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Homer1b/c“支架”在CTNND2-/-自闭症模型鼠中的作用研究

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重庆医科大学学报 2024年第4期49卷 409-414页

作者：张翰鸿王岩吕明其聂应蔡锦雯王楚萱李英博重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学实验教学管理中心人体机能实验室重庆400016

目的:观察CTNND2-/-自闭症模型鼠前额叶皮层中支架蛋白荷马1b/c(homer protein homolog 1b and 1c,Homer1b/c)与三磷酸肌醇受体(inositol 1,4,5-trisphosphate receptor,IP3R)、代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)和香克3蛋白(sh3 and multiple ankyrin repeat domains 3,Shank3)蛋白相关复合体的变化;前额叶皮层中常见氨基酸的变化,发现自闭症模型鼠中可能参与疾病发生的关键靶点。方法:蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)法检测CTNND2-/-自闭症模型鼠前额叶皮层中支架蛋白Homer1b/c、突触后密度蛋白-95(postsynaptic density protein 95,PSD-95)、突触素蛋白(synaptophysin,SYP)、囊泡谷氨酸转运体1(vesicular glutamate transporter 1,vGluT1)的表达的变化;通过免疫荧光(immunofluorescence,IF)观察Homer1b/c与IP3R、mGluR5和Shank3蛋白的表达与共定位;免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CO-IP)技术分别观察Homer1b/c与IP3R、mGluR5或Shank3结合的变化;使用液相色谱(liquid chromatography,LC)观察前额叶皮层中常见氨基酸的变化。结果:与对照组相比,CTNND2-/-模型鼠前额叶皮层中Homer1b/c(P=0.003)、PSD-95(P=0.003)以及SYP蛋白(P=0.046)的表达均明显降低;同时,Homer1b/c与IP3R、mGluR5、Shank3蛋白相互之间结合减少;前额叶皮层中常见的兴奋性神经递质谷氨酸(glutamate,Glu)和抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的表达无明显变化(P=0.366,P=0.355),组氨酸(histidine,His)(P=0.036),酪氨酸(tyrosine,Tyr)(P=0.030)表达则明显增高。结论:CTNND2-/-自闭症模型鼠中Homer1b/c蛋白低表达,同时Homer1b/c与IP3R、Shank3、mGluR5蛋白复合物的形成减少,并推测低表达的Homer1b/c可能是导致自闭症神经元突触异常发育的关键靶点。

关键词： Homer1b/c 自闭症谱系障碍 CTNND2基因敲除鼠

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关注老年抑郁症患者的认知障碍

中华精神科杂志 2024年第10期57卷 632-636页

作者：杨铭枫宁玉萍广州医科大学附属脑科医院老年神经科学中心广州

老年抑郁症是一种常见的老年精神障碍, 具有高发病率、低识别率和高痴呆转化风险等特点。老年抑郁症患者普遍存在不同程度的认知功能障碍, 尤其是执行功能和处理速度方面的缺陷。文章深入分析了老年抑郁症认知障碍的可能病理机制, 包括... 详细信息

老年抑郁症是一种常见的老年精神障碍, 具有高发病率、低识别率和高痴呆转化风险等特点。老年抑郁症患者普遍存在不同程度的认知功能障碍, 尤其是执行功能和处理速度方面的缺陷。文章深入分析了老年抑郁症认知障碍的可能病理机制, 包括前额叶网络紊乱、脑血管损伤和阿尔茨海默病相关病理变化。在治疗方面, 抗抑郁药可改善部分认知功能, 但对执行功能的改善效果有限。针对老年抑郁症认知障碍病理机制的靶向治疗展现出潜在价值, 但仍需进一步研究。鉴于老年抑郁症的高度异质性, 未来研究应致力于解析其病理异质性, 以实现更精准的个体化治疗策略, 从而提高老年抑郁症患者的生活质量并降低痴呆转化风险。

关键词：抑郁症老年认知功能

基于Lasso回归的颅内静脉和静脉窦血栓形成预后预测模型的构建与验证

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中华神经外科杂志 2024年第5期40卷 492-499页

作者：张家淳郑鉴峰李钢李静陈桂虎郭宗铎孙晓川重庆医科大学附属第一医院神经外科重庆400016

目的基于最小绝对收缩和选择算子(Lasso)回归构建颅内静脉和静脉窦血栓形成(CVST)预后的预测模型并验证其效能。方法回顾性分析2012年12月至2023年5月重庆医科大学附属第一医院神经外科收治的98例CVST患者的临床资料。患者的预后通过改... 详细信息

目的基于最小绝对收缩和选择算子(Lasso)回归构建颅内静脉和静脉窦血栓形成(CVST)预后的预测模型并验证其效能。方法回顾性分析2012年12月至2023年5月重庆医科大学附属第一医院神经外科收治的98例CVST患者的临床资料。患者的预后通过改良Rankin量表评分(mRS)评估。对比预后良好组(mRS<3分,81例)与预后不良组患者(mRS≥3分,17例)的基线资料、首发症状、入院时根据颅内静脉和硬脑膜窦血栓形成的国际研究建立的风险评分(ISCVT-RS)、入院时颅内静脉血栓形成分级量表(CVT-GS)、入院时格拉斯哥昏迷评分(GCS)、治疗方案、出院时mRS、影像学资料及实验室检查资料。应用二元logistic回归筛选出预测因子构建预后预测模型1,再应用Lasso回归筛选出预测因子构建预测模型2。运用受试者工作特征曲线(ROC)和曲线下面积(AUC)评估两种预测模型的效能。校准曲线用于评估预测模型的校准度。采用Bootstrap自抽样方法对模型进行内部验证。采用决策曲线分析(DCA)方法评估预测模型的临床获益。结果与预后良好组比较,预后不良组意识障碍、肢体乏力、脑实质出血、静脉性梗死、乙状窦血栓形成、横窦血栓形成及颈内静脉血栓形成的患者占比均较高,入院时ISCVT-RS、CVT-GS评分、GCS、外周血白细胞计数、中性粒细胞计数、血糖浓度、D-二聚体均较高,而淋巴细胞计数和血清白蛋白浓度均较低,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,肢体乏力(OR=9.40,95%CI:1.13~78.42)、外周血中性粒细胞计数升高(OR=1.70,95%CI:1.18~2.44)和血糖浓度升高(OR=1.36,95%CI:1.03~1.79)为CVST患者预后的危险因素,而外周血淋巴细胞计数升高(OR=0.05,95%CI:0.01~0.29)以及血清白蛋白浓度升高(OR=0.82,95%CI:0.70~0.96)为CVST患者预后的保护因素,基于以上5个预测因子构建预测模型1。预测模型2基于静脉性梗死、外周血中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、血清白蛋白浓度、血糖浓度和D-二聚体6个预测因子构建。两种预测模型的AUC分别为0.95(95%CI:0.90~1.00)、0.94(95%CI:0.89~0.99)。校准曲线显示预测和实际观测之间具有良好的同质性。DCA显示,预测模型2具有更大的标准化净收益。结论基于静脉性梗死、外周血中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、血清白蛋白浓度、血糖浓度和D-二聚体构建的Lasso回归预测模型2为CVST患者提供了更符合临床实际的预后预测,可以更加快捷、准确地评估CVST患者的预后,从而指导临床治疗。

关键词：窦血栓形成,颅内静脉血栓形成预后比例危险度模型列线图

Senp1介导蛛网膜下腔出血后神经元焦亡的作用

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陆军军医大学学报 2024年第17期46卷 1976-1984页

作者：马寅瑞何朝晖重庆医科大学附属第一医院神经外科重庆400016

目的探究SUMO特异性蛋白酶1(SUMO-specific protease 1,Senp1)在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)中参与神经元焦亡的机制。方法95只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术(sham)组(n=15)、SAH(6、12、24、48、72 h)组(n=8、7、17、6、6)、SAH+AAV9-NC组(n=19)、SAH+AAV9-sh-Senp1组(n=17),左侧颈内动脉血管内穿刺建立SAH动物模型,神经行为学评分评价神经功能,HE染色、FJC染色观察脑皮质神经元损伤情况,RT-PCR检测敲低Senp1的mRNA水平,Western blot检测各组Senp1、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、焦孔素D(gasdermin D,GSDMD)、含PYD和CARD域蛋白(PYD and CARD domain containing,ASC)及半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的表达,免疫荧光观察Senp1和NLRP3的定位表达。结果SAH后Senp1表达升高,于24 h达到峰值,并表达于脑皮质神经元。与sham组相比,SAH组Senp1、NLRP3、GSDMD、ASC和Caspase-1的表达明显升高(P神经损伤加重,并且有神经功能障碍;与SAH+AAV9-NC组相比,给予AAV9-sh-Senp1后神经损伤及功能明显改善,Senp1及上述焦亡蛋白NLRP3、GSDMD、ASC、Caspase-1表达明显降低(P神经元焦亡。结论Senp1在SAH后促进细胞焦亡的发生,介导神经元损伤。

关键词： Senp1 蛛网膜下腔出血细胞焦亡神经炎症

YAP通过促进自噬抑制髓核细胞胞外基质分解代谢

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陆军军医大学学报 2024年第10期46卷 1107-1114页

作者：易威威唐秋雨陶白龙李开庭王大武重庆医科大学附属第一医院康复医学科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆400016

目的探讨YAP对椎间盘髓核细胞的作用及其可能机制。方法收集重庆医科大学附属第一医院2021年3月至2022年7月接受腰椎手术患者的相对正常和退变的椎间盘组织,采用免疫组化和Western blot检测YAP在人椎间盘髓核组织中的表达差异。体外培... 详细信息

目的探讨YAP对椎间盘髓核细胞的作用及其可能机制。方法收集重庆医科大学附属第一医院2021年3月至2022年7月接受腰椎手术患者的相对正常和退变的椎间盘组织,采用免疫组化和Western blot检测YAP在人椎间盘髓核组织中的表达差异。体外培养人原代髓核细胞,通过IL-1β处理诱导髓核细胞退变,将实验分为对照组、IL-1β组、IL-1β+LV-YAP组、IL-1β+YAP-siRNA组和IL-1β+LV-YAP+3-MA组。采用Western blot检测细胞外基质分解代谢及自噬水平变化。最后建立大鼠椎间盘退变模型,利用MRI、阿利新蓝染色及免疫组化检测YAP和LC3的表达及椎间盘退变情况。结果YAP在退变椎间盘组织的表达水平明显低于相对正常的椎间盘组织(P<0.05)。体外细胞实验结果显示,IL-1β+LV-YAP组显著提高IL-1β诱导的髓核细胞中CollagenⅡ、Aggrecan和LC3-Ⅱ的蛋白表达(P<0.05),降低MMP-3和MMP-13的蛋白表达(P<0.05),而IL-1β+YAP-siRNA组则表现出完全相反的作用。而予以自噬抑制剂3-MA预处理后明显降低IL-1β+LV-YAP组中GFP-LC3阳性颗粒数量和CollagenⅡ、Aggrecan、LC3-Ⅱ蛋白表达(P<0.05),且提高MMP-3和MMP-13的蛋白表达(P<0.05)。进一步在体内构建大鼠椎间盘退变模型,YAP过表达促进LC3表达和抑制椎间盘退变。结论YAP过表达通过促进人髓核细胞自噬抑制细胞外基质降解,从而延缓椎间盘退变。

关键词： YAP 椎间盘退变自噬细胞外基质髓核细胞

PIK3R3在生长激素型垂体神经内分泌肿瘤中的表达及其生物学功能研究

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中华神经外科杂志 2024年第6期40卷 618-625页

作者：张港汪攀廖彬龚胜吴南重庆医科大学重庆400016 重庆市人民医院神经外科重庆401147

目的探讨磷酸肌醇3激酶调节亚基3(PIK3R3)在生长激素型垂体神经内分泌肿瘤(GH-PitNETs)中的表达及其与细胞增殖、迁移和侵袭之间的关系.方法利用基因表达数据库(GEO)中相关的PitNETs数据集,分析PIK3R3在GH-PitNETs中的表达情况.利用来... 详细信息

目的探讨磷酸肌醇3激酶调节亚基3(PIK3R3)在生长激素型垂体神经内分泌肿瘤(GH-PitNETs)中的表达及其与细胞增殖、迁移和侵袭之间的关系.方法利用基因表达数据库(GEO)中相关的PitNETs数据集,分析PIK3R3在GH-PitNETs中的表达情况.利用来源于不同PitNETs亚型的细胞株,通过蛋白质免疫印迹实验(WB)检测PIK3R3在GH3、MMQ和AtT-20细胞中的表达情况.体外培养GH3细胞,应用慢病毒感染的方法对PIK3R3进行敲低,并将细胞分为PIK3R3敲低2组(Sh-PIK3R3-2)、PIK3R3敲低3组(Sh-PIK3R3-3)和未转染对照组(Sh-NC),通过CCK-8、EdU及集落形成实验检测各组细胞增殖速度,采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,采用WB检测上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)、神经型钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、AKT和磷酸化AKT(P-AKT)的表达.结果GEO数据库的数据分析结果显示,相较于正常垂体或瘤旁组织,PIK3R3在GH-PitNETs中表达上调(均P0.05).WB检测结果显示,相较于MMQ和AtT-20细胞,PIK3R3在GH3细胞中表达更高(均P0.05).结论PIK3R在GH-PitNETs中高表达,并通过激活AKT信号传导,促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭.

关键词：垂体肿瘤磷酸肌醇3激酶调节亚基3 细胞增殖细胞迁移细胞侵袭体外研究

迷走神经刺激对急性呼吸窘迫综合征大鼠Th17和Treg相关蛋白及炎症因子的影响

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海军军医大学学报 2024年第5期45卷 544-551页

作者：张欣贾功伟虞乐华程黎重庆医科大学附属第二医院健康医学中心重庆400010

目的在脂多糖(LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型大鼠中,探讨迷走神经刺激(VNS)对辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)相关蛋白及炎症因子的调控作用。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+VNS组,每组10只。LPS组和LP... 详细信息

目的在脂多糖(LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型大鼠中,探讨迷走神经刺激(VNS)对辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)相关蛋白及炎症因子的调控作用。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+VNS组,每组10只。LPS组和LPS+VNS组大鼠通过鼻腔滴注2 mg/kg LPS构建ARDS模型。LPS+VNS组于鼻腔滴注LPS 6 h后暴露左侧颈部迷走神经,给予电压5 V、频率5 Hz、脉冲宽度2 ms的电刺激,持续10 min。电刺激2 h后取双肺及脾组织进行检测。检测指标包括肺部病理学变化、肺湿干比、支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白含量、BALF中炎症因子水平、肺及脾组织中Treg转录蛋白叉头框蛋白P3(Foxp3)和Th17转录蛋白维甲酸受体相关孤儿受体γt(Rorγt)表达。结果与对照组相比,LPS组大鼠肺泡壁明显变厚、炎症细胞浸润到肺泡腔,BALF总蛋白含量增高(P<0.01),肺湿干比增高(P<0.01),BALF中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-10表达升高(均P<0.01),肺和脾组织中Foxp3和Rorγt蛋白表达上调;与LPS组相比,LPS+VNS组大鼠肺组织病理表现减轻,肺湿干比下降(P<0.05),BALF总蛋白含量降低(P<0.05),BALF中IL-6和IL-17降低(均P<0.05)、IL-10升高(P<0.01),肺及脾组织中Foxp3蛋白表达上调、Rorγt蛋白表达下调。结论VNS可能通过调控大鼠肺和脾组织Th17和Treg相关蛋白表达进而调控炎症因子水平,减轻LPS诱导的ARDS病理改变。

关键词：急性呼吸窘迫综合征迷走神经电刺激炎症因子辅助性T细胞调节性T细胞

GABA能系统在Tourette综合征中的作用及治疗展望

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中国儿童保健杂志 2024年第10期32卷 1101-1105页

作者：许莹史海水张会丰田晓瑜河北医科大学第二医院儿科河北石家庄050000 河北医科大学神经科学研究中心河北医科大学护理学院

Tourette综合征(TS)是一种儿童和青少年中患病率约为1%的慢性神经精神障碍性疾病。临床特征为眨眼、摇头等头面以及躯干、四肢等部位骨骼肌的突发的、不自主性的抽动症状和发声抽搐。目前TS的发病机制不明,尚缺乏有效的治疗手段。γ-氨... 详细信息

Tourette综合征(TS)是一种儿童和青少年中患病率约为1%的慢性神经精神障碍性疾病。临床特征为眨眼、摇头等头面以及躯干、四肢等部位骨骼肌的突发的、不自主性的抽动症状和发声抽搐。目前TS的发病机制不明,尚缺乏有效的治疗手段。γ-氨基丁酸(GABA)是哺乳动物大脑中主要的抑制性神经递质。有研究显示,GABA能系统的失衡参与了多种神经精神疾病的发生发展。近年来,GABA能系统在TS中的作用被大家关注。目前研究集中在GABA能代谢途径的异常以及TS患者肠道菌群GABA代谢的变化。但目前没有特定治疗TS的GABA能系统药物。该文提供了关于GABA能系统在TS病理生理学中的作用以及其作为新治疗的潜在靶点。

关键词：多发性抽动症 γ-氨基丁酸 GABA能系统脑肠轴

夫妻双方胰岛素抵抗对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

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陆军军医大学学报 2024年第6期46卷 623-629页

作者：雷若冰李维宏重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心重庆400016

目的探讨原发不孕夫妻双方胰岛素抵抗对新鲜周期胚胎移植妊娠结局的影响。方法纳入2022年10月-2023年10月在重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心首次行体外受精-胚胎移植/卵泡浆内单精子显微注射(in vitro fertilization and embryo... 详细信息

目的探讨原发不孕夫妻双方胰岛素抵抗对新鲜周期胚胎移植妊娠结局的影响。方法纳入2022年10月-2023年10月在重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心首次行体外受精-胚胎移植/卵泡浆内单精子显微注射(in vitro fertilization and embryo transfer/intracytoplasmic sperm injection, IVF-ET/ICSI)助孕并进行新鲜周期胚胎移植的原发不孕夫妻101例。根据患者夫妇单方是否合并胰岛素抵抗(insulin resistance, IR),分别分为两组:女方IR组(49例),女方无IR组(52例)。男方IR组(49例),男方无IR组(52例)。比较女方IR组和非IR组,男方IR组和非IR,各组间基础资料、促排卵情况、胚胎移植情况和妊娠结局的差异,Logistic回归分析胰岛素抵抗对妊娠结局及促排卵实验室指标的影响。结果 (1)IR女性组的体质量、BMI与非IR女性组比较均显著升高(P<0.05),AFC与非IR女性组比较显著减少(P<0.05)。(2)女性空腹血糖与获卵数、MII卵数、可移植胚胎数、优质胚胎数均呈负相关(P<0.05);女性空腹胰岛素与GN天数及总量呈正相关(P<0.05);女性HOMA-IR与GN天数及总量呈正相关(P<0.05)。(3)IR女性组胚胎种植率、临床妊娠率与非IR女性组相比均显著降低(P<0.05)。(4)男性IR组的BMI与男性非IR组比较显著升高(P<0.05)。(5)三组夫妻(双方IR组、一方IR组、双方均无IR组)的胚胎种植率、临床妊娠率有降低趋势,但无统计学差异。(6)女性空腹血糖显著负向影响获卵数、MII卵数、可移植胚胎数、优质胚胎数。结论胰岛素抵抗影响原发不孕女性IVF/ICSI周期的胚胎质量;原发不孕夫妻双方胰岛素抵抗可能对IVF/ICSI周期的胚胎种植率和临床妊娠率有负面影响。

关键词：胰岛素抵抗不孕症体外受精-胚胎移植妊娠结局