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SD大鼠乳鼠原代皮质神经元和小胶质细胞同时提取并培养的实验方法

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1395-1400页

作者：何龙才宋文学明江陈光唐王军浩廖益东崔君拴徐卡娅贵州医科大学贵州省贵阳市550004 贵阳市第一人民医院贵州省贵阳市550002 贵州医科大学附属医院神经外科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院高压氧科贵州省贵阳市550004

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质... 详细信息

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质神经元及小胶质细胞的方法。方法:取24 h内新生SD大鼠乳鼠,将大脑取出放入装有DMEM的培养皿中,去除软脑膜后备用。同一脑组织,先提取原代神经元,再将剩余脑组织用于提取小胶质细胞,整个过程在冰上操作。原代皮质神经元提取培养步骤:镊子夹取2.0-3.0 mm厚度大脑皮质组织置于培养皿,用木瓜蛋白酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈互相粘连的组织悬液,吸上清细胞悬液,过滤、分装到15 mL离心管中,离心并重悬后将细胞接种于左旋多聚赖氨酸包被的6孔板爬片上放入细胞培养箱,每隔1 d观察神经元形态,第7天进行MAP2和β-Tubulin免疫荧光染色鉴定。小胶质细胞提取培养步骤:夹取上一步取皮质后剩余脑组织,厚度8-10 mm,置于培养皿,用胰酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈匀浆,然后将匀浆转移到培养瓶中培养,第14天将培养瓶封口后进行恒温水平摇床振荡2 h,小胶质细胞脱落于上清中;取纯化后的小胶质细胞继续培养3 d进行Iba1免疫荧光染色鉴定。结果与结论:(1)神经元培养24 h后贴壁、胞体变大,部分神经元长出突触;培养到第3,5天时胞体进一步增大,大部分神经元已呈突触形态,部分神经元成团生长;第7天时,神经元突触延长增粗并互相连接成网。经β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色鉴定为神经元。(2)小胶质细胞培养第1天换液后可见细胞贴壁生长;第3,5,7天时细胞密度均较小,细胞形态呈高亮椭圆或圆形,但已基本成团块状生长于其他细胞上层;第10天时小胶质细胞密度明显增大;第14天时小胶质细胞呈致密团块状生长于其他细胞上层,此时可进行分离纯化。取分离纯化后细胞再培养至第3天,经Iba1免疫荧光鉴定为小胶质细胞,且纯度大于95%。(3)结果表明,经此法提取并培养获得的原代皮质神经元和小胶质细胞纯度高、形态好、成活率高。

关键词：原代皮质神经元小胶质细胞 SD大鼠细胞提取细胞培养

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动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者并发脑积水影响因素及风险预测模型建立

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中华神经外科疾病研究杂志 2025年第1期19卷 20-25页

作者：邵正群王瑶路华李征陈慧常晗晓南京医科大学第一附属医院/江苏省人民医院神经外科江苏南京210029

目的探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)患者并发脑积水的影响因素并构建其风险预测模型。方法选取2021年7月至2024年6月南京医科大学第一附属医院收治的130例aSAH患者作为本次研究对象,随访3个月后根据是否发生脑积水分为脑积水组(n=38... 详细信息

目的探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)患者并发脑积水的影响因素并构建其风险预测模型。方法选取2021年7月至2024年6月南京医科大学第一附属医院收治的130例aSAH患者作为本次研究对象,随访3个月后根据是否发生脑积水分为脑积水组(n=38)和非脑积水组(n=92)。采用二分类Logistic逐步回归分析探讨aSAH患者并发脑积水的影响因素,并以此构建列线图模型;采用受试者工作特性(ROC)曲线评估列线图模型对aSAH患者并发脑积水的预测价值。结果脑积水组年龄≥60岁、糖尿病史、入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分一致性指数(C-index)为0.812(95%CI:0.761-0.863)。列线图模型预测aSAH患者并发脑积水的曲线下面积(AUC)为0.879(95%CI:0.826-0.932),特异度为67.44%,灵敏度为91.15%。结论aSAH患者并发脑积水的危险因素包括年龄、Hunt-Hess分级、脑出血破入脑室、颅内感染、D-二聚体、脑脊液RBC、脑脊液葡萄糖含量,据此构建的列线图模型对aSAH患者并发脑积水具有较好的预测价值。

关键词：动脉瘤性蛛网膜下腔出血脑积水影响因素列线图预测模型

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极度屈肘位下肘横纹延长线在儿童伸直型肱骨髁上骨折尺侧置针定位中的应用

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中国修复重建外科杂志 2025年

作者：刘旭吴伟单宇宙杨光辉陈明南京鼓楼医院集团宿迁医院徐州医科大学附属宿迁医院骨科

目的讨论肘横纹延长线在指导儿童伸直型肱骨髁上骨折克氏针内固定手术中的作用。方法回顾分析2021年8月—2024年7月收治且符合选择标准的58例伸直型肱骨髁上骨折患儿临床资料。其中28例术中于肘横纹延长线辅助下进行肱骨内上髁置针（... 详细信息

目的讨论肘横纹延长线在指导儿童伸直型肱骨髁上骨折克氏针内固定手术中的作用。方法回顾分析2021年8月—2024年7月收治且符合选择标准的58例伸直型肱骨髁上骨折患儿临床资料。其中28例术中于肘横纹延长线辅助下进行肱骨内上髁置针（研究组），30例术中采用常规触摸肱骨内上髁辅助置针（对照组）。两组患儿性别、年龄、侧别、致伤原因、Gartland分型、克氏针构型、受伤至手术时间等基线资料比较差异jun无统计学意义（P>0.05）。记录并比较两组患者闭合复位率、总手术时间、内侧髁置针时间、内侧髁置针操作期间透视次数、一次性确定内侧进针点率、尺神经损伤率及骨折愈合时间；同时比较所有患儿中受伤至手术时间≤24 h和>24 h者闭合复位率；采用Mayo肘关节功能评分进行功能评价。结果研究组闭合复位率高于对照组（P24 h者[42.9%（12/28）]（χ2=5.545,P=0.019）。研究组总手术时间、内侧置针时间、透视次数明显少于对照组，一次性确定内侧进针点率明显大于对照组，差异均有统计学意义（P神经损伤，研究组无尺神经损伤，但两组尺神经损伤率比较差异无统计学意义（P>0.05）。所有患儿均获随访，随访时间6～12个月，平均8个月。两组均无骨不连发生，研究组骨折愈合时间短于对照组，差异有统计学意义（P0.05）。结论在儿童伸直型肱骨髁上骨折治疗中，肘横纹延长线可辅助快速定位肱骨内上髁，快速置入克氏针，减少手术时间及创伤。

关键词：伸直型肱骨髁上骨折肘横纹延长线闭合复位内固定

脑血管病急性期血尿酸/血肌酐比值与脑血管事件复发及死亡的关系:一项前瞻性队列研究

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中国全科医学 2025年第2期28卷 175-182,192页

作者：任小乔王盼吴昊纪勇石志鸿天津医科大学神经内外科及神经康复临床学院天津市300070 天津市环湖医院 300350

背景脑卒中在世界各地有较高的死亡率和复发率。血尿酸(SUA)是嘌呤代谢的产物,已被认为是心脑血管病的危险因素。血尿酸/血肌酐比值(SUA/Scr)是代表肾功能标准化的SUA,目前有关SUA/Scr在急性脑血管病中的作用仍有争议。目的探讨脑血管... 详细信息

背景脑卒中在世界各地有较高的死亡率和复发率。血尿酸(SUA)是嘌呤代谢的产物,已被认为是心脑血管病的危险因素。血尿酸/血肌酐比值(SUA/Scr)是代表肾功能标准化的SUA,目前有关SUA/Scr在急性脑血管病中的作用仍有争议。目的探讨脑血管病急性期SUA/Scr与脑血管事件复发和死亡的关系。方法本研究为前瞻性队列研究,选取2006年9月—2019年9月天津市环湖医院连续收治的首次发生脑血管事件的13313例患者为研究队列,并对患者进行随访,随访截至2020年9月。随访方式为门诊及电话相结合。随访主要终点事件为全因死亡,次要终点事件为脑血管事件复发、心血管事件复发、其他血管事件发生(如下肢动静脉栓塞)。采用Cox比例风险回归模型探究SUA/Scr与脑血管事件复发与死亡的关系。结果根据脑血管病急性期SUA/Scr四分位数,将患者分为Q1组(SUA/Scr≤3.16,n=3520)、Q2组(3.164.92,n=3243)。截至随访结束,774例(5.8%)患者死亡,2064例(15.5%)患者复发脑血管事件。脑血管病急性期SUA/Scr位于Q1~Q4的患者中,男性复发脑血管病的例数依次为302、375、408、337例,女性依次为99、125、169、249例;男性复发脑梗死的例数依次为261、314、345、283例,女性依次为90、101、142、205例;男性复发大动脉粥样硬化型脑梗死的例数依次为154、191、214、183例,女性依次为58、52、45、31例;男性全因死亡的例数依次为165、128、131、88例,女性依次为57、63、62、80例;男性因脑梗死死亡的例数依次为93、72、70、46例,女性依次为31、33、36、44例;男性因大动脉粥样硬化型脑梗死死亡的例数依次为58、52、45、31例,女性依次为17、18、27、24例。调整多项混杂因素后,SUA/Scr位于Q4相较于Q1是男性急性脑梗死复发的影响因素(HR=0.690,95%CI=0.500~0.953,P=0.026);SUA/Scr位于Q4相较于Q1是男性脑梗死亚组患者大动脉粥样硬化型脑梗死复发的影响因素(HR=0.740,95%CI=0.578~0.947,P=0.017)。SUA/Scr位于Q4相较于Q1是男性全因死亡、因脑梗死死亡的影响因素(HR=0.575,95%CI=0.368~0.901,P=0.003;HR=0.610,95%CI=0.353~0.814,P=0.011)。SUA/Scr位于Q3、Q4相较于Q1是男性出院后死亡的影响因素(HR=0.656,95%CI=0.476~0.904,P=0.010;HR=0.582,95%CI=0.409~0.829,P=0.001)。SUA/Scr位于Q4相较于Q1是男性脑梗死亚组患者因大动脉粥样硬化型脑梗死死亡的影响因素(HR=0.580,95%CI=0.386~0.873,P=0.007)。结论一定范围内,脑血管病急性期SUA/Scr升高对男性患者脑血管事件复发及死亡有一定的保护作用,低SUA/Scr与男性大动脉粥样硬化型脑梗死的死亡和复发风险升高有关,但与小动脉闭塞型脑梗死和心源性卒中复发和死亡无关。在女性患者中没有观察到SUA/Scr与脑血管事件复发及死亡的关系。

关键词：脑血管障碍脑卒中血尿酸/血肌酐比值动脉粥样硬化男性复发死亡队列研究前瞻性研究 Cox比例风险回归模型

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PUM1通过糖酵解途径影响胶质瘤细胞的增殖

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脑与神经疾病杂志 2025年第1期33卷 54-59页

作者：张世阳王一证刘力强河北医科大学第二医院神经外科河北医科大学第四医院疼痛康复科

目的探究Pumilio RNA结合家族成员1 (PUM1)对胶质瘤U251和T98G细胞增殖能力的影响及机制。方法使用siPUM1对U251及T98G胶质瘤细胞系进行转染,通过CCK-8实验以及EdU实验检测PUM1对U251和T98G的细胞活力以及增殖的影响,通过乳酸生成实... 详细信息

目的探究Pumilio RNA结合家族成员1 (PUM1)对胶质瘤U251和T98G细胞增殖能力的影响及机制。方法使用siPUM1对U251及T98G胶质瘤细胞系进行转染,通过CCK-8实验以及EdU实验检测PUM1对U251和T98G的细胞活力以及增殖的影响,通过乳酸生成实验检测PUM1和糖酵解途径的关系。结果 PUM1在胶质瘤中的表达水平较正常人星形胶质细胞更高,且敲低PUM1后,相比于对照组,实验组胶质瘤细胞的增殖能力减弱,乳酸生成量减少。结论 PUM1可通过糖酵解途径促进胶质瘤细胞的增殖。

关键词：胶质瘤 Pumilio RNA结合家族成员1 细胞增殖糖酵解

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帕金森病患者疾病接受度现状及其影响因素

中国科学:生命科学 2025年第1期 168-176页

作者：张莉陈华玉季晶黄梅南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院神经外科

在江苏省某三级甲等医院门诊就诊或住院的179例帕金病患者中通过便利抽样法抽取作为受试对象,使用一般资料调查表、疾病接受度量表、改良H-Y分级量表、帕金森病患者的生活质量问卷(PDQ-39)调查患者的疾病接受度现状及其影响因素.帕金森... 详细信息

在江苏省某三级甲等医院门诊就诊或住院的179例帕金病患者中通过便利抽样法抽取作为受试对象,使用一般资料调查表、疾病接受度量表、改良H-Y分级量表、帕金森病患者的生活质量问卷(PDQ-39)调查患者的疾病接受度现状及其影响因素.帕金森病患者疾病接受度得分为(20.22±7.15)分;分值在20分以下有92例(51.39%),表明患者无法接受患病的事实,存在心理或情绪问题;分值在20～30分有66例(36.87%),表明患者对自己患病接受程度适中;分值在30分以上的有21例(11.73%),表明患者能高度接受身患帕金森病.相关性分析结果显示:中老年帕金森病患者的疾病接受度的得分与婚姻状况、文化程度、家庭年收入、劳动性质、居住方式、H-Y分级有关,差异具有统计学意义(P<0.05).多元线性回归结果显示,中老年帕金森病患者的身体活动、屈辱度、交流、H-Y分期是影响患者疾病接受度的危险因素,共解释疾病接受度总变异的49.5%.帕金森病患者的疾病接受度目前来看仍然处于中等偏下的水平,对帕金森病患者的疾病接受度评估应予以重视,可以考虑依据患者的居住方式、身体活动、屈辱度、交流等几个方面设置精准个性化干预措施,以提高患者对自身疾病的接受度.

关键词：帕金森病疾病接受度生活质量影响因素

脊柱手术机器人治疗脊柱疾病的研究发展趋势及热点剖析

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中国组织工程研究 2025年第21期29卷 4612-4620页

作者：牛艳艳张琦范明星首都医科大学附属北京积水潭医院医学期刊中心北京市100035 首都医科大学附属北京积水潭医院脊柱外科北京市100035

背景:近年来在脊柱外科领域,手术机器人的应用已成为研究热点,但目前中国尚缺乏脊柱手术机器人的的文献可视化分析相关研究。目的:对脊柱手术机器人治疗脊柱疾病的研究热点进行文献可视化分析,以期为中国脊柱手术机器人的研究和发展提... 详细信息

背景:近年来在脊柱外科领域,手术机器人的应用已成为研究热点,但目前中国尚缺乏脊柱手术机器人的的文献可视化分析相关研究。目的:对脊柱手术机器人治疗脊柱疾病的研究热点进行文献可视化分析,以期为中国脊柱手术机器人的研究和发展提供有益的参考。方法:在Web of Science核心集数据库中检索脊柱手术机器人治疗脊柱疾病的相关文献,最终纳入900篇文献。采用VOSviewer 1.6.19软件对纳入文献的发文量、期刊、机构、国家、关键词、共被引文献和高被引文献进行可视化分析。结果与结论:(1)脊柱手术机器人治疗脊柱疾病研究领域的文献呈逐年上升趋势,尤其在2023年达到了发文量的高峰。美国、中国和德国是该领域的研究热点国家。中国国家自然科学基金是该领域的主要资助基金。(2)中国北京积水潭医院和美国特殊外科医院在该领域的研究具有较高的发文量。(3)《World Neurosurgery》《Spine》和《Operative Neurosurgery》是该领域的主要发文期刊。(4)关键词分析显示,研究主要集中在机器人辅助脊柱手术的准确性、微创手术、机器人脊柱手术和导航技术等方面。(5)文献共被引分析结果显示了机器人辅助技术在脊柱手术中具有显著优势,与传统手术相比,脊柱手术机器人如ROSA?Spine,ExcelsiusGPS,Mazor X及TiRobot等,具有高精度导航、精确椎弓根螺钉置入及实时反馈等优点,它们通过减少手术中X射线辐射暴露,降低患者并发症风险,提高手术成功率,显示出其在脊柱外科领域的应用前景。(6)尽管如此,相关技术的应用和精确度仍需不断积累经验以提高;机器人手术技术在降低手术辐射暴露和提高手术精度方面显示出成本效益,但还需深入探讨其在椎弓根螺钉置入过程中的精确度、手术时间影响及经济效益。(7)2021-2024年的高被引文献分析结果进一步显示,目前该领域最新研究热点主要集中在虚拟现实和增强现实技术的应用、机器人辅助椎弓根螺钉置入的准确性提升以及导航机器人脊柱手术平台的应用等。例如,通过创新技术如有机电化学神经元为脑机接口、假肢和智能软机器人技术提供了新的集成方案。同时,虚拟现实和增强现实技术在脊柱畸形矫正等领域展示了广泛应用前景。

关键词：脊柱脊柱手术机器人机器人辅助技术脊柱手术椎弓根螺钉准确性导航并发症脊柱畸形

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菌群移植对神经认知恢复延迟小鼠炎症反应以及菌群和代谢产物的研究

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重庆医科大学学报 2025年

作者：唐璐张斌森张笑佳宋文静都忠莹王春爱甘肃中医药大学第一临床医学院重庆医科大学第五临床学院甘肃省中医院麻醉疼痛医学中心

目的：探讨粪便菌群移植（fecal microbiota transplantation,FMT）对神经认知恢复延迟（delayed neurocognitive recovery,dNCR）小鼠认知能力、肠道菌群及代谢物和炎症反应的影响，为dNCR患者提供一种有效治疗方式。方法：将小鼠随机... 详细信息

目的：探讨粪便菌群移植（fecal microbiota transplantation,FMT）对神经认知恢复延迟（delayed neurocognitive recovery,dNCR）小鼠认知能力、肠道菌群及代谢物和炎症反应的影响，为dNCR患者提供一种有效治疗方式。方法：将小鼠随机分为对照组、模型组和菌群移植组3组。采用胫骨中段骨折的方式建立dNCR模型，收集健康小鼠粪便进行FMT。采用Morris水迷宫实验和旷场实验检测行为学能力，Elisa法检测海马和血清中IL-6、IL-1β和TNF-α的含量，Western blot法检测结肠组织Z0-1及海马NSE和S-100β的蛋白含量。透射电镜下观察海马区神经细胞超微结构。采用16s rRNA基因测序以及LC-MS技术来检测肠道菌群及代谢物的变化。结果：旷场实验和水迷宫实验结果显示模型组认知功能受损而菌群移植后改善了认知损害。模型组血清以及海马中IL-6、IL-1β和TNF-α高于其他2组。模型组结肠组织中ZO-1蛋白含量低于其他2组（P=0.000），而NSE及S-100β高于对照组和菌群移植组（P=0.000）。透射电镜结果显示模型组海马组织结构破坏，而菌群移植后改善了这些变化。3组之间的Chao 1指数和Shannon指数相似。基于bray＿curtis的PCoA发现模型组与对照组、菌群移植组明显分离。模型组和菌群移植组的优势菌以拟杆菌门、厚壁菌门为主，模型组中厚壁菌、脱硫弧菌和变形杆菌高于另两组，而拟杆菌降低。代谢分析中PLS-DA分析显示3组明显分离。热图显示出模型组与对照组、菌群移植的明显差别，与对照组和菌群移植组相比，模型组中色氨酸、5-羟色胺、吲哚等代谢物含量减少，而溶血磷脂酰胆碱增加。结论：肠道菌群及代谢产物的失调以及炎性反应可能是dNCR发生发展的重要机制，而FMT可能通过这机制能够改善麻醉/手术后小鼠的认知功能。

关键词： 16s rRNA 神经认知恢复延迟粪便微生物群移植胃肠道微生物组肠道代谢产物炎症反应

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探讨女性压力性尿失禁的解剖学发病机制

现代泌尿外科杂志 2025年

作者：申吉泓李玲昆明医科大学第一附属医院泌尿外一科

女性控尿是一个复杂的生理过程,本文从解剖学层面分析静态的尿道解剖结构改变和动态的功能解剖学变化因素在女性压力性尿失禁(SUI)发生中的作用。在SUI患者中,尿道自身的解剖学变化包括管腔黏膜萎缩、管壁弹性下降、尿道括约肌功能缺陷... 详细信息

女性控尿是一个复杂的生理过程,本文从解剖学层面分析静态的尿道解剖结构改变和动态的功能解剖学变化因素在女性压力性尿失禁(SUI)发生中的作用。在SUI患者中,尿道自身的解剖学变化包括管腔黏膜萎缩、管壁弹性下降、尿道括约肌功能缺陷和功能尿道长度缩短;尿道周围支撑结构方面的变化包括膀胱颈支撑力减弱、吊床结构损伤、耻骨尿道韧带薄弱、肛提肌薄弱或功能障碍等;盆底神经的损伤在SUI的病理过程中也起到了重要的作用。在动态功能解剖方面,本文分析了膀胱颈与提肌板互锁、尿道外括约肌与肛提肌互锁、尿道中后段与会阴体互锁,3个动态互锁机制。借由这些动态机制,静态结构得到了协调与支持,帮助维持正常的控尿功能,对这些互锁机制的分析能够帮助对SUI患者控尿问题机制的理解。总之,本文试图通过对女性控尿机制静态和动态因素的系统化分析,构建清晰的理论框架来为女性SUI的临床诊疗提供充实的理论基础。

关键词：功能解剖学女性压力性尿失禁膀胱颈与提肌板互锁尿道外括约肌与肛提肌互锁尿道中后段与会阴体互锁发病机制