检索结果-南通市图书馆

RNA测序揭示肾母细胞瘤中潜在的circRNA-miRNA-mRNA调控网络

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

陆军军医大学学报 2022年第19期44卷 2002-2016页

作者：向彬田小毛米滔金黎明陈美玲刘丰刘星林涛魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿童泌尿生殖发育与组织工程重点实验室儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的基于高通量RNA测序技术和生物信息学分析鉴定肾母细胞瘤(wilms tumor,WT)中潜在的circRNA-miRNA-mRNA调控网络。方法收集2021年6月至2022年3月期间重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科的WT患者的肿瘤切除组织共25例。RNA测序技术分析... 详细信息

目的基于高通量RNA测序技术和生物信息学分析鉴定肾母细胞瘤(wilms tumor,WT)中潜在的circRNA-miRNA-mRNA调控网络。方法收集2021年6月至2022年3月期间重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科的WT患者的肿瘤切除组织共25例。RNA测序技术分析4对配对的肿瘤和癌旁正常组织的circRNA(DEcircRNA)和mRNA(DEmRNA)差异表达谱。对差异分子进行基于miRanda的miRNA靶点预测,基于相同位点和协同表达建立完整的circRNA-miRNA-mRNA调控网络。最后验证关键环状RNA的功能。结果筛选出314个DEcircRNAs和1612个DEmRNAs。通过RT-qPCR在组织中随机选择12个circRNA进行表达量验证,其中7个circRNA显示出与测序结果一致的趋势。基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析提示DEcircRNA的亲本基因和DEmRNA主要富集到细胞增殖、癌症和多种代谢相关通路中。利用miRanda预测工具识别DEcircRNA和DEmRNA的共同miRNA靶点,以此构建完整的circRNA-miRNA-mRNA网络。基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)提示ceRNA网络中的靶基因与细胞周期和免疫应答有关。为了鉴定关键的下游靶点,基于STRING数据库建立了127个ceRNA网络中靶基因的PPI(protein-protein interaction)网络,并进一步确定了前10个HUB基因。其中,4个HUB基因(TP53、KANK3、LLGL1和TOPA3)被证实与WT的预后密切相关。基于具有预后意义的关键靶基因构建circRNA作用的调控子网络。最后,通过CCK-8、划痕、Transwell和流式细胞实验,发现沉默子网络中的circRNA(hsa_circ_0009035)抑制了WT细胞的增殖、迁移、侵袭和细胞周期分布(P研究展示了WT中circRNAs的全面表达,构建了潜在的circRNA相关的ceRNA调控网络,深入阐释了WT发生发展的调控机制。

关键词： Wilms瘤肾母细胞瘤 RNA测序环状RNA ceRNA网络

piRNA NU13对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2021年第2期41卷 184-192页

作者：张朝霞王璋金黎明谭小军王钊颖沈炼桔魏光辉何大维重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿童泌尿生殖发育与组织工程重点实验室儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的探讨piwil2诱导的肿瘤样干细胞(piwil2-iCSCs)来源的差异piRNA NU13对肾母细胞瘤细胞(G401)生物学行为的影响。方法RT-qPCR检测G401中piRNANU13及NOP56的表达情况;通过脂质体转染技术,在肾母细胞瘤细胞株G401中过表达及抑制piRNANU... 详细信息

目的探讨piwil2诱导的肿瘤样干细胞(piwil2-iCSCs)来源的差异piRNA NU13对肾母细胞瘤细胞(G401)生物学行为的影响。方法RT-qPCR检测G401中piRNANU13及NOP56的表达情况;通过脂质体转染技术,在肾母细胞瘤细胞株G401中过表达及抑制piRNANU13,并用RT-qPCR技术验证转染后G401细胞中piRNANU13的表达量;通过CCK8检测转染后G401细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡能力,划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力的改变;通过双荧光素酶实验检测NOP56与piRNA NU13的结合情况;通过Western blot检测MMP2、MMP9、BAX、Bcl2、NOP56蛋白表达情况。结果在人肾母细胞瘤细胞G401中piRNANU13表达水平低于肾小管上皮细胞HK2(P组织均高表达(P<0.05);在G401中上调piRNANU13表达能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭,并促进肿瘤细胞凋亡(P<0.05);过表达piRNANU13可抑制MMP2、MMP9及Bcl2的表达水平,促进BAX表达(P<0.05);piRNANU13与预测靶基因NOP56非直接结合,但可间接调控NOP56的表达。结论piRNANU13在肾母细胞瘤中低表达,NOP56在肾母细胞瘤中高表达,piNU13可能间接调控NOP56表达从而抑制肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡。

关键词： piwil2-iCSCs piRNA 人肾母细胞瘤增殖凋亡迁移侵袭

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

64例儿童睾丸畸胎瘤病例分析

中华男科学杂志 2015年第9期21卷 809-815页

作者：魏仪吴盛德林涛何大维李旭良刘俊宏刘星华燚陆鹏张德迎温晟魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的：分析儿童睾丸畸胎瘤的诊断与治疗，旨在提高其临床诊治水平。方法：回顾性分析本院1995—2014年收治的64例儿童睾丸畸胎瘤的临床资料。结果：61例以无痛性阴囊包块就诊，查体均有沉重感；3例因阴囊空虚诊断为隐睾时发现。术前46... 详细信息

目的：分析儿童睾丸畸胎瘤的诊断与治疗，旨在提高其临床诊治水平。方法：回顾性分析本院1995—2014年收治的64例儿童睾丸畸胎瘤的临床资料。结果：61例以无痛性阴囊包块就诊，查体均有沉重感；3例因阴囊空虚诊断为隐睾时发现。术前46例甲胎蛋白（AFP）明显升高，18例AFP值正常。超声检查提示异常混杂回声区，内有钙化成分或液化坏死。阴囊x片检查28例有点片状、弧形高密度影。40例于我院行睾丸肿瘤剜除术（TSS），1例院外手术，20例行高位瘤睾切除术，3例放弃手术治疗。病理检查成熟畸胎瘤均可见成熟的3个胚层，未成熟畸胎瘤可见原始神经管等未成熟胚层成分。60例手术患儿中11例为不成熟畸胎瘤，49例成熟畸胎瘤。成熟畸胎瘤术后无需化疗，未成熟畸胎瘤术后采用顺铂＋依托泊苷＋博来霉素（Cisplatin，Etoposide，Bleomy-cin，PEB）方案化疗。随访2年均未见复发或转移。结论：儿童睾丸畸胎瘤多因无痛性阴囊包块就诊，查体包块有沉重感；AFP多有异常，超声及阴囊平片对诊断有一定帮助。手术方案主要为TSS，术中冰冻能协助术者选择手术范围。成熟畸胎瘤术后无需化疗，未成熟畸胎瘤术后应配合化疗。

关键词：儿童睾丸畸胎瘤甲胎蛋白超声

piwil2重编程人成纤维细胞形成肿瘤样干细胞的基因差异表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基因组学与应用生物学 2020年第4期39卷 1886-1892页

作者：郭文浩何大维李典唐波张丹康青魏光辉重庆医科大学附属儿童医院儿童泌尿生殖发育与组织工程重庆市重点实验室儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆400014

利用基因芯片技术检测piwil2基因重编程人成纤维细胞(fibroblast,FB)形成肿瘤样干细胞的差异表达基因,分析主要差异表达信号通路。采用前期已构建的piwil2-gfp基因,以gfp作为空载对照的慢病毒转染人包皮来源的成纤维细胞,获得稳定转染... 详细信息

利用基因芯片技术检测piwil2基因重编程人成纤维细胞(fibroblast,FB)形成肿瘤样干细胞的差异表达基因,分析主要差异表达信号通路。采用前期已构建的piwil2-gfp基因,以gfp作为空载对照的慢病毒转染人包皮来源的成纤维细胞,获得稳定转染的肿瘤样干细胞,人成纤维细胞作为正常对照,采用基因芯片技术检测其转录差异表达,进行pathway分析,挑选差异表达明显的支链氨基酸代谢信号通路,采用q-PCR进行验证。基因芯片结果显示,FB-piwil2组相较于FB,上调基因1490个,下调基因1484个,参与支链氨基酸代谢等多条信号通路;FB-piwil2组相较于FB-GFP组,上调基因3765个,下调基因1988个,参与支链氨基酸代谢等多条信号通路;FB-GFP组相较于FB组,上调基因2095个,下调基因4014个,参与破骨细胞分化等信号通路;q-PCR验证重编程形成的肿瘤样干细胞克隆的支链氨基酸代谢信号通路上调的7个基因(acad8,acadm,aldh3a2,bcat1,hibch,hmgcs1,mccc2)与基因芯片上调表达一致。由此可见,piwil2基因重编程人成纤维细胞形成的肿瘤样干细胞基因出现差异表达,与支链氨基酸代谢相关。

关键词： piwil2 基因芯片成纤维细胞

汽车尾气来源PM2.5颗粒物长期暴露导致SD雄鼠生殖功能损害

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华男科学杂志 2016年第2期22卷 104-109页

作者：严超曹希宁沈炼桔刘东尧彭金普陈进军周玥龙春兰林涛何大维李旭良魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿科学重庆市重点实验室儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆400014

目的：建立Sprague Dawley（SD）大鼠空气细颗粒物（PM2.5）长期暴露模型,研究PM2.5长期暴露对SD大鼠生殖功能的损伤及其机制。方法：45只SD大鼠（80~94 g,28日龄）随机分配成3组：生理盐水对照组,低剂量组[2μg/（100 g·d）],高剂量组... 详细信息

目的：建立Sprague Dawley（SD）大鼠空气细颗粒物（PM2.5）长期暴露模型,研究PM2.5长期暴露对SD大鼠生殖功能的损伤及其机制。方法：45只SD大鼠（80~94 g,28日龄）随机分配成3组：生理盐水对照组,低剂量组[2μg/（100 g·d）],高剂量组[16μg/（100 g·d）]。每天分别给予0.9%的生理盐水或PM2.5颗粒,连续暴露60 d,最后一次暴露24 h后各实验组选取10只与正常雌鼠合笼,统计雌鼠受孕率,剩余实验鼠取材,进行精子计数和畸形率测定、睾丸组织病理学检测以及睾丸组织Connexin43蛋白表达检测。结果：与对照组雌鼠受孕率（100%）相比,PM2.5暴露组正常雌鼠受孕率（高剂量组50%,低剂量组70%）明显降低,精子数量和质量明显下降,生精小管结构紊乱,管腔精子数减少,部分次级精母细胞脱落至管腔。睾丸组织中Connexin43蛋白表达下降,血睾屏障破坏。结论：汽车尾气来源PM2.5长期暴露影响SD大鼠生殖功能。

关键词：空气细颗粒物大鼠汽车尾气生殖功能

邻苯二甲酸二-(2-乙基己基)酯通过氧化应激、凋亡诱导大鼠尿道下裂

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第三军医大学学报 2018年第5期40卷 372-379页

作者：黄方圆周玥王绍刘星沈炼桔龙春兰唐向亮李典魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科、儿童泌尿生殖发育与组织工程重庆市重点实验室、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的探讨邻苯二甲酸二-(2-乙基己基)酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]诱导大鼠发生尿道下裂的发生机制。方法 20只成年孕SD大鼠[10~12周龄,体质量(240±20)g]按完全随机分为:玉米油对照组[750 mg/(kg·d),n=10]和DEHP暴露组[750 mg/(kg·d),n=10],于妊娠期(gestation day,GD)第8.5~18.5日每日灌胃,于GD19.5时剖宫取出胎鼠,以有无睾丸分辨雌雄,并在解剖显微镜下观察有无尿道下裂的发生,将DEHP暴露组有尿道下裂的列入尿道下裂组,以玉米油对照组雄性无尿道下裂的胎鼠作为正常对照组。测量雄鼠胎鼠的肛门生殖器距离(anogenital distance,AGD)和肛门生殖指数(anogenital index,AGI),扫描电镜和HE染色观察阴茎组织形态改变情况,高效液相色谱法检测胎鼠肝脏中的维生素A、E水平,Western blot检测阴茎组织中氧化应激相关蛋白Nrf2、HO-1、SOD1、Gpx和凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax、Bcl2的表达水平,TUNEL法检测阴茎组织中的细胞凋亡。结果玉米油对照组胎鼠无尿道下裂发生,DEHP暴露组胎鼠出现尿道下裂,发生率为27.59%。与正常对照组相比,尿道下裂组AGD、AGI均明显降低(P组织中Nrf2、HO-1、Gpx、SOD1和Bcl2蛋白表达水平明显下降(P组织中细胞凋亡异常增加有关。

关键词：尿道下裂氧化应激损伤凋亡 DEHP

mTOR自噬信号通路和凋亡在DEHP致SD尿道下裂胎鼠中的改变

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华小儿外科杂志 2018年第5期39卷 383-388页

作者：黄方圆周玥沈炼桔魏仪龙春兰唐向亮李典刘星魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科、儿童泌尿生殖发育与组织工程重庆市重点实验室、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室 400014

目的探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯[Di（2-Ethylhexyl） Phthalate,DEHP]诱导大鼠发生尿道下裂的机制.方法 20只成年孕SD鼠[10～12周龄,体重（240±20 g）]按照数字随机化法分为：正常对照组（n=10）和DEHP暴露组（750 mg·kg-1·... 详细信息

目的探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯[Di（2-Ethylhexyl） Phthalate,DEHP]诱导大鼠发生尿道下裂的机制.方法 20只成年孕SD鼠[10～12周龄,体重（240±20 g）]按照数字随机化法分为：正常对照组（n=10）和DEHP暴露组（750 mg·kg-1·d-1）（n=10）,于妊娠期（gestationday,GD）第8.5～18.5日每日灌胃,于GD 19.5时剖宫取出胎鼠,以有无睾丸分辨雌雄,并在解剖显微镜下观察有无尿道下裂的发生.测量肛门生殖器距离（anogenital distance,AGD）和肛门生殖指数（anogenital index,AGI）,扫描电镜和HE染色观察阴茎组织形态改变,透射电镜观察阴茎组织内自噬的改变,western blot检测生殖结节（GTs）中自噬相关蛋白LC3、p62、Beclin1、Akt、mTOR、p-Akt、p-mTOR和凋亡相关蛋白cleaved-caspase3、Bax、Bcl2的表达水平,TUNEL法检测雄鼠GTs中细胞凋亡.结果 DEHP暴露后出现尿道下裂,发生率为27.58％,尿道下裂组中AGD、AGI均明显降低（P＜0.05）;尿道下裂雄鼠的GTs出现腹侧尿道缝融合障碍及尿道开口异位.尿道下裂组GTs中LC3和Beclin1的表达、LC3Ⅱ/Ⅰ比值增加（P＜0.05）,p62、p-Aktser473、p-mTORser2448表达明显减少（P＜0.05）,Bcl2表达减少（P＜0.05）,cleaved-caspase3和Bax蛋白表达水平则明显增高（P＜0.05）,细胞凋亡显著增加（P＜0.05）.结论 DEHP作为一个外源性干扰物进入机体后,致使胎鼠的GTs中PI3K/Akt/mTOR信号通路被抑制,自噬水平增加,同时促凋亡与抗凋亡系统失衡,进一步促进自噬的发生,最终使得凋亡异常增加,导致尿道下裂的发生.

关键词：尿道下裂细胞凋亡自噬 DEHP

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

双裂输尿管盲端支合并全身多器官畸形一例

中华小儿外科杂志 2020年第3期41卷 270-273页

作者：许俊杰刘星刘丰张德迎陆鹏吴盛德温晟华燚重庆医科大学儿科学院儿外科 400014 重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室儿童泌尿生殖发育与组织工程重点实验室400014

患儿男,7岁7个月,因"尿痛伴少尿2月余"入院。门诊彩色超声检查示"双肾积水、右侧输尿管扩张"。出生史、喂养史、家族史、过去史无特殊。体检示全身体表淋巴结未扪及肿大,心肺腹(-),右侧拇指多指畸形。余无特殊。血常规、肝肾功能、电解... 详细信息

患儿男,7岁7个月,因"尿痛伴少尿2月余"入院。门诊彩色超声检查示"双肾积水、右侧输尿管扩张"。出生史、喂养史、家族史、过去史无特殊。体检示全身体表淋巴结未扪及肿大,心肺腹(-),右侧拇指多指畸形。余无特殊。血常规、肝肾功能、电解质、大小便、凝血及免疫学常规均未见明显异常。B型超声检查示右肾积水伴输尿管扩张。排泄性膀胱尿道造影检查示膀胱充盈可,右侧膀胱-输尿管反流(V级),右侧肾盂及输尿管明显积水扩张,膀胱排空顺利,尿道未见明显异常。

关键词：输尿管扩张 B型超声检查右侧输尿管右肾积水彩色超声检查出生史喂养史膀胱充盈

ULBP2在肾母细胞瘤组织中的表达对评估患儿预后的意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华小儿外科杂志 2018年第7期39卷 515-518页

作者：郭文浩何大维李典唐波张丹魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科、儿童泌尿生殖发育与组织工程重点实验室、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室 400014

目的探讨ULBP2蛋白在儿童肾母细胞瘤的表达与肾母细胞瘤患儿预后之间的关系。方法收集重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科2014年1月至2016年12月的肾母细胞瘤肿瘤组织32例，通过电话随访肾母细胞瘤患儿预后等信息，通过调病历获取肾母细... 详细信息

目的探讨ULBP2蛋白在儿童肾母细胞瘤的表达与肾母细胞瘤患儿预后之间的关系。方法收集重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科2014年1月至2016年12月的肾母细胞瘤肿瘤组织32例，通过电话随访肾母细胞瘤患儿预后等信息，通过调病历获取肾母细胞瘤患儿临床病理信息。应用免疫组织化学法检测ULBP2蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达，并分析ULBP2蛋白等临床病理特征与肾母细胞瘤患儿预后的关系。结果ULBP2蛋白的表达、不同的病理类型、不同的临床分期在预后良好组肾母细胞瘤和预后不良组肾母细胞瘤中差异有统计学意义（P〈0.05）。在预后良好的肾母细胞瘤肿瘤组织中ULBP2蛋白的低表达率为78.57%（11/14），高表达率为21.43%（3/14）；在预后不良的肾母细胞瘤肿瘤组织中，ULBP2蛋白高表达率为100%（18/18）。ULBP2蛋白高表达诊断儿童肾母细胞瘤患儿预后不良的灵敏度为100%，特异度为78.57%，阳性预测值为85.7%，阴性预测值为100%。结论ULBP2蛋白在肾母细胞瘤中低表达预示患儿预后良好，高表达提示预后不良，对于评估儿童肾母细胞瘤的预后具有较高的临床价值。

关键词： Wilms瘤自然杀伤细胞预后