定 VP2基因遗传进化分析

益生菌对肉鸡生长性能、消化酶活性及肠道健康的影响

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中国饲料 2024年第12期 41-44页

作者：任丽萍李颖斯张国张学胜山东省济南市动物疫病预防与控制中心山东济南250002

文章旨在研究益生菌对肉鸡生长性能、消化酶活性及肠道健康的影响,试验选取300只体况相近的肉鸡为研究对象,随机分为4个处理,试验日粮添加0%(对照组)、0.1%、0.3%、0.5%的益生菌菌剂。结果表明,添加0.1%益生菌对肉鸡生长性能无显著影响(... 详细信息

文章旨在研究益生菌对肉鸡生长性能、消化酶活性及肠道健康的影响,试验选取300只体况相近的肉鸡为研究对象,随机分为4个处理,试验日粮添加0%(对照组)、0.1%、0.3%、0.5%的益生菌菌剂。结果表明,添加0.1%益生菌对肉鸡生长性能无显著影响(P>0.05),0.3%益生菌处理的日采食量和日增重与对照组无显著差异(P>0.05),料重比比对照组降低了8.8%,0.5%益生菌处理的日采食量与对照组无显著差异(P>0.05),日均增重比对照组显著提高10.4%(P0.05),0.3%益生菌处理的胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性比对照组分别显著提高15%、44%和47%(P0.05),添加0.3%和0.5%益生菌均可显著提高肉鸡空肠的绒毛高度、绒隐比、SIgA含量、肠道屏障基因Occludin和ZO-1的表达,对隐窝深度无显著影响(P>0.05),显著降低肉鸡空肠的肠道炎症(P<0.05),其中,添加0.5%效果最优,使得SIgA含量比对照组增加了42.5%,Occludin表达量增加了114%,ZO-1表达量增加了48%。综上所述,益生菌可以显著提高肉鸡的肠道消化酶活性,改善肠道健康状况,从而提高肉鸡的生长性能,其中0.5%添加比例效果最优。

关键词：益生菌肉鸡生长性能消化酶肠道健康

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管碟法测定硫酸新霉素效价的方法优化

中国抗生素杂志 2024年第6期49卷 667-672页

作者：吴雨珊孙冰清张妤姜芹顾欣张文刚曹莹上海市动物疫病预防控制中心上海201103

目的优化硫酸新霉素含量管碟法测定方法,增大新霉素抑菌圈直径大小,提高检测结果的准确性。方法按照《中国兽药典》2020版一部附录1200抗生素微生物(检定法)的实验基本要求,设置菌液麦氏浊度(0.5、1、2、3和>4 mcf)、培养基pH(7.6、7.8... 详细信息

目的优化硫酸新霉素含量管碟法测定方法,增大新霉素抑菌圈直径大小,提高检测结果的准确性。方法按照《中国兽药典》2020版一部附录1200抗生素微生物(检定法)的实验基本要求,设置菌液麦氏浊度(0.5、1、2、3和>4 mcf)、培养基pH(7.6、7.8、8.0、8.2和8.4)、磷酸盐缓冲液中NaCl添加比例(0、3%、4%、5%、7%和9%)等变量进行含量测定,比较抑菌圈直径大小和可信限率等指标。结果在添加0.5%的菌液麦氏浊度为3 mcf的金黄色葡萄球菌液、培养基p H为8.0、缓冲液添加5%的Na Cl条件下,高剂量抑菌圈直径扩大至20 mm左右,抑菌圈边缘清晰,且符合《中国兽药典》可信限率的要求(不大于5%)。通过多产品多厂家的实样验证此条件稳定可靠。结论优化后的方法可用于硫酸新霉素常规效价含量的测定。

关键词：新霉素抗生素微生物检定法效价测定金黄色葡萄球菌

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4种布鲁氏菌病胶体金试纸条的比较研究

中国动物传染病学报 2024年

作者：黄晓兵杨磊刘爱军倪柏锋孙思琪浙江省动物疫病预防控制中心

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条... 详细信息

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条的敏感性、特异性等评价指标。结果表明：4个厂家试纸条的Cut-off值为标准血清抗体含量2.5 IU/mL～10 IU/mL，敏感性为8%～100%，特异性为93.10%～100%，符合率为72.29%～96.39%，AUC值为0.54～0.97；配对卡方检验结果显示：除厂家A外，厂家B、C、D的结果与真实结果均有显著性差异（P＜0.05）。A厂家试纸条的检测结果与真实结果符合率为95.18%，成本-效果分析结果表明，4个厂家的C/E值分别为15.76、31.52、19.71和20.75，厂家A试纸条准确诊断1份样品的成本最低。故推荐使用A厂家的胶体金试纸条开展宰前动物布病的筛查工作。

关键词：布鲁氏菌病胶体金法初筛比较分析