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玻璃体腔注射环孢素A对糖尿病大鼠视网膜功能及结构的保护作用

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中华眼科杂志 2012年第7期48卷 591-597页

作者：宗元娟沈强张学东雷博方晏红陈雪梅重庆医科大学附属第一医院眼科眼科学重庆市市级重点实验室重庆市眼科研究所重庆400016

目的探讨玻璃体腔注射环孢素A（CsA）对早期糖尿病（DM）大鼠视网膜功能、组织结构及超微结构的影响。方法实验研究。SD大鼠经链脲佐菌素诱导建立DM动物模型。实验分为正常对照组、未注射药物组（DM组）、注射CsA干预组（DM＋CsA组）、... 详细信息

目的探讨玻璃体腔注射环孢素A（CsA）对早期糖尿病（DM）大鼠视网膜功能、组织结构及超微结构的影响。方法实验研究。SD大鼠经链脲佐菌素诱导建立DM动物模型。实验分为正常对照组、未注射药物组（DM组）、注射CsA干预组（DM＋CsA组）、注射对照液干预组（DM＋DMSO组），每组9只。于建模成功后4周进行玻璃体腔注射，注射后48h应用视网膜电图（ERG）检测视网膜功能。然后处死大鼠获取视网膜，应用光镜、透射电镜检测视网膜结构变化。运用单因素方差分析方法分析4组大鼠在不同刺激光强下ERG结果的差异，辅以事后检验进行ERG结果的各组间多重比较。结果不同刺激光强度下4组大鼠的ERGb波振幅间的差异有统计学意义（F=14．760—28．890，P值均〈0．01）；当刺激光强度≥-0．35log cd·s·m^-2时，4组大鼠的暗适应ERGa波振幅间的差异亦有统计学意义（F值分别为12．510和15．500，P值均〈0．01）。与正常对照组（ERGa波：82．43±26．68，ERGb波：208．40±51．20）相比，DM组（ERGa波：39．71±7．61，ERGb波：92．20±24．42）和DM＋DMSO组（ERGa波：37．63±17．25，ERGb波：93．11±22．50）大鼠暗适应时均有ERGa波、b波振幅下降（t=5．448—7．872，P值均〈0．05），DM＋CsA组b波振幅（160．10±43．49）下降明显（t=3．299，P〈0．05），但a波（63．91±20．32）无明显变化（P〉0．05）。石蜡切片染色结果显示，与正常对照组相比，其他三组大鼠视网膜外核层疏松变薄、细胞超微结构紊乱呈凋亡表现。与DM组及DM＋DMSO组相比，DM＋CsA组暗适应时ERGa波、b波振幅下降程度轻（t=3．203—4．759，P值均〈0．05）、外核层疏松变薄程度轻、超微结构改变程度轻。结论DM大鼠病程早期即出现视网膜神经功能的损害，并有视网膜神经细胞超微结构改变。眼内注射CsA对大鼠视网膜功能有保护作用。

关键词：糖尿病视网膜病变疾病模型,动物环孢素A 视网膜电图超微结构

川芎嗪通过调控NRF2/HO-1途径抑制高糖诱导的中性粒细胞外捕获网形成

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陆军军医大学学报 2022年第21期44卷 2157-2164页

作者：陈金泉赵龙丁渲恒王令达文艳谢昊彭惠重庆医科大学附属第一医院眼科眼科学重庆市市级重点实验室重庆市眼科研究所重庆400016

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对高糖诱导的中性粒细胞外捕获网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成的影响及机制。方法运用CCK-8检测不同浓度(0、5、10、20、40、80μmol/L)的TMP处理4 h后中性粒细胞的活性。将中性粒细胞分为7组:Control组(1.5 g/L葡萄糖)、TMP组(40μmol/L TMP)、HG组(4.5 g/L葡萄糖)、HG+TMP组(40μmol/L TMP+4.5 g/L葡萄糖)、HG+TMP+ML385组(4.5 g/L葡萄糖+40μmol/L TMP+10μmol/L ML385)、HG+ML385组(4.5 g/L葡萄糖+10μmol/L ML385)和HG+DPI组(4.5 g/L葡萄糖+10μmol/L DPI)。通过免疫荧光观察NETs的结构;运用DHE和DCFH-DA检测中性粒细胞内ROS和超氧化物阴离子的表达量;采用ELISA试剂盒检测培养基中MPO-DNA的含量,Pico-Green kit试剂盒检测培养基中dsDNA含量,Western blot检测细胞内H3-cit、NRF2、HO-1、NOX2等的表达,评估TMP对NRF2信号级联的调控作用。结果80μmol/L的TMP会降低中性粒细胞活性(P<0.01),其余浓度的TMP对中性粒细胞活性无显著影响。与Control组比较,TMP组中性粒细胞NRF2、HO-1表达明显上升(P<0.01)。与HG组比较,HG+TMP组中性粒细胞产生的H3-cit表达显著降低(P<0.05),并且培养基中dsDNA和MPO-DNA含量明显下降(P<0.01)。免疫荧光未观察到HG+TMP组中NETs形成;HG+TMP组中性粒细胞产生的ROS和超氧化物阴离子较HG组中性粒细胞显著降低(P<0.01)。使用NRF2抑制剂ML385处理后,TMP对H3-cit、NRF2和HO-1的作用被逆转;培养基中dsDNA和MPO-DNA含量明显上升(P<0.01),并且胞内ROS和超氧化物阴离子相较HG+TMP组的中性粒细胞显著升高(P<0.01)。结论TMP可以激活NRF2/HO-1通路并抑制ROS的形成,从而抑制高糖诱导的中性粒细胞外捕获网形成。

关键词：川芎嗪中性粒细胞中性粒细胞外捕获网活性氧高糖 NRF2/HO-1

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结节病性葡萄膜炎的临床特征分析

中华眼科杂志 2023年第3期59卷 196-201页

作者：杨培增谭涵丹叶子易圣蓝重庆医科大学附属第一医院眼科、眼科学重庆市市级重点实验室、重庆市眼科研究所重庆400016

目的探讨结节病性葡萄膜炎的临床特征。方法回顾性病例系列研究。收集重庆医科大学附属第一医院眼科2008年4月至2019年12月收治的19086例葡萄膜炎患者的病历资料,重点对结节病性葡萄膜炎患者的一般资料、病史、诊断、治疗、随访情况和... 详细信息

目的探讨结节病性葡萄膜炎的临床特征。方法回顾性病例系列研究。收集重庆医科大学附属第一医院眼科2008年4月至2019年12月收治的19086例葡萄膜炎患者的病历资料,重点对结节病性葡萄膜炎患者的一般资料、病史、诊断、治疗、随访情况和眼科及其他辅助检查等进行回顾性分析。使用配对样本Wilcoxon符号秩检验比较患者首次和末次就诊时患眼的最佳矫正视力(BCVA)。结果共纳入结节病性葡萄膜炎患者51例(97只眼),男性15例(29.4%),女性36例(70.6%),男女比例为1/2.4;其中46例(88只眼)患者为拟眼结节病,5例(9只眼)患者为确诊眼结节病。患者发病年龄为48(40,55)岁;90.2%患者(46例)双眼受累;88.2%患者(45例)为慢性经过,表现为急性炎性反应者仅占11.8%(6例)。前葡萄膜炎是最常见类型(49只眼,50.5%)。检眼镜检查仅发现2只眼(2.1%)合并有视网膜血管炎,荧光素眼底血管造影术(FFA)检查显示64只眼(66.0%)荧光素弥散性血管渗漏。患者的随访时间为21.5(13.7,29.3)个月,31例患者(59只眼)的随访时间≥3个月。白内障是最常见的眼部并发症,占44.1%(26只眼)。糖皮质激素联合其他免疫抑制剂治疗45只眼(76.3%)的炎性反应得到控制。在随访时间≥3个月的31例(59只眼)患者中,末次随访25只眼(42.3%)的BCVA≥0.8,15只眼(25.4%)的BCVA<0.3,59只患眼的BCVA均较首次就诊时提高,差异有统计学意义(Z=-2.76,P=0.006)。结论结节病性葡萄膜炎主要表现为双眼受累的慢性前葡萄膜炎,多数患者合并有亚临床视网膜血管炎。糖皮质激素联合其他免疫抑制剂治疗可控制大部分患者的炎性反应,并改善患者视力。

关键词：葡萄膜炎结节病回顾性研究

兔玻璃体腔注射PBS后视网膜差异蛋白的表达（英文）

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南方医科大学学报 2016年第5期36卷 595-603页

作者：汪家名雷博重庆医科大学附属第一医院眼科眼科学重庆市市级重点实验室重庆市眼科研究所重庆400016

目的研究家兔玻璃体腔内注射PBS后的视网膜功能变化及差异蛋白的表达情况以探索玻璃体腔注射的安全性。方法将20只青紫蓝兔随机分为4组,A组不作任何处理,B至D组在兔右眼玻璃体腔内注射50μL PBS。分别于注射后第0、4、7、14天进行眼底... 详细信息

目的研究家兔玻璃体腔内注射PBS后的视网膜功能变化及差异蛋白的表达情况以探索玻璃体腔注射的安全性。方法将20只青紫蓝兔随机分为4组,A组不作任何处理,B至D组在兔右眼玻璃体腔内注射50μL PBS。分别于注射后第0、4、7、14天进行眼底照相和视网膜电图(ERG)检查,之后摘取眼球并分离视网膜。利用串联质谱标签(TMT)联合液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)法检测注射组相对于空白对照组的视网膜蛋白变化情况。通过KOBAS及基于KEGG数据库分析明显变化的蛋白富集通路,利用STRING得出明显变化蛋白间相互作用的功能网络图。结果注射组眼底照相结果与空白组相比无明显变化,ERG结果显示视网膜功未受到影响。TMT蛋白质谱共检测出了6042种兔视网膜蛋白,其中49种蛋白(0.81%)在玻璃体腔注射后表达上调超过5倍或下调超过80%。变化比较显著的蛋白主要与细胞骨架有关。显著变化蛋白富集的通路包括黏着斑通路、紧密连接通路、核黄素新陈代谢通路、细胞外基质受体相互作用通路及肌动蛋白细胞骨架调节通路。功能网络图分析显示ACTC1及ISG15在蛋白相互作用关系中起着比较中心的作用。结论玻璃体腔内注射PBS主要引起与细胞黏连、形态、迁移、分化、信号传导及核黄素代谢通路相关的视网膜蛋白变化。

关键词：玻璃体腔注射视网膜蛋白质组串联质谱标签

评估糖尿病黄斑水肿抗血管内皮生长因子药物治疗预后的临床标志物研究进展

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中华眼底病杂志 2021年第4期37卷 321-327页

作者：陈沁芸张学东重庆医科大学附属第一医院眼科重庆市眼科研究所眼科学重庆市市级重点实验室400016

玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子(VEGF)药物是治疗糖尿病黄斑水肿(DME)的主要手段,但仍有30%的患者对其治疗反应差。目前能够提示抗VEGF药物治疗预后的影像标志物包括缺血指数、深层视网膜毛细血管丛的黄斑中心凹无血管区面积、微动脉... 详细信息

玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子(VEGF)药物是治疗糖尿病黄斑水肿(DME)的主要手段,但仍有30%的患者对其治疗反应差。目前能够提示抗VEGF药物治疗预后的影像标志物包括缺血指数、深层视网膜毛细血管丛的黄斑中心凹无血管区面积、微动脉瘤数量、血流密度、视网膜内层紊乱、外界膜和(或)椭圆体带破坏程度、强反射灶、视网膜内囊肿、视网膜下液;生物标志物包括超敏C反应蛋白、中性粒细胞与淋巴细胞比率、抗延胡索酸酶抗体以及眼内房水细胞间黏附分子-1、白介素(IL)-6、IL-8等。了解这些可能预测和评估抗VEGF药物治疗预后的临床标志物,可以灵活调整治疗方案,更加有效地监测、治疗、管理DME患者。

关键词：糖尿病视网膜病变黄斑水肿血管生成抑制剂生物学标记,药理学综述

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我国葡萄膜炎研究的现状及发展

中华眼科杂志 2010年第10期46卷 924-929页

作者：杨培增杜利平重庆医科大学附属第一医院重庆市眼科研究所眼科学重庆市市级重点实验室400016

近年来,我国的葡萄膜炎研究已步入国际先进行列.在临床研究方面,我国学者归纳总结出我国葡萄膜炎的临床谱系及特征,对葡萄膜炎的诊断及防治进行了一系列原创性研究;在基础研究方面,发现了葡萄膜炎发生的一个新通路即IL-23/IL-17,揭示出... 详细信息

近年来,我国的葡萄膜炎研究已步入国际先进行列.在临床研究方面,我国学者归纳总结出我国葡萄膜炎的临床谱系及特征,对葡萄膜炎的诊断及防治进行了一系列原创性研究;在基础研究方面,发现了葡萄膜炎发生的一个新通路即IL-23/IL-17,揭示出CD4＋CD25high调节性T细胞数量减少和功能降低在Vogt-小柳原田综合征发病中起着重要作用,发现了与葡萄膜炎发病有关的数个基因多态,揭示出机体防御眼内炎症机制（前房相关免疫偏离）形成的分子和细胞学基础.这些研究成果多发表在国际著名的杂志上,表明我国对世界葡萄膜炎研究做出了积极贡献.

关键词：葡萄膜炎免疫遗传学

健康人视网膜电图a波和b波数字滤波纯化研究

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中华眼科杂志 2013年第12期49卷 1064-1068页

作者：陈子和郑昌伟雷博重庆医科大学附属第一医院眼科眼科学重庆市市级重点实验室重庆市眼科研究所 400016

目的确定暗适应3．0和明适应3．0视网膜电图（ERG）中a—b复合波的频率范围，为临床提取纯净的a波和b波波形提供理论基础和方法。方法系列研究。2010年10至11月对8名健康受试者进行全视野视网膜电图检查。应用数字滤波技术提取暗适应3．... 详细信息

目的确定暗适应3．0和明适应3．0视网膜电图（ERG）中a—b复合波的频率范围，为临床提取纯净的a波和b波波形提供理论基础和方法。方法系列研究。2010年10至11月对8名健康受试者进行全视野视网膜电图检查。应用数字滤波技术提取暗适应3．0和明适应3．0ERG信号中的a波和b波，通过分别测量计算时域波形图上a波和b波的周期并且对a波和b波进行傅里叶频谱分析，确定暗适应3．0和明适应3．0ERG中a—b复合波的频率范围。同时对数字滤波器的阶对a—b复合波的波形及频率的影响进行了比较。对明适应3．0及暗适应3．0ERG中a—b复合波频率范围的比较采用Student—t检验。结果暗适应3．0ERG中a—b复合波的频率范围为（14．99±2．39）～（25．35±3．77）Hz；明适应3．0ERG中a—b复合波的频率范围为（25．22±6．56）～（32．47±3．68）Hz。经Student—t检验发现，暗适应3．0ERG中a—b复合波的频率小于明适应3．0ERG中a—b复合波的频率（t=7．910，7．693，P值均〈0．01）。选择第三阶可以有效地从ERG中滤去振荡电位，同时又兼顾振幅的大小和时相位移的影响。结论健康人群ERG可以利用a—b复合波低频率和振荡电位高频率的特征，通过数字滤波器进行分离。选取数字滤波器第三阶，将通频带设定于1—45Hz，可以将振荡电位从ERG波形中滤去，获得光滑的a波和b波波形图。

关键词：视网膜电描记术适应眼电生理学

人类视网膜电图暗适应及明适应震荡电位的参数特征

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南方医科大学学报 2011年第12期31卷 2057-2060页

作者：银娟萍雷博彭惠王隽付校楠重庆医科大学附属第一医院眼科眼科学重庆市市级重点实验室重庆市眼科研究所重庆400016

目的为了描述在相同闪光刺激强度下,人类视网膜在不同适应状态下的震荡电位(OPs)特征。方法对正常受试者行全视野视网膜电图(ERG)检查。然后应用数字滤波技术提取暗适应3.0和明适应3.0ERG信号中的震荡电位,并对震荡电位进行傅里叶频谱... 详细信息

目的为了描述在相同闪光刺激强度下,人类视网膜在不同适应状态下的震荡电位(OPs)特征。方法对正常受试者行全视野视网膜电图(ERG)检查。然后应用数字滤波技术提取暗适应3.0和明适应3.0ERG信号中的震荡电位,并对震荡电位进行傅里叶频谱分析。分别确定暗适应以及明适应震荡电位的参数(频率峰值、潜伏期、能量)。结果确定了暗适应震荡电位的频率峰值平均值为(125.3±9.93)Hz,潜伏期平均值为(41.7±3.56)ms,能量平均值为(9.25±5.55)(μV.s)2;明适应震荡电位的频率峰值平均值为(79.5±6.79)Hz,潜伏期平均值为(50.8±5.36)ms,能量平均值为(3.56±2.18)(μV.s)2。分别对暗适应与明适应震荡电位的参数(频率峰值,潜伏期,能量)进行比较,发现均有显著差异(P<0.001)。结论与暗适应震荡电位参数相比较,明适应震荡电位的峰值频率及能量更低、潜伏期更长。

关键词：震荡电位暗适应明适应

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葡萄膜炎基因治疗的研究进展

中华眼科杂志 2013年第3期49卷 281-284页

作者：陶雪莹杨培增雷博重庆医科大学附属第一医院眼科眼科学重庆市市级重点实验室重庆市眼科研究所 400016

葡萄膜炎是一类常见的致盲性眼病，其病因复杂、病程长、易反复，是眼科难治疾病之一。长期全身应用传统的治疗药物，如糖皮质激素和免疫抑制剂有较大的毒副作用。因此，寻找效果可靠、作用时间长的治疗方法成为必然。近年来，病毒载体... 详细信息

葡萄膜炎是一类常见的致盲性眼病，其病因复杂、病程长、易反复，是眼科难治疾病之一。长期全身应用传统的治疗药物，如糖皮质激素和免疫抑制剂有较大的毒副作用。因此，寻找效果可靠、作用时间长的治疗方法成为必然。近年来，病毒载体介导的基因治疗在葡萄膜炎的研究中取得较大进展。目前主要通过两种方式达到治疗实验性葡萄膜炎的目的：一是利用病毒载体转导免疫调节分子，如白细胞介素（IL）-10、IL-1Ra、IL-4、IFN-α、IL-27p28在眼局部发挥免疫调节作用；二是通过载体导入与葡萄膜炎发生相关的抗原诱导免疫耐受。基因治疗葡萄膜炎有局部用药、长效和全身不良反应小的优势，可能会成为临床治疗葡萄膜炎的一种重要方法。

关键词：葡萄膜炎基因疗法免疫调节免疫耐受