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华蟾素通过调控HIF1α的SUMO修饰促进胃癌细胞铁死亡

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1342-1349页

作者：郑梓莹张燕陈文林玉婷叶磊福建医科大学附属第二医院中医科福建泉州362000

目的本研究旨在探讨华蟾素(cinobufotalin,CB)调控缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF1α)的小泛素样修饰相关蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)修饰对胃癌细胞铁死亡的影响。方法使用不同浓度CB处理人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和人胃癌细胞(MGC803)。MTT检测细胞活力并计算CB在胃癌细胞中的IC_(50)值,Transwell检测侵袭。铁死亡激动剂(erastin)或抑制剂(ferrostatin-1)处理癌细胞并评估胃癌细胞脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、MDA水平和细胞凋亡、细胞内总铁水平和Fe^(2+)的水平。Western blot检测SUMO1和HIF1α的表达,免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)检测SUMO1和HIF1α的相互作用。建立异种移植瘤模型,使用CB或erastin治疗,评估CB在体内对肿瘤生长和胃癌细胞铁死亡的影响。结果2μmol·L^(-1)以下CB未对GES-1细胞活力产生影响。与Con组相比,CB处理剂量依赖性地抑制MGC803细胞活力和侵袭。与Con组比较,CB处理提高胃癌细胞脂质ROS、MDA、总铁和Fe^(2+)水平,并促进细胞凋亡(均P处理则抑制CB诱导的胃癌细胞铁死亡。机制上,CB抑制SUMO1表达,减少HIF1α的SUMO化修饰,进而抑制其表达。CB诱导的胃癌细胞铁死亡能够被SUMO1过表达载体逆转。体内实验证实,CB能够抑制肿瘤生长并诱导胃癌细胞铁死亡。结论CB通过抑制HIF1α的SUMO化修饰进而诱导胃癌细胞铁死亡。

关键词：华蟾素胃癌缺氧诱导因子1α 小泛素样修饰蛋白铁死亡细胞凋亡

栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床效果研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：潘英英康静王海铭山西省人民医院中医科

目的观察栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床效果。方法将山西省人民医院中医科2021年2月～2023年3月收治的110例失眠（心肾不交型）患者以随机数字表法分为对照组、观察组，各组55例，给予对照组患者右佐匹克隆片... 详细信息

目的观察栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床效果。方法将山西省人民医院中医科2021年2月～2023年3月收治的110例失眠（心肾不交型）患者以随机数字表法分为对照组、观察组，各组55例，给予对照组患者右佐匹克隆片治疗，观察组患者口服右佐匹克隆片同时结合栀子豉汤及宁神补肾法针刺治疗，治疗及研究过程中；对照组脱落2例患者，观察组脱落3例患者，比较各组数据：疗效、患者中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）变化、多导睡眠监测（Polysomnography，PSG）指标变化、焦虑自评（Self-RatingAnxietyScale，SAS）及抑郁自评量表（Self-ratingdepressionscale，SDS）评分变化、匹兹堡睡眠指数（Pittsburghsleepqualityindex，PSQI）评分变化及简易智力状态检查量表（Mini-mentalStateExamination，MMSE）评分变化、生活质量量表（shortform36questionnaire，SF-36）评分变化、不良反应情况。结果观察组与对照组患者治疗总有效率分别为96.15%、83.02%，观察组治疗总有效率显著更高（p＜0.05）。治疗前两组患者中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）、PSG相关指标（睡眠总时长、觉醒时长、睡眠潜伏期与睡眠效率）、SAS评分以及SDS评分、PSQI评分、MMSE评分以及SF-36评分比较（p＞0.05），经治疗后各组患者中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）、PSG相关指标（睡眠总时长、觉醒时长、睡眠潜伏期与睡眠效率）、SAS评分以及SDS评分、PSQI评分、MMSE评分以及SF-36评分均显著改善，观察组患者治疗后中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）、PSG相关指标（睡眠总时长、觉醒时长、睡眠潜伏期与睡眠效率）、SAS评分以及SDS评分、PSQI评分、MMSE评分以及SF-36评分显著优于对照组患者（p＜0.05）；观察组与对照组患者治疗不良反应率分别为1.92%、13.21%，观察组患者总不良反应率更低（p＜0.05）。结论栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床疗效好，患者临床症状、心理状态与睡眠质量均改善，认知功能与生活质量均提升，且不良反应少，较为安全。

关键词：失眠心肾不交型栀子豉汤宁神补肾法针刺疗效睡眠质量不良反应

基于RhoA/ROCK通路探讨桔梗提取物对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及转移的影响

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中国新药与临床杂志 2024年第4期43卷 279-284页

作者：王洋田伟峰毛文娟青海省第五人民医院中医科青海西宁810001

目的探讨桔梗提取物(PGE)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法将成纤维样滑膜细胞MH7A细胞分为对照组、PGE-L组(25 mg·L^(-1)PGE)、PGE-M组(50 mg·L^(-1)PGE)、PGE-H组(100 mg·L^(-1)PGE)、PGE+... 详细信息

目的探讨桔梗提取物(PGE)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法将成纤维样滑膜细胞MH7A细胞分为对照组、PGE-L组(25 mg·L^(-1)PGE)、PGE-M组(50 mg·L^(-1)PGE)、PGE-H组(100 mg·L^(-1)PGE)、PGE+血管紧张素(Ang)Ⅱ组[100 mg·L^(-1)PGE+100 nmol·L^(-1)Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶(ROCK)通路激活剂AngⅡ],给予相应的处理。采用CCK-8法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭情况,Western blot法检测相关蛋白表达水平,GST-pull down法检测细胞中RhoA活性。结果与对照组比较,PGE-L组、PGE-M组、PGE-H组的吸光度值(PGE处理24、48、72h)、迁移及侵袭细胞数目、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、ROCK1、ROCK2蛋白表达及RhoA活性降低,p21蛋白表达及细胞凋亡率升高(P处理24、48、72 h)、迁移及侵袭细胞数目、cyclin D1、MMP-2、MMP-9、ROCK1、ROCK2蛋白表达及RhoA活性升高,p21蛋白表达及细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论PGE可抑制MH7A细胞增殖与转移,该机制可能与抑制RhoA/ROCK通路有关。

关键词：桔梗关节炎类风湿滑膜细胞肿瘤转移增殖桔梗提取物

补阳还五汤通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4197-4206页

作者：张修红傅开龙林侃李楠姚明龙郑关毅福建医科大学附属协和医院中医科福建福州350001

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制,180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miR-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组,每组36只;每组又按再灌注时间分为第3、7... 详细信息

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制,180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miR-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组,每组36只;每组又按再灌注时间分为第3、7、14天3个亚组。除假手术组外,其余各组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血90 min后再灌注。补阳还五汤组、激动剂组、激动剂阴性对照组建模24 h后开始给予补阳还五汤灌胃,每日2次;假手术组、模型组灌胃等量生理盐水,直至处死的前1 d。激动剂组和激动剂阴性对照组建模24 h后分别于侧脑室注射miR-26a-5p激动剂和miR-26a-5p激动剂阴性对照剂,其他各组注射等量生理盐水。各组建模24 h后腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU),每日1次,直至处死的前1 d。采用改良版神经损伤严重程度评分(mNSS)评价神经功能缺损,2,3,5-三苯四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,免疫荧光双标记法检测BrdU/NeuN双阳性(BrdU^(+)/NeuN^(+))细胞数评估新生神经元,双荧光素酶实验验证PTEN是miR-26a-5p的靶基因,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测PTEN及miR-26a-5p的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的表达。结果显示,与模型组比较,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,缩小脑梗死体积,增加BrdU+/NeuN+细胞数,上调miR-26a-5p的表达,调控PTEN/PI3K/Akt信号通路,促进神经元新生;侧脑室注射miR-26a-5p激动剂后加强上述效应。综上所述,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,减小脑梗死体积,促进脑缺血大鼠神经元新生,其机制可能是通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路。

关键词：补阳还五汤脑缺血再灌注神经保护 miR-26a-5p 大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血 PTEN/PI3K/Akt

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心力衰竭的中医认识与经方治疗策略

中国中药杂志 2024年

作者：蓝宇罗富锟于悦王小雅王朋倩熊兴江中国中医科学院广安门医院中国中医科学院中药研究所

我国心血管病患病率呈现持续上升态势，其中心力衰竭（以下简称“心衰”）患者约890万例，给公共卫生健康带来了沉重负担。虽然现代医学在心衰的病理机制与临床治疗上不断取得进展，然而患者仍然存在喘憋反复发作，需反复入院，利尿剂... 详细信息

我国心血管病患病率呈现持续上升态势，其中心力衰竭（以下简称“心衰”）患者约890万例，给公共卫生健康带来了沉重负担。虽然现代医学在心衰的病理机制与临床治疗上不断取得进展，然而患者仍然存在喘憋反复发作，需反复入院，利尿剂抵抗，长期使用利尿剂导致肌酐升高、预后不佳等临床关键问题。在中医学中，心衰属于“心水”范畴。由于现代疾病谱变化，古今体质差异，西医抗心衰药物干预，改变了心衰的病理进程，掩盖了部分患者的证候表现，导致其病因病机已发生较大变化。研究发现，在病因上，包括外邪侵袭、情志内伤、过度劳伤、药物损伤、饮食失节、水湿浸渍、禀赋不足等，这与现代医学中的感染加重心衰、双心疾病、心脏容量负荷增加等因素密切相关。在病机上，包括急性期的阳虚水泛、水饮化热，缓解期的肝郁气滞、心气不足、肾阳亏虚、肺脾气虚、痰饮内停、瘀血内阻等证型。在经方治疗策略上，阳虚水泛推荐真武汤，水饮化热推荐木防己汤，肝气郁滞推荐柴胡加龙骨牡蛎汤，心气不足推荐桂枝汤，肾阳亏虚推荐肾气丸、右归丸，肺脾气虚推荐玉屏风散、理中汤、补中益气汤、归脾汤，痰饮内停推荐防己黄芪汤、五苓散、苓桂术甘汤、葶苈大枣泻肺汤，瘀血内停推荐桂枝茯苓丸、当归芍药散。在临床治疗上，进一步提出“病机结合病理，药性结合药理”的治疗原则，中医药膏方补虚的“二级预防”观念，最终达到提高患者生活质量，减少入院次数与利尿剂抵抗，改善终点事件。

关键词：心力衰竭经方方证对应中医药

中药调控PI3K/Akt信号通路干预多囊卵巢综合征大鼠实验研究的现状、问题及对策

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：闫朋宣刘奕清咸楠星彭麟景李鲲张京春赵雨坤中国中医科学院中国中医科学院西苑医院中国中医科学院中医基础理论研究所

多囊卵巢综合征（PCOS）及其导致的不孕症是妇科和生殖内分泌科常见的疾病之一，磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路是干预PCOS发展研究相对较多的信号通路，中药通过此信号通路开展的PCOS大鼠实验也是机制研究的主要方向... 详细信息

多囊卵巢综合征（PCOS）及其导致的不孕症是妇科和生殖内分泌科常见的疾病之一，磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路是干预PCOS发展研究相对较多的信号通路，中药通过此信号通路开展的PCOS大鼠实验也是机制研究的主要方向，本文通过相应的标准梳理筛选出了近5年在学术期刊公开发表的文章20篇，并从5个方面对入选的研究项目客观情况、存在问题进了分析，发现各个研究项目均存在不同程度的问题，如造模观察指标、模型成功判断标准、治疗周期、方药/有效成分剂量计算方式和具体用量等未明确，易造成结果偏倚或降低实验数据有效度。基于此，形成提出了PCOS大鼠实验研究的实验大鼠、模型构建、研究实施、结局指标和分析与报告五大类共21条操作清单，以期对后续PCOS实验有关科研提供参考，助力形成高质量文章。

关键词：中医药(TCM) 多囊卵巢综合征(PCOS) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路现状及问题动物模型肾虚型蛋白

冠心静胶囊治疗气虚血瘀型冠心病心绞痛的“6+1维度”临床综合评价

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王萌萌崔鑫吕健谢雁鸣王连心中国中医科学院中医临床基础医学研究所中国中医科学院西苑医院

目的：系统梳理冠心静胶囊治疗冠心病心绞痛（气虚血瘀证）现有研究，进行涵盖6+1维度及9个方面的临床证据和综合价值评估，明确冠心静胶囊临床定位以及优势特点。方法：采用定性与定量相结合的评价方式，应用临床医学、流行病学、循证... 详细信息

目的：系统梳理冠心静胶囊治疗冠心病心绞痛（气虚血瘀证）现有研究，进行涵盖6+1维度及9个方面的临床证据和综合价值评估，明确冠心静胶囊临床定位以及优势特点。方法：采用定性与定量相结合的评价方式，应用临床医学、流行病学、循证医学、药物经济学等方法学，通过公开资料、问卷调查、真实世界数据和文献综合评价，构建了对冠心静胶囊的6+1维度等9个方面的评价体系。通过专家为准则层和指标层赋予权重，并利用多准则层决策分析模型（MCDA）和CSC（V2.0）软件对各维度进行了度量，揭示了冠心静胶囊的临床价值。结果：①评估结果显示冠心静胶囊的安全性较高，根据说明书不良反应、临床安全性系统评价和Meta分析、国家药品不良反应监测中心收集等数据显示冠心静胶囊不良反应主要包括胸闷、呼吸困难、头晕和消化系统相关症状，标准化分数为0.75分，安全性良好。②从Meta分析结果中可以看出，在疗效标准一致的情况下，单用冠心静胶囊和冠心静胶囊联合西医常规或中成药来治疗冠心病时的有效性高于单纯西医常规或中成药参芍胶囊治疗，有效性标准化分数为 0.57分，仍需一定的证据支持。③以2020年的个人可支配收入作为患者的预期付款假设阈值，与单用常规治疗相比，在一定条件转化下（高于106.91元），冠心病心绞痛患者通过联合冠心静胶囊与常规治疗会有成本效益，经济性较好。④目前已有3个关于冠心静胶囊的发明的专利获得批准，涵盖了临床创新、服务系统革新以及产业发展等多个领域，创新性较好。⑤此外，针对医护人员所做的调查问卷涉及五个不同的维度，其统计分数和评价均表现出良好的适应性，适宜性良好。⑥居民报销比例较高，抽样调查发现冠心静胶囊在全国医院内配比较全，可及性良好。⑦源自清朝著名医学家王清任的活血化瘀理论，冠心静胶囊融合了和益气养阴、芳香温通等多种疗法。根据“6+1”维度的分析数据，最终得出冠心静胶囊对冠心病心绞痛（气虚血瘀型）的临床综合评价为0.73分。结论：基于各维度及临床价值综合评价的结果，冠心静胶囊对于冠心病心绞痛（气虚血瘀型）临床证据充足，具备良好的的安全性、适宜性和可及性，建议推荐冠心静胶囊按照既定程序纳入基本临床用药管理的相关政策范畴。

关键词：冠心静胶囊冠心病心绞痛气虚血瘀临床综合评价多准则决策分析

神经退行疾病中髓鞘再生及microRNA的调控机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 223-231页

作者：李曼菁李琦冉庆森陈坤妮杜欣柯杨丽娜聂春霞杨庆李玉洁陈颖王娅杰翁小刚蔡维燕朱晓新中国中医科学院中药研究所北京100700 北京市宣武中医医院北京100050

中枢神经系统脱髓鞘多发于神经退行性疾病中,如多发性硬化症(MS)。髓鞘是包裹在轴突上的一层髓磷脂膜,为神经元起到冲动的快速传导和代谢耦合的作用,若轴突裸漏,则导致轴突变性,进而导致神经元变性,此为脱髓鞘性神经退行性疾病患者机体... 详细信息

中枢神经系统脱髓鞘多发于神经退行性疾病中,如多发性硬化症(MS)。髓鞘是包裹在轴突上的一层髓磷脂膜,为神经元起到冲动的快速传导和代谢耦合的作用,若轴突裸漏,则导致轴突变性,进而导致神经元变性,此为脱髓鞘性神经退行性疾病患者机体功能障碍甚至致残的主要原因。其中除了成熟髓鞘脱失,髓鞘再生障碍也是导致疾病发展的重要原因之一。髓鞘由少突胶质细胞(OLs)组成,其由神经干细胞(NSC)分化为少突胶质祖细胞(OPCs),进而分化为成熟的少突胶质细胞。髓鞘再生过程即为从NSCs分化为形成髓鞘的少突胶质细胞的过程,近年来的研究发现此过程受众多基因调控。微小核糖核酸(microRNA)作为神经退行性疾病的重要调节因子,在髓鞘再生环节中形成复杂的调控网络。该文总结了髓鞘再生的主要分子途径及参与此过程的microRNA,并对其作用机制及其靶点进行归纳和分类,并总结了目前中医药促进髓鞘再生的治疗方法和通过microRNA发挥神经保护功能的药物。该综述有望对未来针对调控microRNA治疗脱髓鞘疾病的研究提供理论参考和研究指引。

关键词：微小核糖核酸(microRNA) 髓鞘再生多发性硬化退行性疾病少突胶质细胞

鱼腥草素钠对肺炎克雷伯菌耐药性和毒力的降低作用及其机制

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中华医院感染学杂志 2024年 2887-2893页

作者：赵赟安赵一铮沈琪陈娇丽赵芯米武蓉珍赵志钢黄建胜温州医科大学附属第五医院检验科温州医科大学附属第五医院药学部温州医科大学附属第五医院中医科

目的研究鱼腥草素钠（SH）对肺炎克雷伯菌耐药性和毒力的影响。方法收集2021—2022年温州医科大学附属第五医院临床分离的肺炎克雷伯菌。采用聚合酶链式反应（PCR）检测碳青霉烯类耐药性肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药基因、多位点序列... 详细信息

目的研究鱼腥草素钠（SH）对肺炎克雷伯菌耐药性和毒力的影响。方法收集2021—2022年温州医科大学附属第五医院临床分离的肺炎克雷伯菌。采用聚合酶链式反应（PCR）检测碳青霉烯类耐药性肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药基因、多位点序列分型（MLST）明确ST型、微量肉汤稀释法分析菌株对亚胺培南（IPM）的最低抑菌浓度(MICIPM),综合耐药基因、ST分型和耐药表型结果筛选不同类型CRKP;PCR检测黏液表型调控基因（rpmA、rpmA2）、气杆菌素合成基因（iucA）、沙门菌素合成基因（iroB）和荚膜分型基因（wzi）,筛选不同荚膜分型的高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）;K-B纸片法联合微量肉汤稀释法分析SH作用前后CRKP对IPM的耐药性变化。血清杀菌实验和离心实验分析SH作用前后hvKP毒力及黏液产量变化。逆转录定量PCR（qRT-PCR）分析碳青霉烯耐药基因(blaKPC、blaNDM)和毒力基因（galF）的mRNA表达变化。结果 10株CRKP作为耐药性实验菌株,具有高中低三种耐药表型,9种ST型,携带有blaKPC-2、blaNDM-1,blaNDM-5不同耐药基因;7株不同荚膜分型hvKP联合标准hvKP（NUTH-K2044）作为毒力实验菌株;微量肉汤稀释法结果显示,SH作用后CRKP菌株的MICIPM降低至原来的1/4～1/2,K-B纸片法显示抑菌圈明显扩大;血清杀菌实验结果表明SH作用后hvKP在血清中的存活率降低（P<0.05）,离心实验发现SH能抑制hvKP菌株黏液的产生;qRT-PCR定量结果证明SH能抑制blaKPC、blaNDM、galF基因mRNA的表达（P<0.05）。结论 SH通过抑制耐药基因、毒力基因表达和黏液的合成,进而降低肺炎克雷伯菌的耐药性和毒力。

关键词：鱼腥草素钠肺炎克雷伯菌耐药性毒力