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基于基因共表达网络分析氧诱导小鼠视网膜新生血管模型免疫相关靶基因

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国际眼科杂志 2024年第6期24卷 857-863页

作者：袁琳慧刘新中国辽宁省大连市第三人民医院眼科 116033

目的:通过生物信息学方法探究氧诱导小鼠视网膜新生血管(OIR)模型中与免疫相关的关键基因以及免疫细胞浸润水平。方法:从GEO数据库获取基因芯片数据集,采用R语言环境中“limma”包获得差异表达基因(DEGs),并进行GO功能富集和KEGG通路分... 详细信息

目的:通过生物信息学方法探究氧诱导小鼠视网膜新生血管(OIR)模型中与免疫相关的关键基因以及免疫细胞浸润水平。方法:从GEO数据库获取基因芯片数据集,采用R语言环境中“limma”包获得差异表达基因(DEGs),并进行GO功能富集和KEGG通路分析,基于CIBERSORT算法进行数据集免疫细胞浸润分析,通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选与免疫相关基因模块中的DEGs,利用STRING在线数据库及Cytoscape软件构建蛋白质互作(PPI)网络,利用cytoHubba模块筛选出最终的靶基因。结果:筛选出467个表达具有显著差异性的基因,其中270个基因表达上调,197个基因表达下调。免疫浸润分析结果显示仅辅助型T细胞2(Th2 cells)高表达,且差异具有显著性(P<0.05)。WGCNA分析后,与免疫最相关模块中差异基因为66个,构建PPI网络后利用插件筛选出5个关键基因,即血管性血友病因子(vWF)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、Serping1、凋亡诱导因子1(AIF1)以及信号传导蛋白和转录激活物(STAT3)。结论:采用生物信息学的方式进行OIR模型的免疫细胞浸润分析及筛选出与免疫相关的关键基因,可为视网膜新生血管性疾病的进一步研究与诊疗提供依据。

关键词：氧诱导视网膜新生血管生物信息学免疫浸润蛋白质互作网络差异基因免疫细胞小鼠

circRNA CPT1A调控PTEN在糖尿病视网膜病变患者神经组织病变中的作用

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眼科新进展 2024年第3期44卷 212-216页

作者：尹丹韩莎莎刘颖李跃峰李勇衡水市人民医院眼科河北省衡水市053000

目的研究circRNA肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)在糖尿病视网膜病变(DR)患者中的表达情况,并探讨其对神经组织病变的作用。方法选取我院2019年1月至2022年1月收治的2型糖尿病患者80例(102眼),其中无DR(NDR)患者22例(28眼)为NDR组,非增生型... 详细信息

目的研究circRNA肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)在糖尿病视网膜病变(DR)患者中的表达情况,并探讨其对神经组织病变的作用。方法选取我院2019年1月至2022年1月收治的2型糖尿病患者80例(102眼),其中无DR(NDR)患者22例(28眼)为NDR组,非增生型DR(NPDR)患者38例(48眼)为NPDR组,增生型DR(PDR)患者20例26眼为PDR组。采用OCTA检查患者视盘周围视网膜神经纤维层(pRNFL)厚度、黄斑神经节细胞复合体(GCC)厚度,采用Western blot检测患者外周血磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN),采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测患者外周血circRNA CPT1A。比较3组患者外周血circRNA CPT1A、PTEN以及pRNFL、GCC厚度,并采用Pearson相关分析患者circRNA CPT1A与PTEN、pRNFL厚度、GCC厚度的相关性。结果 PDR组患者外周血circRNA CPT1A均高于NDR组、NPDR组,而PDR组患者外周血PTEN均低于NDR组、NPDR组(均为P0.05)。Pearson相关性分析结果显示,患者外周血circRNA CPT1A与PTEN呈负相关性(P<0.05)。随着疾病严重程度的增加,pRNFL以及GCC厚度均呈降低趋势,NDR组患者的整体、上半部分、下半部分pRNFL厚度以及GCC厚度均高于NPDR组(均为P<0.05),NPDR组患者以上指标均高于PDR组(均为P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,患者外周血circRNA CPT1A分别与受检眼的整体、上半部分、下半部分pRNFL厚度以及GCC厚度均呈负相关性(均为P<0.05)。结论随着DR严重程度的增加,DR患者外周血circRNA CPT1A呈增加趋势,且与外周血PTEN、pRNFL厚度以及GCC厚度呈负相关性,其作用机制可能为circRNA CPT1A负性调控PTEN的表达,从而参与DR的发生、发展。

关键词： circRNA肉碱棕榈酰转移酶1A 磷酸酶-张力蛋白基因糖尿病视网膜病变神经组织病变

SR8278改善时差所致小鼠泪腺功能紊乱的转录组学分析

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眼科新进展 2024年第4期44卷 264-269页

作者：黄深振齐迪裴晓婷路顶立司宏丽黄杜鎏睿张文潇巴梦茹轩书婷李志杰郑州大学人民医院河南省人民医院河南大学人民医院河南省立眼科医院河南省眼科研究所河南省郑州市450003

目的探讨核受体亚家族1 D组成员1(NR1D1)合成拮抗剂SR8278在改善时差诱导的小鼠眶外泪腺结构和功能损伤方面的作用及其机制。方法 36只健康的8~10周龄野生型C57BL/6J小鼠在12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱内适应2周后随机分为3组:... 详细信息

目的探讨核受体亚家族1 D组成员1(NR1D1)合成拮抗剂SR8278在改善时差诱导的小鼠眶外泪腺结构和功能损伤方面的作用及其机制。方法 36只健康的8~10周龄野生型C57BL/6J小鼠在12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱内适应2周后随机分为3组:正常组(12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱饲养)、时差组(8 h前移的12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱饲养)及时差+SR8278组(8 h前移的12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱饲养,并给予25 mg·kg^(-1)的SR8278干预),每组12只,共干预5 d。干预结束后,收集各组小鼠的活动度和核心体温,记录小鼠的泪液分泌量,并对泪腺组织进行称重和泪腺细胞大小测量。采用免疫组织化学方法对小鼠眶外泪腺进行组织学评估。提取泪腺RNA进行包含NR1D1的高通量RNA-Seq分析,并对获得的转录组数据进行KEGG和GO功能富集分析。结果与正常组相比,时差组小鼠白天活动度较高,夜间活动度较低,白天核心体温较高,夜间核心体温较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与时差组相比,时差+SR8278组小鼠白天活动度较低,夜间活动度较高,白天核心体温较低,夜间核心体温较高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与正常组相比,时差组小鼠泪腺重量及泪液分泌量降低,泪腺细胞增大,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与时差组相比,时差+SR8278组小鼠泪腺重量及泪液分泌量增加,泪腺细胞减小,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与正常组相比,时差组小鼠夜晚泪腺中NR1D1表达量较高;与时差组相比,时差+SR8278组小鼠夜晚泪腺中NR1D1表达量较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。生物信息学分析显示,时差组和时差+SR8278组共有947个显著性差异基因,其中显著性上调基因43个,显著性下调基因904个,信号通路差异最大的为Notch信号通路。结论 SR8278通过靶向抑制NR1D1,有效增强了时差小鼠的泪液分泌功能,其过程可能是通过Notch信号通路完成的。

关键词：时差 SR8278 泪腺功能紊乱小鼠

HTRA3基因对脉络膜新生血管和M2型巨噬细胞极化的影响

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眼科新进展 2024年第4期44卷 275-281页

作者：肇莉莉王萍孙连义马为梅张乐喻磊西安市人民医院(西安市第四医院) 陕西省眼科医院西北大学附属人民医院眼科陕西省西安市710004 西北妇女儿童医院眼科陕西省西安市710003

目的探讨HtrA丝氨酸肽酶3(HTRA3)基因对脉络膜新生血管(CNV)和M2型巨噬细胞极化的影响。方法收集30例湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)患者(wAMD组)和30例同期健康体检者(健康组)的空腹静脉血,通过qRT-PCR检测血清HTRA3 mRNA水平。将RF/6... 详细信息

目的探讨HtrA丝氨酸肽酶3(HTRA3)基因对脉络膜新生血管(CNV)和M2型巨噬细胞极化的影响。方法收集30例湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)患者(wAMD组)和30例同期健康体检者(健康组)的空腹静脉血,通过qRT-PCR检测血清HTRA3 mRNA水平。将RF/6A细胞随机分为对照组、NC-sh组和HTRA3-sh组,使用Lipofectamine2000将NC-shRNA和HTRA3-shRNA慢病毒载体分别转染到NC-sh组和HTRA3-sh组RF/6A细胞中,通过qRT-PCR和Western blot检测HTRA3的转染情况。将RF/6A细胞随机分为N组、H组、H+NC-sh组和H+HTRA3-sh组,细胞转染后,N组RF/6A细胞在完全RPMI 1640培养基中进行常氧培养,其他组细胞在添加200 mmol·L^(-1)氯化钴(CoCl_(2))的RPMI 1640培养基中进行低氧培养,使用Matrigel测定小管形成。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、CNV组、CNV+NC-sh组和CNV+HTRA3-sh组,每组12只。对照组为未建模的小鼠,其他组为激光诱导的CNV模型小鼠。向CNV+NC-sh组和CNV+HTRA3-sh组小鼠玻璃体内分别注射1μL滴度为1×10^(11)TU·mL^(-1)的NC-shRNA和HTRA3-shRNA慢病毒载体。对照组和CNV组小鼠注射PBS。注射后7 d,对小鼠进行荧光素眼底血管造影(FFA)检测和眼球苏木精伊红(HE)染色。通过qRT-PCR检测RF/6A细胞或各组小鼠脉络膜组织中HTRA3、类几丁质酶3样蛋白3(Ym-1)、精氨酸酶1(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平。通过Western blot检测RF/6A细胞或脉络膜组织中HTRA3、VEGF和细胞核核因子κB(NF-κB) p65的蛋白表达水平。结果与健康组比较,wAMD组患者的血清HTRA3 mRNA水平升高(t=11.804,P<0.001)。与对照组和NC-sh组比较,HTRA3-sh组RF/6A细胞的HTRA3 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。与N组比较,H组RF/6A细胞的闭合管腔数量、HTRA3和VEGF的mRNA和蛋白表达水平均增加(均为P<0.05)。与H+NC-sh组比较,H+HTRA3-sh组RF/6A细胞的闭合管腔数量、HTRA3和VEGF的mRNA和蛋白表达水平均减少(均为P<0.05)。与对照组比较,CNV组小鼠的HTRA3的mRNA和蛋白表达水平增加,CNV相对荧光强度升高,Ym-1和Arg-1 mRNA水平升高,iNOS和COX-2 mRNA水平降低,细胞核NF-κB p65蛋白表达水平升高(均为P<0.05)。与CNV+NC-sh组比较,CNV+HTRA3-sh组小鼠的HTRA3的mRNA和蛋白表达水平减少,CNV相对荧光强度降低,Ym-1和Arg-1 mRNA水平降低,iNOS和COX-2 mRNA水平升高,细胞核NF-κB p65蛋白表达水平降低(均为P<0.05)。结论下调HTRA3可抑制CNV形成和M2型巨噬细胞极化,HTRA3可能是防治wAMD的重要潜在靶点。

关键词：湿性年龄相关性黄斑变性脉络膜新生血管 HtrA丝氨酸肽酶3 M2型巨噬细胞极化

2020-2022年重庆市璧山区婚检人群乙肝和HIV与梅毒筛检报告

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中华医院感染学杂志 2024年第8期34卷 1183-1186页

作者：刘显川潘莲邱娅张岩岩廉静焦震华储成顶重庆市璧山区妇幼保健院检验科重庆402760 重庆市璧山区人民医院输血科重庆402760 安徽医科大学公共卫生学院安徽合肥230032

目的婚检人群进行乙肝表面抗原(HBsAg)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)、人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体三项指标筛查。方法回顾性分析重庆市璧山区2020年1月-2022年12月婚检人群,其中筛查HBsAg24684例,梅毒螺旋体抗体筛查25140例,HIV抗体筛查2355... 详细信息

目的婚检人群进行乙肝表面抗原(HBsAg)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)、人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体三项指标筛查。方法回顾性分析重庆市璧山区2020年1月-2022年12月婚检人群,其中筛查HBsAg24684例,梅毒螺旋体抗体筛查25140例,HIV抗体筛查23553例。同时回顾性分析2018年度、2019年度婚检人员的相应数据。所有婚检人员均于空腹状态下抽取静脉血液5ml,对血清进行离心分离,采用酶联免疫吸附法对HBsAg、抗-TP、HIV抗体进行检验,了解婚检人群各指标阴性和阳性感染情况,并对不同年度,不同性别,不同年龄段的婚检人群进行汇总,行统计学分析。结果2020-2022年间婚检人群HBsAg检测阳性比例6.34%,抗-TP检测阳性比例2.46%,HIV检测阳性比例为0.34%;不同性别感染性疾病指标分布比例有一定差别:HBsAg阳性率以男性为高(P三项感染指标分布比例差异均有统计学意义(P医院感染的发生。

关键词：婚检筛查乙肝表面抗原梅毒螺旋体抗体人类免疫缺陷病毒抗体血液传播母婴传播医护人员医院感染

P2Y2受体激动剂联合睑板腺热敷按摩对老年干眼症患者视觉质量、泪膜稳定性的影响

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 54-57页

作者：谢丽丽刘颖梁冬梅张贺鹏韩莎莎郭彦芳安通李跃峰衡水市人民医院眼科河北衡水053000

目的探究P2Y2受体激动剂-地夸磷索钠滴眼液联合睑板腺热敷按摩治疗老年干眼症的临床疗效及其对患者视觉质量、泪膜稳定性的影响。方法选取2019年4月至2022年3月衡水市人民医院眼科就诊的126例老年干眼症病患者,根据入院时间分为对照组... 详细信息

目的探究P2Y2受体激动剂-地夸磷索钠滴眼液联合睑板腺热敷按摩治疗老年干眼症的临床疗效及其对患者视觉质量、泪膜稳定性的影响。方法选取2019年4月至2022年3月衡水市人民医院眼科就诊的126例老年干眼症病患者,根据入院时间分为对照组和干预组,其中对照组58例,入院时间为2019年4月至2020年9月,干预组68例,入院时间为2020年10月至2022年3月。患者均接受常规药物对症治疗,对照组在此基础上加用睑板腺热敷按摩,干预组在对照组基础上加用地夸磷索钠滴眼液,对其进行为期4 w的治疗。比较两组临床疗效和治疗前后的视觉质量、泪膜稳定性、眼部其他情况及泪液中炎性因子的表达水平。结果两组治疗前视觉质量、泪膜稳定性、角膜荧光素染色评分(FL)、眼表疾病指数(OSDI)量表评分、睑板腺功能评分(MGYSS)及炎性因子白细胞介素(IL)-6和前列腺素(PG)E2的表达水平均无统计学差异(P>0.05),两组治疗后调制传递函数截止频率(MTF cut off)、斯特列尔比(SR)、泪膜破裂时间(BUT)和泪液分泌试验(SⅠT)评分均显著上升,且干预组显著高于对照组(P<0.05),MGYSS、OSI、FL、OSDI评分及IL-6和PGE2表达均显著下降,且干预组显著低于对照组(P<0.05)。干预组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论P2Y2受体激动剂-地夸磷索钠滴眼液联合睑板腺热敷按摩能够提高老年干眼症患者的临床疗效,联合治疗后患者视觉质量、泪膜稳定性、OSDI量表、FL评分及MGYSS评分均能得到改善,炎症反应也能减轻。

关键词： P2Y2受体激动剂睑板腺视觉质量泪膜稳定性干眼症

儿童脑源性视觉障碍诊断与治疗专家共识(2023)

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中华儿科杂志 2024年第5期62卷 402-411页

作者：中华医学会儿科学分会康复学组中华医学会儿科学分会眼科学组肖农梁建宏不详重庆医科大学附属儿童医院康复医学科重庆400014 北京大学人民医院眼科北京100044

脑源性视觉障碍是一组由中枢视觉通路受损导致的视觉功能障碍症候群。脑源性视觉障碍对儿童的运动、认知等方面影响深远,早发现、早干预至关重要。基于临床实践的迫切需要,中华医学会儿科学分会康复学组和眼科学组组织国内相关专家联合... 详细信息

脑源性视觉障碍是一组由中枢视觉通路受损导致的视觉功能障碍症候群。脑源性视觉障碍对儿童的运动、认知等方面影响深远,早发现、早干预至关重要。基于临床实践的迫切需要,中华医学会儿科学分会康复学组和眼科学组组织国内相关专家联合制订“儿童脑源性视觉诊断与治疗专家共识(2023)”,对儿童脑源性视觉障碍的定义、评估、诊断及治疗提出了15条推荐意见。

关键词：中华医学会眼科学专家共识脑源性推荐意见视觉障碍儿科学分会临床实践

TROPIS术联合中药外敷治疗高位肛瘘疗效及术后功能分析

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中华中医药学刊 2024年

作者：吕文辉刘远成朱竞彭西兰刘洋熊敏安徽医科大学第三附属医院合肥市第一人民医院滨湖院区

目的探讨经肛括约肌间切开（transanalopeningofintersphinctericspace，TROPIS）手术联合中药外敷治疗高位肛瘘的方法及对术后1年肛门功能、复发的影响。方法选择2022年1月-2022年12月我院收治的76例高位肛瘘行手术治疗的患者作为研... 详细信息

目的探讨经肛括约肌间切开（transanalopeningofintersphinctericspace，TROPIS）手术联合中药外敷治疗高位肛瘘的方法及对术后1年肛门功能、复发的影响。方法选择2022年1月-2022年12月我院收治的76例高位肛瘘行手术治疗的患者作为研究对象，最终纳入60例患者，采用病例对照研究方法，按治疗方式不同分为观察组（采用TROPIS术联合中药外敷治疗）30例与对照组（采用用TROPIS术治疗）30例。比较两组术后1d、7d创面疼痛、渗液评分。分别于术前和术后1年，采用多功能胃肠动力学检查系统测定肛管静息压、肛管最大收缩压等肛门功能指标水平，并采用Wexner失禁评分评估，随访1年，统计比较两组术后并发症发生率，比较两组复发率。结果观察组术后1d、7d创面疼痛、渗液评分均低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。术后1年，两组肛管静息压、肛管最大收缩压均高于术前，Wexner失禁评分低于术前，而观察组肛管静息压、肛管最大收缩压均高于对照组，Wexner失禁评分低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组并发症发生率6.67%低于对照组30%，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。随访1年，观察组发生率1例（3.33%）低于对照组6例（20%），但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 TROPIS术联合中药外敷治疗高位肛瘘效果显著，能够减轻患者创面疼痛，减少患者创面渗液，改善肛门功能，且术后并发症较少，复发率低。

关键词： TROPIS手术中药外敷高位肛瘘术后肛门功能复发率

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中国老年学杂志 2024年第9期44卷 2206-2210页

作者：罗立王乃群张红萍张小莲宜春市人民医院输血管理科宜春市人民医院院感科

目的探究姜黄素(Cur)对输血相关急性肺损伤(TRALI)大鼠肺损伤及肺组织Toll样受体(TLR)4、高迁移率族蛋白(HMG)B1表达的影响。方法将80只SPF级随机分为假手术组、TRALI组、Cur-200组、Cur-400组及Cur-800组，每组16只，给药1 w。建立TR... 详细信息

目的探究姜黄素(Cur)对输血相关急性肺损伤(TRALI)大鼠肺损伤及肺组织Toll样受体(TLR)4、高迁移率族蛋白(HMG)B1表达的影响。方法将80只SPF级随机分为假手术组、TRALI组、Cur-200组、Cur-400组及Cur-800组，每组16只，给药1 w。建立TRALI动物模型，处死大鼠。采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理变化，检测BALF细胞总数和中性粒细胞百分比，肺组织中免疫因子水平白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、人巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2肺组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量，Western印迹检测TLR4、CD40、核因子(NF)-κB、HMGB1蛋白表达量，选取合理蛋白与Cur进行分子对接。结果与TRALI组相比，Cur-200组、Cur-400组和Cur-800组肺组织干/湿重明显减小、肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞百分比明显减小，肺组织免疫因子IL-1β、TNF-α、MIP-2水平均明显降低(均P<0.01);Cur-200组GSH水平明显升高，MDA均明显降低(P<0.05,P<0.01),Cur-400组和Cur-800组肺组织氧化应激因子SOD、GSH水平明显升高，MDA明显降低(P<0.01)。与TRALI组相比，Cur-800组肺组织TLR4、CD40、NF-κB蛋白表达水平明显降低，而HMGB1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。分子对接结果表明，与TLR4关键靶点对接较好(结合能为-6.7 kCal/mol),其在TRALI能发挥较好的治疗作用。结论 Cur通过调节免疫因子、氧化应激因子及TLR4、CD40、NF-κB和HMGB1蛋白表达并经过分子对接验证TLR4对TRALI具有较好的亲和力，达到缓解TRALI症状。

关键词：姜黄素输血相关急性肺损伤 Toll样受体(TLR)4 高迁移率族蛋白(HMG)B1