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miR-382通过PGC-1α对三阴性乳腺癌细胞株4T1生物学特性的影响

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第三军医大学学报 2019年第15期41卷 1415-1422页

作者：雷优扬周华代朦靳鑫明佳重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺外科

目的研究乳腺癌4T1细胞内miR-382下调PGC-1α对细胞生物学特性的影响。方法①以4T1细胞作为研究对象,miR-382mimics或抑制性探针anti-miR-382转染4T1细胞后,以qRT-PCR检测4T1中miR-382水平变化,qRT-PCR和Western blot检测各组PGC-1α的表达水平变化;②荧光素酶报告基因检测miR-382与PGC-1α3′UTR的结合位点;③将miR-382mimics或对照miR分别与pCDNA3.1或pCDNA-PGC1α共转染于4T1细胞,Transwell迁移实验检测细胞迁移能力的变化;CCK8实验检测细胞增殖活力的变化;皮下移植瘤实验和尾静脉肺移植瘤实验分别检测小鼠体内肿瘤生长及肺转移的变化。结果转染miR-382 mimics之后乳腺癌细胞PGC-1α表达明显降低(P<0.05),转染抑制性探针anti-miR-382后PGC-1α表达明显升高(P<0.05);miR-382与PGC-1α存在靶向调控核心序列,其作用位点位于PGC-1α3′UTR 565-582(核心序列ACAACTT)。相比对照+pCDNA3.1组,miR-382+pCDNA3.1组的细胞迁移和增殖活力明显降低,4T1皮下移植瘤体积和尾静脉移植瘤肺转移灶的面积显著减小(P<0.05);对照+pCDNA-PGC-1α较对照+pCDNA3.1组,细胞迁移和增殖活力明显提高,4T1皮下移植瘤体积和尾静脉移植瘤肺转移灶的面积显著增加(P<0.05);miR-382的抑瘤效应因PGC-1α过表达而被阻断。结论miR-382可能通过PGC-1α抑制4T1细胞株的增殖和肺转移能力,其作用位点可能位于PGC-1α3′UTR 565-582。

关键词：三阴性乳腺癌 microRNA-382 PGC-1α

乌司他丁抑制CCL17/CCL22-CCR4介导的小鼠乳腺癌肝转移

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中国癌症杂志 2018年第4期28卷 248-255页

作者：李霞印国兵程熙潘倍倍李顺波代朦郭丹重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺外科重庆400010

背景与目的:越来越多的研究表明趋化因子及其受体在癌症的发生、发展和转移中起关键作用。本文研究了乌司他丁(ulinastatin)对胸腺和活化调节趋化因子(thymus and activation-regulated chemokine,TARC)即CCL17/巨噬细胞来源的趋化因子(... 详细信息

背景与目的:越来越多的研究表明趋化因子及其受体在癌症的发生、发展和转移中起关键作用。本文研究了乌司他丁(ulinastatin)对胸腺和活化调节趋化因子(thymus and activation-regulated chemokine,TARC)即CCL17/巨噬细胞来源的趋化因子(macrophage-derived chemokine,MDC)即CCL22-CC族趋化因子受体4(CC chemokine receptor 4,CCR4)信号通路介导的乳腺癌肝转移的影响及其作用机制。方法:通过小鼠乳腺脂肪垫(mfp)接种4T1乳腺癌细胞的方式构建小鼠乳腺癌模型,15 d后取小鼠乳腺肿瘤,并记录乳腺肿瘤的质量;采用免疫组织化学法检测乳腺肿瘤组织中CCR4及肝脏转移瘤中CCL22、CCL17蛋白的表达;采用慢病毒转染的方式抑制4T1乳腺癌细胞CCR4基因,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测抑制效果,并以同样方式进行小鼠乳腺成瘤并观察肿瘤生长情况;用三种不同浓度乌司他丁处理4T1细胞荷瘤小鼠,15 d后采用免疫组织化学法检测乳腺癌组织中CCR4及肝脏组织中CCL22及CCL17的表达,采用Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)分别检测肝脏组织中TGF-β的表达以及microRNA-34a和microRNA-31的含量,并进行TGF-β和microRNA-34a、microRNA-31、CCL22以及CCL17的相关性分析。结果:小鼠乳腺癌组织高表达CCR4,肝脏转移瘤高表达CCL22和CCL17;沉默4T1乳腺癌细胞CCR4的表达,可抑制乳腺癌成瘤性;乌司他丁抑制CCR4、TGF-β、CCL22、microRNA-31和CCL17的表达,促进microRNA-34a的表达。结论:乌司他丁具有抑制乳腺癌肝转移的作用,其具体机制可能与乌司他丁通过TGF-β-microRNA-34a-CCL22轴及microRNA-31-TGF-β-CCL17轴抑制肝脏组织中与乳腺癌肝转移密切相关的CCL17/CCL22-CCR4信号通路有关。

关键词：乳腺癌肝转移乌司他丁 CCR4 CCL22 CCL17

乌司他丁和泰索帝对乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其机制

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中国生物制品学杂志 2011年第2期24卷 203-207页

作者：高峰孙治君赵晓亮罗杰重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺胰腺外科重庆400010

目的探讨乌司他丁(Ulinastatin for injection,UTI)和泰索帝(Taxotere,TXT)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231(ER-)增殖、侵袭及血管内皮生长因子-C(Vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)、碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblastgrowth factor,bFGF)、神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)mRNA转录水平的影响。方法体外培养MDA-MB-231细胞,随机分为4组:对照组(只加RPMI1640培养液)、UTI组(终浓度800 U/ml)、TXT组(3.7μg/ml)、UTI+TXT组(800 U/ml UTI+3.7μg/ml TXT)。给药后24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖水平;24 h,采用Transwell侵袭小室法检测细胞侵袭能力,实时荧光定量PCR法检测细胞VEGF-C、bFGF、NGF基因mRNA的转录水平。结果 UTI、TXT及UTI+TXT呈时间依赖性抑制MDA-MB-231细胞的增殖(P均0.05);对细胞增殖、侵袭及VEGF-C、bFGF、NGF基因mRNA转录的抑制作用UTI+TXT>TXT>UTI。结论 UTI和TXT均可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭,UTI可增强TXT的抑制作用,其机制可能与下调VEGF-C、bFGF、NGF mRNA的表达有关。

关键词：乌司他丁泰索帝乳腺肿瘤细胞增殖肿瘤侵润药理作用分子作用机制

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乳腺癌多学科团队实践进展

中国护理管理 2019年第3期19卷 473-476页

作者：梁寅寅陈文均重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺外科重庆市400000

本文对国内外乳腺癌多学科团队(MDT)的发展概况、组织成员、运作模式、实践效果以及护理人员在MDT中的角色与职责等进行综述,为制定适合我国的乳腺癌多学科团队运作模式提供借鉴。

关键词：乳腺癌多学科团队护理

乌司他丁对乳腺癌细胞迁移、黏附、侵袭能力的影响及机制

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重庆医学 2012年第26期41卷 2685-2688页

作者：张超孙治君重庆医科大学附属第二医院甲状腺乳腺外科 400010

目的探讨乌司他丁(UTI)对乳腺癌MDA-MB-231雌激素受体阴性(ER-)和MCF-7ER阳性(ER+)细胞迁移、黏附、侵袭的影响及机制。方法体外培养MDA-MB-231和MCF-7细胞,并分别将其随机分为5组:空白组,UTI高、中、低剂量组,UTI+多西紫杉醇(TXT)组。E... 详细信息

目的探讨乌司他丁(UTI)对乳腺癌MDA-MB-231雌激素受体阴性(ER-)和MCF-7ER阳性(ER+)细胞迁移、黏附、侵袭的影响及机制。方法体外培养MDA-MB-231和MCF-7细胞,并分别将其随机分为5组:空白组,UTI高、中、低剂量组,UTI+多西紫杉醇(TXT)组。ELISA检测两种细胞培养液中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平,Western blot检测两种细胞蛋白激酶B(Akt)、整合素β1(Integrinβ1)的表达;改良MTT实验、Transwell小室实验观察两种细胞的黏附、迁移和侵袭。结果 UTI干预后,ER-/+乳腺癌细胞的迁移、黏附、侵袭均降低;两种乳腺癌细胞培养液中NE的水平和细胞Akt及Integrinβ1的表达均明显下降。结论 UTI抑制乳腺癌细胞的迁移、黏附、侵袭,可能与其降低乳腺癌细胞NE、Akt及Integrinβ1的表达有关。

关键词：白细胞弹性蛋白酶蛋白激酶类整合素类乳腺肿瘤肿瘤转移

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乳腺癌治疗现状

重庆医学 2010年第7期39卷 772-773页

作者：孙治君重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺胰腺外科

早期发现和治疗方法的改进使乳腺癌死亡率得到了实质性的降低。然而,治疗转移性乳腺癌要获得与早期乳腺癌相同的治疗效果仍然面临着可怕的挑战。[第一段]

关键词：早期乳腺癌治疗方法转移性乳腺癌治疗效果死亡率

乌司他丁和泰索帝对人原代乳腺癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响及其机制

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中国生物制品学杂志 2011年第10期24卷 1197-1202页

作者：钟彪孙治君付裕王宏重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺外科重庆400010 成都大学附属医院胸心乳腺外科成都610081

目的探讨乌司他丁(Ulinastatin,UTI)单独和联合泰索帝(Taxotere,TXT)对人原代乳腺癌细胞增殖、侵袭、凋亡和环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)、前列腺素E-2(Prostaglandin E-2,PGE-2)、白介素-10(Interleukin-10,IL-10)表达的影响。方法采用酶消化法提取人乳腺癌组织中的癌细胞,进行原代培养,将细胞随机分为4组:空白对照组、UTI组(800 IU/ml)、TXT组(3.7μg/ml)、UTI+TXT组,采用MTT法、Transwell小室试验和流式细胞术分别检测细胞的增殖、侵袭和凋亡;半定量RT-PCR和Western blot检测细胞COX-2、IL-10基因和蛋白水平的表达;ELISA检测细胞PGE-2的分泌。结果与对照组相比,UTI和TXT均能抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭,并促进凋亡,UTI与TXT联合作用更显著;UTI、TXT单独和联合处理后,细胞COX-2、IL-10的表达均较对照组明显下降,并有效降低了PGE-2的分泌水平。结论 UTI和TXT均能抑制乳腺癌细胞的体外生长,UTI可增强TXT的抑制作用,其机制可能与UTI降低COX-2、PGE-2、IL-10的水平有关。

关键词：乌司他丁泰索帝乳腺肿瘤环氧合酶-2 前列腺素E-2 白介素-10

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IL-8与乳腺癌的研究进展

重庆医学 2010年第7期39卷 817-818页

作者：赵晓亮孙治君重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺胰腺外科 400010

乳腺痛是女性最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年约有120万妇女罹忠乳腺癌,占所有女性肿瘤的18%,乳腺癌5年生存率约50%－60%,近50%忠者治疗后复发转移,而晚期乳腺癌患者甲均生存时间仅18－30个月。侵袭和转移是恶性肿埔的木质特征,也是肿... 详细信息

乳腺痛是女性最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年约有120万妇女罹忠乳腺癌,占所有女性肿瘤的18%,乳腺癌5年生存率约50%－60%,近50%忠者治疗后复发转移,而晚期乳腺癌患者甲均生存时间仅18－30个月。侵袭和转移是恶性肿埔的木质特征,也是肿瘤治疗学面临的最具挑战性的问题,进一步阐明肿瘤转移的分子和细胞机制是制定新的肿瘤治疗方案的理论基础。[第一段]

关键词：白细胞介素8 乳腺癌

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血小板活化因子在乳腺癌中的研究进展

重庆医学 2010年第7期39卷 821-823页

作者：王宏孙治君重庆医科大学附属第二医院乳腺甲状腺胰腺外科 400010

乳腺癌发病率不断增高,已经成为女性最常见的恶性肿瘤之一,乳腺癌的转移是病死率增加的重要原因,而肿瘤血管的形成是肿瘤发展、肿瘤转移首要条件。血小板活化因子(platelet activating factor,PAF,1-烷-2-乙酰基-SN-甘油-3磷酸胆碱),是... 详细信息

乳腺癌发病率不断增高,已经成为女性最常见的恶性肿瘤之一,乳腺癌的转移是病死率增加的重要原因,而肿瘤血管的形成是肿瘤发展、肿瘤转移首要条件。血小板活化因子(platelet activating factor,PAF,1-烷-2-乙酰基-SN-甘油-3磷酸胆碱),是一种具有生物活性的脂质递质,1972年由Battlor等人发现。[第一段]

关键词：血小板活化因子乳腺癌