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灰树花多糖通过LncRNA HULC/miR-186-5p轴调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭

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食品工业科技 2024年第14期45卷 335-343页

作者：于静段子朋徐松涛漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:分析灰树花多糖(Grifola frondose polysaccharide,GFP)对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:将对数期GBC-SD细胞随机分组:对照组、GFP组(0.5、1、2µg/mL GFP)、shNC组、shHULC组、miR-NC组、miR-186-5p mimics组、GFP+pcDNA组、GFP+pcDNA-HULC组。CCK-8法检测细胞抑制率;Transwell小室法检测GBC-SD细胞迁移和侵袭;Western Blot印迹检测Cyclin D1、P21、MMP-2、MM-9蛋白水平;qRT-PCR检测LncRNA HULC和miR-186-5p的水平;Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p的结合位点,双荧光素酶报告实验检测LncRNA HULC和miR-186-5p的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测GFP对GBC-SD细胞移植瘤体内生长的影响。结果:0.25~8µg/mL GFP对胆囊癌GBC-SD细胞具有一定的抑制作用;与对照组比较,0.5、1、2µg/mL的GFP(极)显著(P0.05);与shNC组比较,shHULC组HULC相对表达水平极显著(P<0.01)降低,miR-186-5p相对表达水平极显著(P<0.01)增加,细胞存活率、迁移数目、侵袭数目极显著(P<0.01)降低,Cylin D1、MMP-2和MM-9水平极显著下调(P<0.01);与GFP+pcDNA组比较,GFP+pcDN-HULC组抑制率显著降低(P<0.05),迁移数目、侵袭数目极显著增加(P<0.01),Cylin D1、MMP-2和MM-9水平显著上调(P<0.05);与GFP+pcDNA给药组比较,GFP+pcDN-HULC给药组瘤体体积、质量极显著增加(P<0.01),miR-186-5p水平极显著下调(P<0.01)。结论:GFP可抑制胆囊癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制与调控LncRNA HULC/miR-186-5p有关。

关键词：灰树花多糖 LncRNA HULC miR-186-5p 胆囊癌增殖迁移侵袭

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基于Nrf2/ROS信号通路探讨岩藻多糖对食管癌细胞增殖的抑制作用

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食品工业科技 2024年第11期45卷 316-322页

作者：马永超程琦吴华陆琼金少举漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻... 详细信息

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻多糖对细胞增殖以及Nrf2/ROS信号通路的影响。裸鼠成瘤实验验证岩藻多糖对瘤体的瘤重、瘤体积及Nrf2、HO-1、NQO-1水平的影响。结果:1~16µg/mL岩藻多糖极显著抑制ECA109细胞增殖,48 h IC50为3.26µg/mL。与对照组(0.1%DMSO)相比,1、2、4µg/mL岩藻多糖处理后的ECA109细胞出现核凝聚、染色质不规则收缩、凋亡小体等明显的凋亡特征,(极)显著促进ECA109细胞凋亡,极显著下调Bcl-2表达水平,极显著上调Bax、Cleaved-caspase-3表达水平,极显著增加ROS水平,极显著降低Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05,P<0.01);Nrf2过表达能显著下调岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖效果,显著下调ROS水平,显著上调Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05)。体内实验显示,50、100 mg/kg岩藻多糖极显著抑制瘤体体积、瘤体质量,下调瘤体Nrf2、HO-1、NQO-1水平(P<0.05)。结论:岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖,对体内移植瘤抑瘤效果显著,其机制与调控Nrf2/ROS信号通路有关。

关键词：岩藻多糖 Nrf2/ROS 信号通路食管癌细胞增殖移植瘤

富硒羊肚菌多糖的制备及其体外抗肿瘤活性探究

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食品工业科技 2024年第15期45卷 213-222页

作者：李贝贝王慧琴孙仪征郑州澍青医学高等专科学校河南郑州450064

本研究旨在优化提取和纯化富硒羊肚菌多糖(Se-MPS),并评估其抗肿瘤活性及其机制。采用单因素和响应面优化法,对富硒羊肚菌粗多糖的提取工艺进行优化。通过柱层析法对粗多糖进行纯化,并对其化学组成进行分析。使用HepG2细胞进行CCK-8试... 详细信息

本研究旨在优化提取和纯化富硒羊肚菌多糖(Se-MPS),并评估其抗肿瘤活性及其机制。采用单因素和响应面优化法,对富硒羊肚菌粗多糖的提取工艺进行优化。通过柱层析法对粗多糖进行纯化,并对其化学组成进行分析。使用HepG2细胞进行CCK-8试验、集落形成试验、划痕试验和Transwell试验来评价Se-MPS的抗肿瘤活性。采用RT-qPCR法、Western blot法和免疫荧光法评价Se-MPS的潜在抗肿瘤机制。单因素和响应面试验结果显示,富硒羊肚菌粗多糖提取的最佳工艺参数为:提取时间2.5 h、液料比45:1(mL/g)、提取温度82℃,得率为7.95%。纯化后,Se-MPS的总糖含量达到95.86%,硒含量高达76.07±0.32 mg/g。此外,Se-MPS显著降低了HepG2细胞的集落形成效率、细胞迁移率和侵袭细胞数目(P<0.05)。同时,Se-MPS抑制了PI3K/Akt通路传导,下调了葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的mRNA表达,并降低了细胞的葡萄糖摄取量。研究结果表明,通过对提取时间、液料比及提取温度的优化,可改善富硒羊肚菌粗多糖得率。此外,通过调控PI3K/Akt通路,富硒羊肚菌多糖可发挥出较强的抗肿瘤活性。这项研究为富硒羊肚菌多糖的抗肿瘤活性提供了证据,并为相关功能性食品的开发提供了参考。

关键词：硒羊肚菌多糖化学组成响应面优化抗肿瘤活性

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六堡砖茶多糖制备及其免疫调节活性

食品工业科技 2024年第14期45卷 327-334页

作者：孙仪征王慧琴李贝贝郑州澍青医学高等专科学校河南郑州450064

目的:优化六堡砖茶多糖提取工艺,并进一步研究其免疫调节作用及其可能的调节机制。方法:采用单因素实验探究提取温度、料液比及乙醇浓度对茶多糖得率的影响,在此基础上与响应面试验相结合,对茶多糖提取工艺进行了优化。通过测定六堡砖... 详细信息

目的:优化六堡砖茶多糖提取工艺,并进一步研究其免疫调节作用及其可能的调节机制。方法:采用单因素实验探究提取温度、料液比及乙醇浓度对茶多糖得率的影响,在此基础上与响应面试验相结合,对茶多糖提取工艺进行了优化。通过测定六堡砖茶多糖对RAW264.7细胞的吞噬能力及NO释放量,检测核因子κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)和AMP依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK)信号通路相关基因及蛋白表达,评价纯化后的茶多糖的体外免疫调节活性。结果:六堡砖茶多糖的最佳提取工艺为:提取温度91.11℃,料液比1:15.45(g/mL),乙醇浓度82.84%(v/v)。在此条件下,茶多糖得率为8.62%。细胞实验显示六堡砖茶多糖可显著增强RAW264.7细胞的吞噬能力及NO释放量(P<0.05),显著激活NF-κB和AMPK信号通路(P<0.05),显著上调诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的mRNA表达水平(P<0.05)。其中,高剂量茶多糖效果更佳。结论:通过优化提取温度、料液比及乙醇浓度条件,可有效提高六堡砖茶多糖得率,并可通过激活NF-кB/AMPK通路发挥免疫调节作用。该研究结果为六堡砖茶多糖活性深入探究和应用提供了研究基础。

关键词：六堡砖茶茶多糖提取响应面优化免疫调节

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不同HDAC水平的外周T细胞淋巴瘤患者预后复发的影响因素分析

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中国实验血液学杂志 2024年第3期32卷 733-741页

作者：李英新李一丹王佩焦会杰李英张静原现华邢台医学高等专科学校第一附属医院血液科河北邢台054000

目的:基于潜在类别分析不同组蛋白去乙酰化酶(HDAC)水平的外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者预后复发的影响因素分布特征。方法:选取2012年9月至2019年9月在本院就诊的PTCL患者112例,将患者分为复发组和未复发组,比较两组患者的临床资料。通过... 详细信息

目的:基于潜在类别分析不同组蛋白去乙酰化酶(HDAC)水平的外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者预后复发的影响因素分布特征。方法:选取2012年9月至2019年9月在本院就诊的PTCL患者112例,将患者分为复发组和未复发组,比较两组患者的临床资料。通过多因素Logistic回归分析影响患者预后复发的危险因素。采用潜在类别分析法比较复发高风险组与复发低风险组间预后复发影响因素的分布特征差异。结果:复发组患者87例(77.68%),未复发组患者25例(22.32%)。多因素Logistic回归分析结果显示,ECOG评分≥2分、Ann Arbor分期为III-IV期、IPI评分>2分、骨髓受累、血清β2-微球蛋白(β2-MG)水平升高、近期疗效未达到完全缓解(CR)和部分缓解(PR)、HDAC高表达为患者复发的独立危险因素(P5分)和低风险组(HDAC≤5分)。潜在类别分析结果显示,与预后复发低风险组相比,预后复发高风险组中“危险因素分布较多型”占比较高(P<0.05)。结论:不同HDAC水平的PTCL患者的预后复发情况以及预后复发高风险与低风险人群中危险因素分布特征均有差异。

关键词：组蛋白去乙酰化酶外周T细胞淋巴瘤复发危险因素分布特征

茯苓多糖通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控肝癌细胞自噬、化疗耐药的机制

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食品工业科技 2024年

作者：陈永芳李艳珂张淑静漯河医学高等专科学校

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰... 详细信息

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pcDNA组(转染2 μg pcDNA)、pcDNA3.1-HCG11组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11)、PCP组(30 μg/mL)和PCP+pcDNA3.1-HCG11 组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11+30 μg/mL PCP)。MTT检测肝癌细胞耐药情况和抑制率，Western blot检测Beclin-1、LC3 I和LC3 II水平，实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR，qRT-PCR)检测细胞株中LncRNA HCG11和miR-539-3p的水平，双荧光素酶报告实验检测LncRNA HCG11和miR-539-3p的靶向关系，裸鼠成瘤实验验证体内瘤体的瘤重、瘤体积及自噬相关蛋白水平。结果：4-128 μg/mL PCP抑制HepG-2/DDP细胞增殖，7.5、15、30 μg/mL的PCP能显著降低HepG-2/DDP细胞中MRP1、P-gp、Beclin-1、LC3II的水平，下调HCG11水平，增加miR-539-3p的表达水平(P<0.01)；与对照组比较，HCG11 siRNA 组HepG-2/DDP细胞HCG11相对表达水平、IC50(顺铂)、Beclin-1、LC3 II/ LC3 I比值显著降低，miR-539-3p水平和抑制率(顺铂)显著增加(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1-HCG11处理组HCG11相对表达水平显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I比值显著增加(P<0.01)；在不同浓度的顺铂处理下，与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1+ HCG11 组抑制率显著降低(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+ HCG11 shRNA 组肿瘤体积和肿瘤重量显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I水平显著下调(P<0.05)。结论：PCP能通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控耐药和自噬，并影响肝癌细胞的增殖。

关键词：茯苓多糖 LncRNA HCG11 miR-539-3p 化疗耐药性自噬

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基层全科医生医防融合能力评价指标体系构建

健康发展与政策研究 2024年第2期27卷 148-156页

作者：兰晓霞杨朝晖岳帅王苗刘冬莹天津医学高等专科学校

目的构建基层全科医生医防融合能力评价指标体系，探索提高基层全科医生医防融合服务能力的方法。方法用改良的德尔菲法构建基层全科医生医防融合能力评价指标体系，用界值法筛选指标，评价专家积极性、专家咨询权威程度和专家意见协... 详细信息

目的构建基层全科医生医防融合能力评价指标体系，探索提高基层全科医生医防融合服务能力的方法。方法用改良的德尔菲法构建基层全科医生医防融合能力评价指标体系，用界值法筛选指标，评价专家积极性、专家咨询权威程度和专家意见协调程度，用层次分析法计算指标权重系数。结果共发放专家咨询问卷33份，第1轮和第2轮有效问卷回收率分别为100.0%（33份）和97.0%（32份）。总体指标专家权威系数为0.80。2轮专家咨询后，三级指标和总体指标重要性的肯德尔协调系数分别为0.677、0.683,χ2值分别为88.774、91.663（P均<0.001）。基层全科医生医防融合能力评价指标体系包含3个一级指标、10个二级指标和36个三级指标。一级指标“B能力、技能、技术方面医防融合能力”权重最高，为0.500 0。三级指标组合权重排序前5位从高到低依次为：C11主动服务基层居民的意识（0.081 7）、B12掌握院前急救技术（0.075 7）、A11掌握合理用药及预防知识（0.067 7）、A22掌握传染病预防控制理论（0.055 6）和C12主动提供卫生服务的意识（0.052 0）。结论从知识结构、能力、技能与技术、素质等3个维度系统构建了基层全科医生医防融合能力评价指标体系，可为基层全科医生医防融合能力评价以及系统设计与开发继续教育培训项目提供参考。

关键词：全科医生医防融合能力评价指标体系专家德尔菲法层次分析法

COL6A3促进胃癌细胞增殖进而导致预后不良

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南开大学学报（自然科学版） 2024年第1期57卷 61-66页

作者：李德尚孙慧杰邢台市人民医院检验科河北邢台054001 邢台医学高等专科学校药学系河北邢台054000

COL6A3是COL6家族的一员,在多个生物过程中发挥关键作用,已被报道与多种恶性肿瘤的进展相关.然而,它在胃癌中的作用仍不清楚.在这项研究中,通过分析TCGA数据库,发现COL6A3 mRNA在胃癌组织中上调,并与胃癌患者的预后呈现负相关.通过分析... 详细信息

COL6A3是COL6家族的一员,在多个生物过程中发挥关键作用,已被报道与多种恶性肿瘤的进展相关.然而,它在胃癌中的作用仍不清楚.在这项研究中,通过分析TCGA数据库,发现COL6A3 mRNA在胃癌组织中上调,并与胃癌患者的预后呈现负相关.通过分析我院收集的胃癌组织,发现COL6A3在人类胃癌组织中高表达.数据进一步证实了COL6A3的表达与胃癌患者的临床病理特征包括肿瘤大小(P=0.006)之间的关联性.在人类胃癌细胞系MGC-803和AGS中,通过CCK-8和细胞集落形成实验发现敲低COL6A3能抑制细胞增殖,动物实验结果表明,敲低COL6A3可以明显减小小鼠的肿瘤体积.综上所述,COL6A3可能成为治疗胃癌的新靶点和预后标志物.

关键词：胃癌 COL6A3 pTNM期预后不良因素

EGCG对小鼠糖尿病肾病的影响及对NLRP3通路的调控作用

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中国老年学杂志 2024年第17期 4306-4311页

作者：张献彩刘子宸王艳盛李永刚邢台医学高等专科学校解剖与组胚教研室

目的探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠糖尿病肾病(DN)的缓解作用及其对NOD样受体热蛋白结构域(NLRP)3通路的影响。方法雄性大鼠随机分为对照(Control)组、糖尿病肾病(DN)组、二甲双胍(Metformin)组、EGCG 50、100、200 mg/k... 详细信息

目的探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠糖尿病肾病(DN)的缓解作用及其对NOD样受体热蛋白结构域(NLRP)3通路的影响。方法雄性大鼠随机分为对照(Control)组、糖尿病肾病(DN)组、二甲双胍(Metformin)组、EGCG 50、100、200 mg/kg组，链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导小鼠糖尿病肾病模型，在16 w内称量小鼠体质量变化，血糖仪检测空腹血糖水平，行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),取尿液及血样，试剂盒检测24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血胰岛素、8-羟基脱氧尿苷(OHdG)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18水平，取肾脏组织，试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)含量，苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织病理变化，末端脱氧核苷酸转移酶接到dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色检测肾脏组织细胞凋亡，Western印迹检测NLRP3、胱天蛋白酶(Caspase)-1、cleaved Caspase-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。另设DN+EGCG、DN+MCC950、DN+MCC950+EGCG组，通过抑制NLRP3通路评估EGCG在NLRP3通路中的作用。结果与Control组相比，DN组空腹血糖水平明显升高，空腹胰岛素水平明显下降，血糖清除能力明显下降，24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮水平明显升高，肾脏出现病理样改变，同时细胞凋亡增加，此外尿液8-OHdG水平明显升高，肾脏SOD含量明显减少，MCP-1、IL-6、IL-1β、IL-18水平明显升高，NLRP3和Caspase-1蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),经过二甲双胍或EGCG干预治疗后，上述指标均得到扭转。通过NLRP3抑制剂MCC950抑制NLRP3通路的激活，可抑制24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮的产生，与EGCG联合使用抑制效果更为明显。结论 EGCG对小鼠糖尿病肾病的缓解作用部分与其对NLRP3通路的抑制作用有关。

关键词：糖尿病肾病表没食子儿茶素没食子酸酯 NOD样受体热蛋白结构域(NLRP)3 胱天蛋白酶1