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NDUFA13过表达可减轻CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化:基于抑制NLRP3活化

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 201-209页

作者：徐小惠冯金梅罗颖何昕觎臧金宝黄道超重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所//国家儿童健康与疾病临床医学研究中心//儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院心内科//国家儿童健康与疾病临床医学研究中心//儿童发育疾病研究教育部重点实验室//国家临床心血管内科重点专科//重庆市卫生健康委儿童重要器官发育与疾病重点实验室重庆400014 重庆市九龙坡区第二人民医院检验科重庆400052

目的探究NDUFA13蛋白在小鼠急性肝损伤和肝纤维化中的保护作用及可能机制。方法小鼠分为正常组(n=18)、CCl_(4)组(n=18)、CCl_(4)+AAV-NC组(n=18)、CCl_(4)+AAV-NDU13组(n=18)。采用腹腔注射CCl(42次/周)建立肝纤维化小鼠模型,连续给药3... 详细信息

目的探究NDUFA13蛋白在小鼠急性肝损伤和肝纤维化中的保护作用及可能机制。方法小鼠分为正常组(n=18)、CCl_(4)组(n=18)、CCl_(4)+AAV-NC组(n=18)、CCl_(4)+AAV-NDU13组(n=18)。采用腹腔注射CCl(42次/周)建立肝纤维化小鼠模型,连续给药3、5、7周后处死取材。病毒干预组小鼠则预先分别尾静脉注射AAV8-TBG-NC对照与AAV8-TBG-NDUFA13过表达病毒,7~10 d后再经CCl_(4)进行肝纤维化诱导。通过HE染色、Masson染色观察CCl_(4)致小鼠肝损伤及肝纤维化情况。Western blotting检测肝组织中NDUFA13、α-SMA蛋白表达水平。免疫荧光分析NDUFA13与炎症小体NLRP3、肿瘤坏死因子TNF-α与白介素IL-1β、肝星型细胞活化标志物α-SMA与胶原纤维CollagenⅢ的表达情况。结果HE染色、Masson染色结果显示CCl_(4)诱导小鼠肝组织肝小叶结构紊乱,肝细胞变性坏死,炎症细胞浸润且伴大量胶原纤维沉积(P<0.001)。Western blotting结果发现CCl_(4)模型鼠肝脏NDUFA13蛋白表达水平相比正常对照组明显降低(P<0.001);而NDUFA13蛋白过表达后,CCl_(4)处理小鼠的肝脏炎症细胞聚集和纤维化均明显减少(P<0.001)。免疫荧光结果显示,NDUFA13蛋白过表达的CCl_(4)诱导鼠肝组织中炎症小体NLRP3活化明显减弱(P<0.001),并伴随炎症因子TNF-α与IL-1β分泌显著减少(P<0.001),同时肝星状细胞活化(P<0.05)及其胶原形成均受到抑制(P<0.001)。结论肝细胞线粒体NDUFA13蛋白过表达可通过抑制NLRP3炎症信号活化发挥抗纤维化作用。

关键词： NDUFA13过表达 NLRP3 炎症因子肝星状细胞肝纤维化

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儿童抽动障碍干预治疗现状及家庭需求分析

中华实用儿科临床杂志 2024年第4期39卷 293-297页

作者：曾俊祺李双子王婷夏庆赵婧蒋莉重庆医科大学附属儿童医院神经内科儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的了解抽动障碍儿童干预治疗现状及家庭干预需求,并分析干预需求的影响因素。方法横断面调查,采用方便抽样法,便利选取2022年10月至2023年1月在重庆医科大学附属儿童医院就诊的362例患儿及其家庭进行调查,分析干预需求的影响因素。结... 详细信息

目的了解抽动障碍儿童干预治疗现状及家庭干预需求,并分析干预需求的影响因素。方法横断面调查,采用方便抽样法,便利选取2022年10月至2023年1月在重庆医科大学附属儿童医院就诊的362例患儿及其家庭进行调查,分析干预需求的影响因素。结果共362例患儿接受了调查,家庭关注的主要方面为药物治疗和行为干预,目前患儿以接受药物治疗为主(102/126,80.9%),77.8%的家长认为治疗效果不太理想;276例患儿及家庭提交了需求部分的作答(76.2%),其中社会支持需求得分最高为(2.69±0.96)分。多元线性回归分析显示,病程、有无合并症、疾病严重程度、家庭月收入、家长焦虑程度和对治疗是否关注是家庭干预治疗需求的主要影响因素(均P临床工作者在选择干预治疗时结合家庭治疗需求,制定更加个体化的干预方案,提高治疗效果。

关键词：抽动障碍治疗现状家庭需求儿童

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心脏再同步化治疗在儿童心力衰竭中应用

临床儿科杂志 2024年第4期42卷 367-372页

作者：陈若瑜(综述) 吕铁伟(审校) 重庆医科大学附属儿童医院心血管内科、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、国家儿童健康与疾病临床医学研究中心、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室重庆400014

心脏再同步化治疗(CRT)作为成人心力衰竭的一种重要非药物治疗手段,在儿童心力衰竭中的应用受到了越来越多的关注及应用,也已被初步证明在部分原发病导致的心力衰竭中有良好的疗效。本文回顾了近年来CRT在先天性心脏病、起搏诱导性心肌... 详细信息

心脏再同步化治疗(CRT)作为成人心力衰竭的一种重要非药物治疗手段,在儿童心力衰竭中的应用受到了越来越多的关注及应用,也已被初步证明在部分原发病导致的心力衰竭中有良好的疗效。本文回顾了近年来CRT在先天性心脏病、起搏诱导性心肌病等不同病因导致的儿童心力衰竭中的应用及其疗效、植入形式和不良反应,并对其进一步发展做出展望,以期为CRT在儿童心力衰竭中的适时应用提供参考。

关键词：心力衰竭心脏再同步化治疗儿童

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一个格里塞利综合征2型家系分析

临床儿科杂志 2024年第4期42卷 345-350页

作者：赵倩陈俊羽唐雪梅赵晓东杨曦重庆医科大学附属儿童医院、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、国家儿童健康与疾病临床医学研究中心、儿童感染免疫重庆市重点实验室重庆医科大学附属儿童医院内科教研室重庆医科大学附属儿童医院风湿免疫科重庆400014

目的探讨由RAB27A基因缺陷导致的格里塞利综合征2型(Griscelli syndrome type 2,GS2)的临床及免疫学特征。方法收集1家系2例GS2患儿组成的临床资料、生化检查及病理活检结果,采集头发显微镜检查,抽取外周静脉血进行免疫系统基因外显子... 详细信息

目的探讨由RAB27A基因缺陷导致的格里塞利综合征2型(Griscelli syndrome type 2,GS2)的临床及免疫学特征。方法收集1家系2例GS2患儿组成的临床资料、生化检查及病理活检结果,采集头发显微镜检查,抽取外周静脉血进行免疫系统基因外显子阵列测序,桑格测序验证患儿及父母RAB27A基因突变位点,采用蛋白印迹法检测外周血单个核细胞RAB27A蛋白表达水平,采用流式细胞术进行CTL细胞及NK细胞毒性功能检测,健康对照为正常同龄儿童。结果2例患者为亲兄妹,生后均表现毛发色素减退合,均以反复发热、反复呼吸道感染合并噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)为主要临床表现,妹妹伴全身弥漫靶形损害样皮疹。2例患者头发内均有不规则黑色素团块堆积,妹妹皮损组织病理示表皮基底层黑色素细胞不规则分布,RAB27A基因5号外显子发生c.377 delC纯合移码突变,其父母为近亲结婚,均为携带者,2例患儿RAB27A蛋白表达均明显降低,NK细胞及CTL的细胞毒功能均受损。2例患儿均未接受化疗及造血干细胞移植(HSCT),先后因HLH死亡。结论GS2的确诊依赖临床表现及基因检测,免疫功能检测亦有助于诊断,同种异体造血干细胞移植是目前根治GS2的唯一方法。

关键词：格里塞利综合征2型 RAB27A基因家族性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症

射频消融治疗心脏扩大伴心室预激患儿的单中心临床分析

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临床儿科杂志 2024年第5期42卷 407-413页

作者：徐江珊许欣何爽刘茜田杰吕铁伟重庆医科大学附属儿童医院心内科、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、国家儿童健康与疾病临床医学研究中心、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地重庆400014

目的总结心脏扩大伴心室预激患儿的临床特点,评价射频消融(RFCA)治疗该类疾病的安全性和有效性。方法回顾性分析2016年5月至2023年5月在心内科就诊的心脏扩大伴心室预激患儿的临床资料。结果 6例(男2例、女4例)患儿发现心脏扩大时中... 详细信息

目的总结心脏扩大伴心室预激患儿的临床特点,评价射频消融(RFCA)治疗该类疾病的安全性和有效性。方法回顾性分析2016年5月至2023年5月在心内科就诊的心脏扩大伴心室预激患儿的临床资料。结果 6例(男2例、女4例)患儿发现心脏扩大时中位年龄2.0岁,所有患儿均存在无心动过速表现的显性心室预激,且正规抗心力衰竭药物治疗后心脏大小及心功能恢复不满意。6例患儿均接受了RFCA,接受RFCA时的中位年龄为4.4岁,所有患儿术中心内电生理检查均证实存在右侧旁道,其中右侧游离壁旁道4例,右侧间隔旁道2例,其中2例为多旁道。术后随访发现所有患儿室壁运动不协调及室壁动度较前改善,术后心脏功能首先恢复,最短术后1个月恢复正常;心脏大小恢复较慢,最短1.7年恢复正常。结论心脏扩大合并不伴有心动过速的心室预激临床多见,在药物治疗效果不佳时可尝试RFCA去除引起旁路预激的因素,RFCA不仅有助于该类疾病的诊断,也是安全、有效的治疗手段。

关键词：心脏扩大心功能不全心室预激射频消融儿童

NDUFA13过表达可减轻CCl诱导的小鼠肝纤维化:基于抑制NLRP3活化

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南方医科大学学报 2024年

作者：徐小惠冯金梅罗颖何昕觎臧金宝黄道超重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所//国家儿童健康与疾病临床医学研究中心//儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆市九龙坡区第二人民医院检验科重庆医科大学附属儿童医院心内科//国家儿童健康与疾病临床医学研究中心//儿童发育疾病研究教育部重点实验室//国家临床心血管内科重点专科//重庆市卫生健康委儿童重要器官发育与疾病重点实验室

目的探究NDUFA13蛋白在小鼠急性肝损伤和肝纤维化中的保护作用及可能机制。方法小鼠分为正常组(n=18)、CCl4组(n=18)、CCl4+AAV-NC组(n=18)、CCl4+AAV-NDU13组(n=18)。采用腹腔注射CCl4(2次/周)建立肝纤维化小鼠模型，连续给药3、5、... 详细信息

目的探究NDUFA13蛋白在小鼠急性肝损伤和肝纤维化中的保护作用及可能机制。方法小鼠分为正常组(n=18)、CCl4组(n=18)、CCl4+AAV-NC组(n=18)、CCl4+AAV-NDU13组(n=18)。采用腹腔注射CCl4(2次/周)建立肝纤维化小鼠模型，连续给药3、5、7周后处死取材。病毒干预组小鼠则预先分别尾静脉注射AAV8-TBG-NC对照与AAV8-TBG-NDUFA13过表达病毒，7～10 d后再经CCl4进行肝纤维化诱导。通过HE染色、Masson染色观察CCl4致小鼠肝损伤及肝纤维化情况。Western blotting检测肝组织中NDUFA13、α-SMA蛋白表达水平。免疫荧光分析NDUFA13与炎症小体NLRP3、肿瘤坏死因子TNF-α与白介素IL-1β、肝星型细胞活化标志物α-SMA与胶原纤维CollagenⅢ的表达情况。结果 HE染色、Masson染色结果显示CCl4诱导小鼠肝组织肝小叶结构紊乱，肝细胞变性坏死，炎症细胞浸润且伴大量胶原纤维沉积(P<0.001)。Western blotting结果发现CCl4模型鼠肝脏NDUFA13蛋白表达水平相比正常对照组明显降低(P<0.001)；而NDUFA13蛋白过表达后，CCl4处理小鼠的肝脏炎症细胞聚集和纤维化均明显减少(P<0.001)。免疫荧光结果显示，NDUFA13蛋白过表达的CCl4诱导鼠肝组织中炎症小体NLRP3活化明显减弱(P<0.001)，并伴随炎症因子TNF-α与IL-1β分泌显著减少(P<0.001)，同时肝星状细胞活化(P<0.05)及其胶原形成均受到抑制(P<0.001)。结论肝细胞线粒体NDUFA13蛋白过表达可通过抑制NLRP3炎症信号活化发挥抗纤维化作用。

关键词： NDUFA13过表达 NLRP3 炎症因子肝星状细胞肝纤维化

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儿童暴发性心肌炎临床特点及危险因素分析

中国实用儿科杂志 2024年第3期39卷 223-230页

作者：陈静何爽郑敏李谧吕铁伟吴晓云重庆医科大学附属儿童医院心内科、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、国家儿童健康与疾病临床医学研究中心、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室重庆400014 南方科技大学医院儿科医学部广东深圳518000

目的探讨儿童暴发性心肌炎早期临床特点及危险因素,为早期识别暴发性心肌炎提供临床经验。方法回顾性对比分析2015年1月至2022年1月重庆医科大学附属儿童医院收治的51例暴发性心肌炎患儿及62例急性心肌炎患儿的临床资料。结果(1)暴发性... 详细信息

目的探讨儿童暴发性心肌炎早期临床特点及危险因素,为早期识别暴发性心肌炎提供临床经验。方法回顾性对比分析2015年1月至2022年1月重庆医科大学附属儿童医院收治的51例暴发性心肌炎患儿及62例急性心肌炎患儿的临床资料。结果(1)暴发性心肌炎组起病年龄较大,有阿斯综合征发作,头晕、头痛,呼吸困难,恶心、呕吐,腹痛、腹胀,少尿,意识改变,心音低钝,心律不齐,肢端凉,面色改变,肝脏肿大等起病时临床表现及体征的发生率均大于急性心肌炎组(P室间隔、室壁动度及厚度,心包积液,二、三尖瓣中重度反流,室性心动过速,逸搏,室颤/室性停搏,Ⅲ度房室传导阻滞,束支传导阻滞等指标与急性心肌炎组相比,差异均有统计学意义(P0.05);(3)Logistic回归分析显示白蛋白、左室射血分数、Ⅲ度房室传导阻滞、束支传导阻滞是发生暴发性心肌炎的预测危险因素;Logistic回归方程P=1/[1+e^(-(92.862-0.171×白蛋白-0.351×左室射血分数+6.286×Ⅲ度房室传导阻滞+5.492×束支传导阻滞))],敏感度为94.1%,特异度为96.8%,区分度良好;(4)暴发性心肌炎患儿经免疫调节、抗心律失常、抗心力衰竭、抗感染等综合治疗,死亡3例(5.8%)。结论儿童暴发性心肌炎早期出现白蛋白降低、左室射血分数降低、Ⅲ度房室传导阻滞、束支传导阻滞是暴发性心肌炎的预测危险因素。

关键词：暴发性心肌炎临床特点危险因素治疗

NaNO_(2)对HDM预处理的气道上皮细胞氧化损伤的影响及其机制

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陆军军医大学学报 2024年第12期46卷 1395-1402页

作者：李熙炫彭东红重庆医科大学附属儿童医院呼吸内科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿童代谢与炎症性疾病重庆市重点实验室重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院江西医院南昌330108

目的探究NaNO_(2)对经屋尘螨(house dust mite,HDM)预处理的人支气管上皮细胞氧化损伤的影响及其机制。方法体外培养人支气管上皮细胞16HBE,经HDM预处理后用不同浓度NaNO_(2)染毒处理,CCK-8检测细胞存活率,确定NaNO_(2)最适浓度及处理时... 详细信息

目的探究NaNO_(2)对经屋尘螨(house dust mite,HDM)预处理的人支气管上皮细胞氧化损伤的影响及其机制。方法体外培养人支气管上皮细胞16HBE,经HDM预处理后用不同浓度NaNO_(2)染毒处理,CCK-8检测细胞存活率,确定NaNO_(2)最适浓度及处理时间;将细胞接种于6孔板中随机分为3组(n=3):正常对照组、HDM组(HDM预处理)、NaNO_(2)组(HDM预处理后进行NaNO_(2)染毒处理)。Western blot和RT-PCR检测各组细胞Krüppel样锌指转录因子2(Krüppel-like transcription factors 2,KLF2)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和Notch1的表达水平;ELISA法检测细胞炎症因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的表达水平;荧光探针法检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;微量法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)与谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量。结果CCK-8实验确定NaNO_(2)最适干预方式为500μmol/L处理24 h。与正常对照组比较,HDM组KLF2蛋白和mRNA水平减少,HIF-1α蛋白和mRNA水平(P<0.01)、Notch1的蛋白(P<0.05)、mRNA水平和ROS含量升高(P<0.01),MDA、TNF-α和IL-6含量均增高,GSH含量降低(P<0.05);与HDM组比较,NaNO_(2)组KLF2蛋白和mRNA水平明显减少,HIF-1α蛋白和mRNA水平(P<0.01)、Notch1的蛋白(P<0.05)和mRNA水平、ROS含量显著升高(P<0.01),MDA(P<0.05)、TNF-α(P<0.001)和IL-6含量显著增高,GSH含量明显减少(P<0.05)。结论NaNO_(2)可能通过调控KLF2的表达加重HDM诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤。

关键词：氧化应激 KLF2 气道上皮细胞哮喘氮氧化物

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射频消融治疗儿童预激性心肌病1例病例报告

中国循证儿科杂志 2024年第2期19卷 149-151页

作者：徐江珊许欣何爽刘茜吕铁伟重庆医科大学附属儿童医院心内科儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地重庆400014

1 病例资料女,1岁5月龄时以“发现心脏增大1周余”于2019年7月就诊于重庆医科大学附属儿童医院(我院)心内科。1周前患儿因咳嗽在当地医院完善X线胸片显示心影增大,转诊至我院。心脏彩超检查提示左室、左房增大,室间隔及左室后壁动度降低... 详细信息

1 病例资料女,1岁5月龄时以“发现心脏增大1周余”于2019年7月就诊于重庆医科大学附属儿童医院(我院)心内科。1周前患儿因咳嗽在当地医院完善X线胸片显示心影增大,转诊至我院。心脏彩超检查提示左室、左房增大,室间隔及左室后壁动度降低,左室心内膜增厚回声增强,左室心肌不紧合,左室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(FS)降低。

关键词：心脏增大射频消融治疗周前左房增大左室心肌病例报告心脏彩超检查病例资料