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基于实时动态成像系统对NK细胞毒性的检测方法

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生物技术通报 2024年第4期40卷 77-84页

作者：桑森骅星奕昂(上海)生物医药科技有限公司上海200000

【目的】细胞免疫疗法是当前发展快速且可靠的治疗癌症的手段,为开发检测细胞治疗产品效价的新方法。【方法】通过监测肿瘤细胞荧光的变化来反馈细胞毒性。通过构建表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的肿瘤细胞,建立了... 详细信息

【目的】细胞免疫疗法是当前发展快速且可靠的治疗癌症的手段,为开发检测细胞治疗产品效价的新方法。【方法】通过监测肿瘤细胞荧光的变化来反馈细胞毒性。通过构建表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的肿瘤细胞,建立了一种基于活细胞实时动态成像系统的方法来评估细胞治疗产品的细胞毒性。【结果】使用活细胞实时动态成像系统监测K562-GFP细胞,发现其总荧光强度与细胞数量呈现出良好的线性关系。在极低效靶比的共培养条件下,也能展现出高精确性。通过计算NK细胞对K562-GFP细胞的半最大效应浓度(EC50)能够整体地评价NK细胞的细胞毒性。利用流式细胞术检测K562-GFP细胞凋亡与细胞荧光蛋白淬灭的相关性,证明了检测方法的可行性。【结论】该方法无需再使用染料或者抗体,就能够低成本的评估不同类型或生产工艺的免疫细胞对各种肿瘤细胞的杀伤能力。

关键词：细胞免疫疗法凋亡检测自然杀伤细胞实时动态成像半最大效应浓度

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药品包装设计中防潮工艺的应用与研究

网印工业 2024年第2期 5-7页

作者：郭玉生药康众拓(江苏)医药科技有限公司

药品在流通和存储阶段，极易受空气中水含量、温湿度变化等影响而发生潮解，严重损坏药品质量和有效性，损害用药安全。在药品包装设计中应用防潮工艺是势在必行的措施。电喷雾防潮工艺利用电喷雾技术将防潮剂以微粒化的形式喷洒到药品... 详细信息

药品在流通和存储阶段，极易受空气中水含量、温湿度变化等影响而发生潮解，严重损坏药品质量和有效性，损害用药安全。在药品包装设计中应用防潮工艺是势在必行的措施。电喷雾防潮工艺利用电喷雾技术将防潮剂以微粒化的形式喷洒到药品表面，形成薄而均匀的防潮层，可有效减少药品因受潮而产生裂片、松片、结块变质等问题，确保药品质量和效用。

关键词：药品包装设计电喷雾工艺防潮工艺

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经典名方养胃汤的关键信息考证

中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 147-157页

作者：梁绿圆曹佳蕾王艺萍耿萌萌朱路君魏文希魏炳琦史文丽马丙祥河南中医药大学第一附属医院儿科医院郑州450099 河南中医药大学儿科医学院郑州450046 郑州世卓医药科技有限公司郑州450000 河南中医药大学中医学院郑州450046

《证治准绳》记载的养胃汤善治外感风寒、内伤生冷及疟疾等,现已被收录于2018年国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录(第一批)》。采用文献学研究方法,通过系统整理相关古籍文献及现代文献发现《证治准绳》养胃汤类方众多,与《证... 详细信息

《证治准绳》记载的养胃汤善治外感风寒、内伤生冷及疟疾等,现已被收录于2018年国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录(第一批)》。采用文献学研究方法,通过系统整理相关古籍文献及现代文献发现《证治准绳》养胃汤类方众多,与《证治准绳》养胃汤交织衍化且临床应用广泛,为厘清其历史沿革和衍化脉络,对养胃汤及其类方的历史源流进行梳理,并对方义组成、药物基原、炮制方法、功效主治等关键信息进行考证分析。该研究共获取《证治准绳》养胃汤数据896条,经筛选纳入26条有效数据,涉及中医古籍17部,另纳入《证治准绳》养胃汤类方有效数据29条,涉及23部古籍供脉络梳理。考证发现,养胃汤最早可追溯至宋代《太平惠民和剂局方》所载之“人参养胃汤”,并沿用至今,后世医家在此基础上进行加减应用,因而流传版本较多。经对比分析,历代《证治准绳》养胃汤方剂组成较为统一,其药物基原和炮制方法基本清晰,建议“清半夏、厚朴(姜汁炒)、苍术(米泔水制)各37.3 g,橘红27.98 g,藿香叶、草果、茯苓、人参各18.65 g,炙甘草9.33 g。上述药物粉碎为粗粒,每服14.92 g,以水450 mL,生姜7 g,乌梅2 g,煎至270 mL,热服”。《证治准绳》养胃汤具有温中解表,燥湿除疟之效,主治病证广泛,如外感风寒、内伤生冷等脾胃不和之症及各类疟疾。现代临床未见有《证治准绳》所载养胃汤相关报道,故需加大对该方的挖掘和应用。

关键词：经典名方养胃汤考证《证治准绳》关键信息香砂养胃汤藿香养胃汤

基于“病-药-量”探讨《中华医典》含丹参方剂用药规律的数据挖掘

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中草药 2024年第4期55卷 1268-1280页

作者：梁绿圆曹佳蕾刘宜杭马涵悦张尔昱万和伽韩乐群余淑敏张煜欣魏炳琦谭祥汉马丙祥河南中医药大学第一附属医院儿科医院河南郑州450099 河南中医药大学儿科医学院河南郑州450046 河南梁济时中医药科技研究院河南郑州450000 郑州世卓医药科技有限公司河南郑州450000 河南中医药大学中医药科学院河南郑州450046 河南中医药大学中医学院河南郑州450046 康奈尔大学威尔医学院美国纽约10065

目的基于“病-药-量”分析《中华医典》中含有丹参的中药方剂的用药规律,为丹参的临床应用及药品开发提供科学依据。方法从《中华医典》中收集含有丹参的中药方剂,采用Excel 2020建立丹参临证方药数据库,对其病症、证型、药物使用频次... 详细信息

目的基于“病-药-量”分析《中华医典》中含有丹参的中药方剂的用药规律,为丹参的临床应用及药品开发提供科学依据。方法从《中华医典》中收集含有丹参的中药方剂,采用Excel 2020建立丹参临证方药数据库,对其病症、证型、药物使用频次、功效类别、性味归经、剂型及用量等进行统计分析,运用SPSS Statistics 22.0、IBM SPSS Modeler 18.0软件进行关联规则、聚类分析等数据挖掘。结果共收集含丹参方剂1196首,主治病证分类共511种,其中高频病证(频次≥9)主要为“中风”“脚气”“虚劳”“痹痛”“腰痛”。治疗“中风”证型以阴虚风动为主,“脚气”证型以湿热蕴结为主,“虚劳”证型以肾阳虚为主,“痹病”证型以风寒湿痹为主,“腰痛”证型以寒湿腰痛为主。组方中使用频次≥150的药物有16味,使用频次较高的有当归、人参、茯苓等。药物功效种类以活血调经药、补气药、发散风寒药、补血药、利水消肿药较多;药性使用频次由高到低为温、寒、平;药味多选用苦、甘、辛味;药物归经以肝、肺、肾、心经为主。高频病症剂型及药物用量分析显示,治疗“中风”时,丹参常用剂量为41.31 g,剂型多为汤剂和散剂,核心药物配伍防风以祛风止痉;治疗“脚气”时,丹参常用剂量为123.93 g,剂型多为汤剂,核心药物配伍防风以除湿止痉;治疗“虚劳”时,丹参常用剂量为41.31 g,剂型多为散剂,核心药物配伍熟地黄以滋阴补血;治疗“痹病”时,丹参常用剂量为37.3 g,剂型多为酒剂,核心药物配伍肉桂以温经散寒;治疗“腰痛”时,丹参常用剂量为41.31 g,剂型多为酒剂,核心药物配伍牛膝以通血下行。结论丹参可治疗多系统疾病,在诸多疾病中主要发挥活血化瘀、通经止痛功效。根据不同疾病特点,与其他药物相配伍时,丹参又被赋予“祛风”“壮骨”“祛湿”“止痉”等功效,为丹参临床应用及新药开发提供了理论参考及科学依据。

关键词：丹参病-药-量《中华医典》数据挖掘用药规律活血化瘀通经止痛

注意力缺陷多动障碍啮齿类动物模型中西医研究新进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 280-289页

作者：井贺云康乐董亚博杨艳丽李秀敏苗明三河南中医药大学中医药科学院郑州450046 河南中医药大学药学院郑州450046 河南中医药大学第一临床医学院郑州450046 郑州泰丰制药有限公司郑州450046

注意力缺陷多动障碍(ADHD)又称儿童多动症,是一种多见于儿童,尤其是学龄前儿童的行为障碍性疾病。该病可能会引起认知障碍、学习困难、品行障碍等其他精神疾病,严重影响儿童的生活质量,而且目前全球患病人数仍旧在不断增加。建立一种与... 详细信息

注意力缺陷多动障碍(ADHD)又称儿童多动症,是一种多见于儿童,尤其是学龄前儿童的行为障碍性疾病。该病可能会引起认知障碍、学习困难、品行障碍等其他精神疾病,严重影响儿童的生活质量,而且目前全球患病人数仍旧在不断增加。建立一种与临床病证及发病原理吻合度高的动物模型对于深入研究该疾病的预防治疗是至关重要的。近年来,关于ADHD动物模型的研究迅速发展,研究者们从遗传和环境等角度开发了近20种动物模型,但是大多数动物模型目前还处在探索阶段,并没有足够的研究来详细探讨其发病机制、核心特征和药物作用。自发性高血压(SHR)大鼠因为其优秀的表面有效性及发病阶段更加符合儿童期等诸多优势成为目前应用最为普遍的ADHD动物模型。此外多巴胺转运体(DAT)敲除小鼠、蛛毒素受体基因3(LPHN3)敲除大鼠和新生期大鼠缺氧模型也都表现出了良好的表面有效性。有研究者给SHR大鼠每日注射左旋甲状腺肝素钠,造模后大鼠既可以表现出多动症的典型症状,还具有阴虚阳亢的证候表现,成功模拟了ADHD阴虚阳亢证型的病证模型,为中西医病证结合ADHD动物模型的构建及评价提供了全新思路。该文综述了近10年来国内外报道的ADHD动物模型,将ADHD啮齿类动物模型总结归纳为遗传模型、化学物质诱导型及环境诱导型3大类,并分别对其进行概括分析,以期为ADHD的实验研究选择和合适模型地探索提供参考。

关键词：注意力缺陷多动障碍动物模型实验动物研究进展

盐酸溴己新注射液中溴己新与辅料反应杂质研究

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中国现代应用药学 2024年第3期41卷 378-385页

作者：曾智丽吴中礼刘保林贾飞楼金芳余露山浙江大学杭州310058 杭州百诚医药科技股份有限公司杭州311103

目的对盐酸溴己新注射液中特有的未知杂质进行结构鉴定、合成和分析,并作为已知杂质控制。方法通过二维液相色谱串联质谱推导了未知杂质的结构,根据产品的处方工艺推导出了杂质来源,分析杂质产生机制,采用定向合成的方式获得杂质单体,... 详细信息

目的对盐酸溴己新注射液中特有的未知杂质进行结构鉴定、合成和分析,并作为已知杂质控制。方法通过二维液相色谱串联质谱推导了未知杂质的结构,根据产品的处方工艺推导出了杂质来源,分析杂质产生机制,采用定向合成的方式获得杂质单体,并采用二维液相色谱串联质谱、核磁共振等技术确证杂质的结构,最后采用HPLC对杂质进行分析方法验证。结果确证该类杂质为溴己新与辅料葡萄糖反应生成,2个杂质与盐酸溴己新的校正因子分别为2.2和2.4,分析方法专属性和重现性良好。结论将该2个注射液特有杂质分别命名为杂质1和杂质2,并作为已知杂质定入标准,按照自身对照加校正因子法计算杂质含量。本研究对指导盐酸溴己新注射液的杂质控制以及辅料葡萄糖筛选有着重要的意义。

关键词：盐酸溴己新杂质解析未知杂质高效液相色谱-质谱联用

现代中药制剂创新研发模式“证-药-方-剂”的构建

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中药材 2024年 803-809页

作者：李伟泽赵宁韩文霞关丽付丽娜郭伟杨黎彬西安医学院江苏微纳医药科技有限公司

中医药是中国医疗体系的重要组成部分,并为人民的生命健康做出了重要贡献。然而近代以来,随着科学技术的发展、生态环境的演变、人们生活工作方式的变化与人类疾病谱及病因发生了较大的更迭,因此,中医药创新发展面临重大挑战与机遇。目... 详细信息

中医药是中国医疗体系的重要组成部分,并为人民的生命健康做出了重要贡献。然而近代以来,随着科学技术的发展、生态环境的演变、人们生活工作方式的变化与人类疾病谱及病因发生了较大的更迭,因此,中医药创新发展面临重大挑战与机遇。目前,对于中药现代化的本质以及现代科技如何融入中医药尚无统一认识,造成临床疗效低于预期是中医药临床推广与应用面临的困局,也是中医药创新发展的核心“卡脖子”问题。如何传承、创新与发展中医药,进一步提高其临床疗效和工业化水平以满足疾病救治需求,是现代中药制剂创新研发的关键。本论述基于多年中药新产品研发、转化与临床应用实践,构建了“证-药-方-剂”的现代中药制剂创新研发模式,将中医药理论与现代疾病病机、中药药理机制和药效物质以及新型制剂技术等有效融合,通过“证-药-方”解决中药临床疗效的问题,通过“剂”解决中药制剂的工业化水平与患者用药的便捷性问题,从而为以临床治疗为目的现代中药制剂创新研发提供了模式借鉴。

关键词：中药临床疗效中医理论现代化证-药-方-剂

丹酚酸F调控Bax/Caspase-3/GSDME信号通路改善肾小管上皮细胞焦亡作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 56-64页

作者：石贤聪谢治深赵靓王佳俊段亚飞王潘张振强张效威徐江雁河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:基于B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度(2.5、5、10、20μmol·L^(-1))... 详细信息

目的:基于B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度(2.5、5、10、20μmol·L^(-1))丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞相对活力的影响及给予丹酚酸F不同干预时间条件下HK-2细胞的相对活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒和酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒分别检测细胞培养基上清中LDH和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;流式细胞术结合异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)和Hoechst 33342/PI染色检测丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞PI阳性率的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)评价丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中Bax、Bcl-2、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、Caspase-3、GSDME蛋白表达及激活情况的影响。2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法(DCFH-DA)及线粒体膜电位(JC-1)考察丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中活性氧(ROS)产生及线粒体膜电位的影响。结果:与空白组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),乳酸脱氢酶、炎症因子IL-1β、PI阳性细胞比例均显著升高(P<0.01);Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的降低,ROS产生过量蓄积。与模型组比较,丹酚酸F组有效改善高糖诱导所致HK-2细胞的损伤(P<0.05),明显降低细胞培养基上清中LDH及IL-1β含量(P<0.05,P<0.01),显著减少PI阳性细胞的比例(P<0.01);丹酚酸F组降低Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达,明显升高Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的升高,ROS的过量蓄积减少。结论:丹酚酸F通过减少ROS的产生,改善线粒体膜电位失衡,抑制Bax/Caspase-3/GSDME信号通路介导的细胞焦亡发挥改善高糖诱导所致HK-2细胞损伤的作用。

关键词：丹酚酸F B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)信号通路肾小管上皮细胞细胞焦亡

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鲜车前草的应用考证及现代临床应用

中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 159-169页

作者：赵日开蒋鑫杨卉妍苗明三河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:探究鲜车前草临床应用规律,为鲜车前草的现代应用提供文献支持及发展思路。方法:以第5版《中华医典》为古籍数据库,以中国知网、维普、万方、中华医学期刊全文数据库为现代数据库,摘录包含鲜车前草应用的内容,并进行归纳整理分析... 详细信息

目的:探究鲜车前草临床应用规律,为鲜车前草的现代应用提供文献支持及发展思路。方法:以第5版《中华医典》为古籍数据库,以中国知网、维普、万方、中华医学期刊全文数据库为现代数据库,摘录包含鲜车前草应用的内容,并进行归纳整理分析。结果:古籍中车前草鲜用的频率很高,功效以清热、凉血、利尿、通淋为主,可用于治疗淋证、小便不通、小便溺血等内科病及疮痈、白虎丹等外科病,治疗面口五官热证如鼻衄、目赤肿痛、乳蛾喉痹等病的疗效极佳,在妇科及儿科疾病中也有广泛的应用。现代文献记载鲜车前草主治范围包括肾系、五官、脾胃、肺系、肝胆、皮肤外科及妇科儿科疾病,主要用于肾系湿热证及由于湿热毒蕴引起的皮肤外科诸证,功效以清热解毒,利尿通淋为主。民间从古至今都有采食鲜车前用于充饥或保健的报道。结论:鲜车前草临床应用广泛,具有极高的医用价值与经济价值,但是现代应用发展滞后,需要集策集力从“药材生产-储存运输-制剂研发-临床应用”各个环节入手推动鲜车前草应用发展。

关键词：鲜药车前草古籍考证临床应用

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