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鳖蛋黄血管紧张素转化酶抑制肽分离纯化及活性分析

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食品科学 2025年第1期46卷 40-48页

作者：刘华宇廖彭莹张天丰张新锐邓纭宁李耀华韦金锐陈俊广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室中药学国家级实验教学示范中心广西南宁530200 广西中医药大学教学实验实训中心广西南宁530200 广西中医药大学广西中医药科学实验中心广西南宁530200

为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性的肽段,以ACE抑制活性为评价指标,采用超滤和凝胶过滤色谱技术进行分离纯化。采用液相色谱-串联质谱技术对活性组分进行肽段鉴定,借助生物信息... 详细信息

为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性的肽段,以ACE抑制活性为评价指标,采用超滤和凝胶过滤色谱技术进行分离纯化。采用液相色谱-串联质谱技术对活性组分进行肽段鉴定,借助生物信息学工具进行活性评估。优选预测活性较高的肽段进行合成和活性验证,并用分子对接工具分析活性肽与ACE的相互作用。结果表明,鳖蛋黄菠萝蛋白酶酶解物的水解度为(17.70±0.34)%,抑制ACE的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值为(0.210±0.019)mg/mL。对酶解产物进行分离纯化,从活性组分F3中鉴定出36条肽段,选择6条活性评分较高的肽段进行合成,其中肽段YNGIWPRD和ASDILPKK的IC_(50)值分别为(0.019 00±0.000 36)、(0.170 0±0.001 3)mg/mL。分子对接结果表明,二者均通过多条氢键与ACE紧密结合。综上,从鳖蛋黄中筛选出2条新的ACE抑制活性肽。

关键词：鳖蛋黄血管紧张素转化酶抑制肽分离纯化生物信息学分子对接

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三七总皂苷调控破骨细胞外泌体中差异miRNA表达抑制成骨细胞铁死亡

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4011-4021页

作者：陶红成曾平刘金富田照丁强李晁辉韦建杰李豪广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530200 广西中医药大学第一附属医院广西壮族自治区南宁市530023 广西中医基础研究重点实验室广西壮族自治区南宁市530200

背景:激素性股骨头坏死多是由于长期大量使用激素所致,但具体的发病机制尚未明确,有待于进一步研究。目的:筛选出三七总皂苷干预破骨细胞来源外泌体中的差异miRNA,在此基础上构建成骨相关铁死亡调控网络,以探索激素性股骨头坏死发生的... 详细信息

背景:激素性股骨头坏死多是由于长期大量使用激素所致,但具体的发病机制尚未明确,有待于进一步研究。目的:筛选出三七总皂苷干预破骨细胞来源外泌体中的差异miRNA,在此基础上构建成骨相关铁死亡调控网络,以探索激素性股骨头坏死发生的潜在机制及研究方向。方法:MTT实验检测不同浓度地塞米松和不同质量浓度三七总皂苷对Raw264.7细胞系的毒性作用;抗酒石酸酸性磷酸酶染色和TUNEL染色检测三七总皂苷对破骨细胞抑制和凋亡的影响;从三七总皂苷干预的破骨细胞中提取外泌体,对外泌体进行测序找出差异表达miRNA,通过CytoScape 3.9.1构建并可视化差异表达的miRNA与mRNA间的调控网络;通过GO分析和KEGG分析筛选候选mRNA;最后筛选出铁死亡相关的差异基因,构建铁死亡相关基因的调控网络。结果与结论:①通过MTT实验确定了适合干预Raw264.7细胞的地塞米松浓度(0.1μmol/L)和三七总皂苷质量浓度(1736.85μg/mL);②三七总皂苷对破骨细胞有抑制作用并能促进其凋亡;③从破骨细胞来源外泌体样本中鉴定出20个差异miRNA,通过靶标mRNA预测出11种成骨相关的差异miRNA,并构建了4个上调的差异表达miRNA对应于155个下调的候选mRNA以及7个下调的差异表达miRNA对应于238个上调的候选mRNA的调控网络;④在差异基因中筛选出与铁死亡相关的基因24个,最终构建了12个网络(miR-98-5p/PTGS2,miR-23b-3p/PTGS2,miR-425-5p/TFRC,miR-133a-3p/TFRC,miR-185-5p/TFRC,miR-23b-3p/NFE2L2,miR-23b-3p/LAMP2,miR-98-5p/LAMP2,miR-182-5p/LAMP2,miR-182-5p/TLR4,miR-23b-3p/ZFP36,miR-182-5p/ZFP36)。这些结果表明三七总皂苷可能通过调控破骨细胞外泌体来源miRNA的表达来调节成骨细胞铁死亡,为激素性股骨头坏死的机制研究提供新的思路。

关键词：激素性股骨头坏死三七总皂苷破骨细胞外泌体铁死亡调控网络

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死:急性和慢性运动的影响

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4868-4877页

作者：冯强皮亦华黄华生黄德伦张艳广西中医药大学体育部广西壮族自治区南宁市530021 广西中医药大学基础医学院生理教研室广西壮族自治区南宁市530021

背景:干细胞移植对治疗心肌梗死具有可观的治疗前景,但移植细胞向心脏归巢效率及在心脏内的滞留率和存活率较低限制了干细胞疗效。运动疗法是心肌梗死患者心脏康复的重要有机组成部分,然而运动在干细胞移植治疗心肌梗死中的作用尚未明... 详细信息

背景:干细胞移植对治疗心肌梗死具有可观的治疗前景,但移植细胞向心脏归巢效率及在心脏内的滞留率和存活率较低限制了干细胞疗效。运动疗法是心肌梗死患者心脏康复的重要有机组成部分,然而运动在干细胞移植治疗心肌梗死中的作用尚未明确。目的:探讨运动(包括急性和慢性运动)对骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的影响。方法:取80只雌性SD大鼠,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、移植组或联合组,每组20只。模型组、移植组或联合组大鼠通过冠状动脉结扎术制作心肌梗死模型,造模24 h后,联合组进行8周有氧运动(慢性运动,30 min/d,每周运动5 d),于首次运动(急性运动)后5 min内,移植组和联合组尾静脉输注绿色荧光蛋白标记的SD大鼠骨髓间充质干细胞,首次运动后24 h取部分大鼠,检测大鼠心肌内移植的干细胞存活率、Y染色体性别决定区mRNA表达、归巢因子蛋白表达以及氧化应激和炎症反应参数;末次运动后72 h取剩余大鼠,检测心脏结构与功能、心肌组织学变化和Ki67^(+)细胞数量。结果与结论:(1)急性运动后:与假手术组比较,模型组心肌活性氧、丙二醛、肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β水平升高(P 室射血分数、左心室短轴缩短率下降(P 室射血分数、左心室短轴缩短率、Ki67+细胞升高(P <0.05)。(3)急性运动通过促进干细胞归巢、改善心肌微环境提高外源性干细胞存活率,慢性运动可刺激干细胞移植后心肌细胞增殖、抑制心脏重塑并增强心功能,提示运动有助于优化大鼠心肌梗死后干细胞移植疗效。

关键词：急性运动慢性运动干细胞移植骨髓间充质干细胞心肌梗死归巢

氨基酸代谢重编程对肝细胞癌免疫微环境的影响

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临床肝胆病杂志 2025年第12期40卷 2531-2537页

作者：刘晓丽谭钦文徐健陈焕灵余洁卢露戴明侃黄晶晶黄鸿娜毛德文广西中医药大学研究生院南宁 530200 广西中医药大学第一附属医院脾胃肝病科南宁 530023 广西中医药大学第一附属医院中内教研室南宁 530023 广西中医药大学第一附属医院肝病科南宁 530023

肿瘤免疫微环境是由肿瘤免疫细胞及其分泌的细胞因子构成的肿瘤局部外环境，对肿瘤的发生和发展具有一定调控作用。在肝细胞癌的治疗中，氨基酸代谢及其对增殖细胞代谢的重编程日益受到关注，显示出在调控肿瘤免疫微环境中的潜力。尽管... 详细信息

肿瘤免疫微环境是由肿瘤免疫细胞及其分泌的细胞因子构成的肿瘤局部外环境，对肿瘤的发生和发展具有一定调控作用。在肝细胞癌的治疗中，氨基酸代谢及其对增殖细胞代谢的重编程日益受到关注，显示出在调控肿瘤免疫微环境中的潜力。尽管氨基酸代谢重编程被视为治疗肿瘤的新途径，但其在调控肝细胞癌中肿瘤免疫的具体机制尚未明确。本文深入探讨了氨基酸代谢在肝细胞癌肿瘤免疫微环境中的作用机制及其临床应用前景，旨在为肝癌的免疫治疗研究提供新的思路。

关键词：癌, 肝细胞肿瘤微环境氨基酸类代谢免疫调节

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拟穴青蟹对不同饵料稳定同位素的周转和分馏

渔业科学进展 2025年第1期46卷 30-45页

作者：钟声平蔡小辉宋建达刘旭佳彭银辉黄亮华葛长字黄国强广西中医药大学海洋药物研究院广西海洋药物重点实验室广西南宁530200 北部湾大学海洋学院广西海洋生物多样性养护重点实验室广西钦州535011 山东大学(威海)海洋学院山东威海264209 广西海洋科学研究院广西南宁530007

为研究不同饵料对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)幼蟹碳和氮稳定同位素周转和分馏系数的影响,本研究采用200个50 cm×40 cm×40 cm的水族箱,采用鱼(李氏Callionymus richardsoni)、虾(宽沟对虾Penaeus latisulcatus)、贝(杂色蛤Ruditapes philippinarum)、沙蚕(双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis)为饵料投喂初始体质量为1.5g左右的拟穴青蟹幼蟹,并在第0、30、60、90、135、180天取样测定幼蟹的δ^(13)C和δ15N,计算周转参数和分馏系数。结果显示,实验期间幼蟹δ^(13)C和δ15N随养殖时间的变动可用δ^(13)C=a×lnt+b和δ15N=a×lnt+b描述,摄食不同饵料时a值变动较大。生长是驱动幼蟹体内碳和氮稳定同位素周转的主要因素,投喂4种饵料的幼蟹生长对13C周转的贡献百分比分别为79.83%、83.65%、84.88%和63.80%,生长对15N周转的贡献百分比分别81.97%、82.88%、75.27%和59.80%。投喂4种饵料的幼蟹13C完成50%周转时间(t50)分别为36.30、24.56、27.96和21.17 d,完成95%周转的时间(t95)分别为156.86、106.16、120.83和91.64 d,15N完成50%周转时间(t50)分别为37.60、24.34、24.77和20.17 d,完成95%周转的时间(t95)分别为162.49、105.22、107.05和86.99 d。投喂4种饵料的幼蟹180 d时对饵料的δ^(13)C的分馏系数Δ^(13)C180d为0.71‰~1.64‰,对饵料的δ15N的分馏系数Δ^(15)N180d为2.15‰~2.66‰。Δ^(13)C与增重率(MGR,%)的关系符合公式Δ^(13)C=a×ln(MGR)+b,Δ^(15)N与增重率(MGR,%)的关系符合公式Δ^(15)N=a×ln(MGR)+b,摄食不同饵料时,a和b值均出现较大差异。Δ^(13)C与饵料的δ^(13)C成负线性相关,与初始幼蟹与饵料的δ^(13)C相差数值(δ^(13)CIC~δ^(13)CD)成正线性相关;Δ^(15)N与饵料的δ15N成负线性相关,与初始幼蟹与饵料的δ15N相差数值(δ15N IC~δ15N D)成正线性相关。本研究表明,生长是驱动拟穴青蟹幼蟹稳定同位素周转的主要因素,饵料稳定同位素丰度是影响分馏系数的重要因子。实验结果为拟穴青蟹营养生态学研究提供了参考数据。

关键词：拟穴青蟹稳定同位素周转速率分馏系数饵料生长

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单一切口椎间孔镜治疗双节段腰椎管狭窄合并腰椎间盘突出症的效果

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实用医学杂志 2025年第1期 41-47页

作者：王子桓张翼升余熙荣马楚杰莫泳皓钟远鸣广西中医药大学第一临床医学院广西中医药大学第一附属医院脊柱骨伤科

目的探讨单一切口椎间孔镜治疗双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症的临床疗效。方法回顾性分析2016年3月至2018年5月在广西中医药大学第一附属医院脊柱骨伤科就诊的40例双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症患者临床资料，其中通过单一切... 详细信息

目的探讨单一切口椎间孔镜治疗双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症的临床疗效。方法回顾性分析2016年3月至2018年5月在广西中医药大学第一附属医院脊柱骨伤科就诊的40例双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症患者临床资料，其中通过单一切口同时穿刺椎间孔镜治疗的患者11例（A组），通过单一切口前后穿刺椎间孔镜治疗的患者13例（B组），通过双切口前后穿刺椎间孔镜治疗的患者16例（C组）。记录患者的一般临床资料，三组不同时间点（术前、术后即刻、术后1周、术后1个月、末期随访）的VAS评分、JOA评分及临床疗效，并运用统计学进行分析。结果三组间手术时间、术中透视次数、皮肤切开长度和满意度差异均有统计学意义（P <0.05）；手术时间与手术方式在VAS、JOA评分上存在交互作用；手术时间、手术方式在VAS、JOA评分上存在主效应（P <0.05）；三组术后即刻、术后1周、术后1个月、末期随访与术前在VAS、JOA评分上比较差异均有统计学意义（P <0.05）；三组间术后即刻在VAS、JOA评分上差异有统计学意义（P <0.05）；三组间术后1周在VAS评分上差异有统计意义（P <0.05）。结论单一切口椎间孔镜技术同时减压双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症的有效手段，具有手术时间短、术中透视少，损伤小等优势，患者满意，值得临床推广应用。

关键词：单一切口椎间孔镜腰椎管狭窄腰椎间盘突出症

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基于甲状腺激素合成信号通路CGA/GPX2/TSHβ探讨逍遥散对肝郁脾虚证大鼠HPT轴的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第3期 1-10页

作者：王芳袁汝鑫樊玲瑾陈宗礼肖华业杨力强李晓红郑春成广西中医药大学广西中医药大学广西中医基础研究重点实验室

目的：通过观察逍遥散对肝郁脾虚证大鼠甲状腺激素合成通路糖蛋白激素α亚基/谷胱甘肽过氧化酶2/促甲状腺素β亚基（CGA/GPX2/TSHβ）的影响，探讨其调节肝郁脾虚证大鼠HPT轴功能紊乱的作用机制。方法：72只雄性SD大鼠按随机数字表法分... 详细信息

目的：通过观察逍遥散对肝郁脾虚证大鼠甲状腺激素合成通路糖蛋白激素α亚基/谷胱甘肽过氧化酶2/促甲状腺素β亚基（CGA/GPX2/TSHβ）的影响，探讨其调节肝郁脾虚证大鼠HPT轴功能紊乱的作用机制。方法：72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、逍遥散高、中、低剂量组(16.7、8.35、4.175 g·kg-1)、氟西汀组(0.001 8 g·kg-1)，每组12只。用慢性束缚应激21 d的方法复制肝郁脾虚证大鼠模型，逍遥散各剂量组和氟西汀组分别用逍遥散中药煎剂和氟西汀悬浊液干预。造模结束后苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠甲状腺、垂体组织形态学变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清三碘甲状腺原氨酸（T3）、四碘甲状腺原氨酸（T4）、促甲状腺激素（TSH）含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠甲状腺组织促甲状腺激素受体（TSHR）、垂体组织促甲状腺激素释放激素受体（TRHR）和TSHβ及下丘脑组织促甲状腺激素释放激素（TRH）、CGA、GPX2、TSHβ mRNA和蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠甲状腺大量腺泡萎缩，不规则，胶体分泌严重减少，垂体前叶大量腺细胞空泡变性，血清T3、T4、TSH含量显著降低（P<0.01），甲状腺组织中TSHR、垂体组织中TRHR与TSHβ、下丘脑组织中TRH、CGA、GPX2、TSHβ mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，逍遥散高、中剂量组、氟西汀组大鼠甲状腺与垂体组织病理变化得到明显改善优于逍遥散低剂量组；逍遥散高、中剂量组、氟西汀组血清T3、T4、TSH含量均明显升高（P<0.05,P<0.01），逍遥散低剂量组血清TSH含量亦明显升高（P<0.05）；逍遥散高、中剂量组大鼠甲状腺TSHR、垂体TRHR、TSHβ、下丘脑TRH、CGA、GPX2、TSHβ的mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05,P<0.01），逍遥散低剂量组大鼠下丘脑TSHβ的mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01），氟西汀组大鼠甲状腺TSHR、垂体TRHR、下丘脑TRH、CGA、GPX2的mRNA表达和蛋白水平均明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论：甲状腺激素合成通路CGA/GPX2/TSHβ的活性下调可能是引起肝郁脾虚证大鼠HPT轴功能紊乱的生物学机制之一，而逍遥散对肝郁脾虚证大鼠HPT轴功能紊乱的调节作用可能与上调CGA/GPX2/TSHβ的活性有关。

关键词：慢性束缚应激肝郁脾虚证糖蛋白α亚基/谷胱甘肽过氧化物酶2/促甲状腺素β亚基(CGA/GPX2/TSHβ)信号通路逍遥散

机器学习识别激素性股骨头坏死中线粒体自噬诊断标志物及免疫浸润分析

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2402-2410页

作者：黄柯琪陈跃平陈尚桐李加根广西中医药大学附属瑞康医院广西壮族自治区南宁市530000

背景:线粒体自噬和激素性股骨头坏死的发生、发展关系密切,但具体生物标志物及调控机制尚未明确。目的:通过机器学习算法识别激素性股骨头坏死中线粒体自噬的关键标志物及免疫浸润分析。方法:从GEO数据库下载股骨头坏死数据集GSE123568... 详细信息

背景:线粒体自噬和激素性股骨头坏死的发生、发展关系密切,但具体生物标志物及调控机制尚未明确。目的:通过机器学习算法识别激素性股骨头坏死中线粒体自噬的关键标志物及免疫浸润分析。方法:从GEO数据库下载股骨头坏死数据集GSE123568和GSE74089,分别作为训练集和验证集,在激素性股骨头坏死组和对照组之间选择差异表达基因,进行加权共表达分析。从MitoCarta 3.0数据库下载线粒体自噬相关基因,然后与差异基因和模块基因取交集。利用两种机器学习算法鉴定激素性股骨头坏死线粒体自噬关键基因,利用外部验证集进行验证。采用CIBERSORT和免疫浸润分析免疫细胞占比,单样本基因集富集分析线粒体自噬基因与免疫细胞的相关性分析。结果与结论:①差异分析共获得1163个差异基因,其中有663个上调基因和500个下调基因;加权共表达分析鉴定出4个相关模块,共1412个模块基因;②最终与线粒体自噬基因取交集初步筛选出39个交叉基因可能是疾病相关线粒体自噬基因;GO富集分析结果显示,生物过程主要涉及血红素代谢、线粒体运输、核苷酸双磷酸代谢和硫酯代谢过程,细胞组分主要涉及线粒体基质、线粒体外膜、细胞器外膜和线粒体内膜,分子功能主要涉及脂肪酸连接酶活性、铁-硫簇结合和辅酶A连接酶活性;KEGG富集分析结果共映射出6条通路,主要涉及脂肪酸降解、线粒体自噬、丁酸代谢、脂肪酸生物合成和辅因子生物合成;③经LASSO回归和随机森林算法分析最终得到4个核心基因(ALDH5A1、FBXL4、MCL1和STOM),4个核心基因和诊断列线图外部验证集的受试者工作特征曲线均大于0.9;④激素性股骨头坏死发生发展与活化的树突状细胞、骨髓来源的抑制性细胞、调节性T细胞和中心记忆CD8T细胞等免疫细胞有关;⑤结果显示,4个关键的线粒体自噬基因ALDH5A1、FBXL4、MCL1和STOM通过破骨细胞分化和免疫机制在激素性股骨头坏死进展中发挥关键作用,均具有较好的疾病预测效果,可能作为激素性股骨头坏死诊断和治疗的生物标志物。

关键词：激素性股骨头坏死线粒体自噬机器学习免疫细胞浸润关键标志物

颈椎定点旋转手法在体生物力学量化及影响因素分析

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中国组织工程研究 2025年第3期29卷 486-492页

作者：梁基耀周红海韦贵康苏少亭陈龙豪何心愉刘粮酺广西中医药大学研究生院广西壮族自治区南宁市530001 广西中医药大学骨伤学院广西壮族自治区南宁市530001 广西中医骨伤科生物力学与损伤修复重点实验室广西壮族自治区南宁市530001 国医大师韦贵康学术思想与临床诊疗传承发展研究中心广西壮族自治区南宁市530001 浙江中医药大学附属第三临床医学院浙江省杭州市310000

背景:颈椎定点旋转手法属于技术要求较高的力学操作,但目前其生物力学还缺少相关量化数据;且颈椎定点旋转手法的影响因素研究包括了众多参数并且存在差异性,需要进一步对其影响因素进行分析,以完善其相关数据。目的:量化颈椎定点旋转手... 详细信息

背景:颈椎定点旋转手法属于技术要求较高的力学操作,但目前其生物力学还缺少相关量化数据;且颈椎定点旋转手法的影响因素研究包括了众多参数并且存在差异性,需要进一步对其影响因素进行分析,以完善其相关数据。目的:量化颈椎定点旋转手法在体生物力学参数,探讨各生物力学参数之间的相关性,及研究对象个体特征差异对手法力学参数的影响。方法:选取35例颈椎病患者为测试对象,均为广西中医药大学第一附属医院仁爱分院骨伤科门诊就诊者。术者佩戴穿戴式力学测量手套采集手法力学参数,包括拇指预加载力、拇指最大推力、掌心预加载力、掌心旋扳力和掌心旋扳最大作用力。并采集患者个人特征参数,包括年龄、身高、体质量和颈围。对手法操作过程中的关键力学参数进行特征分析及不同个体特征进行量化,对力学指标参数进行Spearman相关性分析;分析不同个体特征参数对生物力学可能存在的影响。结果与结论:(1)双侧力学参数相比,左侧操作与右侧操作无显著差异性(P>0.05)。(2)拇指预加载力均值为(7.21±1.19)N、拇指最大推力均值为(28.40±4.48)N、掌心预加载力均值为(5.67±2.49)N、掌心旋扳力均值为(10.90±5.11)N、掌心旋扳最大作用力均值为(16.00±7.27)N。(3)掌心预加载力和掌心旋扳力存在显著正相关(Rs=0.812,P<0.01);掌心预加载力和掌心旋扳最大作用力存在显著正相关(Rs=0.773,P<0.01);掌心旋扳力和掌心旋扳最大作用力存在显著正相关(Rs=0.939,P<0.01)。(4)患者体质量与拇指预加载力、掌心预加载力、掌心旋扳力及掌心旋扳最大作用力之间存在显著正相关(P<0.05)。(5)结果证实,颈椎定点旋转手法治疗颈椎病操作中生物力学有一定的标准量值。该手法左右侧操作无显著差异性,具有较好的一致性和可重复性。掌心预加载力、掌心旋扳力及掌心旋扳最大作用力3种力之间存在一致性和协调性,对于治疗效果的贡献是相近的。患者的体质量是影响颈椎定点旋转手法重要的因素。

关键词：颈椎定点旋转手法生物力学影响因素分析量化研究颈椎病正骨手法保守治疗个体特征