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运用微流控技术分析虫草素对剪切诱导血小板聚集和活化的抑制效果

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 541-548页

作者：高雪梅张天聪黄小静宦宣容李远重庆医科大学附属永川医院中心实验室重庆402160

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7... 详细信息

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7和50μL·min^(-1)流过带有0.5 mm长的80%狭窄的通道150 s,同时用荧光显微镜实时拍摄血小板在微通道表面的黏附聚集图像;用Image J分析荧光图片,以血小板表面覆盖率作为血小板聚集的量化指标。流式细胞术分析虫草素对血小板钙离子动员,单核细胞-血小板聚集体的抑制效果,并通过凝血检测和溶血实验对虫草素出血风险以及血液相容性做评估。结果虫草素可抑制剪切诱导的血小板聚集。在14.7和50μL·min^(-1)条件下,血小板聚集均可被虫草素抑制。虫草素抑制血小板钙离子动员和单核细胞-血小板聚集具有剪切力相关性,并且对外源性凝血途径和内源性凝血途径无影响,具有良好血液相容性。结论虫草素可有效抑制剪切率诱导的血小板聚集,是一种有潜力的抗血小板药物。

关键词：血小板聚集微流控技术壁剪切率虫草素

表层氧化对单晶铁薄膜电子磁手性二向色性谱的影响研究

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电子显微学报 2024年第4期 464-472页

作者：曾志欣胡绮雯李建军符潇潇黄晓旭重庆大学材料科学与工程学院轻合金材料国际合作联合实验室重庆大学电子显微镜中心

电子磁手性二向色性技术（EMCD）是一种基于透射电镜电子能量损失谱（EELS）的磁表征技术，可实现亚纳米级高空间分辨、元素分辨的局域轨道自旋磁矩定量测量。本文以单晶铁薄膜为例研究了金属透射样品表面氧化对EMCD信号的影响。在Fe/Mg... 详细信息

电子磁手性二向色性技术（EMCD）是一种基于透射电镜电子能量损失谱（EELS）的磁表征技术，可实现亚纳米级高空间分辨、元素分辨的局域轨道自旋磁矩定量测量。本文以单晶铁薄膜为例研究了金属透射样品表面氧化对EMCD信号的影响。在Fe/MgO（001）薄膜的平面样品中，从不同区域中提取一系列低能损失谱、Fe-L2,3峰常规在轴芯能级损失谱和动量转移矢量分辨的离轴芯能级损失谱（q-EELS）。结合低能损失谱和常规在轴芯能级损失谱，可合理忽略所选区域的复散射，且发现样品靠近孔洞边缘的区域较其他区域而言存在更为严重的氧化情况。表层氧化物相对含量的增加导致所选数据中常规在轴芯能级损失谱以及动量转移矢量分辨离轴芯能级损失谱的白线比值均呈单调递增趋势，这种现象原理上会导致从EMCD谱中提取的轨道-自旋磁矩比值的偏差相对递增。此外，作者还发现样品表层氧化、非晶化、样品弯曲效应和外延质量等因素综合引起了实验中局部衍射条件的轻微不规则变化，这些因素同样对EMCD定量的结果有较大的影响，最终导致所观测区域EMCD谱中实际提取的轨道-自旋磁矩比值呈不规则变化。本工作建议在进行易氧化单质金属的EMCD实验时，可预先进行会聚束辐照以降低表层氧化物厚度，并注意关注衍射条件的细微变化。

关键词： EMCD 表层氧化复散射动量分辨芯能级损失谱

低强度脉冲聚焦超声对小鼠膝关节软骨细胞损伤中炎症因子和焦亡蛋白的影响

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海军军医大学学报 2024年第3期45卷 268-276页

作者：魏霞李东倩骆诗琪贾朗重庆医科大学附属第二医院康复科重庆400010

目的探讨低强度脉冲聚焦超声(FLIPUS)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠膝关节软骨细胞损伤中炎症因子和细胞焦亡相关蛋白表达的影响及其保护软骨的作用机制。方法提取C57BL/6J小鼠膝关节原代软骨细胞进行体外实验,用1μg/mL LPS处理软骨细胞12 ... 详细信息

目的探讨低强度脉冲聚焦超声(FLIPUS)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠膝关节软骨细胞损伤中炎症因子和细胞焦亡相关蛋白表达的影响及其保护软骨的作用机制。方法提取C57BL/6J小鼠膝关节原代软骨细胞进行体外实验,用1μg/mL LPS处理软骨细胞12 h模拟骨关节炎样软骨细胞损伤。细胞分为对照组(仅用含10%FBS的培养基培养,不予任何处理)、LPS组(LPS处理12 h)和LPS+FLIPUS组(LPS处理12 h后再用FLIPUS干预20 min)。采用蛋白质印迹法检测各组软骨细胞中Ⅱ型胶原蛋白α1(COL2α1)、炎症细胞因子(IL-18和IL-1β)、焦亡相关蛋白[核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、cleaved caspase 1、消皮素D N端片段(GSDMD-N)]、软骨基质降解因子[基质金属蛋白酶(MMP)13、MMP3和血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)]的表达。采用钙黄绿素乙酰氧基甲酯(calcein AM)/PI荧光染色和乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞活性,采用扫描电子显微镜观察细胞的形态变化,采用ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、IL-18水平。结果成功提取小鼠膝关节原代软骨细胞并模拟骨关节炎样软骨细胞损伤。与对照组相比,LPS组小鼠膝关节软骨细胞中COL2α1蛋白表达降低(P<0.01),MMP13、MMP3、ADAMTS5、NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase 1、IL-18和IL-1β蛋白表达增加(均P<0.01),细胞上清液中IL-18、IL-1β水平升高和LDH释放增加(均P<0.01),细胞肿胀变形,细胞膜上出现较多孔隙,丧失完整性,细胞死亡率增加(P<0.01)。与LPS组相比,LPS+FLIPUS组小鼠膝关节软骨细胞中COL2α1蛋白表达上升(P<0.01),MMP13、MMP3、ADAMTS5、NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase 1、IL-18和IL-1β蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01),细胞上清液中IL-18、IL-1β水平下降和LDH释放减少(P<0.05,P<0.01),细胞肿胀程度减轻,细胞膜上孔隙减少,细胞死亡率下降(P<0.05)。结论FLIPUS可能通过抑制炎症因子和细胞焦亡相关蛋白表达减轻LPS诱导的小鼠膝关节软骨细胞损伤。

关键词：低强度脉冲聚焦超声骨关节炎炎症软骨细胞细胞焦亡

靶向脑内糖原合成激酶-3β的环丙酰胺吡啶类化合物的设计和合成及活性评估

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中国新药杂志 2024年第3期33卷 279-284页

作者：贾建华杨美仙邱大川重庆医科大学基础医学院放射医学实验室重庆400016

目的:合成靶向脑内糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的环丙酰胺吡啶类衍生物,为开发用于阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)治疗的GSK-3β小分子抑制剂及AD脑正电子发射计算机断层成像(positron emission to... 详细信息

目的:合成靶向脑内糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的环丙酰胺吡啶类衍生物,为开发用于阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)治疗的GSK-3β小分子抑制剂及AD脑正电子发射计算机断层成像(positron emission tomography,PET)的显像剂提供优秀先导化合物。方法:通过Pd催化的Suzuki偶联反应形成环丙酰胺吡啶偶联芳环的靶向GSK-3β目标化合物;通过酶抑制实验测试了化合物对GSK-3β的抑制活性;通过SwissADME预测了化合物穿透血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的能力。结果:目标产物结构经1H-NMR,13C-NMR和HRMS确证;化合物表现出对GSK-3β蛋白中等及较高水平的抑制活性;氟代酰胺类化合物(17,18,19和20)可能会穿过BBB。结论:环丙酰胺吡啶类化合物具有开发成用于AD治疗的GSK-3β抑制剂或转化成PET显像剂的潜力。

关键词：环丙酰胺吡啶类衍生物合成生物活性糖原合成激酶-3β抑制剂正电子发射计算机断层成像显像剂

精神科门诊青少年患者烟草及电子烟使用现状的研究

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精神科门诊青少年患者烟草及电子烟使用现状的研究

作者：程娟重庆医科大学

学位级别：硕士

显微镜下多血管炎合并弥漫性肺泡出血的死亡危险因素分析

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显微镜下多血管炎合并弥漫性肺泡出血的死亡危险因素分析

作者：杨雪重庆医科大学

学位级别：硕士

夫妻双方胰岛素抵抗对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

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陆军军医大学学报 2024年第6期46卷 623-629页

作者：雷若冰李维宏重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心重庆400016

目的探讨原发不孕夫妻双方胰岛素抵抗对新鲜周期胚胎移植妊娠结局的影响。方法纳入2022年10月-2023年10月在重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心首次行体外受精-胚胎移植/卵泡浆内单精子显微注射(in vitro fertilization and embryo... 详细信息

目的探讨原发不孕夫妻双方胰岛素抵抗对新鲜周期胚胎移植妊娠结局的影响。方法纳入2022年10月-2023年10月在重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心首次行体外受精-胚胎移植/卵泡浆内单精子显微注射(in vitro fertilization and embryo transfer/intracytoplasmic sperm injection, IVF-ET/ICSI)助孕并进行新鲜周期胚胎移植的原发不孕夫妻101例。根据患者夫妇单方是否合并胰岛素抵抗(insulin resistance, IR),分别分为两组:女方IR组(49例),女方无IR组(52例)。男方IR组(49例),男方无IR组(52例)。比较女方IR组和非IR组,男方IR组和非IR,各组间基础资料、促排卵情况、胚胎移植情况和妊娠结局的差异,Logistic回归分析胰岛素抵抗对妊娠结局及促排卵实验室指标的影响。结果 (1)IR女性组的体质量、BMI与非IR女性组比较均显著升高(P<0.05),AFC与非IR女性组比较显著减少(P<0.05)。(2)女性空腹血糖与获卵数、MII卵数、可移植胚胎数、优质胚胎数均呈负相关(P<0.05);女性空腹胰岛素与GN天数及总量呈正相关(P<0.05);女性HOMA-IR与GN天数及总量呈正相关(P<0.05)。(3)IR女性组胚胎种植率、临床妊娠率与非IR女性组相比均显著降低(P<0.05)。(4)男性IR组的BMI与男性非IR组比较显著升高(P<0.05)。(5)三组夫妻(双方IR组、一方IR组、双方均无IR组)的胚胎种植率、临床妊娠率有降低趋势,但无统计学差异。(6)女性空腹血糖显著负向影响获卵数、MII卵数、可移植胚胎数、优质胚胎数。结论胰岛素抵抗影响原发不孕女性IVF/ICSI周期的胚胎质量;原发不孕夫妻双方胰岛素抵抗可能对IVF/ICSI周期的胚胎种植率和临床妊娠率有负面影响。

关键词：胰岛素抵抗不孕症体外受精-胚胎移植妊娠结局

罗汉果皂苷V对RSL3诱导的SH-SY5Y细胞铁死亡的抑制作用及其机制

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中国病理生理杂志 2024年第6期40卷 1033-1042页

作者：刘艳夏荣松冉冬芝彭哲王红重庆医科大学重庆400016 重庆市人民医院药学部重庆401147 重庆医科大学附属妇女儿童医院重庆市妇幼保健院重庆401147

目的:探讨罗汉果皂苷V(MV)对铁死亡诱导剂RAS选择性致死分子3(RSL3)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞铁死亡的抑制作用及可能机制。方法:用RSL3诱导SH-SY5Y细胞建立铁死亡模型。MTT法检测细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态;亚铁离子荧光... 详细信息

目的:探讨罗汉果皂苷V(MV)对铁死亡诱导剂RAS选择性致死分子3(RSL3)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞铁死亡的抑制作用及可能机制。方法:用RSL3诱导SH-SY5Y细胞建立铁死亡模型。MTT法检测细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态;亚铁离子荧光探针FerroFarRed检测细胞内亚铁离子含量;线粒体红色荧光探针MitoTracker Red CMXRos检测线粒体膜电位(MMP);超氧化物阴离子荧光探针二氢乙啶和线粒体超氧化物红色荧光探针MitoSoX Red分别检测细胞内和线粒体内活性氧(ROS)。微板法检测细胞谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。Western blot检测脂酰辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、环加氧酶2(COX-2、)谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白表达水平。分子对接技术预测MV与ACSL4、COX-2、GPX4和SLC7A11的靶向关系。结果:与control组相比,RSL3组SH-SY5Y细胞活力显著降低(P<0.01),细胞内亚铁离子含量、细胞内和线粒体内ROS水平及MDA水平显著升高(P<0.05或P<0.01),MMP和GSH水平显著降低(P<0.01),ACSL4和COX-2蛋白表达水平显著升高,而GPX4和SLC7A11蛋白表达水平显著降低(P<0.01),提示成功建立了细胞铁死亡模型。MV处理使细胞活力显著升高(P<0.05),细胞内亚铁离子含量、细胞内和线粒体内ROS水平及MDA水平显著降低(P<0.01),MMP和GSH水平显著升高(P<0.05或P<0.01);ACSL4和COX-2蛋白水平显著降低,而GPX4和SLC7A11蛋白水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。分子对接结果显示,MV与铁死亡核心蛋白ACSL4、COX-2、GPX4和SLC7A11存在结合位点。结论:MV可抑制RSL3诱导的SH-SY5Y细胞铁死亡的发生,其机制可能与激活SLC7A11/GPX4和抑制ACSL4/COX-2有关。

关键词：罗汉果皂苷V 神经母细胞瘤 RSL3化合物铁死亡 SLC7A11/GPX4信号通路

嗜铬细胞瘤及副神经节瘤不同生化表型的CT征象对比研究

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重庆医科大学学报 2024年第2期49卷 203-209页

作者：赵晓芳杨萍刘柳李庆姝李易陶奉明毛芸重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理教研室重庆400016

目的:分析生化阴性嗜铬细胞瘤及副神经节瘤(pheochromocytomas and paragangliomas,PPGLs)的电子计算机断层扫描(computed tomography,CT)征象是否有别于生化阳性PPGLs,同时了解生化阳性PPGLs不同表型的CT征象是否存在差异。方法:回顾... 详细信息

目的:分析生化阴性嗜铬细胞瘤及副神经节瘤(pheochromocytomas and paragangliomas,PPGLs)的电子计算机断层扫描(computed tomography,CT)征象是否有别于生化阳性PPGLs,同时了解生化阳性PPGLs不同表型的CT征象是否存在差异。方法:回顾性分析131例PPGLs患者的术前腹部增强CT图像,包括肿瘤位置、大小、形态、囊变坏死、液-液分层、钙化、向心结节状强化、肿瘤内粗大血管、强化包膜、绝对廓清率及相对廓清率。根据生化水平,将患者分为生化阳性组和阴性组,阳性组进一步分为去甲肾上腺素型、肾上腺素型及多巴胺型。比较各组及各表型间的CT征象差异。结果:相较于生化阴性组,阳性组PPGLs更大(Z=-2.064,P=0.039)、囊变坏死(χ2=6.610,P=0.010)及向心结节状强化(χ2=3.909,P=0.048)的比例更高;相较于去甲肾上腺素型,肾上腺素型PPGLs更大(Z=-2.036,P=0.042)、强化包膜比例更高(χ2=7.242,P=0.007)。结论:肿瘤大小、囊变坏死及向心结节状强化的CT征象有助于术前诊断生化阴性PPGLs,肿瘤大小及强化包膜有助于解释去甲肾上腺素型及肾上腺素型PPGLs不同临床表现产生的机制。

关键词：嗜铬细胞瘤副神经节瘤甲氧基肾上腺素类物质电子计算机断层扫描诊断