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CD8^(+)T细胞在致死型约氏疟原虫17XL感染中的作用研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第7期44卷 620-628页

作者：吕童常玉芝李菲菲张晨晨曹雅明冯辉德阳市人民医院检验科德阳618000 中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110122

目的探讨CD8^(+)T细胞在抵抗致死型约氏疟原虫17XL(Plasmodium yoelii 17XL,Py 17XL)感染中的作用。方法对BALB/c和C57BL/6小鼠腹腔接种Py 17XL感染红细胞(1×10^(6)个/0.1 ml),建立疟原虫感染模型。动态监测小鼠红细胞感染率、生存率... 详细信息

目的探讨CD8^(+)T细胞在抵抗致死型约氏疟原虫17XL(Plasmodium yoelii 17XL,Py 17XL)感染中的作用。方法对BALB/c和C57BL/6小鼠腹腔接种Py 17XL感染红细胞(1×10^(6)个/0.1 ml),建立疟原虫感染模型。动态监测小鼠红细胞感染率、生存率。流式细胞术检测CD8^(+)T细胞亚群效应T细胞(T EFF)和记忆T细胞(T CM)数量,检测IFN-γ和颗粒酶B(granzyme B,GB)表达水平,及CD8^(+)T细胞表面CXCR3、CXCR6和CX3CR1表达水平。对Py 17XL感染C57BL/6小鼠进行FTY720阻断试验,分析CD8^(+)T细胞迁移对Py 17XL感染的影响。结果BALB/c小鼠红细胞感染率在感染后5 d持续上升,8 d达峰值[(79.57±3.82)%],且明显高于C57BL/6小鼠(P学意义(P<0.0001)。流式结果显示,与BALB/c小鼠相比,C57BL/6小鼠脾脏和肝脏CD8^(+)T细胞绝对值数量显著增加(P<0.05),脾脏和淋巴结CD8^(+)T EFF和CD8^(+)T CM细胞数量显著升高(P<0.05)。与BALB/c小鼠相比,C57BL/6小鼠脾脏和肝脏CD8^(+)T细胞表达GB、IFN-γ及趋化因子水平显著升高(P<0.05)。FTY720阻断试验显示,实验组小鼠生存率显著性下降(P<0.05),肝脏和脾脏CD8^(+)T细胞绝对数明显下降(P<0.05);且CD8^(+)CXCR3^(+)T细胞数量显著下调(P<0.05)。结论CD8^(+)T细胞通过T_(EFF)和T_(CM)亚群以分泌GB和IFN-γ方式介导抵抗Py 17XL感染。趋化因子受体CXCR3在介导CD8^(+)T细胞向脾脏和肝脏趋化中发挥重要作用。

关键词：约氏疟原虫 CD8^(+)T细胞效应T细胞记忆T细胞

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体PA103的生物学特性及全基因组分析

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中国病原生物学杂志 2024年第10期19卷 1182-1188,1193页

作者：张改靳静陈松建王书伟李振江刘肖李亚辉张欢欢王山梅河南医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室河南郑州451191 河南省人民医院检验科

目的探讨耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)噬菌体PA103的生物学特性及全基因组信息。方法以CRAB临床菌株A103为宿主菌,采用双层平板法在市政污水中分离得到1株裂解性噬菌体PA103;通过双... 详细信息

目的探讨耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)噬菌体PA103的生物学特性及全基因组信息。方法以CRAB临床菌株A103为宿主菌,采用双层平板法在市政污水中分离得到1株裂解性噬菌体PA103;通过双层平板法观察噬菌斑形态;通过透射电镜观察噬菌体形态特征;调查PA103的噬菌谱、一步生长曲线及对温度和酸碱的稳定性;应用蛋白酶K/SDS法提取噬菌体基因组DNA;对PA103进行基因组测序、拼装;用RAST在线预测软件对基因组中可能存在的开放读码框进行预测;用MEGA 11.0软件以末端酶大亚基构建进化树,用Mauve软件进行比较基因组学分析。结果试验分离得到1株可以裂解CRAB的裂解性噬菌体,命名为PA103;它可以在宿主菌A103的菌苔上形成直径约2 mm完全透明的噬菌斑,周围环绕宽为3~4 mm的半透明晕环;透射电镜显示PA103属于有尾噬菌体,头部和尾部直径长度约64 nm和120 nm;一步生长曲线显示PA103的潜伏期约为40 min,爆发期约为15 min,爆发量约为17 PFU/cell;噬菌体PA103在50、60℃,pH 5.0~9.0的环境下,均能保持相对稳定的活性;PA103的基因组全长45 225 bp, G+C含量为37.82%,全基因组预测含86个开放阅读框,其中29个为功能蛋白,其余57个被注释为假定蛋白;共线性分析结果显示噬菌体PA103与噬菌体LZ35的局部共线性区域的数目、方向、排列顺序和长度非常相似;进化树构建结果显示噬菌体PA103应属于Obolenskviru属成员。结论新型噬菌体PA103具有较强的鲍曼不动杆菌裂解能力,可为噬菌体防治耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的感染提供参考。

关键词：耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌噬菌体生物学特性基因组分析

3-甲基腺嘌呤通过抑制AKT信号减轻糖尿病小鼠的早期肾损伤

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南方医科大学学报 2024年第7期44卷 1236-1242页

作者：刘本菊王业磊任海文欧丽雯邓轩黄梦欣吴鑫龚权长江大学医学部人体解剖学教研室湖北荆州434023 长江大学医学部免疫学教研室湖北荆州434023 重庆市彭水自治县人民医院内科重庆彭水409600 重庆医科大学附属璧山医院检验科重庆璧山402760

目的探究3-甲基腺嘌呤(3-MA)减轻糖尿病早期肾损伤的机制。方法将24只小鼠随机分为对照组(CON组,n=8)和模型组(n=16)。模型组采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病,CON组注射等体积柠檬酸缓冲液。将造模成功的小鼠随机分为糖尿病组(DM... 详细信息

目的探究3-甲基腺嘌呤(3-MA)减轻糖尿病早期肾损伤的机制。方法将24只小鼠随机分为对照组(CON组,n=8)和模型组(n=16)。模型组采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病,CON组注射等体积柠檬酸缓冲液。将造模成功的小鼠随机分为糖尿病组(DM组,n=8)和3-MA干预糖尿病组(DM+3-MA组,n=8),分别灌胃给予等体积生理盐水和3-MA 10 mg/(kg·d),每周记录小鼠体质量和空腹血糖,干预6周后取肾,记录肾/体质量比,PAS染色观察肾小球大小,Western blotting和免疫组化法检测肾皮质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。将SV40 MES 13细胞分别采用5.6 mmol/L正常糖(NG组)、5.6 mmol/L正常糖+24.4 mmol/L甘露醇(NG+M组)、30 mmol/L高糖(HG组)和30 mmol/L高糖加5 mmol/L 3-MA(HG+3-MA组)培养24 h,CCK8法检测细胞活力,Western blotting检测PCNA蛋白表达。对糖尿病肾脏疾病(DKD)基因靶点与3-MA预测基因靶点的交集基因进行生信分析,并外采用Western blotting对生信分析结果进行验证。结果体内实验结果显示,3-MA具有短期降血糖作用,可减轻糖尿病小鼠肾/体质量比和肾小球肥大(均P<0.05),减少糖尿病小鼠肾皮质α-SMA和PCNA蛋白表达(P<0.01,P<0.001)。体外实验结果显示,3-MA可显著抑制高糖处理的SV40 MES 13细胞活力和PCNA表达(均P<0.001)。生信分析结果显示,蛋白激酶B1(AKT1)为3-MA作用于DKD的关键基因,Western blotting结果显示,3-MA在体内外均可抑制AKT及核糖体蛋白S6(S6)的磷酸化。结论3-MA通过抑制AKT信号减少系膜细胞增殖减轻糖尿病早期肾损伤。

关键词： 3-甲基腺嘌呤糖尿病肾脏疾病系膜细胞肾损伤

抗M3R抗体在干燥综合征并发间质性膀胱炎中致病机制的研究进展

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中华泌尿外科杂志 2024年第8期45卷 637-640页

作者：徐聪颖徐智慧李涯松浙江中医药大学第二临床学院杭州310053 浙江省人民医院/杭州医学院附属人民医院泌尿外科杭州310014 浙江省人民医院/杭州医学院附属人民医院风湿免疫科杭州310014

干燥综合征是一种以侵犯泪腺、唾液腺等外分泌腺体为主要临床特点,以高度淋巴细胞浸润为特征的弥漫性结缔组织病。间质性膀胱炎是一种慢性膀胱炎性疾病,以尿频、尿急、夜尿多和/或盆腔疼痛为主要临床表现,其病理改变以膀胱黏膜下溃疡和... 详细信息

干燥综合征是一种以侵犯泪腺、唾液腺等外分泌腺体为主要临床特点,以高度淋巴细胞浸润为特征的弥漫性结缔组织病。间质性膀胱炎是一种慢性膀胱炎性疾病,以尿频、尿急、夜尿多和/或盆腔疼痛为主要临床表现,其病理改变以膀胱黏膜下溃疡和纤维化为主要表现。干燥综合征并发间质性膀胱炎不少见。抗毒蕈碱型3型乙酰胆碱受体抗体不仅会引起干燥综合征患者腺体分泌功能障碍,同时在间质性膀胱炎中发挥重要的致病作用,其机制可能包括:①伴有肥大细胞参与的免疫性炎症和膀胱感觉神经上调的神经源性炎症;②引起逼尿肌收缩功能受损,诱发三磷酸腺苷释放,刺激感觉神经流出。

关键词：干燥综合征间质性膀胱炎抗毒蕈碱型3型乙酰胆碱受体抗体致病机制

新型肠炎沙门菌菌影候选疫苗在小鼠免疫应答和保护功效的评估

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第4期44卷 295-303页

作者：杨慧韩雪杜小春焦红梅郑国军常州市第三人民医院检验科常州213000 扬州大学医学院/转化医学研究院病原生物学教研室扬州225001

目的比较肠炎沙门菌制备的菌影(SE-ghost)通过肌肉注射(肌注)和口服不同免疫途径接种雌性BALB/c小鼠诱导体液和细胞免疫应答的功效。方法用SE-ghost接种BALB/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清中IgG抗体水平和阴道灌洗液IgA抗体水平;流式细... 详细信息

目的比较肠炎沙门菌制备的菌影(SE-ghost)通过肌肉注射(肌注)和口服不同免疫途径接种雌性BALB/c小鼠诱导体液和细胞免疫应答的功效。方法用SE-ghost接种BALB/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清中IgG抗体水平和阴道灌洗液IgA抗体水平;流式细胞仪检测小鼠脾脏CD3^(+)CD4^(+)T、CD3^(+)CD8^(+)T细胞百分比变化和脾脏内细胞因子IL-4、IFN-γ分泌;三次免疫后所有小鼠口服半数致死量肠炎沙门菌进行强毒攻击。用SE-ghost刺激小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs),流式细胞仪检测表面分子抗体APC-CD11c、FITC-MHC ClassⅡ、PE-CD40、FITC-CD86、PE-CD80表达量;双抗体夹心ELISA测定BMDCs上清液IL-1β、IL-6、IL-10和IL-12p70的产量。结果与PBS组相比,SE-ghost(口服)和SE-ghost(肌注)免疫组小鼠体内肠炎沙门菌特异性抗体IgG和IgA水平明显增高;脾脏CD3^(+)CD4^(+)T细胞百分比上调、高分泌细胞因子IL-4、IFN-γ。肌肉注射SE-ghost比口服可诱导更强的体液和细胞免疫应答。致病菌肠炎沙门菌强毒攻击后,SE-ghost(口服)和SE-ghost(肌注)免疫组生存率高达80%。与对照组相比,BMDCs经SE-ghost刺激后高表达表面成熟分子抗体CD86、CD80、CD40、MHCⅡ,高分泌细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12p70。结论通过肌肉注射SE-ghost进行免疫,可在小鼠中引发更强大的抗原特异性免疫应答,以防止沙门菌感染。SE-ghost是一种有用的沙门菌候选疫苗。

关键词：肠炎沙门菌细菌菌影灭活疫苗免疫应答保护功效

类风湿关节炎合并宫颈放线菌病及输尿管梗阻1例并文献复习

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中南大学学报（医学版） 2024年第5期49卷 818-824页

作者：甘海娜任翔邹瑶李丽华丁敬韬彭丽娟熊英李先耀肖伟中南大学湘雅医学院附属常德医院(常德市第一人民医院)风湿免疫科湖南常德415003

放线菌病是一种少见的慢性肉芽肿性疾病,以肉芽肿及组织纤维化窦道的形成为特点,其症状与许多传染性和非传染性疾病相似,临床上经常被误诊。现报告1例长期使用免疫抑制剂及生物制剂治疗的类风湿关节炎合并放线菌感染的患者。该患者为60... 详细信息

放线菌病是一种少见的慢性肉芽肿性疾病,以肉芽肿及组织纤维化窦道的形成为特点,其症状与许多传染性和非传染性疾病相似,临床上经常被误诊。现报告1例长期使用免疫抑制剂及生物制剂治疗的类风湿关节炎合并放线菌感染的患者。该患者为60岁女性,类风湿关节炎病程10余年,既往使用氨甲蝶呤、艾拉莫德、英夫利昔单抗等多种免疫抑制剂及生物制剂治疗,关节肿痛反复发作,对类风湿关节炎疾病活动度的控制不佳,白细胞计数持续升高。全腹部CT示盆腔占位,右侧输尿管扩张。对宫颈管刮出组织进行病理检查,可见大量中性粒细胞浸润和硫磺样颗粒,考虑放线菌感染。予多西环素抗感染治疗18个月,以及艾拉莫德、硫酸羟氯喹及托法替布抗风湿治疗后,患者关节肿痛好转,白细胞计数正常。随访2年,患者病情稳定,无复发。类风湿关节炎患者使用较强免疫抑制剂、生物制剂时,应警惕合并发生感染,一些慢性、隐匿部位及少见病原体的感染也应当引起临床医生的重视,并尽早进行相关筛查以明确诊断。

关键词：类风湿关节炎宫颈放线菌病输尿管梗阻免疫抑制剂

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干扰素抗新型冠状病毒感染的作用及临床研究进展

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第1期38卷 110-116页

作者：吴桂娟张鹏李传海张记陆军军医大学基础医学院免疫学教研室(暨全军免疫学研究所) 重庆400038 山东省第二人民医院呼吸与危重症医学科济南250117 中国人民解放军联勤保障部队第九六〇医院胸外科济南250031

新型冠状病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)引起新型冠状病毒感染(Coronavirus Disease 2019, COVID-19)。I型和III型干扰素(interferon, IFN)作为重要广谱抗病毒药物, 是潜在的用于COVID-19治疗和预防的药物。2020年初, 陆续启动了包括世界卫生组织SOLIDARITY研究在内的40余项临床试验, 探索IFN治疗COVID-19的临床效力及使用方法。同时, 多个实验室利用动物模型和临床标本, 从免疫机理层面探究了IFN在COVID-19中的作用和功能。然而, 虽然过去3年积累了众多数据, 但其结论并不一致甚至相反, 这反应了IFN在COVID-19中作用和功能的复杂性。最近, 4项高质量的大型随机对照III期临床试验发表了结果。本文从免疫病理和临床试验两个层面, 系统总结并分析了这些复杂而矛盾的数据, 阐明了人类感染2019-nCoV以后不同的临床结局与IFN水平及其产生时间密切相关, IFN在COVID-19早期具有免疫保护作用, 而在晚期具有加重炎症的免疫损伤作用。IFN在COVID-19中的精准作用和临床使用, 需要进一步开展严格控制混杂因素的高质量前瞻性临床试验研究。

关键词：新型冠状病毒感染新型冠状病毒 I型干扰素 III型干扰素

LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第3期40卷 207-214页

作者：樊翠张娅薇杨蕊吴肖婕周嘉迪薛江楠滨州医学院基础医学院免疫学教研室山东烟台264000 临沂市中医医院超声医学科山东临沂276000 滨州市人民医院中心实验室山东滨州256610 陕西中医药大学附属医院检验科陕西咸阳712000

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以... 详细信息

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变;应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类;采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率;采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果在JAK2 V617F突变的HEL细胞中,LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平,并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达,而对BAX的表达水平未见显著影响;LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖,促进HEL细胞凋亡。结论在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中,LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,进而抑制HEL细胞的增殖,促进细胞凋亡。

关键词：骨髓增殖性肿瘤白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1) JAK2 V617F突变 Janus激酶(JAK) 信号转导子与转录激活子(STAT) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) 蛋白激酶B(AKT)

CD4^(+)CD28^(-)T细胞在炎症相关性疾病中的研究进展

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中华内科杂志 2024年第2期63卷 213-216页

作者：卢睿凌洪小平刘冬舟暨南大学第二临床医学院、深圳市人民医院风湿免疫科深圳518001

CD4^(+)CD28^(-)T细胞是一种T细胞的效应功能亚群,特征是缺乏共刺激受体CD28,能分泌大量毒性颗粒和炎性细胞因子,具有更强的抗凋亡能力。目前研究发现,CD4+CD28-T细胞在类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管... 详细信息

CD4^(+)CD28^(-)T细胞是一种T细胞的效应功能亚群,特征是缺乏共刺激受体CD28,能分泌大量毒性颗粒和炎性细胞因子,具有更强的抗凋亡能力。目前研究发现,CD4+CD28-T细胞在类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎、原发性干燥综合征、特发性炎症性肌病等多种炎症相关性疾病中发挥重要作用。本文将对该细胞的产生机制、生物学功能及其在炎症相关性疾病中的研究进展进行综述。

关键词：自身免疫病 CD4^(+)CD28^(-)T细胞炎性细胞因子共刺激分子