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miR-135a-5p靶向抑制Kif3B调控小鼠腭胚突间充质细胞的自噬

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 3003-3011页

作者：冯文宣廉舒博王哲陈靖何苇遵义医科大学口腔医学院贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属口腔医院贵州省遵义市563000

背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间... 详细信息

背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。目的:探讨miR-135a-5p对小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬的调控作用。方法:体外提取并培养C57BL/6J小鼠胚胎腭突间充质细胞。细胞转染分别设置为:①对照组、miR-135a-5p阴性对照组、miR-135a-5p模拟物组。②NC+miR-NC组、KIF3B过表达组、miR-135a-5p+KIF3B组。qRT-PCR验证miR-135a-5p、KIF3B的转染效率;透射电镜观察各组细胞中自噬小体/自噬溶酶体的数目;免疫荧光技术测定自噬标记物LC3B的荧光表达程度;Western blot检测KIF3B、LC3和P62的蛋白表达。③miR-135a-5p阴性对照组、SAG处理组、SAG+miR-135a-5p组。qRT-PCR检测Shh信号下游关键转录因子Gli3的mRNA表达水平;Western blot检测自噬相关蛋白LC3和P62的蛋白表达。结果与结论:①过表达miR-135a-5p后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01);LC3B的荧光密度显著升高(P<0.01),KIF3B、P62的蛋白表达降低(P<0.01),LC3的蛋白表达升高;②过表达KIF3B后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数目明显减少(P<0.01),LC3B的荧光密度降低(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);miR-135a-5p靶向抑制KIF3B的表达(P<0.01),并使自噬小体/自噬溶酶体数目、LC3B的荧光强度以及LC3的蛋白表达得到回升(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01);③SAG使Gli3的mRNA表达明显升高(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);加入miR-135a-5p后,Gli3的mRNA表达显著下降(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01),LC3的蛋白表达回升(P<0.01);④结果表明:miR-135a-5p靶向抑制KIF3B并且可能通过负向调控Shh信号通路促进小鼠胚胎间充质细胞自噬。

关键词：自噬胚胎腭突间充质细胞 miRNA KIF3B Shh信号通路腭裂

苦参总黄酮对醋酸铅诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激的改善作用及对Keap1/Nrf2信号通路的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 320-325页

作者：刘玥欣来永巍王艳春徐博路倩安英任旷范红艳吉林医药学院药学院药理学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院基础医学院机能实验室吉林吉林132013

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用... 详细信息

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、50和80µmol·L^(-1))LA和不同浓度(0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1))SF分别干预24 h后的TM3细胞存活率;将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组。除空白对照组外,其他各组均采用50µmol·L^(-1)LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型,其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L^(-1)SF。利用MTT法检测TM3细胞存活率;WST-1法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。结果:MTT法检测,与0µmol·L^(-1)LA组比较,10、20、50和80µmol·L^(-1)LA组TM3细胞存活率明显降低(P组比较,12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1)SF组TM3细胞存活率明显降低(P组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高(P组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高(P组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用,并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平,升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平。

关键词：苦参总黄酮醋酸铅睾丸间质细胞氧化应激 KELCH状ECH相关蛋白1 核因子E2相关因子2

高氟干预成釉细胞钙稳态差异表达基因的筛选及分析

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2481-2487页

作者：黄婷刘霞王烛陈霆陈彬白国辉吴家媛田源遵义医科大学附属口腔医院贵州省遵义市563000 遵义医科大学口腔医学院贵州省遵义市563000

背景:氟牙症是长期摄入大量氟所导致的牙釉质发育障碍,病因复杂,其发病机制有待深入研究。目的:通过转录组测序技术筛选高氟干预成釉细胞与钙稳态相关的差异表达基因,并进一步探索氟斑牙形成的分子机制。方法:分别用浓度为0,0.4,0.8,1.6... 详细信息

背景:氟牙症是长期摄入大量氟所导致的牙釉质发育障碍,病因复杂,其发病机制有待深入研究。目的:通过转录组测序技术筛选高氟干预成釉细胞与钙稳态相关的差异表达基因,并进一步探索氟斑牙形成的分子机制。方法:分别用浓度为0,0.4,0.8,1.6,3.2,6.4 mmol/L的NaF处理成釉细胞LS824,48,72 h,检测细胞形态、细胞活性与细胞内钙离子浓度。分别用浓度为0,1.6,3.2 mmol/L的NaF处理成釉细胞LS824 h,通过转录组测序筛选差异表达基因,并对差异表达基因进行验证。结果与结论:①处理24 h后,NaF浓度0,0.4,0.8 mmol/L组细胞生长状态良好,细胞的数量增多,细胞轮廓清晰;当NaF浓度≥1.6 mmol/L,随着NaF浓度的增加,细胞体积逐渐皱缩变小、细胞数量减少。处理48,72 h后,NaF浓度0,0.4 mmol/L组细胞数量增加,0.8,1.6,3.2 mmol/L组细胞数量逐渐减少,细胞形态变圆、变小,6.4 mmol/L组细胞皱缩变圆悬浮于培养基中,几乎无细胞贴壁。当NaF浓度相同时,处理24 h后LS8细胞的生长状态最佳。CCK-8检测结果显示,当NaF浓度相同时,随着处理时间的延长,细胞活性减弱;当处理时间相同时,随着NaF浓度的增加,细胞活性减弱。处理24 h后,随着NaF浓度的增加,细胞内钙离子浓度增加。②转录组测序分析发现参与调控细胞钙稳态的基因:Hsp90b1、Canx、Calr、Hspa5的表达显著上调(P<0.05),Cacna1a的表达显著下调(P<0.05),该结果得到了RT-qPCR检测的验证。③结果显示,NaF对LS8细胞增殖的抑制作用可能与细胞内Ca2+浓度异常增加有关,其机制可能由蛋白质加工合成通路Hsp90b1、Canx、Calr、Hspa5表达上调和钙信号通路Cacna1a表达下调所导致。

关键词：氟中毒氟斑牙成釉细胞氟化钠转录组测序内质网应激钙离子通道钙离子探针

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丘脑中央内侧核的形态及功能研究进展

中华神经医学杂志 2024年第5期23卷 494-499页

作者：任肖叶笑妮张明明张潜李云庆遵义医科大学基础医学院人体解剖学教研室遵义563006 空军军医大学人体解剖与组织学胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032

丘脑中央内侧核(CM)是位于丘脑中线的髓板内核团,是丘脑中线核群中的一个重要部分,同时也属于丘脑的非特异投射系统,与脑内其他区域有着广泛的神经纤维联系,发挥着中继传导和脑内整合中心的作用。近年来研究表明,CM参与机体多种行为的... 详细信息

丘脑中央内侧核(CM)是位于丘脑中线的髓板内核团,是丘脑中线核群中的一个重要部分,同时也属于丘脑的非特异投射系统,与脑内其他区域有着广泛的神经纤维联系,发挥着中继传导和脑内整合中心的作用。近年来研究表明,CM参与机体多种行为的产生和调节,包括全身麻醉与唤醒、疼痛、痒觉、情绪和认知等方面。本文现围绕CM的解剖结构及细胞类型、神经纤维联系、电生理特性及其相关功能进行综述,以期为进一步的相关研究提供参考依据。

关键词：丘脑中央内侧核神经纤维联系电生理特性疼痛痒觉认知

基于基因表达综合数据库芯片挖掘结合网络药理学与分子对接探讨芒果苷治疗口腔黏膜下纤维化的机制研究

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华西口腔医学杂志 2024年第4期42卷 444-451页

作者：宋子毅杨超张云龙张柱江任天娇张欣悦李雪齐齐哈尔医学院口腔医学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院医学技术学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院公共卫生学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院基础医学院齐齐哈尔161006

目的基于基因表达综合(GEO)数据库芯片挖掘、网络药理学及分子对接技术探讨芒果苷(MF)治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)的核心作用靶标及潜在作用机制。方法基于GEO芯片挖掘OSF的潜在治疗靶点,利用数据库预测MF潜在作用靶标和收集OSF疾病靶标... 详细信息

目的基于基因表达综合(GEO)数据库芯片挖掘、网络药理学及分子对接技术探讨芒果苷(MF)治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)的核心作用靶标及潜在作用机制。方法基于GEO芯片挖掘OSF的潜在治疗靶点,利用数据库预测MF潜在作用靶标和收集OSF疾病靶标,使用EVenn平台绘制维恩图,STRING数据库绘制蛋白质互作(PPI)网络,DAVID平台进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,Cytoscape 3.10.1软件绘制药物—靶标—通路—疾病网络图,AutoDocktools 1.5.6软件进行分子对接分析及可视化。结果从多种数据库挖掘得到MF潜在靶标356个,OSF疾病靶标360个,选取PPI网络中排名前15个关键靶蛋白,GO功能及KEGG通路富集分析结果显示,MF治疗OSF主要涉及高级糖基化终末产物-受体(AGE-RAGE)、表皮生长因子受体(EGFR)等信号通路。分子对接显示,MF与丝氨酸蛋白激酶(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)等核心靶点有较佳结合活性。结论MF可能通过多靶点、多途径的方式对OSF发挥治疗作用。

关键词：口腔黏膜下纤维化芒果苷基因表达综合数据库网络药理学分子对接

CDCA8在肿瘤发生发展及耐药中的研究进展

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检验医学与临床 2024年第3期21卷 405-409页

作者：顾汇权张涵强王芳玉姚龙宇周小天(综述) 刘嫱(审校) 海南医学院药理教研室海南海口571199

细胞分裂周期相关基因(CDCA)8是CDCA家族中的一个成员,早期在胚胎干细胞中被发现,用于调控有丝分裂期间着丝粒的定位及纺锤体的稳定性。近年越来越多的研究发现CDCA8在肺癌、肝癌、黑色素瘤和胰腺癌等多种肿瘤组织中呈高表达,并与肿瘤... 详细信息

细胞分裂周期相关基因(CDCA)8是CDCA家族中的一个成员,早期在胚胎干细胞中被发现,用于调控有丝分裂期间着丝粒的定位及纺锤体的稳定性。近年越来越多的研究发现CDCA8在肺癌、肝癌、黑色素瘤和胰腺癌等多种肿瘤组织中呈高表达,并与肿瘤的分级、不良预后密切相关。干扰CDCA8的表达会显著抑制肿瘤的生长以及转移,诱导细胞周期的阻滞及细胞凋亡,同时提高肿瘤细胞对顺铂和他莫昔芬的灵敏度,而对正常细胞影响较小。故认为CDCA8是治疗恶性肿瘤的一个潜在干预靶点。本文从预后情况、作用机制以及耐药关系出发,对CDCA8在肿瘤中的功能和作用的机制通路进行讨论,旨在为临床上肿瘤生物标志物的筛选及靶向药物研发提供新思路。

关键词：细胞分裂周期相关基因8 肿瘤治疗靶点耐药

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耳内镜下中耳手术治疗中耳炎的临床效果

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2024年第5期 0106-0109页

作者：刘有煊遵义市第一人民医院·遵义医学院第三附属医院贵州遵义563000

探究运用耳道镜手术疗法治愈慢性化脓型中耳炎的临床成效。方法自2021年12月至2022年10月,选取我院接诊的50名慢性脓性中耳炎病患作为研讨对象,应用随机数字表格法划分成对比组(25名,显微术下鼓室成型术)与实验组(25名,耳内镜下鼓室成... 详细信息

探究运用耳道镜手术疗法治愈慢性化脓型中耳炎的临床成效。方法自2021年12月至2022年10月,选取我院接诊的50名慢性脓性中耳炎病患作为研讨对象,应用随机数字表格法划分成对比组(25名,显微术下鼓室成型术)与实验组(25名,耳内镜下鼓室成型术)。比较双方组别手术参数、疗效、并发状况及听力阈值的提升情形。结果实验组的出血量、施术时长、术后24小时VAS评定分别为(6.42±1.36)毫升、(71.67±3.35)分钟、(2.37±0.86)分,显著优于对比组(19.67±2.45)毫升、(101.36±4.73)分钟、(3.76±0.89)分,此差异在统计上显著(t=23.6425、25.6118、5.6156,P=0.0000)。治愈效能比较,实验组的 96.00% 明显胜过对比组的 60.00%,此间差别具有统计学上的重要性(=9.4406,P=0.0021)。实验组的并发症出现率仅为 4.00%,远低于对比组的 44.00%,这种差异在统计学上是显著的(=10.9649,P=0.0009)。疗程结束后,实验组的气导和骨导听力阈值分数均低于对照组,这种差别在统计上具有意义(t=5.6618、4.2058,P=0.0000、0.0001)。结论耳道镜手术在治愈慢性脓性中耳炎方面显著有效、手术耗时较短、流血较少、痛感较轻、病人恢复迅速、听力明显增强,且手术过程安全可靠,未见重大并发情况。

关键词：耳内镜中耳手术中耳炎临床治疗

黎药天然产物调控AMPK抗MAFLD作用的研究进展

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海南医学院学报 2024年第8期30卷 623-633页

作者：陈咪咪卢文蕾于晏苏周媛媛张小坡张勇张寿文江西中医药大学中药资源与民族药研究中心江西南昌330004 海南医学院药学院海南海口571199 海南医学院基础医学与生命科学学院药理教研室海南海口571199 海南医学院基础医学与生命科学学院代谢与功能组学研究中心海南海口571199

代谢相关性脂肪性肝病(MAFLD)是代谢综合征的肝脏表现,世界成人发病率高达25%,在我国已取代病毒性肝炎成为慢性肝病之首。单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)是体内重要的糖脂代谢调控关键酶,激活AMPK被认为能改善糖脂代谢紊乱、减轻氧化... 详细信息

代谢相关性脂肪性肝病(MAFLD)是代谢综合征的肝脏表现,世界成人发病率高达25%,在我国已取代病毒性肝炎成为慢性肝病之首。单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)是体内重要的糖脂代谢调控关键酶,激活AMPK被认为能改善糖脂代谢紊乱、减轻氧化应激、抗炎、调节自噬及保护线粒体等功能发挥治疗MAFLD作用。黎药是我国中药药用资源的重要宝库,黎药天然产物被广泛发现具有激活AMPK的作用,且表现出显著的改善MAFLD效果。本文将归纳总结黎药及黎药天然产物改善MAFLD的作用和激活AMPK的关联机制,以期为黎药及黎药天然产物药物的挖掘与开发提供思路和参考,助力黎药现代化产业发展。

关键词：黎药黎药天然产物 AMPK MAFLD

依帕司他对放射性肺炎小鼠线粒体氧化应激损伤的保护作用

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中国临床药理学与治疗学 2024年第7期29卷 809-818页

作者：李泽朋顾文强陈晓王银华李先伟皖南医学院药学院药理学教研室安徽芜湖241002 芜湖市第二人民医院肿瘤放疗科安徽芜湖241000

目的:探讨依帕司他(Epa)对放射性肺炎(RP)小鼠线粒体氧化应激损伤的影响及其机制。方法:C57BL/6小鼠随机对照(CON)组、放射(IR)组、IR联合10 mg/kg Epa处理组及IR联合20 mg/kg Epa处理组,每组各16只。采用6MV X线直线加速器全胸单次照射... 详细信息

目的:探讨依帕司他(Epa)对放射性肺炎(RP)小鼠线粒体氧化应激损伤的影响及其机制。方法:C57BL/6小鼠随机对照(CON)组、放射(IR)组、IR联合10 mg/kg Epa处理组及IR联合20 mg/kg Epa处理组,每组各16只。采用6MV X线直线加速器全胸单次照射15 Gy建立放射性肺炎模型。照射后连续灌胃给药6~8周。HE染色观察肺组织病理变化。透射电镜观察肺组织线粒体结构。ELISA检测血浆白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的水平。免疫组化检测肺组织醛糖还原酶(AR)的表达。比色法检测肺组织丙二醛(MDA)及4-羟基壬烯醛(4-HNE)含量。制备肺组织单细胞悬液,使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平。实时定量PCR检测AR、IL-6、TNF-α和TGF-β1 mRNA的表达。Western blot法检测AR、IL-6、TNF-α、TGF-β1、BAX、Bcl2、Cleaved Caspase-3、8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)及沉默信号调节因子3(SIRT3)的蛋白水平。结果:与CON组相比,IR组肺泡水肿,肺泡间隔增厚并伴大量炎症细胞浸润;炎症因子IL-6、TNF-α和TGF-β1的水平明显升高(P组相比,Epa连续给药6~8周后,小鼠肺组织炎症损伤明显减轻,炎症因子IL-6、TNF-α和TGF-β1的水平明显降低(P组相比,IR组AR的表达明显升高,ROS、MDA及4-HNE的水平明显增加(P组相比,Epa连续给药6~8周后,IR组AR的表达明显下调(P<0.05,P<0.01),ROS、MDA及4-HNE的水平明显降低,OGG1和SIRT3的表达明显增加,线粒体损伤明显减轻(P<0.05,P<0.01)。结论:Epa对放射性肺炎具有保护作用,其作用可能与其抑制AR的表达,减轻线粒体氧化应激损伤,抑制炎症反应和细胞凋亡有关。

关键词：依帕司他放射性肺炎醛糖还原酶线粒体氧化应激小鼠