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海草床盐生植物根际土壤可培养细菌多样性及抑菌活性研究

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广西植物 2024年第8期44卷 1458-1468页

作者：陈望安李蜜黎芳婷高程海广西中医药大学海洋药物研究院南宁530200 广西海洋药物重点实验室南宁530200 广西英华国际职业学院广西钦州535000

为探究海草床盐生植物根际土壤可培养细菌的新颖性和独特性及其代谢产物粗提物抑菌活性,该文采集防城港市珍珠湾和渔洲坪海草床9份盐生植物根际土壤进行研究,使用5种分离培养基,并采用稀释涂布法分离纯化可培养细菌。通过PCR扩增和16S r... 详细信息

为探究海草床盐生植物根际土壤可培养细菌的新颖性和独特性及其代谢产物粗提物抑菌活性,该文采集防城港市珍珠湾和渔洲坪海草床9份盐生植物根际土壤进行研究,使用5种分离培养基,并采用稀释涂布法分离纯化可培养细菌。通过PCR扩增和16S rRNA测序进行菌种鉴定并对其进行多样性分析。采用滤纸片法筛选可培养细菌发酵粗提物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(***)、金黄色葡萄球菌(***)和鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)4种人类致病菌的抑制活性。结果表明:(1)从9份样品中共分离获得可培养细菌42株,隶属13个科14个属,包括链霉菌属、弧菌属、芽孢杆菌属、希瓦氏菌属、微杆菌属、短杆菌属、葡萄球菌属、鞘氨醇单胞菌属、罗思氏菌属、嗜冷杆菌属、假诺卡氏菌属、发光菌属、氟单胞菌属和志贺菌属,其中链霉菌属为优势菌属。(2)抑菌活性初筛结果显示,6株可培养细菌至少对2种以上人类致病菌有较强的抑制活性,其中1株来自弧菌属,1株来自罗思氏菌属,其余4株均来自链霉菌属。综上所述,防城港海域海草床盐生植物根际土壤微生物资源较新颖独特,链霉菌属细菌具有较强的抑菌活性,为开发新型抗生素提供了潜在菌种资源。

关键词：海草床人类致病菌细菌多样性链霉菌属抑菌活性

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甘蔗横向种植机补种装置辊耙结构仿真分析

农机化研究 2024年第4期46卷 48-52页

作者：麻芳兰滕筱李科李尚平吴飞广西大学机械工程学院南宁530004 广西民族大学电子信息学院南宁530006 北部湾大学机械与船舶海洋工程学院广西钦州535011

针对甘蔗横向种植机在种植过程中出现的漏播问题进行了研究,设计了一套补种装置。通过ADAMS软件对装置中的补种辊耙进行顺逆时针等两种运动形式的虚拟仿真分析,分别得出齿式、整叶式与窝轮式等3种辊耙结构所受的力和扭矩等因素。仿真结... 详细信息

针对甘蔗横向种植机在种植过程中出现的漏播问题进行了研究,设计了一套补种装置。通过ADAMS软件对装置中的补种辊耙进行顺逆时针等两种运动形式的虚拟仿真分析,分别得出齿式、整叶式与窝轮式等3种辊耙结构所受的力和扭矩等因素。仿真结果表明:在相同条件下,补种辊耙的逆时针转动方式更优于顺时针转动方式;窝轮式补种装置进行逆时针运动时,其力约为10N,力矩约为2N·m。由于窝轮式补种装置的力、力矩小于齿式补种装置与整叶式补种装置,因此其结构最优,补种性能最好。研究结果可为后续甘蔗横向种植机精准种植的研究与开发提供了一定的理论依据。

关键词：甘蔗横向种植机补种装置辊耙结构 ADAMS

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基于鲎试剂生产的中国鲎血液质量监测方法研究

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海洋科学 2022年第12期46卷 177-182页

作者：贾久满粟双婷黄慧灵黄鸿期唐冬周琦余柳俊陈金文贾玉珍韦莉念廖永岩广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室北部湾大学海洋学院广西钦州535011

为了研究中国鲎血液质量的监测方法,实验选择9只中国鲎检测其血液中铜含量、血细胞数量、血浆蛋白含量、血淋巴蛋白含量等指标,并进行相关性分析。结果表明,中国鲎血液中铜含量与血细胞数相关性r=0.917,与血浆蛋白含量相关性r=0.995,与... 详细信息

为了研究中国鲎血液质量的监测方法,实验选择9只中国鲎检测其血液中铜含量、血细胞数量、血浆蛋白含量、血淋巴蛋白含量等指标,并进行相关性分析。结果表明,中国鲎血液中铜含量与血细胞数相关性r=0.917,与血浆蛋白含量相关性r=0.995,与血淋巴蛋白含量相关性r=0.983,均呈现极显著相关性。中国鲎血液中铜含量与血细胞数的相关关系为Y_(1)=6.14+0.86X(R~2=0.840),与血浆蛋白含量的相关关系为Y_(2)=2.08+0.78X(R~2=0.989),与血淋巴蛋白含量的相关关系为Y_(3)=1.87+0.62X(R~2=0.966)。中国鲎血液中铜含量不但能够直接反映血蓝蛋白的含量,而且可以反映血细胞数、血浆蛋白含量、血淋巴蛋白含量。因此,以中国鲎血液中铜含量作为监测血液质量的指标,可以推动中国鲎可持续采血技术的发展与完善,对中国鲎的利用与保护具有重要意义。

关键词：中国鲎血液质量监测方法铜含量

卵形鲳鲹TLR13基因的克隆、表达分析和亚细胞定位研究

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渔业科学进展 2023年第3期44卷 85-96页

作者：毛美琴蓝桢宇黄凤萍郭锡燚乐蒙胥鹏吴颖瑞彭银辉蔡小辉北部湾大学海洋学院、广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室广西钦州536011

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是一种古老的先天性免疫受体,参与病原体相关分子模式识别,对维持免疫稳态和预防感染至关重要。本研究克隆和鉴定了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)TLR13基因(命名为ToTLR13),其开放阅读框(ORF)为1269 ... 详细信息

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是一种古老的先天性免疫受体,参与病原体相关分子模式识别,对维持免疫稳态和预防感染至关重要。本研究克隆和鉴定了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)TLR13基因(命名为ToTLR13),其开放阅读框(ORF)为1269 bp,编码422个氨基酸,等电点为8.13。保守结构域分析显示,ToTLR13含有跨膜结构域(TM)、LRR结构域和TIR结构域,符合TLR家族的典型特征。通过建立TLR13保守域三级结构发现,ToTLR13与小鼠(Mus musculus)和大黄鱼(Larimichthys crocea)TLR13功能结构域的蛋白三级结构具有较高重叠性。多序列比对显示,ToTLR13与其他硬骨鱼TLR13具有较高的相似性,与其他纲物种的序列相似性较低。系统进化树结果显示,To TLR13与硬骨鱼TLR13聚在一起,其中与鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)最为接近,与哺乳动物、两栖类和贝类相分离。实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)分析显示,ToTLR13在健康卵形鲳鲹的心、鳃、肾、头肾、肝、脾、脑和肌肉中普遍表达,其中鳃的表达量最高,其次是脾。ToTLR13在其鳃、脾、肝和肾免疫相关组织中的表达情况呈现出不同程度的上调,提示其经无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)免疫刺激后可能激活了炎症反应,启动了先天性免疫反应。亚细胞定位显示,ToTLR13定位于A549细胞质。本研究表明,ToTLR13在抵御病原菌免疫应答过程中可能发挥重要的作用,研究结果可为阐明脊椎动物TLRs的功能进化史提供基础资料。

关键词：卵形鲳鲹 TLR13 基因克隆表达谱亚细胞定位

长毛明对虾核转录因子NF-κB家族基因的克隆及在细菌侵染过程中的表达变化

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中国水产科学 2022年第11期29卷 1551-1563页

作者：梁芳梅朱鹏邱春桃王艳梅刘丽丽蔡双虎王鹏良张虹陈俭清许尤厚北部湾大学广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室广东海洋大学水产学院

核转录因子NF-κB家族在无脊椎动物抵抗病原刺激中起着重要作用。本研究通过RACE技术克隆了长毛明对虾(Fenneropenaeuspenicillatus)NF-κB家族基因,分别命名为FpRelish和FpDorsal。FpRelishcDNA全长为5373 bp,其中5’UTR 88 bp, 3’UTR 1667 bp,编码区3618 bp,编码1205个氨基酸; FpDorsal cDNA全长为4816 bp,其中5’UTR 611 bp, 3’UTR 2147 bp,编码区2058 bp,编码685个氨基酸,两者均具有RHD结构域。同源性和系统进化分析表明, FpRelish和FpDorsal都分别与甲壳动物首先聚为一支。qPCR分析表明,两基因在检测的血液、心脏、肝胰脏、鳃、肠道、性腺、肌肉、神经和胃组织中均有表达,且均在肝胰脏中最低,在血细胞中最高,相差8～10.7倍。嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)刺激后, FpRelish和FpDorsal基因在鳃和肝胰脏中均有先上升再下降的表达变化模式,鳃中FpRelish基因6 h表达最高,为对照组2.7倍, FpDorsal基因9 h表达最高,为对照组2.1倍;肝胰脏中FpRelish基因在9 h高表达,最高表达量在48 h,为对照组的4.5倍, FpDorsal基因9 h表达最高,为对照组22倍。溶藻弧菌(Vibrio aliginolyticus)刺激后,鳃中FpRelish基因24 h表达最高,为对照组1.9倍, FpDorsal基因24 h表达最高,为对照组1.5倍;肝胰脏中FpRelish基因3 h达最高表达量, FpDorsal基因6 h表达最高,均为对照组的1.5倍。本研究表明FpRelish和FpDorsal在长毛明对虾免疫调控中发挥了重要作用。

关键词：长毛明对虾 NF-κB家族基因细菌侵染克隆与表达

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织锦巴非蛤形态性状对体质量的影响

广东农业科学 2022年第7期49卷 113-119页

作者：翟子钦喻达辉白丽蓉北部湾大学海洋学院/广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室广西钦州535011

【目的】研究织锦巴非蛤(Paphia textile)野生群体形态性状对体质量性状的影响,为该贝类的人工选育提供参考。【方法】以广西北海铁山港海区采集的121只织锦巴非蛤为研究对象,分别测定其壳长(SL)、壳高(SH)、壳宽(SW)及体质量(BM)性状... 详细信息

【目的】研究织锦巴非蛤(Paphia textile)野生群体形态性状对体质量性状的影响,为该贝类的人工选育提供参考。【方法】以广西北海铁山港海区采集的121只织锦巴非蛤为研究对象,分别测定其壳长(SL)、壳高(SH)、壳宽(SW)及体质量(BM)性状。以壳形态性状(SL、SH、SW)为自变量、体质量性状(BM)为因变量进行相关性分析、通径分析、决定程度分析和多元回归分析。【结果】参数统计分析结果表明,体质量变异系数最高。相关性分析结果表明,各性状间的相关性均达到极显著水平,体质量与壳宽的相关系数最大(0.882),壳长与壳宽的相关系数最小(0.596)。通径分析结果表明,壳宽对体质量的直接影响最大、通径系数为0.573,壳高通过壳宽对体质量的间接影响最大、通径系数为0.423;决定程度分析与通径分析结果变化趋势基本一致。运用多元回归分析方法建立了估计体质量的最优回归方程:BM=-32.258+0.309SL+0.356SH+1.456SW(R~2=0.874)。【结论】以体质量为选育目标开展织锦巴非蛤人工选育时,在形态性状上应首先考虑壳宽性状,同时加强壳高的协同选择。

关键词：织锦巴非蛤形态性状体质量通径分析多元回归

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鱼类细胞培养历史、应用及培养条件研究概述

广东农业科学 2022年第3期49卷 124-134页

作者：毛美琴蓝桢宇李进郭锡燚黄凤萍廖元龙蔡小辉北部湾大学海洋学院/广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室广西钦州536011

细胞培养指的是经过酶、机械或化学的方法将组织离散成单个细胞,模拟动物体内环境进行培养并促进其生长发育的方法。基于鱼类模型的潜在应用,开发了包括体外细胞培养在内的多种技术。20世纪生物技术兴起,体外细胞培养逐渐渗透至各学科应... 详细信息

细胞培养指的是经过酶、机械或化学的方法将组织离散成单个细胞,模拟动物体内环境进行培养并促进其生长发育的方法。基于鱼类模型的潜在应用,开发了包括体外细胞培养在内的多种技术。20世纪生物技术兴起,体外细胞培养逐渐渗透至各学科应用,如免疫学、药理学、毒理学、遗传及组织再生和移植等。体外培养细胞具有模仿宿主细胞遗传同质性的优点,实验过程中可一定程度上减少体内的反应变异性,且成本低、重复性好、道德约束小。鱼类细胞培养技术发展于20世纪60年代,最早应用于病毒分离,细胞可从不同器官组织中获得。虽然鱼类细胞培养技术研究晚于哺乳动物,但从长远来看对于鱼类细胞的深入研究对于理论研究和实际应用都具有深远意义和广阔开发前景。简要讨论了鱼类细胞培养的历史进程、应用现状以及细胞培养技术,为未来鱼类细胞培养技术研究提供参考。

关键词：细胞培养技术鱼类细胞应用现状发展方向

温度、盐度和pH对钝缀锦蛤耗氧率和排氨率的影响

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海洋科学 2022年第10期46卷 113-121页

作者：陆莉莉喻达辉李雷旭胡朝翟子钦陈健吴颖瑞白丽蓉北部湾大学广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室广西钦州535011

为探究温度、盐度和pH对钝缀锦蛤(Tapes dorsatus)耗氧率和排氨率的影响,作者采用室内实验生态学方法研究了不同温度、盐度和pH对钝缀锦蛤呼吸代谢的影响。实验设定了5个温度梯度(18℃、21℃、24℃、27℃、30℃)、5个盐度梯度(18、21、2... 详细信息

为探究温度、盐度和pH对钝缀锦蛤(Tapes dorsatus)耗氧率和排氨率的影响,作者采用室内实验生态学方法研究了不同温度、盐度和pH对钝缀锦蛤呼吸代谢的影响。实验设定了5个温度梯度(18℃、21℃、24℃、27℃、30℃)、5个盐度梯度(18、21、24、27、30)和5个pH梯度(5、6、7、8、9)。结果表明,温度对钝缀锦蛤的耗氧率影响显著(P0.05),在温度18~30℃范围内,耗氧率随温度的升高而升高,而排氨率随温度的升高先降后升;盐度对该贝的耗氧率和排氨率影响极显著(P0.05), pH为6~9时,钝缀锦蛤的耗氧率和排氨率变化幅度较小。在温度18~30℃,耗氧率与排氨率之比(O∶N)为5.56~45.4;在盐度18~30,O∶N为17.14~40.09;在pH5~9范围内,O∶N为27.59~40.41。研究结果为进一步研究钝缀锦蛤的生理生态奠定了一定基础。

关键词：钝缀锦蛤(Tapes dorsatus) 温度盐度 pH 耗氧率排氨率

合浦珠母贝PfCLEC17A基因的克隆及表达分析

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华北农学报 2022年第5期37卷 230-238页

作者：郑玉斯王培郭颖白丽蓉喻达辉赵森北部湾大学广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室广西钦州535011

为了探究C型凝集素(C-type lectin)家族成员在合浦珠母贝机体内的作用及表达模式,为进一步解析合浦珠母贝PfCLEC17A的免疫应答机制,通过RACE技术克隆获得合浦珠母贝C型凝集素基因PfCLEC17A;利用生物信息学方法分析了PfCLEC17A的分子特征... 详细信息

为了探究C型凝集素(C-type lectin)家族成员在合浦珠母贝机体内的作用及表达模式,为进一步解析合浦珠母贝PfCLEC17A的免疫应答机制,通过RACE技术克隆获得合浦珠母贝C型凝集素基因PfCLEC17A;利用生物信息学方法分析了PfCLEC17A的分子特征,并通过荧光定量PCR检测PfCLEC17A基因在合浦珠母贝的鳃、外套膜、闭壳肌、性腺、血液、足和肝胰腺等组织及溶藻弧菌感染后在肝胰腺中的表达情况。结果显示,从合浦珠母贝中克隆获得新的C型凝集素基因PfCLEC17A,cDNA全长为699 bp,其中开放阅读框(ORF)长534 bp,编码178个氨基酸残基,含有一个CTL结构域。系统进化树分析表明,合浦珠母贝与其他贝类的PfCLEC17A基因聚集在一个分支。实时荧光定量PCR结果显示,PfCLEC17A在合浦珠母贝的鳃、外套膜、闭壳肌、性腺、血液、足和肝胰腺等各个组织中均有表达,其中在肝胰腺中的相对表达量最高且显著高于在其他组织中的相对表达量。肝胰腺作为软体动物重要的免疫器官,暗示PfCLEC17A基因可能参与机体免疫过程。藻弧菌感染1 h后,合浦珠母贝PfCLEC17A基因表达水平显著升高并达到最大值,说明该基因参与弧菌等微生物刺激的早期反应。综上所述,PfCLEC17A基因参与合浦珠母贝的免疫应激反应,具有一定的免疫功能。

关键词：合浦珠母贝 C型凝集素 PfCLEC17A 基因克隆基因表达