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白介素2、干扰素γ、白介素10对天疱疮棘层松解影响的研究

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中华皮肤科杂志 2004年第7期37卷 425-427页

作者：王鹰刁庆春钟白玉王鲁郝飞叶庆佾第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038

目的了解白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素10(IL-10)对天疱疮棘层松解的影响作用。方法借助天疱疮器官培养模型,观察不同浓度IL-2、IFN-γ、IL-10分别或共同作用24h、48h、72h后培养表皮片的棘层松解程度。结果接近正常体内浓度... 详细信息

目的了解白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素10(IL-10)对天疱疮棘层松解的影响作用。方法借助天疱疮器官培养模型,观察不同浓度IL-2、IFN-γ、IL-10分别或共同作用24h、48h、72h后培养表皮片的棘层松解程度。结果接近正常体内浓度时,IL-2、IFN-γ对天疱疮抗体所致棘层松解无明显作用,IL-10能轻度抑制天疱疮抗体所致棘层松解;随浓度逐渐增加,IL-2、IFN-γ能显著促进天疱疮抗体所致棘层松解,IL-10则能明显抑制天疱疮抗体所致棘层松解,作用随浓度增加而更加显著;共同作用时,IL-10能抑制IFN-γ促进天疱疮抗体所致棘层松解的作用,浓度高于100pg/mL时能抑制IL-2促进天疱疮抗体所致棘层松解的作用。结论Th1型细胞因子能促进天疱疮抗体所致棘层松解,Th2型细胞因子能抑制天疱疮抗体所致棘层松解、抑制Th1型细胞因子促进天疱疮抗体所致棘层松解的作用。

关键词：白介素2 干扰素γ 白介素10 天疱疮棘层松解自身免疫性大疱性皮肤病

应用聚集培养技术进行兔骨髓间充质干细胞体外成软骨诱导培养

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中华实验外科杂志 2007年第3期24卷 316-318页

作者：段小军杨柳左镇华戴刚陈光兴李忠李起鸿第三军医大学西南医院关节外科中心重庆400038

目的观察离心管诱导培养条件下，兔骨髓间充质干细胞（MSCs）的成软骨分化，从而为应用该技术提供实验依据。方法分离扩增兔骨髓MSCs和关节软骨细胞，采用离心管内聚集培养技术诱导培养MSCs，用含转化生长因子-β1的DMEM培养液换液，以... 详细信息

目的观察离心管诱导培养条件下，兔骨髓间充质干细胞（MSCs）的成软骨分化，从而为应用该技术提供实验依据。方法分离扩增兔骨髓MSCs和关节软骨细胞，采用离心管内聚集培养技术诱导培养MSCs，用含转化生长因子-β1的DMEM培养液换液，以相同培养条件下的软骨细胞为阳性对照组，以常规培养液换液的MSCs为阴性对照组；分别于培养1、2、3、4周后，收集培养物行苏木素-伊红（HE）染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和图像分析。结果MSCs诱导培养1周后开始表达Ⅱ型胶原，随时间延长而表达增强，并逐渐产生细胞外基质，但4周内表达强度始终弱于软骨细胞组（P〈0．01）。阴性对照组中部分MSCs死亡，培养物崩解。结论采用离心管诱导培养技术可以促进MSCs向软骨细胞表型分化；该技术方法操作简单、诱导确切，适宜于鉴定干细胞的软骨分化潜能。

关键词：细胞培养间充质干细胞软骨细胞

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药物实验血脑屏障体外模型的建立及评价

中国医院药学杂志 2008年第7期28卷 534-537页

作者：陈剑鸿刘松青王章阳陈勇川孙凤军赵映兰第三军医大学西南医院药学部重庆400038

目的:建立模拟在体血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)模型并评价其形态和功能,为中枢神经系统药物的跨血脑屏障特性研究提供体外实验的模型依据。方法:将BALB/c小鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMVEC)和大... 详细信息

目的:建立模拟在体血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)模型并评价其形态和功能,为中枢神经系统药物的跨血脑屏障特性研究提供体外实验的模型依据。方法:将BALB/c小鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMVEC)和大鼠C6胶质瘤细胞分别接种于经明胶包被的Transwell多聚碳酯膜内室和外室,进行非接触双室共培养,建立细胞培养水平的BBB模型,分别考察模型形成前后BBB光镜、扫描电镜和细胞的跨内皮电阻值(transendothelial electrical resistance,TEERs)。结果:BMVEC培养至汇合后,扫描电镜显示细胞呈单层平铺生长并产生紧密连接,TEERs值较未形成屏障时明显升高(P<0.05)。结论:构建的BBB体外模型在形态学、跨内皮电阻和通透性方面具备了在体BBB的基本特性,适用于中枢神经系统药物跨BBB特性的研究。

关键词：中枢神经系统药物跨内皮电阻血脑屏障模型

某大型教学医院连续4年不同季节医院感染发病率调查

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中国感染控制杂志 2015年第10期14卷 691-693页

作者：王婷张波第三军医大学西南医院重庆400038

目的了解医院感染发病与季节变迁的关系,为季节性医院感染防控提供依据。方法对2010—2013年某院住院患者医院感染情况进行回顾性分析。结果共监测住院患者303 371例,发生医院感染10 376例,医院感染发病率为3.42%;感染例次12 919次,例... 详细信息

目的了解医院感染发病与季节变迁的关系,为季节性医院感染防控提供依据。方法对2010—2013年某院住院患者医院感染情况进行回顾性分析。结果共监测住院患者303 371例,发生医院感染10 376例,医院感染发病率为3.42%;感染例次12 919次,例次感染发病率4.26%。医院感染发病率第4季度(3.76%)最高,第2季度(3.20%)最低(P医院感染部位以下呼吸道(39.79%)为主,其次为上呼吸道(13.17%)、血液(10.39%)、手术部位(8.60%)、泌尿道(7.91%)。医院感染发病率>5%的科室由高至低分别是中心重症监护病房(ICU,24.61%)、血液科(17.47%)、康复科(13.16%)、神经外科(9.27%)、感染病科(9.17%)、胸心外科(7.67%)、肝胆外科(5.13%),其中中心ICU、神经外科医院感染高发部位均是下呼吸道、血液以及泌尿道。结论医院感染部位与季节变化关系密切,应根据医院感染季节变化及科室高发部位特点,针对性制定相应防控措施,减少医院感染的发生。

关键词：医院感染感染部位季节发病率监测

mtDNA与缺血缺氧性细胞损伤及疾病的关系

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中国病理生理杂志 2001年第11期17卷 65-66页

作者：陆松敏第三军医大学大坪医院野战外科研究所400042

线粒体有相对独立的遗传系统和生物合成机构。线粒体与缺血缺氧性细胞损伤和疾病密切相关。 1　线粒体DNA(mtDNA) 的结构特点高等动物mtDNA是共价闭合的双链DNA,长度为16.5kb左右。mtDNA是核外遗传物质，按线粒体DNA物理结构将其分... 详细信息

线粒体有相对独立的遗传系统和生物合成机构。线粒体与缺血缺氧性细胞损伤和疾病密切相关。 1　线粒体DNA(mtDNA) 的结构特点高等动物mtDNA是共价闭合的双链DNA,长度为16.5kb左右。mtDNA是核外遗传物质，按线粒体DNA物理结构将其分为编码区和非编码区。编码区共37个基因，编码22个tRNA，2个rRNA 和13条多肽；非编码区即线粒体基因组的控制区也称为D-loop(控制区),占mtDNA的6%左右。富含A-T碱基，遗传上属高变区。其碱基替换率比mtDNA其它区域高5-10倍，控制mtDNA的复制和转录。 mtDNA特点：①全部转录，无内含子。② 双链编码，高度浓缩。③ 有多个拷贝，其拷贝数存在器官组织的差异性。李晓东用定量Southern杂交法测定，发现大鼠骨骼肌的mtDNA 相对含量最高，心脑及肝肾依次减少（P＜0.05），肝肾相对含量无明显差别。④ 一个基因执行多个功能。由于mtDNA是游离的，缺少蛋白保护，又处在一个高氧化还原环境中，所以m tDNA比nDNA （核DNA）突变率高5-17倍，主要表现为缺如、插入和点突变。其基因损伤是导致氧化磷酸化中基因突变的主要部位。 2　缺血缺氧对线粒体酶含量及线粒体氧化磷酸化效率影响当缺血缺氧使参与线粒体氧化磷酸化的载体、酶损伤或底物缺乏时均会引起线粒体氧化磷酸化功能损伤，从而导致细胞内能量代谢障碍。失血性休克2 h NADH-CytC还原酶显著低于假处理组,3 h NADH-CoQ还原酶、琥珀酸-CoQ 还原酶、细胞色素还原酶、细胞色素氧化酶均明显低于假处理组。细胞色素C、a、b、c1 在休克时也明显减少，线粒体氧利用能力下降、线粒体内膜改变，细胞色素丢失；失血性休克线粒体复合体Ⅰ+Ⅲ和复合体Ⅳ、复合体Ⅰ、复合体Ⅱ以及复合体Ⅱ+Ⅲ电子传递活性皆明显下降。衰竭运动缺血缺氧也可引起心肌线粒体内膜流动性下降、NADH-CoQ还原酶和ATP酶活性下降。 3　缺血缺氧有关mtDNA变化 Zullo报告慢性脑缺氧时脑组织中mtDNA4977片断缺失率升高,8羟基鸟嘌呤(8-hydroxy guan ine)下降,出现缺血缺氧核苷酸异常。 Sauleda J等报告慢性阻塞肺病患者（COPD）骨骼肌细胞色素氧化酶及其呼吸链电子传递终末复合体(COX)的活性增加似乎是通过增加线粒体Ribos ome的数量来调节于转录水平后引起的。曾昭惠等报告：实验性脑缺血小鼠脑线粒体DNA片段缺失，12只中青年小鼠检出率为零，11只老年缺血鼠检出率为100%。富路等报告扩张性心肌病17例中4例存在mtDNA7436缺失，一例肥厚性心肌病和一例心梗患者也检出了mtDNA 7436缺失。另外，还有mtDNA10423缺失。袁祖贻等发现，慢性心力衰竭患者活检心肌DNA4977缺失频率为100%，缺失率为0.103%-1.028%之间。mtDNA4977 、 mtDNA7436缺失将影响OXpHOS中5种复合酶中4种复合酶蛋白的编码（复合酶Ⅰ、Ⅲ、 Ⅳ、Ⅴ），OXpHOS受抑制。周林等证明:自发性高血压大鼠心肌线粒体ATPase 6基因构象改变,8701位碱基由G变为A(G8701A),编码的第59位氨基酸由丙氨酸变成苏氨酸;(A8708G) ,编码的第61位氨基酸由组氨酸变成了精氨酸。给HeLa细胞缺氧从135 mmHg降至15 mmHg，mRNA减少＞95%，在48 h内和Po2成线性，但是rRNAs不变。mRNA在复氧4-6 h后恢复。 4　线粒体DNA和核DNA的协作关系哺乳动物mtDNA有不同于nDNA的复制和转录系统，但其复制、转录和翻译系统仍需nDNA 编码的多肽参与。此外，由核编码的存在于线粒体中的转录因子A（mtTFA）的转录可被核呼吸因子NRF-1和 NRF-2活化，而这些呼吸因子也能调控核编码的COX 亚基和F1F0-ATP酶亚基的表达，所以线粒体DNA和核DNA表达是协同的。 ROS可使哺乳动物细胞浆中转录因子NF-κB的无活性形式（由NF-κB二聚体和一个抑制亚基I κB组成）释放出有活性的NF-κB二聚体进入核内，与位于受NF-κB调控的基因上游增强子结合，使该基因转录增强。涉及的基因有引起炎症反应的基因、免疫细胞调节基因、分化基因等。因此，ROS又被称为“逆向调节的第二信使”。另外，在理化及某些生物学因素的作用下，线粒体膜可发生破碎、裂解，导致胞质中游离的mtDNA及mtDNA片段的形成，此时，当胞质中DNA酶及DNA酶样物质的质和量受到影响时，游离的mtDNA 或mtDNA片段可随机整合到核基因组中。目前对细胞内缺氧反应基因（hypoxia responsive genes，HRG）和缺氧诱

关键词：缺血缺氧疾病 mtDNA 性细胞生殖细胞

单纯疱疹病毒Ⅰ型在正常人眼睫状体潜伏的初步研究

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第三军医大学学报 2005年第5期27卷 429-431页

作者：陈康谢汉平第三军医大学西南医院全军眼科中心重庆400038

目的　研究正常人睫状体是否有单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏。方法　采用健康志愿者捐献的新鲜眼球15个 1/3眼球组织进行免疫组化染色,排除HSV -1急性感染。取出剩余的睫状体,1/3睫状体组织进行离心,取上清液与Vero细胞共培养,另外2/3睫... 详细信息

目的　研究正常人睫状体是否有单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏。方法　采用健康志愿者捐献的新鲜眼球15个 1/3眼球组织进行免疫组化染色,排除HSV -1急性感染。取出剩余的睫状体,1/3睫状体组织进行离心,取上清液与Vero细胞共培养,另外2/3睫状体组织提取DNA作PCR和凝胶电泳检测HSV -1的DNA和LAT。结果　15个标本免疫组化染色皆阴性,Vero细胞与睫状体组织上清液共培养结果为阴性,未观察到细胞病理学改变,PCR检测的15个标本中4、5、7号标本的HSV- 1DNA阳性,HSV -1LAT阴性,其他12个标本PCR检测HSV -1DNA阴性,HSV --1LAT阴性。结论　正常人睫状体存在HSV 1DNA。

关键词： HSV-1 潜伏睫状体

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28例小肠瘘患者完全胃肠外营养的护理

第三军医大学学报 2004年第22期26卷 2080-2081页

作者：宋娟张超第三军医大学西南医院普通外科重庆400038

肠瘘是肠管与空腔脏器、体腔或体腔外的异常通道.其发病率较高,并发症多,治疗难度大.许多患者可因长期营养不良而死亡.近30近来,全肠外营养的应用及强大控制感染使肠瘘的病死率由60%～70%下降到8%左右[1,2].中心静脉置管为肠瘘患者提供... 详细信息

肠瘘是肠管与空腔脏器、体腔或体腔外的异常通道.其发病率较高,并发症多,治疗难度大.许多患者可因长期营养不良而死亡.近30近来,全肠外营养的应用及强大控制感染使肠瘘的病死率由60%～70%下降到8%左右[1,2].中心静脉置管为肠瘘患者提供了长期肠外营养支持的途径,目前已广泛用于临床.1996年1月至2002年12月之间,我科对收治的28例肠瘘病人采用中心静脉插管行完全胃肠外营养治疗,效果较好,现将护理体会介绍如下.

关键词：肠瘘肠外营养护理

穿膜肽对HPV16E7细胞毒性T细胞表位MHC-Ⅰ类抗原提呈影响的初步研究

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中华皮肤科杂志 2007年第11期40卷 667-670页

作者：尹锐郝飞李芹阶夏汝山钟白玉第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038

目的研究穿膜肽(Tat_(49-57))对HPV16E7 MHC-Ⅰ类限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位(E7_(49-57))在抗原提呈细胞内经MHC-Ⅰ类途径被提呈的动力学影响。方法应用多肽固相合成技术,分别合成含穿膜肽与HPV(人乳头瘤病毒)16E7惟一HLA-A_2/H2-K^(... 详细信息

目的研究穿膜肽(Tat_(49-57))对HPV16E7 MHC-Ⅰ类限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位(E7_(49-57))在抗原提呈细胞内经MHC-Ⅰ类途径被提呈的动力学影响。方法应用多肽固相合成技术,分别合成含穿膜肽与HPV(人乳头瘤病毒)16E7惟一HLA-A_2/H2-K^(b+)限制性CTL表位E7_(49-57)的融合多肽,同时合成该表位N端自然延伸的抗原肽和无关对照肽。采用流式细胞仪(FACS)分析技术,检测抗原提呈细胞(APE)在不同时相点对上述各抗原肽进行MHC-Ⅰ类提呈的情况。结果在与APC孵育早期,Tat- E7_(49-57)在短时间内即被APC快速提呈并进入MHC-Ⅰ类抗原提呈途径,提呈的效率略低于E7_(49-57)(P>0.05);在孵育的后期,与Tat-E7_(49-57)组孵育的APC细胞表面,E7_(49-57)/K^b复合物存在时间较其他组明显延长(P<0.05)。结论在外源性抗原肽中引入穿膜肽可明显促进其MHC-Ⅰ类限制性CTL表位的提呈效率,从而有效增强外源性抗原肽的免疫原性。

关键词：乳头状瘤病毒,人抗原呈递穿膜肽 CTL表位

65例胎儿水肿综合征声像图特征的回顾性分析

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第三军医大学学报 2012年第2期34卷 119-121页

作者：段灵敏李锐张晓航郭燕丽张雪梅薛雅方刘建君王琰邓凤莲江书碧第三军医大学西南医院超声科重庆400038

目的探讨胎儿水肿综合征的声像图特征及其临床意义。方法对2005年6月至2010年12月本科门诊超声检查诊断为胎儿水肿综合征的65例胎儿的超声表现进行回顾性分析。结果胎儿水肿部位最常见的是腹腔(86.2%),其次是皮下(81.5%);水肿胎儿43.1%... 详细信息

目的探讨胎儿水肿综合征的声像图特征及其临床意义。方法对2005年6月至2010年12月本科门诊超声检查诊断为胎儿水肿综合征的65例胎儿的超声表现进行回顾性分析。结果胎儿水肿部位最常见的是腹腔(86.2%),其次是皮下(81.5%);水肿胎儿43.1%出现发育迟缓,58.5%合并其他系统畸形。结论胎儿水肿综合征的声像图特点有助于明确胎儿水肿的部位和程度,检出合并畸形,对临床早期干预及胎儿预后具有重要意义。

关键词：胎儿水肿综合征声像图特征回顾性分析