检索结果-南通市图书馆

攻癌夺命组方对肝癌细胞系HepG2的杀伤作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验方剂学杂志 2010年第13期16卷 145-148页

作者：许筱梅袁房均张有顺邹灿戴宗晴钱行郧阳医学院附属东风总医院肝脏外科研究所湖北十堰442000

目的:探讨中药组方攻癌夺命汤对肝癌细胞系HepG2的杀伤作用及作用机制。方法:攻癌夺命汤煎剂与肝癌细胞系HepG2共培养后,分别用MTT法检测煎剂对肝癌细胞的杀伤作用,用RT-PCR方法检测缺氧诱导因子HIF1α(Hypoxia-inducible factor 1α)... 详细信息

目的:探讨中药组方攻癌夺命汤对肝癌细胞系HepG2的杀伤作用及作用机制。方法:攻癌夺命汤煎剂与肝癌细胞系HepG2共培养后,分别用MTT法检测煎剂对肝癌细胞的杀伤作用,用RT-PCR方法检测缺氧诱导因子HIF1α(Hypoxia-inducible factor 1α)、凋亡相关分子Bax和Bcl-2等基因的mRNA表达变化。结果:攻癌夺命汤对肝癌细胞系HepG2的杀伤作用明显,且随浓度增高而增强,按生药量计6.375 g·L-1药液质量浓度3 d时的细胞毒作用达到80%以上;药物作用使HepG2的HIF1α的表达迅速升高,12 h即达到3倍以上;凋亡相关分子的变化在不同药液浓度有所差别:在2.125 g.L-1药液作用时Bax的增加幅度要大于Bcl-2。在4.250 g·L-1药液作用下,在早期Bcl-2和Bax都增加,24 h后二者表达均下降。结论:中药组方攻癌夺命汤对肝癌细胞系HepG2有很强的杀伤作用。药物作用后缺氧诱导因子HIF1α迅速升高提示其作用机理可能是影响到细胞呼吸所致。药物可能对细胞凋亡有一定作用。

关键词：攻癌夺命汤肝癌细胞细胞杀伤缺氧诱导因子

肝癌细胞系中Oct4与Wnt/β-catenin和TGF-β信号通路的相互影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤防治研究 2011年第1期38卷 21-24页

作者：袁方均周文波邹灿胡洪生张志云戴宗晴张有顺郧阳医学院附属东风总医院肝脏外科研究所湖北十堰442001

目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路在肝癌细胞系中的相互作用。方法应用RT-PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路相关基因β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中的表达... 详细信息

目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路在肝癌细胞系中的相互作用。方法应用RT-PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路相关基因β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中的表达;使用siRNA沉默人肝癌HepG2细胞Oct4和TCF3的表达,实时荧光定量RT-PCR法检测Wnt10b、β-catenin、TCF3及ELF、Smad3和Smad4等基因的表达变化。结果 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达;siRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-catenin、Wnt10b随之下调达40%～50%左右,而TCF3表达升高到3倍左右;同时ELF、Smad3和Smad4均下降到原来的1%以下;而siRNA-TCF3沉默TCF3后,Oct4的表达也升高2～3倍;ELF升高亦达2～3倍,Smad3和Smad4也略有升高。结论 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达提示彼此之间有相互作用。RNAi实验证明Oct4对Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路的成员有调控作用;Oct4与TCF3之间的负反馈作用值得深入研究。

关键词： Oct4 Wnt/β-catenin TGF-β RNAi 肝细胞性肝癌

RNA干扰Oct4的表达对肝癌细胞生物学行为的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华普通外科杂志 2011年第6期26卷 467-469页

作者：周文波袁方均邹灿朱正鹏马建波戴宗晴张有顺郧阳医学院附属东风总医院肝脏外科研究所湖北十堰市442008

【摘要】目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt／β-catenin在人肝癌组织及肝癌细胞系中的相互作用。方法PCR法检测Oct4、Wnt／β-catenin及其他相关基因在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织的表达差异。使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct... 详细信息

【摘要】目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt／β-catenin在人肝癌组织及肝癌细胞系中的相互作用。方法PCR法检测Oct4、Wnt／β-catenin及其他相关基因在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织的表达差异。使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达，实时荧光定量PCR法检测Wnt／β-catenin基因表达。检测RNAi后细胞迁移以及克隆形成能力。结果肝癌患者的上述组织中，Oct4和β-catenin在癌内表达最高，癌旁次之，正常肝最低。使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后，Oct4表达明显下调，β-catenin、Wntl0b表现为与Oct4表达呈正相关，TCF3表达与Oct4呈负相关。RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降。结论Oct4在肝癌组织内高表达而在正常肝细胞中的表达极低。RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降可能与Wnt／β-catenin通路功能减弱有关。

关键词：癌肝细胞 RNA干扰 Oct4 Wnt/β-catenin通路

MDR1短发夹RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤 2004年第6期24卷 542-545页

作者：胡礼仪张有顺周新张吉发袁房均黄玲王菊戴宗晴郧阳医学院附属东风医院肝脏外科研究所十堰442008 武汉大学中南医院检验科武汉430071

目的　构建在哺乳动物细胞中表达MDR1短发夹RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)的表达质粒 ,并初步探讨其对耐药肝癌细胞MDR1mRNA的抑制作用及抗肿瘤药物耐药性的影响。方法　根据Genbank中MDR1mRNA设计的两条多聚核苷酸序列 ,退火形成双链DN... 详细信息

目的　构建在哺乳动物细胞中表达MDR1短发夹RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)的表达质粒 ,并初步探讨其对耐药肝癌细胞MDR1mRNA的抑制作用及抗肿瘤药物耐药性的影响。方法　根据Genbank中MDR1mRNA设计的两条多聚核苷酸序列 ,退火形成双链DNA ,再与经双酶切后的载体PGE 1连接 ,构建 pshRNA MDR1重组质粒 ,在脂质体的介导下转染肝癌细胞株BEL 74 0 2 /ADM ,RT PCR分析MDR1mRNA的表达 ,MTT法检测阿霉素对细胞的半数抑制浓度 (IC50 )。结果　PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功 ,并能明显地抑制BEL 74 0 2 /ADMMDR1mRNA的表达 ,对阿霉素的耐药指数降低了17.5倍 ( 2 99.2 / 17.1)。结论　构建的 pshRNA MDR1表达质粒能有效地抑制转染细胞MDR1mRNA ,从而提高肿瘤细胞的药物敏感性。

关键词：多药耐药 MDR1 mRNA 短发夹状RNA RNA干扰 BEL-7402/ADM细胞

Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中的表达及相互作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华中科技大学学报（医学版） 2010年第4期39卷 501-505页

作者：周文波邹灿张有顺胡洪生朱正鹏郑启昌华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科武汉430022 郧阳医学院附属东风医院肝脏外科研究所十堰442008

目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-Catenin信号转导通路在人肝癌组织及肝癌细胞系中的表达及相互作用。方法选取肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织,采用免疫组化SP法检测其Oct4的表达;RT-PCR法及实时荧光定量PCR检测Oct4、Wnt5b、β-Ca... 详细信息

目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-Catenin信号转导通路在人肝癌组织及肝癌细胞系中的表达及相互作用。方法选取肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织,采用免疫组化SP法检测其Oct4的表达;RT-PCR法及实时荧光定量PCR检测Oct4、Wnt5b、β-Catenin的mRNA表达。Si RNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达后,以实时荧光定量PCR检测Oct4、Sox2、Nanog、β-Catenin等干细胞相关基因的表达变化。结果 Oct4在肝癌组织和癌旁组织中均有表达,正常肝脏组织几乎未发现明显的Oct4表达;实时荧光定量PCR发现Oct4和β-Catenin在癌组织内表达最高,癌旁次之,正常肝最低,而Wnt5b却相反。使用Si RNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-Catenin、Sox2、Nanog表达亦下调,与Oct4呈正相关关系,而Wnt5b表达却上调,与Oct4呈负相关关系。结论 Oct4在肝癌组织中高表达,且为肝癌发生过程的早期事件;Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中存在一定的相互作用。

关键词：干细胞 Oct4基因 Wnt/β-Catenin 小分子干扰RNA 癌,肝细胞

冷冻与化疗在促进肝癌细胞凋亡中的协同作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

冷冻与化疗在促进肝癌细胞凋亡中的协同作用研究

第六届全国低温生物医学及器械学术大会

作者：袁方均周文波邹灿张志云黄玲张有顺戴宗晴郧阳医学院附属东风医院肝脏外科研究所

目的在细胞水平研究冷冻治疗对肝癌细胞系的影响,化疗增强冷冻治疗作用及二者在诱导细胞凋亡的作用。方法1、在-80℃、-40℃、-25℃、-20℃及-15℃的冷冻条件下,分别对肝癌细胞系Bel-7402、SMMC-7721及耐药肝癌细胞系Bel-7402/R和对照... 详细信息

目的在细胞水平研究冷冻治疗对肝癌细胞系的影响,化疗增强冷冻治疗作用及二者在诱导细胞凋亡的作用。方法1、在-80℃、-40℃、-25℃、-20℃及-15℃的冷冻条件下,分别对肝癌细胞系Bel-7402、SMMC-7721及耐药肝癌细胞系Bel-7402/R和对照肠癌细胞系HIC-251的细胞活率的影响。比较冷冻结合化疗与单纯冷冻或化疗之间的细胞活率的差异。2、分析细胞凋亡相关分子在上述不同条件下的表达:(1)流式细胞仪检测Annexin V的表达及凋亡抑制因子存在时Annexin V表达的改变;(2)Western Blot分析Bax及Bcl-2的表达及不同条件下的差异;(3)RT-PCR检测Survivin的表达及变化。结果1、不同冷冻温度及作用时间对不同肿瘤细胞的细胞活率有不同影响,不同细胞对同一冷冻条件的耐受有明显差异。肝癌细胞系Bel-7402的耐受性最强,而肠癌细胞系HIC-251最敏感。肝癌耐药细胞系Bel-7402/R在不同冷冻条件下的细胞活率均较其亲本Bel-7402低。不同化疗药物作用均可降低细胞活率20-30%;2、凋亡相关分子在不同试验条件下表达量不同。单纯Annexin V阳性和Annexin V/PI双阳性细胞比例在Bel-7402对照、经单纯冷冻、经顺铂处理及冷冻-化疗处理后分别为0.9%和0.93%、3.9%和8.16%、6.4%和0.43%以及15.2%和24.67%。caspase-8抑制剂Z-IETD-FMK和caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK均明显抑制冻化疗后单纯Annexin V阳性和Annexin V/PI双阳性细胞比例。经不同化疗药物处理、化疗结合冷冻处理Bel-7402的Bax表达明显上调;3、耐药细胞系Bel-7402/R的Bax的表达也高于Bel-7402,而Survivin mRNA的表达低于后者。结论冷冻和化疗均可以诱导肝癌细胞凋亡,且二者之间具有协同作用。

关键词：肝癌冷冻化疗凋亡 Bax/bcl-2 耐药细胞系

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

RNAi及其在抗肿瘤中的应用

国外医学（肿瘤学分册） 2004年第7期31卷 492-495页

作者：胡礼仪周新张有顺郧阳医学院附属东风医院肝脏外科研究所十堰442008

RNA干扰 (RNAi)作用是生物界普遍存在的一种进化上高度保守的现象 ,是一种研究基因功能的新方法。肿瘤是多基因疾病 ,RNAi为肿瘤的基因治疗提供新的思路 ,通过RNAi抑制癌基因的表达可能成为一种新的癌症基因治疗策略。现综述RNAi的作用... 详细信息

RNA干扰 (RNAi)作用是生物界普遍存在的一种进化上高度保守的现象 ,是一种研究基因功能的新方法。肿瘤是多基因疾病 ,RNAi为肿瘤的基因治疗提供新的思路 ,通过RNAi抑制癌基因的表达可能成为一种新的癌症基因治疗策略。现综述RNAi的作用机制、特点以及在抗肿瘤中应用的研究展望。

关键词： RNA,双链基因表达调控肿瘤基因疗法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胆红素与冠心病

临床心血管病杂志 2003年第2期19卷 126-127页

作者：付文金李毅彭剑雄郧阳医学院附属东风医院湖北十堰442008

血液胆红素的检测一直作为肝、胆疾病诊断指标，临床上比较注重其含量升高的临床意义。近年来的研究发现，胆红素是一种天然的内源性抗氧化剂，它具有抗氧化，抗脂质过氧化，保护细胞免受损伤，以及增强维生素C和E的抗氧化作用等重要生... 详细信息

血液胆红素的检测一直作为肝、胆疾病诊断指标，临床上比较注重其含量升高的临床意义。近年来的研究发现，胆红素是一种天然的内源性抗氧化剂，它具有抗氧化，抗脂质过氧化，保护细胞免受损伤，以及增强维生素C和E的抗氧化作用等重要生理功能。这一发现引起了人们对胆红素研究的极大热情，随后胆红素代谢调节及其对心脏、大脑、肝脏的保护功能得到更为深入的研究，本文就胆红素与冠心病(CHD)关系的研究进展加以综述。

关键词：冠状动脉疾病胆红素

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

介导MDR1的RNAi腺病毒载体的构建

肿瘤防治研究 2006年第11期33卷 798-801页

作者：张志云郑启昌戴宗晴张有顺邹灿黄玲王菊华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科武汉430022 郧阳医学院附属东风总医院肝胆外科研究所

目的介导MDR1的RNAi腺病毒载体,探讨RNA干扰MDR1基因对人肝癌细胞的作用。方法根据MDR1mRNA序列构建表达MDR1mRNA特异的shRNA的腺病毒穿梭质粒pshuttle-MDR1。与腺病毒载体体内重组为pAd-MDR1后转染人肝癌细胞SMMC-7721,以FCM检测细胞... 详细信息

目的介导MDR1的RNAi腺病毒载体,探讨RNA干扰MDR1基因对人肝癌细胞的作用。方法根据MDR1mRNA序列构建表达MDR1mRNA特异的shRNA的腺病毒穿梭质粒pshuttle-MDR1。与腺病毒载体体内重组为pAd-MDR1后转染人肝癌细胞SMMC-7721,以FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率,以共聚焦显微镜检测细胞内Rh123的潴留,WesternBlot检测P-gp蛋白量的变化。结果构建成pshuttle-MDR1经限制性酶切和PCR证实与设计一致,将pAd-MDR1转染肝癌细胞SMMC-7721后,FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率为22.9%和30.8%,远低于对照组(85.8%)。WesternBlot经病毒感染的SMMC-7721/R的P-gp含量明显低于对照SMMC-7721/R,而与SMMC-7721/S细胞接近。结论成功构建了pshuttle-MDR1腺病毒载体,并有效干扰了肝癌细胞细SMMC-7721MDR1的表达。

关键词： RNAi 肝癌细胞多药耐药基因腺病毒载体