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SmacsiRNA慢病毒载体的构建及其对Smac基因沉默效果的鉴定

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中华实验眼科杂志 2016年第3期34卷 199-204页

作者：李云郑广瑛蒋瑜郑州大学第一附属医院眼科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052

背景研究证实半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂（Smac）蛋白是肿瘤细胞的促凋亡蛋白，我们先前的研究表明，Smac蛋白在白内障患者LECs中表达量明显高于正常人，因此推测沉默LECs中Smac的表达可抑制LECs的过度凋亡，但如何成功将Smacsi... 详细信息

背景研究证实半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂（Smac）蛋白是肿瘤细胞的促凋亡蛋白，我们先前的研究表明，Smac蛋白在白内障患者LECs中表达量明显高于正常人，因此推测沉默LECs中Smac的表达可抑制LECs的过度凋亡，但如何成功将SmacsiRNA转染进入LECs是研究的关键。目的构建人SmacsiRNA慢病毒载体并对人LECs进行感染，研究慢病毒载体构建方法及其在人晶状体上皮细胞HLE—B3中的干扰效率，利用RNA干扰（RNAi）技术建立Smac低表达的HLE—B3株。方法根据我们前期的工作设计并合成针对Smac基因序列的siRNA序列，将合成的双链DNA以T4噬菌体DNA连接酶与GV118慢病毒载体相连接，转化DH5α感受态细胞，采用PCR筛选阳性克隆，经测序鉴定正确后，感染293T细胞，收集上清液并标定病毒滴度。用重组慢病毒感染HLE—B3细胞，荧光显微镜下观察转染后的阳性HLE—B3细胞数并计算病毒感染复数（MOI）。将常规培养的HLE—B3细胞分为阴性对照组、空质粒组和GV118-Smac—siRNA1组，阴性对照组为常规培养的细胞，空质粒组细胞仅转染不含慢病毒载体的siRNA质粒，GV118-Smac·siRNA1组细胞转染GV118-Smac—siRNA1质粒，采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中SmacmRNA的相对表达量。结果构建的重组载体GV118-Smac—siRNAl转化DH5c感受态细胞后阳性克隆产物大小为340bp，空载的克隆产物为299bp，与预期结果相符，测序结果显示合成的Smac—siRNA1与预期目的序列一致。构建的GV118-Smac—siRNA1病毒滴度为3．0x10。TU／m1。感染HLE．B3细胞后荧光显微镜下可见MOI为100时，细胞毒性低且感染效率高，约为82％。阴性对照组、空载质粒组和GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量分别为（101．290±8．349）％、（92．330±6．320）％和（32．540±4．221）％，3个组间总体比较差异有统计学意义（F=32．871，P〈0．01），其中GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量较阴性对照组明显下降，差异有统计学意义（P=0．000），而空载质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量略低于阴性对照组，但组间差异无统计学意义（P=0．535）。结论本研究中成功构建了siRNA慢病毒载体GV118-Smac—siRNA1，其转染HLE—B3效率高，该siRNA载体能够有效地抑制人LECs中Smac基因的表达。

关键词：线粒体蛋白凋亡小干扰RNA 基因载体慢病毒载体/基因基因转染技术人晶状体上皮细胞

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NLRP3炎性小体及下游因子IL-1β／IL-18在变应性鼻炎大鼠模型中的表达及意义

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2015年第2期50卷 145-150页

作者：万慧娟苏红霞吴玉瑛赵玉林周明辉郑州大学第一附属医院鼻科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052

目的检测天然免疫因子NLRP3炎性小体及下游因子白细胞介素1β（IL-1β）／IL-18在变应性鼻炎（AR）大鼠模型中的表达情况及其意义。方法40只健康sD大鼠，雌雄不限，随机数字表法分为对照组（A组）、AR模型1组（B组）、AR模型2组（C组）... 详细信息

目的检测天然免疫因子NLRP3炎性小体及下游因子白细胞介素1β（IL-1β）／IL-18在变应性鼻炎（AR）大鼠模型中的表达情况及其意义。方法40只健康sD大鼠，雌雄不限，随机数字表法分为对照组（A组）、AR模型1组（B组）、AR模型2组（C组）、AR模型3组（D组），每组10只。A组不加卵清蛋白，B、C、D组用卵清蛋白及氢氧化铝基础致敏后，用5％卵清蛋白生理盐水溶液分别滴鼻10、20、30d，1次／d，激发完成记录大鼠鼻部症状并处死大鼠。苏木精-伊红（HE）染色观察嗜酸粒细胞（EOS）计数、免疫组化观察NLRP3、半胱氨酸天冬酶1（Caspase-1）在各组大鼠鼻黏膜的表达情况，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测大鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA—slgE）、IL-18、IL-1β在各组大鼠外周血中的相对表达量及IL-1β、IL-18在各组大鼠鼻腔冲洗液中的含量。以SPSS17．0软件进行统计学分析。结果嗜酸粒细胞（EOS）计数、行为学评分、OVA—sIgE浓度在AR模型组高于对照组，差异有统计学意义（P值均〈0．05），AR模型组之间比较差异亦有统计学意义（P值均〈0．05）。NLRP3在B、C、D组鼻黏膜中的相对表达量分别为48．80±10．75、71．80±16．98、100．32±13．91，高于对照组的17．47±5．59，差异有统计学意义（F=78．399，P〈0．05）；Caspase-1在B、c、D组鼻黏膜中的相对表达量分别为36．33±4．71、50．87±11．18、73．10±14．77，高于对照组的11．48±2．70，差异有统计学意义（F=71．727，P〈0．05）；IL-1β在B、C、D组外周血中的含量分别为（56．46±10．13）、（82．37±11．93）、（112．01±22．91）pg／ml，高于对照组的（38．26±4．66）pg／ml，差异有统计学意义（F=51．981，P〈0．05）；IL-18在B、C、D组外周血中的含量分别为（177．92±23．63）、（194．33±20．78）、（234．06±31．70）pg／ml，高于对照组的（89．71±5．56）pg／ml，差异有统计学意义（F=73．295，P〈0．05）。且AR模型组之间比较差异亦有统计学意义（P值均〈0．05）。NLRP3表达量与行为学评分、OVA—sIgE浓度、EOS细胞计数呈正相关（r值分别为0．833、0．873、0．868，P值均〈0．01）。结论NLRP3炎性小体及下游因子IL—1β／IL-18参与了AR的发病过程，可能与AR的炎性反应程度有关。

关键词：鼻炎变应性受体胞质和核半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 白细胞介素1β 白细胞介素18 疾病模型动物

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Salubrinal对人晶状体上皮细胞中内质网应激的影响

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中华眼科杂志 2016年第6期52卷 437-443页

作者：李云郑广瑛刘玥郑州大学第一附属医院眼科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052

目的探讨内质网应激（ERS）阻滞剂Salubrinal对人晶状体上皮细胞（HLEC）的保护作用及机制。方法实验研究。应用H2O2诱导HLECB，系细胞（HLE-B3）建立氧化应激模型，诱导ERS的发生。分别在H2O2干预和不干预的情况下，加入不同浓度的Salu... 详细信息

目的探讨内质网应激（ERS）阻滞剂Salubrinal对人晶状体上皮细胞（HLEC）的保护作用及机制。方法实验研究。应用H2O2诱导HLECB，系细胞（HLE-B3）建立氧化应激模型，诱导ERS的发生。分别在H2O2干预和不干预的情况下，加入不同浓度的Salubrinal（10、15、20、25、30、35μmol／L）培养24h，采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组HLE-B，的增殖活性。实验分组为3组，A组（正常对照组）、B组（H2O2 200 μmol／L组）、C组（H2O2 200 μmol/L＋Salubrinal 25 μmol／L组）。采用原位缺口末端转移酶标记法（TUNEL）和流式细胞仪（FCM）检测药物作用48h后HLE-B，的凋亡情况。Westernblot检测不同时间点下各组葡萄糖调节蛋白质78（GRP78）、C／EBP同源蛋白（CHOP）、半胱氨酸蛋白酶12（Caspase-12）、真核细胞翻译起始因子2α（eIF2α）的磷酸化型p-elF2α的变化。单因素方差分析用于组间均数的多重比较，当方差齐时组间两两差异比较采用Dunnettt检验，当方差不齐时Dunnett’s T3用作两两比较。结果CCK-8试剂盒结果显示，没有H2O2干预时，不同浓度的Salubrinal对HLE-B，的细胞活性无明显抑制作用，存活率分别为（98．6±3．3）％，（98．7±2．6）％，（9914±3．2）％，（98．6±1．9）％，（98．8±2．5）％，（99．3±3.2）％，（99．5±2．4）％，差异无统计学意义（F=0．09，P=0．10）；应用H2O2干预时，随着Salubrinal浓度的升高，HLE-B，存活分别为（52．9±4．7）％，（65．0±3．6）％，（72．9±3．8）％．（84．5±3．6）％，（91．6±2．1）％，（93．1±2．9）％，（92．0±3.3）％，与对照组相比，差异有统计学意义（P值均〈0．01），当Salubrinal浓度大于25μmol／L时，HLE-B，细胞的存活率增加不明显（P=0．56，0．88）。流式细胞仪检测3组的细胞凋亡率分别为（1．9±0．7）％、（8．8±0．5）％、（4．3±0.3）％，各组之间差异有统计学意义（F=396．26，P〈0．01；与A组比较P值均〈0．01）。TUNEL染色结果分别为A组（7．7±1．0）％，B组（36．9±1．0）％，C组为（16．7±2．2）％，凋亡指数差异有统计学意义（F=618．39，P〈0．01，与A组比较P〈0．01）。Westernblot结果表明：随着H2O2作用时间的延长，B组中p-elF2α在6h较初始时间点增加（2．16±0．38）倍，GRP78在12h较初始时间点增加（2．56±0．15）倍，CHOP在12h开始升高，持续至24h，后又逐渐降低，在48h升高量达初始时间点的（2．49±0．23）倍，Caspase-12在48h表达明显增加，是初始时间点的（3．53±0．30）倍；C组与B组相比，GRP78、CHOP、p-elF2α表达量增加，而Caspase-12表达降低（GRP78：F=37．85，P〈0．01；CHOP：F=61．09，P〈0．01；Caspse-12：F=22．27，P〈0．01；p-elF2α：F=15．11，P〈0．01）。结论Salubrinal可以通过抑制内质网应激的凋亡通路，对H2O2诱导的HLE-B3凋亡起保护作用。

关键词：晶体上皮细胞内质网应激细胞凋亡桂皮酸盐类

左旋肉碱通过内质网应激对人晶状体上皮细胞凋亡的影响

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中华眼科杂志 2018年第5期54卷 363-368页

作者：孔德倩郑广瑛刘玥郑州大学第一附属医院眼科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052

目的探讨左旋肉碱通过内质网应激途径对人晶状体上皮细胞凋亡产生的影响。方法实验研究。选取人晶状体细胞株（HLE-B3），利用H2O2处理12 h建立氧化应激模型，诱导内质网应激产生。实验分为4组：H2O2组、左旋肉碱（100 μmol/L）＋H2O2... 详细信息

目的探讨左旋肉碱通过内质网应激途径对人晶状体上皮细胞凋亡产生的影响。方法实验研究。选取人晶状体细胞株（HLE-B3），利用H2O2处理12 h建立氧化应激模型，诱导内质网应激产生。实验分为4组：H2O2组、左旋肉碱（100 μmol/L）＋H2O2组、磷酸盐缓冲液（PBS）组和左旋肉碱（100 μmol/L）组，其中PBS组和左旋肉碱组为对照组。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测不同浓度（200、400、600、800 μmol/L）H2O2作用下各组HLE-B3细胞活力。根据CCK-8结果选择适宜的H2O2浓度（400 μmol/L）处理细胞，采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率；实时定量（RT）-PCR和Western印迹分别检测各组细胞内半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）及葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在mRNA及蛋白水平的表达。4组数据的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果CCK-8法检测结果显示，当H2O2浓度分别为200、400、600、800 μmol/L时，HLE-B3细胞存活率H2O2组（77.6%±0.8%，58.1%±3.1%，39.2%±1.5%，28.1%±2.2%）、左旋肉碱＋H2O2组（83.3%±4.2%，74.5%±3.1%，46.4%±1.7%，32.4%±1.2%）、PBS组（97.6%±2.1%，98.3%±0.2%，96.3%±2.2%，98.5%±1.1%）、左旋肉碱组（98.5%±1.3%，96.1%±2.1%，98.1%±0.2%，97.3%±1.4%）4组比较差异均有统计学意义（均P〈0.05），PBS组和左旋肉碱组两组间比较差异均无统计学意义（均P〉0.05）；当H2O2浓度为400 μmol/L时，左旋肉碱＋H2O2组细胞存活率高于H2O2组，差异有统计学意义（t=18.14，P=0.020），且H2O2组细胞存活率接近50%，但随着H2O2浓度的进一步增加，左旋肉碱＋H2O2组与H2O2组相比差异无统计学意义（均P〉0.05）。选取H2O2浓度为400 μmol/L，流式细胞仪检测结果显示H2O2组、左旋肉碱＋H2O2组、PBS组和左旋肉碱组细胞凋亡率依次为31.4%±4.5%、16.5%±2.8%、2.1%±0.2%、1.9%±1.8%，4组比较差异有统计学意义（F=126.784，P=0.024），左旋肉碱＋H2O2组凋亡率低于H2O2组，差异有统计学意义（t=24.67，P=0.013），PBS组和左旋肉碱组两组间差异无统计学意义（P〉0.05）；RT-PCR结果显示，左旋肉碱＋H2O2组caspase-3、GRP78的mRNA表达量均低于H2O2组（0.424±0.041比0.752±0.203，0.521±0.223比0.821±0.103），差异均有统计学意义（t=27.92，P=0.018；t=16.31，P=0.019）；Western印迹结果显示，左旋肉碱＋H2O2组caspase-3、GRP78的蛋白表达量均低于H2O2组（0.712±0.212比1.126±0.251，0.512±0.012比0.735±0.051），差异均有统计学意义（t=15.43，P=0.010；t=20.62，P=0.018）。结论左旋肉碱能够通过抑制内质网应激途径降低人晶状体细胞的凋亡率。

关键词：晶体上皮细胞细胞凋亡肉碱内质网应激

二甲双胍对孕激素耐药的子宫内膜癌细胞的调节作用

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中华妇产科杂志 2016年第2期51卷 135-140页

作者：牛艺洁史惠蓉谢娅郑州大学第一附属医院妇科 450052 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室

目的探讨二甲双胍对孕激素耐药的子宫内膜癌细胞的调节作用及可能的作用机制。方法（1）采用醋酸甲羟孕酮（MPA）持续作用、浓度递增（1—15μmol／L）方法体外诱导子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞，建立孕激素耐药的子宫内膜癌细胞系Ishi... 详细信息

目的探讨二甲双胍对孕激素耐药的子宫内膜癌细胞的调节作用及可能的作用机制。方法（1）采用醋酸甲羟孕酮（MPA）持续作用、浓度递增（1—15μmol／L）方法体外诱导子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞，建立孕激素耐药的子宫内膜癌细胞系Ishikawa／MPA细胞。（2）采用活细胞计数（CCK．8）法检测不同浓度MPA（1、5、10、20、40、60μmol／L）、二甲双胍（1、10、20、40、60、70、80mmol／L）作用24h后Ishikawa和Ishikawa／MPA细胞的增殖情况。（3）实验分为4组，即MPA组（加入20μmol／L的MPA）、二甲双胍组（加入20mmol/L的二甲双胍）、MPA＋二甲双胍组（加入20μmol／L的MPA和20mmol／L的二甲双胍）、对照组（未加药物），采用蛋白印迹（western blot）法检测4组Ishikawa和Ishikawa／MPA细胞中PR-B蛋白的表达。结果（1）采用MPA持续作用、浓度递增方法体外诱导Ishikawa细胞，历经近1年时间成功建立了孕激素耐药的子宫内膜癌细胞系Ishikawa／MPA细胞。Ishikawa和Ishikawa／MPA细胞的倍增时间分别是（47±3）和（43±4）h，两者比较，差异无统计学意义（t=0．349，P=0．572）。（2）CCK-8法检测显示，不同浓度的MPA作用后，低浓度（1、5μmol／L）的MPA对Ishikawa／MPA细胞增殖具有促进作用，其抑制率分别为-3％、-13％，高浓度（10、20、40、60μmol／L）的MPA对Ishikawa／MPA细胞增殖的抑制作用不明显，其抑制率分别为4％、3％、9％、40％；而不同浓度MPA对Ishikawa细胞增殖均具有显著的抑制作用，其抑制率分别为16％、30％、41％、55％、65％、66％。在同一浓度下，两种细胞的抑制率分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。不同浓度（1、10、20、40、60、70、80mmol／L）的二甲双胍作用后，Ishikawa细胞和Ishikawa／MPA细胞的增殖均明显受到抑制，且随着二甲双胍浓度的增加其抑制作用均逐渐增强（χ^2=72．9，P=0．000；χ^2=76．3，P=0．000）。其中，Ishikawa细胞的抑制率分别为-6％、19％、37％、54％、70％、72％、83％，Ishikawa／MPA细胞的抑制率分别为-10％、20％、56％、89％、97％、98％、99％。（3）western blot法检测显示，Ishikawa细胞中，二甲双胍组、MPA＋二甲双胍组细胞中PR-B蛋白的表达水平分别为（53．5±4．0）％、（37．7±5．2）％，分别与对照组[（23．4±3．0）％]比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；Ishikawa／MPA细胞中，二甲双胍组、MPA＋二甲双胍组细胞中PR-B蛋白的表达水平分别为（38．6±1．7）％、（36．3±2．5）％，分别与对照组[（6．4±1．6）％]比较，差异也均有统计学意义（P〈0．01）。结论二甲双胍对孕激素耐药的子宫内膜癌细胞的耐药性有调节作用，其可能的作用机制为通过提高PR-B蛋白的表达水平以改善耐药细胞对孕激素的耐药性。

关键词：子宫内膜肿瘤醋酸甲羟孕酮二甲双胍受体,孕酮

近红外荧光下甲状旁腺自体荧光强度潜在影响因素分析及其对术中甲状旁腺识别的指导

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2020年第5期55卷 490-496页

作者：王涛柳桢张朋宇邱贝刘晨光殷德涛郑州大学第一附属医院甲状腺外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州

目的研究近红外荧光(near-infrared fluorescent,NIRF)下甲状旁腺自体荧光强度(fluorescence intensity,FI)的影响因素,进一步评估NIRF技术在术中辨认甲状旁腺的价值。方法回顾性分析2019年4—6月于郑州大学第一附属医院甲状腺外科行... 详细信息

目的研究近红外荧光(near-infrared fluorescent,NIRF)下甲状旁腺自体荧光强度(fluorescence intensity,FI)的影响因素,进一步评估NIRF技术在术中辨认甲状旁腺的价值。方法回顾性分析2019年4—6月于郑州大学第一附属医院甲状腺外科行甲状腺或甲状旁腺手术的51例患者的临床资料,其中男16例,女35例,年龄18～74岁。测量术中甲状旁腺、甲状腺及背景在NIRF下的FI,并统计NIRF和白光检出甲状旁腺的枚数,用方差分析、两独立样本t检验和Spearman秩相关分析标准化甲状旁腺FI与临床变量的关系,用χ2检验分析NIRF和白光对甲状旁腺检出率的差异。结果 51例患者中,标准化甲状旁腺FI大于标准化甲状腺FI(1.72±0.68比1.25±0.40,t=6.555,P0.05)。标准化甲状旁腺FI与疾病类型有关(F=2.636,P0.05)。PHPT、PTC、NG和PTC合并NG的标准化甲状旁腺FI,两两之间差异均无统计学意义(P值均>0.05)。除外3例SHPT,NIRF对甲状旁腺的检出率高于白光下的检出率[98.32%(117/119)比84.87%(101/119),χ2=13.974,P临床变量的影响,除SHPT外,NIRF技术可提高术中甲状旁腺的识别能力。

关键词：甲状旁腺荧光强度影响因素检出率

多巴胺对兔心肺复苏早期血流动力学及脑氧代谢的影响

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中华急诊医学杂志 2018年第1期27卷 51-56页

作者：兰超王超吕震宇刘奇徐潇翔吕青叶华清郑州大学第一附属医院急诊ICU河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州450000

目的观察不同剂量多巴胺对家兔心肺复苏（CPR）早期血流动力学及脑氧代谢的影响。方法根据多巴胺的不同剂量将健康成年家兔按随机数字法分为4 组：对照组（controlgroup, CG）、低剂量组（low dose group, LG）、中剂量组（moderate d... 详细信息

目的观察不同剂量多巴胺对家兔心肺复苏（CPR）早期血流动力学及脑氧代谢的影响。方法根据多巴胺的不同剂量将健康成年家兔按随机数字法分为4 组：对照组（controlgroup, CG）、低剂量组（low dose group, LG）、中剂量组（moderate dose group, MG）、大剂量组（highdose group, HG），每组15 只。电诱导致颤并进行CPR 直至每组自主循环恢复（ROSC）家兔达到10 只。记录各组ROSC 即刻、15 min、30 min、60 min、120 min 时的心输出量（CO）、平均动脉压（MAP）、心率（HR）、外周血管阻力指数（SVRI）、脑局部组织血氧饱和度（TOI），120 min后处死家兔取脑组织行HE 染色，观察各组神经细胞损伤程度。各时间点组间比较采用重复测量的方差分析，多组定量资料的比较如符合正态性检验采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t 检验；多组二分类资料采用χ2 检验或Fisher 确切概率法检验；生存曲线差异的比较采用Log-rank 检验，以P〈0.05 为差异有统计学意义。结果各组间ROSC 率差异无统计学意义；与CG 和LG 相比，MG 的ROSC 时间更低（277±15 vs. 190±12，P〈0.01 ；252±16 vs. 190±12, P=0.016），且120min 生存率更高（20% vs. 90%, χ2=9.899, P= 0.005; 30% vs. 90%, χ2=7.5, P=0.02）； ROSC 后各时间点MG 的CO 均高于其余各组（均P〈0.05）；MG、HG 在ROSC15 min 后各时间点MAP 均明显高于CG、LG（均P〈0.05）；ROSC 后各时间点HG 的SVRI 均明显大于同时刻其余各组（均P〈0.05）；在ROSC 15 min、30 min 时MG 的TOI 值明显大于同时刻其余各组（均P〈0.05）；MG 和HG 的中位生存时间均大于CG 和LG（均P〈0.05）。平均每高倍镜视野下MG 坏死细胞数（28.4±1.0）显著低于其余各组（CG： 41.2±1.5 ；LG ：41.0±2.0 ；HG ：39.6±1.9）（均P〈0.01）。结论中等剂量多巴胺可同时维持ROSC 家兔MAP、CO 在较高水平，对家兔早期脑氧代谢产生更有益的效果。

关键词：多巴胺心肺脑复苏血流动力学脑氧代谢家兔

脓毒症早期血清白细胞介素-18和10在疾病严重程度及预后评估中的价值研究

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中国危重病急救医学 2011年第5期23卷 299-301页

作者：孙荣青张少雷郑州大学第一附属医院ICU 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室河南450052

目的观察脓毒症早期血清白细胞介素（IL-18、IL-10）的动态变化，评价其在脓毒症病情严重程度及死亡风险评估中的应用价值。方法采用前瞻性随机对照研究方法。选择2009年12月至2010年8月住重症监护病房（ICU）72h以上的脓毒症患者38例... 详细信息

目的观察脓毒症早期血清白细胞介素（IL-18、IL-10）的动态变化，评价其在脓毒症病情严重程度及死亡风险评估中的应用价值。方法采用前瞻性随机对照研究方法。选择2009年12月至2010年8月住重症监护病房（ICU）72h以上的脓毒症患者38例，同时选取20例非脓毒症患者为对照组；根据28d生存情况将脓毒症患者分为生存组（12例）和死亡组（26例）。记录患者入ICU后24、48、72h的一般资料及实验室检查结果，并留取静脉血，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-18、IL-10浓度。结果脓毒症组与对照组患者间生命体征、血常规、肝功能、肾功能、凝血功能、血气分析及电解质比较均无差异。脓毒症组入选后24、48、72hIL-18呈下降趋势，IL-10呈升高趋势，IL-18／IL-10比值呈下降趋势，各时间点均高于对照组。脓毒症患者死亡组IL-18、IL-10水平在24、48、72h均高于存活组CIL-18（ng／L）：108．36±18．54比91．66±21．49，92．13±28．92比54．16±31．76，91．78±17．33比76．04±22．09；IL-10（ng／L）：99．42±12．10比77．20±9．47，103．39±17．24比67．88±18．90，118．99±11．20比99．20±12．46，P〈0．05或P〈0．013；死亡组与存活组脓毒症患者24、48、72hIL-18／IL-10比值均呈下降趋势，但两组间差异无统计学意义（1．09±0．19比1．20±0．32，0．92±0．18比0．98±0．29，0．78±0．15比0．77±0．23，均P〉0．05）。结论脓毒症早期血清IL-18与IL-10浓度升高，且死亡者高于存活者，随病程进展，IL-18呈下降趋势，而IL-10呈上升趋势；血清IL-18和IL-10浓度均可用来评价脓毒症患者的疾病严重程度及预后。

关键词：脓毒症白细胞介素-18 白细胞介素-10 预后评估

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普鲁卡因胺对绵羊心室跨壁复极时间的影响

中国药理学通报 2005年第11期21卷 1371-1374页

作者：王乐信孙同文郑州大学第一附属医院心内科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室

目的研究普鲁卡因胺对心室跨壁复极时间的影响。方法对6只绵羊用苯巴比妥麻醉后,开胸,用4个针状(p lunge need les)电极分别插入到左心室的基底部和心尖部,测量室壁激动-恢复间期(AR I)。静脉注射普鲁卡因胺20mg.m in-1后观察AR I的变... 详细信息

目的研究普鲁卡因胺对心室跨壁复极时间的影响。方法对6只绵羊用苯巴比妥麻醉后,开胸,用4个针状(p lunge need les)电极分别插入到左心室的基底部和心尖部,测量室壁激动-恢复间期(AR I)。静脉注射普鲁卡因胺20mg.m in-1后观察AR I的变化。结果窦性心律时,心外膜、中层心肌和心内膜的AR I差异无显著性,[分别为(266.0±30.5)m s、(265.0±28.9)m s和(265.7±28.1)m s,P>0.05]。普鲁卡因胺对各层心肌的AR I均有延长作用,心外膜、中层心肌和心内膜的AR I分别延长了(66.8±18.3)m s、(70.3±14.7)m s和(65.3±15.7)m s(P>0.05)。结论钠通道阻滞剂普鲁卡因胺对左室的心外膜、中层心肌和心内膜复极的延长程度相似。

关键词：心脏电生理复极激动恢复间期普鲁卡因胺心肌