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双重核酸纸条快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly毒素基因方法的建立及试剂盒的研制

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南方医科大学学报 2025年

作者：刘岩杨建宇周钰娇丁文博张先宇高林然潘蓓珍杨继飞赵云冬北华大学医学技术学院临床生化及分子生物学检验教研室

目的基于聚合酶链反应和胶体金技术相结合的双重核酸试纸条方法快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly两种毒素基因。方法采用加热煮沸法提取单核细胞增生李斯特菌DNA，以单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly为靶基因，分别用6-FAM标记p... 详细信息

目的基于聚合酶链反应和胶体金技术相结合的双重核酸试纸条方法快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly两种毒素基因。方法采用加热煮沸法提取单核细胞增生李斯特菌DNA，以单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly为靶基因，分别用6-FAM标记prfA上游引物5'端，Biotin标记prfA下游引物5'端，Digoxin标记hly上游引物5'端和Biotin标记hly下游引物5'端，建立单核细胞增生李斯特菌的毒素基因检测方法，通过克隆转化、测序分析，克隆阳性对照品，研发试剂盒并对试剂盒特异性、灵敏度、复现性及稳定性进行评价，并通过样品检测对试剂盒进行验证。结果水煮法提取的单核细胞增生李斯特菌浓度为148.81±0.97 ng/μL,A260/A280在1.8～2.0范围内；PCR产物经克隆转化、测序对比，与GenBank数据库中基因序列的同源性均为100%；特异性检测，仅单核细胞增生李斯特菌为阳性结果，与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、蜡样芽胞杆菌无交叉反应；灵敏度检测，最低检测限为10-2 ng/μL，比琼脂糖凝胶电泳高10倍；复现性检测，不同实验室不同人员分别对核酸试纸条进行验证，结果一致；稳定性检测，在第6、9、12月对核酸试纸条进行验证，稳定性较好。样品检测结果显示，本试剂盒可准确快速的检出样品中单核细胞增生李斯特菌。结论本研究所研发的单核细胞增生李斯特菌双重毒素检测试剂盒可同时检测单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly毒素基因，具有特异性强、灵敏度高、复现性好、稳定性好等优点，对保障食品安全具有现实意义。

关键词：单核细胞增生李斯特菌 prfA hly 双重核酸试纸条

萝卜硫素对纳米二氧化钛诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其机制

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中国食品学报 2025年

作者：孔玉雯朱金芳李丽华新疆农业大学食品科学与药学学院台州学院医学院基础教研室

目的：研究萝卜硫素（Sulforaphane SFN）对纳米二氧化钛颗粒(Titanium dioxide nanoparticles TiO2Nps)诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法：将选择的50只6周龄雄性C57BL/6J小鼠，随机分成对照组（NC）、TiO2Nps模型组（100mg/k... 详细信息

目的：研究萝卜硫素（Sulforaphane SFN）对纳米二氧化钛颗粒(Titanium dioxide nanoparticles TiO2Nps)诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法：将选择的50只6周龄雄性C57BL/6J小鼠，随机分成对照组（NC）、TiO2Nps模型组（100mg/kg）、TiO2Nps+低剂量SFN给药组（0.5mg/kg）、TiO2Nps+中剂量SFN给药组（1mg/kg）、TiO2Nps+高剂量SFN给药组（2mg/kg），每组10只。9周后眼眶取血，留取小鼠肝脏。检测小鼠血清中ALT和AST水平，肝脏组织氧化应激、炎症指标。HE染色观察小鼠肝脏组织病理形态学变化，免疫组织化学染色检测小鼠肝脏中F4/80蛋白的表达。蛋白免疫印迹法检测OGG1、NF-κb、ERK、p-ERK蛋白表达水平。结果：与对照组相比，模型组小鼠血清中AST、ALT水平显著升高；与模型组相比，各SFN给药组均显著降低了小鼠血清中ALT、AST、TBIL水平；显著提高肝组织的GSH/GSSG比值以及SOD水平；显著降低小鼠肝脏组织MDA水平。实时定量PCR结果显示，与模型组相比，SFN给药组显著降低了IL-6、TNF-α的mRNA水平。Western Blotting结果显示，与模型组相比，给药组NF-κb、p-ERK、ERK蛋白表达水平显著下调。HE染色结果显示，与模型组相比，给药组的肝细胞空泡化程度有所改善；免疫组织化学染色结果显示，相比于模型组，给药组F4/80表达减少。结论：SFN能够减轻TiO2Nps诱导的小鼠肝损伤，氧化应激和炎症指标的变化表明SFN能够缓解TiO2Nps诱导的氧化应激和炎症反应，且可能通过NF-κb-ERK/p-ERK通路发挥作用。

关键词：萝卜硫素纳米二氧化钛肝损伤

铁代谢异常对代谢相关脂肪性肝病的影响及治疗研究进展

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重庆医科大学学报 2025年

作者：雒世婷史晓燕陕西中医药大学基础医学院生物化学教研室

铁是人体含量、需要量最多的微量元素，对人体的正常代谢和生命活动至关重要。肝脏是铁的主要储存器官，铁代谢紊乱对肝脏有着多方面的危害，与多种肝脏疾病的发生发展有关。近年来，代谢相关脂肪性肝病逐渐成为了全球高发的肝脏疾病，... 详细信息

铁是人体含量、需要量最多的微量元素，对人体的正常代谢和生命活动至关重要。肝脏是铁的主要储存器官，铁代谢紊乱对肝脏有着多方面的危害，与多种肝脏疾病的发生发展有关。近年来，代谢相关脂肪性肝病逐渐成为了全球高发的肝脏疾病，其发生发展受铁代谢等多种因素影响，涉及不同的分子机制。本文综述了铁代谢异常对代谢相关脂肪性肝病的影响，同时总结了基于铁代谢异常对代谢相关脂肪性肝病的治疗方法，以期为代谢相关脂肪性肝病的防治提供更多思路。

关键词：铁代谢铁超负荷铁死亡代谢相关脂肪性肝病

基于列线图的空腹血糖受损发生风险预测模型的构建与验证

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中国医科大学学报 2025年

作者：甄紫伊刘蕾孟继娴傅一婷马小慧孙金菊沈阳医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室辽宁中医药大学护理学院社区护理学教研室

目的探讨空腹血糖受损（IFG）发生的危险因素，构建基于列线图的IFG发生风险的预测模型并验证。方法收集2022年8月至12月沈阳市某医院体检门诊常规体检者（n=3 037）的临床资料，将研究对象按照7∶3随机分为训练组（n=2 126）和验证组... 详细信息

目的探讨空腹血糖受损（IFG）发生的危险因素，构建基于列线图的IFG发生风险的预测模型并验证。方法收集2022年8月至12月沈阳市某医院体检门诊常规体检者（n=3 037）的临床资料，将研究对象按照7∶3随机分为训练组（n=2 126）和验证组（n=911）。通过LASSO回归分析筛选预测变量，采用logistic回归分析进一步筛选并构建列线图预测模型，由验证组对模型可行性进行内部验证，应用受试者操作特征（ROC）曲线的曲线下面积（AUC）和Hosmer-Lemeshow拟合优度检验对模型效能进行评价。结果 3 037例研究对象中2 880例未发生IFG,157例发生IFG。结果显示，年龄（OR=1.04,95%CI:1.02～1.05）、体重指数（OR=1.10,95%CI:1.05～1.17）、收缩压（OR=1.01,95%CI:1.00～1.03）、甘油三酯（OR=1.20,95%CI:0.99～1.51）以及高血压（OR=1.28,95%CI:1.04～1.59）是IFG发生的独立危险因素。基于以上变量成功构建了列线图预测模型。预测模型中训练组预测IFG发生的AUC为0.722 (95%CI:0.68～0.77)，验证组预测IFG发生的AUC为0.907 (95%CI:0.87～0.94)。拟合优度检验结果显示训练组与验证组模型差异比较无统计学意义（P> 0.05），实际概率与模型预测概率基本一致，模型校准度较好。结论本研究构建了包括年龄、体重指数、收缩压、甘油三酯以及高血压5个变量的IFG发生风险的预测模型，有助于尽早筛选IFG高危人群并及时干预。

关键词：空腹血糖受损危险因素预测模型列线图

维持性血液透析患者认知障碍情况及其影响因素：一项多中心横断面研究

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中国全科医学 2025年

作者：丁梓峻周南男罗星罗洁羽郝文娟张春江金鑫赵丹石河子大学第一附属医院石河子大学医学院生化教研室新疆维吾尔自治区石河子市人民医院

背景了解维持性血液透析（MHD）患者认知障碍的情况及影响因素可能对提高MHD患者生活质量，减轻家属与社会负担有较大帮助。目的调查MHD患者的认知障碍情况，并探究其可能的影响因素。方法采用方便抽样，选取2023年4月—2024年4月在... 详细信息

背景了解维持性血液透析（MHD）患者认知障碍的情况及影响因素可能对提高MHD患者生活质量，减轻家属与社会负担有较大帮助。目的调查MHD患者的认知障碍情况，并探究其可能的影响因素。方法采用方便抽样，选取2023年4月—2024年4月在石河子市3家血透中心（包括石河子大学第一附属医院肾病内科、石河子市人民医院肾病内科、朗肾血液透析中心）行MHD的患者。采集患者的人口学特征、认知障碍程度、睡眠情况、独立生活能力、血清α-Klotho、β-Klotho、FGF-23水平及其他常见实验室检查指标。以蒙特利尔认知量表（MoCA）评估认知功能，阿森斯失眠量表（AIS-8）评估睡眠情况，功能活动问卷（FAQ）评估独立生活能力，通过Elisa法测血清α-Klotho、β-Klotho、FGF-23水平，以单因素及多因素Logistic回归分析筛选影响因素，通过受试者工作特征曲线（ROC曲线）验证影响因素对认知障碍的预测价值，并绘制列线图。结果共调查MHD患者276例，认知障碍发生率为76.4%(211/276)，其中轻度认知障碍患者145例，中度认知障碍患者66例。近一半患者存在可疑失眠（21.4%）或失眠（25.4%）。无独立生活能力的患者占14.9%(41/276)。多因素Logistic回归分析结果显示，年龄（OR=1.038,95%CI=1.004～1.072）、睡眠障碍（OR=1.179,95%CI=1.051～1.322）是MHD患者发生认知障碍的危险因素（P<0.05）。高水平血清α-Klotho(OR=0.996,95%CI=0.994～0.998)、高水平血清β-Klotho(OR=0.750,95%CI=0.661～0.852)、高受教育年限（OR=0.800,95%CI=0.699～0.915）是MHD患者发生认知障碍的保护因素（P<0.05）。ROC曲线下面积（AUC）显示，年龄（AUC=0.732,95%CI=0.667～0.797）、睡眠障碍（AUC=0.710,95%CI=0.638～0.783）、α-Klotho(AUC=0.774,95%CI=0.709～0.839)、β-Klotho(AUC=0.741,95%CI=0.663～0.819)、受教育年限（AUC=0.718,95%CI=0.647～0.789）对于MHD患者认知障碍的发生均具有预测价值。年龄、睡眠障碍、血清α-Klotho、血清β-Klotho、受教育年限联合（P=-0.004×α-Klotho-0.287×β-Klotho+0.370×年龄-0.223×受教育年限+0.165×AIS-8评分+6.658）预测MHD患者发生认知障碍的AUC为0.894(95%CI=0.851-0.937,P<0.001)，灵敏度为82.9%，特异度为78.5%。结论 MHD患者认知障碍患病率较高，占76%左右，且年龄、睡眠障碍、受教育年限、α-Klotho、β-Klotho水平是重要的影响因素。医护人员及病人家属应提高对CI的认识，对重点患者积极开展筛查和干预工作，以改善患者的生活质量，减轻患者的家庭和社会负担。

关键词：维持性血液透析认知障碍 α-Klotho β-Klotho 影响因素分析多中心研究

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低浓度鱼藤素抑制活化T细胞增殖作用研究

中国药学杂志 2025年

作者：赵克天敬林崔文杰张佳庆伍佳丽何晶晶赖翼刘阳罗兴燕成都医学院科研实验中心成都医学院药学院广西大学医学院特色生物医药重点实验室成都医学院临床医学院成都医学院检验医学院

目的探究低浓度鱼藤素抑制活化T细胞增殖的作用特点。方法 Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞，免疫磁珠法纯化人T细胞，抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。流式细胞术测定T细胞存活率、增殖指数、凋亡进展、CD25表达水平... 详细信息

目的探究低浓度鱼藤素抑制活化T细胞增殖的作用特点。方法 Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞，免疫磁珠法纯化人T细胞，抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。流式细胞术测定T细胞存活率、增殖指数、凋亡进展、CD25表达水平及分裂期比例；ELISA检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-17及IFN-γ的分泌水平。结果低浓度鱼藤素抑制抗人CD3/CD28抗体活化的T细胞增殖，IC50为（73±12） nmol·L-1，400 nmol·L-1时无细胞毒性。低浓度鱼藤素不影响活化的T细胞表达CD25和分泌IL-2，但提高G0/G1期细胞比例。低浓度鱼藤素促进活化T细胞分泌抗炎细胞因子IL-4，并抑制促炎细胞因子IL-6、IL-17及IFN-γ的产生。结论低浓度鱼藤素显著抑制T细胞增殖于G0/G1期，并有效抑制促炎细胞因子分泌，提示鱼藤素在自身免疫病的治疗中具有潜在作用。

关键词：鱼藤素 T细胞增殖抑制低浓度抗炎作用细胞因子

基于学科交叉整合的医学细胞生物学实验开放性教学探索

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基础医学教育 2025年 43-48页

作者：何美娜张拓贵州医科大学基础医学院生物教研室贵州医科大学基础医学院生理教研室

目前,多数高校的医学细胞生物学实验对细胞器观察仅通过切片进行形态学观察,实验形式单一,教学效果欠佳。文章基于学科交叉理念设计了结构与功能相对应的细胞器染色和观察综合性教学实验,并招募临床、基础医学等专业学生开展开放性实验... 详细信息

目前,多数高校的医学细胞生物学实验对细胞器观察仅通过切片进行形态学观察,实验形式单一,教学效果欠佳。文章基于学科交叉理念设计了结构与功能相对应的细胞器染色和观察综合性教学实验,并招募临床、基础医学等专业学生开展开放性实验。通过将携带荧光基团的药物对细胞进行孵育,同时利用Mitotracker、Lysotracker对线粒体和溶酶体进行特异性荧光染色,观察药物进入细胞器的动态过程。利用线上线下混合式教学,通过课前学习、课中指导、课后培养三个阶段,打造以学生自学为主、教师指导为辅的多学科交叉的实验教学课程,弥补传统实验课程内容单一、学术创新思维培养不够等特点。课程改革旨在提高学生自主学习能力及科研实验技能,通过学科交叉帮助学生深入理解细胞器的功能,为学生将来的科研学习奠定扎实的基础。

关键词：医学细胞生物学细胞器荧光染色实验教学学科交叉整合开放性实验

基于LASSO回归的塔城地区人群冠状动脉狭窄程度预测模型构建及验证

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中国医科大学学报 2025年

作者：徐以康刘蕾刘丽敏马晶茹王嘉钰马军甄紫伊沈阳医学院附属第二医院心内科辽宁中医药大学护理学院社区护理教研室塔城市人民医院心内科沈阳医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室

目的分析新疆塔城地区人群冠状动脉中重度狭窄的危险因素，构建并验证冠状动脉狭窄程度列线图风险预测模型。方法回顾性收集2021年1月至2023年6月于塔城市人民医院心内科住院治疗的629例患者的临床资料。用R语言软件将所有患者的临床... 详细信息

目的分析新疆塔城地区人群冠状动脉中重度狭窄的危险因素，构建并验证冠状动脉狭窄程度列线图风险预测模型。方法回顾性收集2021年1月至2023年6月于塔城市人民医院心内科住院治疗的629例患者的临床资料。用R语言软件将所有患者的临床资料纳入LASSO回归进行危险因素初筛。按7∶3的比例将629例患者随机分为训练组（440例）和验证组（189例）。训练组数据用于模型构建，以冠状动脉狭窄程度为因变量，将LASSO回归筛选出的变量作为自变量纳入logistic回归建模。验证组用于模型验证。基于logistic分析结果，用R语言软件构建冠状动脉狭窄程度预测的可视化列线图。应用曲线下面积（AUC）、临床决策曲线分析（DCA）及校准曲线评价模型的区分度、临床效用和校准度。结果年龄、非汉族、高血压、高脂血症、脑血管病史是发生冠状动脉中重度狭窄的危险因素，纳入风险预测模型。训练组和验证组AUC分别为0.905 (95%CI:0.790～0.863)和0.864(95%CI:0.744～0.861)，校准曲线预测值与实际值一致度较高（训练组和验证组Brier得分分别为0.03和0.14），模型的预测性能好，DCA结果提示本模型具有临床净获益。结论本研究所构建塔城地区人群冠状动脉狭窄程度风险预测模型具有良好的预测性能，可为筛查冠状动脉中重度狭窄患者提供简便易行、经济、易推广的评估工具。

关键词：冠状动脉狭窄程度列线图预测模型 LASSO回归

二甲双胍通过NLRP3炎症小体通路对皮肤角质形成细胞增殖和凋亡的双向调节研究

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中国全科医学 2025年第6期28卷 742-750页

作者：田珂冷秋枫吕晶苗国英王新慧谢辉刘渠姚春霞河北工程大学附属医院皮肤科河北省邯郸市056002 河北工程大学医学院生理教研室河北省邯郸市056038 河北工程大学医学院病理教研室河北省邯郸市056038

背景扁平苔藓是一种皮肤-黏膜慢性炎症性疾病。因其病因不明,许多患者治疗效果欠佳,严重影响生活质量,有必要深入研究扁平苔藓的发病机制,为其药物筛选提供新靶点。目的探讨二甲双胍通过NLRP3炎症小体通路对皮肤角质形成细胞增殖和凋亡... 详细信息

背景扁平苔藓是一种皮肤-黏膜慢性炎症性疾病。因其病因不明,许多患者治疗效果欠佳,严重影响生活质量,有必要深入研究扁平苔藓的发病机制,为其药物筛选提供新靶点。目的探讨二甲双胍通过NLRP3炎症小体通路对皮肤角质形成细胞增殖和凋亡的调控作用。方法实验时间为2020—2023年。体外实验以人永生化角质形成细胞株HaCaT为研究对象,分为4组:对照组、脂多糖(LPS)组(5μg/mL)、二甲双胍组(Met组:10 mmol/L)、LPS与二甲双胍联合组(LPS+Met组:LPS 5μg/mL刺激2 h后,再给予二甲双胍10 mmol/L处理)。体内实验以BALB/c小鼠为研究对象,利用咪喹莫特涂抹小鼠背部皮肤诱导了银屑病样皮炎模型,并制备了二甲双胍乳膏进行治疗,将小鼠随机分为3组:对照组、咪喹莫特组(IMQ组)、咪喹莫特与二甲双胍联合组(IMQ+Met组),每组10只;对照组小鼠于背部涂抹凡士林,IMQ组小鼠于背部涂抹咪喹莫特软膏,IMQ+Met组小鼠于背部涂抹IMQ软膏12 h后再涂抹二甲双胍乳膏;1次/d,连续7 d。采用细胞增殖试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测二甲双胍对HaCaT细胞增殖和凋亡的影响;采用Western Blotting、酶联免疫吸附实验(ELISA)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)活性实验检测二甲双胍处理HaCaT细胞后NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路的蛋白表达情况及活性水平;最后采用皮肤组织切片苏木素-伊红(HE)染色和免疫组化检测二甲双胍对咪喹莫特诱导银屑病小鼠皮炎的抗炎效果。结果CCK-8实验结果显示:LPS组、Met组、LPS+Met组HaCaT细胞48 h存活率均低于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞48 h存活率高于LPS组(P<0.05)。流式细胞术结果显示:LPS组、Met组HaCaT细胞48 h G2/M期细胞、细胞凋亡比例均高于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞48 h G2/M期细胞、细胞凋亡比例低于LPS组(P<0.05)。Western Blotting结果显示:LPS组、Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路Caspase-1 p40、Caspase-1 p20、白介素(IL)-1β、IL-18蛋白表达均高于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路Caspase-1 p40、Caspase-1 p20、IL-1β、IL-18蛋白表达低于LPS组(P<0.05)。ELISA实验结果显示:LPS组、Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路IL-1β、IL-18水平、Caspase-1相对活性均高于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路IL-1β、IL-18水平、Caspase-1相对活性低于LPS组(P<0.05)。皮肤组织切片HE染色显示:IMQ+Met组小鼠二甲双胍涂抹明显改善了咪喹莫特对皮肤的损害。免疫组化结果显示:IMQ+Met组小鼠则显著降低了NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的表达。结论二甲双胍通过NLRP3炎症小体通路双向调节皮肤角质形成细胞的增殖和凋亡,并能够改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠的皮肤损害,有望为二甲双胍临床上用于治疗扁平苔藓提供理论依据。

关键词：二甲双胍 NLRP3炎症小体 HaCaT细胞细胞增殖细胞凋亡扁平苔藓银屑病小鼠