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杂合抗菌肽NK-LPd的设计、表达及抑菌活性评价

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食品工业科技 2023年第18期44卷 173-180页

作者：刘子琦刘正宇郭银虹王鸿飞姚波重庆科技学院化学化工学院重庆401331 工业发酵微生物重庆市重点实验室重庆401331

目的:了解杂合抗菌肽NK-LPd的抑菌活性,探讨进一步开发潜力。方法:用两个甘氨酸作接头连接NKlysin和Piscidin的活性片段,生物信息学技术预测杂合抗菌肽的理化性质和功能结构,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏好性优化杂合抗菌肽... 详细信息

目的:了解杂合抗菌肽NK-LPd的抑菌活性,探讨进一步开发潜力。方法:用两个甘氨酸作接头连接NKlysin和Piscidin的活性片段,生物信息学技术预测杂合抗菌肽的理化性质和功能结构,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏好性优化杂合抗菌肽NK-LPd基因序列,重叠延伸聚合酶链式反应(gene splicing by overlap extension polymerase chain reaction,SOE-PCR)扩增基因并与分泌型表达载体pPIC9K连接,通过化学法将其转化至毕赤酵母KM71感受态细胞中,经0.5%甲醇诱导表达和亲和纯化后获得杂合抗菌肽NK-LPd,评价其抗菌活性。结果:成功构建了KM71/pPIC9K-NK-LPd,经诱导表达5 d后上清液中获得了相对分子质量约6 kDa的表达产物,与预期大小相符;抗菌活性实验表明,NK-LPd对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有较强的抑菌活性,与母体肽相比,杂合抗菌肽NK-LPd的抑菌活性显著增强。结论:设计并在毕赤酵母KM71中分泌表达了杂合抗菌肽NK-LPd,其抑菌活性优于母体肽。本研究可为新型杂合抗菌肽的设计和生产提供技术参考。

关键词：杂合抗菌肽 NK-LPd 设计表达抑菌活性评价

过表达内源Trswo1基因提高里氏木霉纤维素酶对玉米秸秆水解效率的研究

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食品与发酵工业 2023年第14期49卷 60-66页

作者：莫易冉小琴王赞丞陈雨点彭念李江洪李勇昊重庆科技学院化学化工学院重庆401331 工业发酵微生物重庆市重点实验室(重庆科技学院) 重庆401331

利用β-葡萄糖苷酶的转糖苷活性制备廉价葡萄糖-槐糖混合物(mixture of glucose and sophorose, MGD)作为诱导物被成功用于诱导里氏木霉(Trichoderma reesei)高效合成纤维素酶,但蛋白质组学显示相比于纤维素作为诱导物,膨胀素基因(Trsw... 详细信息

利用β-葡萄糖苷酶的转糖苷活性制备廉价葡萄糖-槐糖混合物(mixture of glucose and sophorose, MGD)作为诱导物被成功用于诱导里氏木霉(Trichoderma reesei)高效合成纤维素酶,但蛋白质组学显示相比于纤维素作为诱导物,膨胀素基因(Trswo1)显著性低表达导致纤维素酶水解效率低。因此利用组成型强启动子丙酮酸脱羧酶1(pyruvate decarboxylase1, PDC1)在*** Rut C30中过表达内源Trswo1基因,2个***阳性转化子OEswo1-1和OEswo1-2的Trswo1基因转录水平分别提高了4.65倍和3.91倍,虽然*** OEswo1-1和OEswo1-2在MGD诱导下合成的纤维素酶活性、内切纤维素酶活性和外切纤维素酶活性与野生菌酶活性均无显著性差异,但所产纤维素酶对玉米秸秆的水解效率分别提高了6.98%和13.93%。进一步通过X射线衍射(X-ray diffraction, XRD)和扫描电镜(scanning electron microscope, SEM)显示水解效率提高主要是由于木质纤维素结晶度的降低,同时纤维结构有不同程度的疏松和崩解。该研究成果对***利用可溶性诱导物合成纤维素酶系中纤维素降解辅助蛋白含量低的问题具有一定意义。

关键词：生物炼制里氏木霉纤维素酶膨胀素玉米秸秆水解

水热法制备方糖状CaCO3@HA颗粒药物控释载体

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硅酸盐学报 2019年第12期47卷 1792-1800页

作者：张静李泓高海明曲晓航李波刘雪廖晓玲重庆科技学院纳微复合材料与器件重庆市重点实验室重庆401331 重庆科技学院纳微生物医学检测技术重庆市工程实验室重庆401331

利用水热法制备出新型方糖状介孔羟基磷灰石(CaCO3@HA)颗粒并评价了其生物学性能,结果表明:该方糖状介孔CaCO3@HA内核是方解石型CaCO3,外壳为HA,其相成分比例可以通过水热时间进行调控。水热反应1 h制备的样品比表面积(SBET)高达117.046... 详细信息

利用水热法制备出新型方糖状介孔羟基磷灰石(CaCO3@HA)颗粒并评价了其生物学性能,结果表明:该方糖状介孔CaCO3@HA内核是方解石型CaCO3,外壳为HA,其相成分比例可以通过水热时间进行调控。水热反应1 h制备的样品比表面积(SBET)高达117.046 m^2·g^-1,介孔孔径约为3.83 nm,对阿霉素盐酸盐(DOX)的装载能力高达95%。这种材料还具有良好的pH响应特性,可以控制释放DOX抑制肿瘤细胞的增殖。该方糖状介孔CaCO3@HA颗粒是一种良好的药物控释载体,具有广泛的应用前景。

关键词：水热法方糖状羟基磷灰石药物缓释

羟基磷灰石纳米纤维增强甲基丙烯酸酐改性明胶复合水凝胶的制备及性能

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复合材料学报 2020年第10期37卷 2572-2581页

作者：李泓张静陈可罗程严徐春波梁宸李波肖文谦廖晓玲重庆科技学院纳微复合材料与器件重庆市重点实验室重庆401331 重庆科技学院纳微生物医学检测技术重庆市工程实验室重庆401331

采用溶剂热法制备了具有超高长径比的羟基磷灰石(HAP)纳米纤维,并将其与甲基丙烯酸酐改性明胶(GelMA)结合,利用紫外光交联制备了HAP纳米纤维/GelMA复合水凝胶。通过SEM、XRD、力学测试、溶胀测试、降解测试、细胞培养等对HAP纳米纤维/Ge... 详细信息

采用溶剂热法制备了具有超高长径比的羟基磷灰石(HAP)纳米纤维,并将其与甲基丙烯酸酐改性明胶(GelMA)结合,利用紫外光交联制备了HAP纳米纤维/GelMA复合水凝胶。通过SEM、XRD、力学测试、溶胀测试、降解测试、细胞培养等对HAP纳米纤维/GelMA复合水凝胶进行结构表征和性能测试。SEM断面观察表明,HAP纳米纤维/GelMA水凝胶呈三维孔隙贯通的多孔结构。力学实验表明,HAP纳米纤维能有效增强水凝胶的弹性模量,且随着HAP纳米纤维添加量的增加,力学性能增强效果越明显。溶胀实验表明,当HAP纳米纤维质量分数为5.2wt%~14.2wt%时,HAP纳米纤维复合水凝胶的溶胀率变化不明显,当质量分数为18.2wt%时,溶胀率降低。降解实验表明,HAP纳米纤维的加入能有效保持水凝胶结构形态,使其更加稳定可控。细胞包裹培养实验表明,HAP纳米纤维/GelMA复合水凝胶能为细胞提供良好的三维生长环境,表现出优良的生物相容性。本实验制备的HAP纳米纤维/GelMA复合水凝胶在组织工程领域有着良好的应用前景。

关键词：羟基磷灰石纳米纤维甲基丙烯酸酐改性明胶复合水凝胶

甲基纤维素/聚乙烯醇负载纳米银(AgNPs@PVA/MC)复合膜的制备及其对瓯柑贮藏品质的影响

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食品工业科技 2025年第1期46卷 349-358页

作者：代帅帅吴伟杰房祥军陈杭君黄俊刘瑞玲陈慧芝牛犇郜海燕浙江科技大学生物与化学工程学院浙江杭州310023 浙江省农业科学院食品科学研究所农业农村部果品采后处理重点实验室农业农村部蔬菜采后保鲜与加工重点实验室(部省共建)全省生鲜食品智慧物流与加工重点实验室中国轻工业果蔬保鲜与加工重点实验室浙江杭州310021 省部共建农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江杭州310021

以甲基纤维素(MC)和聚乙烯醇(PVA)为复合膜基材,纳米银(AgNPs)为抑菌剂,甘油为增塑剂,制备具有抑菌作用的AgNPs@PVA/MC复合膜。通过考察不同质量分数(0%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%)AgNPs对复合膜的性能影响并对其外观、机械性能、微观... 详细信息

以甲基纤维素(MC)和聚乙烯醇(PVA)为复合膜基材,纳米银(AgNPs)为抑菌剂,甘油为增塑剂,制备具有抑菌作用的AgNPs@PVA/MC复合膜。通过考察不同质量分数(0%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%)AgNPs对复合膜的性能影响并对其外观、机械性能、微观结构及抑菌性等性能进行表征,为开发瓯柑贮藏保鲜材料提供理论支撑。结果表明,随着AgNPs含量增加,复合膜对桔青霉生长的抑制作用越显著(P<0.05)。其中,0.1%AgNPs含量的复合膜综合性能最为优异,其抗拉强度达到12.45 MPa、断裂伸长率为6.47%、水蒸气透过率为21.03×10^(-6)g·mm/(m^(2)·s·Pa)、氧气透过率为2.31×10^(-6)cm^(3)/(cm^(2)·s·Pa),扫描电子显微镜显示其横截面具有规则、紧密及分布均匀的AgNPs颗粒,红外光谱及热重分析表明其具有良好的结合性和热稳定性。0.1%AgNPs@PVA/MC复合膜可有效减小瓯柑贮藏期间失重率,降低可溶性固形物、可滴定酸及VC的消耗速率,延缓瓯柑的成熟并显著抑制致腐菌桔青霉的生长,能较好地保持瓯柑贮藏期品质,为瓯柑产业的可持续发展提供支撑。

关键词：瓯柑复合膜纳米银甲基纤维素聚乙烯醇贮藏品质

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基于原位交联增容策略的增强PLA/NR共混物界面相容性和发泡性能研究

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陕西科技大学学报 2025年第1期43卷 73-80,100页

作者：王广静邵亮苏晨阳马春燕姬占有陕西科技大学化学与化工学院中国轻工业轻化工助剂重点实验室陕西西安710021

聚乳酸(PLA)是目前最具发展潜力的生物材料之一,但其韧性差,极大的限制了在塑料领域的发展与应用.已有研究发现天然橡胶(NR)的引入可以改善其韧性差的缺陷,但二者为不相容体系,发泡性能差.因此,本文基于原位交联增容原理,采用1,4-双(叔... 详细信息

聚乳酸(PLA)是目前最具发展潜力的生物材料之一,但其韧性差,极大的限制了在塑料领域的发展与应用.已有研究发现天然橡胶(NR)的引入可以改善其韧性差的缺陷,但二者为不相容体系,发泡性能差.因此,本文基于原位交联增容原理,采用1,4-双(叔丁基过氧异丙基)苯(BIPB)增强PLA和NR的界面相容性,并以超临界二氧化碳(scCO_(2))发泡技术制备了PLA/NR复合发泡材料.探究了不同BIPB含量对复合材料界面相容性、韧性及复合材料发泡行为的影响.结果表明,BIPB的引入显著增强了PLA/NR复合材料的相容性、韧性及发泡性能.当BIPB含量为0.25 phr时,PLA/NR复合材料的断裂伸长率从原来的25.75%增加到35.24%,提升了1.37倍;表观密度从初始的0.565 g·cm^(-3)下降至0.373 g·cm^(-3);平均泡孔尺寸从7.5μm下降至5.0μm.

关键词：聚乳酸天然橡胶 1,4-双(叔丁基过氧异丙基)苯超临界发泡相容性

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荧光碳点的合成及抗菌活性

化学研究与应用 2022年第10期34卷 2525-2530页

作者：周莉佳杨金华池玉婷柴水琴重庆科技学院工业发酵微生物重庆市重点实验室重庆401331

耐药病原体感染是全球公共卫生安全的主要威胁之一,开发无耐药性的新型抗菌剂迫在眉睫。碳点作为一种新型纳米材料,具有低毒性和良好的水溶性,是新型抗菌剂的极佳候选。本文以甘草酸和柠檬酸为原料,通过简单的一步水热法制备了蓝色发光... 详细信息

耐药病原体感染是全球公共卫生安全的主要威胁之一,开发无耐药性的新型抗菌剂迫在眉睫。碳点作为一种新型纳米材料,具有低毒性和良好的水溶性,是新型抗菌剂的极佳候选。本文以甘草酸和柠檬酸为原料,通过简单的一步水热法制备了蓝色发光的CDs,其最佳激发波长为360 nm,最佳发射波长为436 nm。CDs表现出良好的抑菌活性,对金黄色葡萄球菌的MIC值为0.20 mg/mL,对大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌等革兰氏阴性菌的MIC值分别为0.16 mg/mL、0.20 mg/mL、0.16 mg/mL。扫描电镜(SEM)结果证实,碳点处理后,大肠杆菌细胞结构被明显破坏,从而达到抗菌的效果。本研究对CDs作为新型抗菌剂的发展具有重要意义。

关键词： CDs 生物相容性耐药性抗菌活性

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基于TCF的荧光探针的设计与应用研究进展

化学试剂 2022年第3期44卷 339-348页

作者：李朝政陈骏杨金华周莉佳裴叔宸重庆科技学院工业发酵微生物重庆市重点实验室重庆401331

2-二氰基亚甲基-3-氰基-4,5,5-三甲基-2,5-二氢呋喃(TCF)是一个强电子供体,广泛应用于光学材料和分子荧光探针。同时,TCF结构简单,活性位点少,能通过简单的反应与苯基偶联。并且基于TCF的分子荧光探针一般具有大的斯托克斯位移和较高的... 详细信息

2-二氰基亚甲基-3-氰基-4,5,5-三甲基-2,5-二氢呋喃(TCF)是一个强电子供体,广泛应用于光学材料和分子荧光探针。同时,TCF结构简单,活性位点少,能通过简单的反应与苯基偶联。并且基于TCF的分子荧光探针一般具有大的斯托克斯位移和较高的量子产率。根据TCF荧光探针的检测对象,将其分为阴阳离子、生物分子和其他分子,并从分子结构、性能、机理出发,综述了近5年来国内外基于TCF的荧光探针在设计和检测方面的新进展。最后提出了构建新型TCF类分子荧光探针面临的挑战和发展方向。

关键词： TCF 荧光探针响应机理设计研究进展

荔枝状CaCO_(3)@HA/Fe_(3)O_(4)磁性介孔多级微球的制备

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无机材料学报 2019年第9期34卷 925-932页

作者：肖文谦张静李克江邹新宇蔡昱东李波刘雪廖晓玲重庆科技学院纳微复合材料与器件重庆市重点实验室

为了克服常规的生物陶瓷微球缺乏靶向功能的缺点,本研究制备了内核为CaCO3,外壳为磁性可调控羟基磷灰石(HA)的新型荔枝状多孔微球。结果表明:抗肿瘤药物阿霉素(DOX)能有效地负载于磁性HA微球上,并具备磁性靶向功能。此外, HA外壳具有良... 详细信息

为了克服常规的生物陶瓷微球缺乏靶向功能的缺点,本研究制备了内核为CaCO3,外壳为磁性可调控羟基磷灰石(HA)的新型荔枝状多孔微球。结果表明:抗肿瘤药物阿霉素(DOX)能有效地负载于磁性HA微球上,并具备磁性靶向功能。此外, HA外壳具有良好的生物相容性和pH响应特性,可在模拟酸性肿瘤细胞环境中控制DOX的释放,有效杀死肿瘤细胞,并在模拟正常细胞培养环境中减少对正常细胞的毒副作用。这种新型的微球材料具有超顺磁性能,且微结构可控,是一种智能化药物控释微球载体,可以灵敏地释放DOX,从而有效地实现抗肿瘤活性。

关键词：核壳结构微球羟基磷灰石 DOX