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西葫芦PRSV-W病毒病抗病种质鉴定及抗性遗传分析

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核农学报 2021年第2期35卷 298-305页

作者：王凯玥张沙沙张国裕田佳星张帆李海真王建书耿丽华北京市农林科学院蔬菜研究中心/农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/农业农村部都市农业(北方)重点实验室北京100097 河北工程大学园林与生态工程学院河北邯郸056038

番木瓜环斑病毒西瓜株系(PRSV-W)是危害西葫芦生产的主要病害之一,为减少产量损失,加快西葫芦抗病品种的选育,本研究拟通过人工苗期子叶摩擦接种,结合酶联免疫吸附测定法(ELISA)及反转录PCR(RT-PCR)检测分析,建立西葫芦PRSV-W抗性鉴定技... 详细信息

番木瓜环斑病毒西瓜株系(PRSV-W)是危害西葫芦生产的主要病害之一,为减少产量损失,加快西葫芦抗病品种的选育,本研究拟通过人工苗期子叶摩擦接种,结合酶联免疫吸附测定法(ELISA)及反转录PCR(RT-PCR)检测分析,建立西葫芦PRSV-W抗性鉴定技术,并对148份西葫芦品种及高代自交系育种材料进行抗性评价,同时利用抗、感自交系构建六世代群体,探究西葫芦PRSV-W抗性遗传规律。结果表明,播种2周后最适宜对子叶进行病毒摩擦接种。接种病毒15~25 d后西葫芦抗、感特性表现充分,易于鉴别,从高抗到高感可分为0~4级。148份西葫芦种质材料中,22份种质材料表现为高度抗病,11份种质材料表现为抗病,总抗病种质材料占比22.3%;12份种质材料表现为感病,103份种质材料表现为高度感病,总感病种质材料占比77.7%。此外,在叶片组织的病毒检测中,RT-PCR技术比ELISA更为灵敏准确;在西葫芦高抗自交系BV21中,PRSV-W抗性受1对显性抗病基因控制。本研究结果为西葫芦PRSV-W抗病育种提供了种质材料及技术支持。

关键词：西葫芦番木瓜环斑病毒西瓜株系(PRSV-W) 抗病种质鉴定遗传分析

考虑沥青层表面细观构造的探地雷达空隙率检测研究

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材料导报 2021年第24期35卷 24081-24087页

作者：凌天清崔立龙张意田波李定珠交通运输部公路科学研究所道路结构与材料交通运输行业重点实验室北京100088 重庆交通大学土木工程学院重庆400074 重庆建工住宅建设有限公司重庆400015

沥青路面空隙率对道路路用性能及服务寿命具有决定性作用,为实现沥青层空隙率精确检测,考虑表面细观构造影响提出一种基于探地雷达的测量方法。首先,通过时域有限差分(FDTD)仿真软件,建立多空隙薄层-均匀空隙层数值模型,量化模拟了表面... 详细信息

沥青路面空隙率对道路路用性能及服务寿命具有决定性作用,为实现沥青层空隙率精确检测,考虑表面细观构造影响提出一种基于探地雷达的测量方法。首先,通过时域有限差分(FDTD)仿真软件,建立多空隙薄层-均匀空隙层数值模型,量化模拟了表面细观构造对空隙率检测精度的影响。其次,基于全波形反演理论提出一种检测算法,对反射波进行分解并计算均匀空隙层介电常数。最后,通过FDTD数值模型及实验室实测对该算法有效性进行验证。结果表明:均匀层空隙率检测值随薄层空隙率增加先变大后减小,沥青层表面细观构造对空隙率检测精度具有较大影响。反射波经全波形反演法分解重构后与原波形具有较高吻合度,可精确计算均匀层介电常数。相较于传统金属板反射法,全波形反演法FDTD模型空隙率检测误差降低了24.0%,实验室检测误差降低了6.6%,验证了该方法的可行性。

关键词：道路工程沥青路面空隙率探地雷达细观构造全波形反演

RNAi转基因大豆品系‘B5C9123-5’的RPA可视化检测技术

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中国农业大学学报 2022年第1期27卷 50-57页

作者：张晨雷展李凯李飞武商颖许文涛昆明理工大学农业与食品学院昆明650504 中国农业大学食品科学与营养工程学院/北京食品营养与人类健康高精尖创新中心北京100083 农业农村部农业转基因生物安全评价(食用)重点实验室北京100083 吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所长春130033

为开发RNAi转基因作物的田间可视化鉴定方法,以DNA嵌合染料SYBR Green I为材料,采用设置重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)特异性引物的手段,建立了一种快速、低成本、可视化的RPA用于转基因大豆‘B5C9123-5... 详细信息

为开发RNAi转基因作物的田间可视化鉴定方法,以DNA嵌合染料SYBR Green I为材料,采用设置重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)特异性引物的手段,建立了一种快速、低成本、可视化的RPA用于转基因大豆‘B5C9123-5’的检测。结果表明,在靶标不存在时,RPA体系中游离的SYBR Green I染料使溶液呈现较弱的黄色荧光。在靶标存在的情况下,RPA扩增产生的双链DNA与SYBR Green I结合导致溶液从黄色转变为绿色并使荧光迅速增强。通过对RPA扩增时间和温度进行优化,阳性结果可在20min内用肉眼鉴别,检测限为1.00ng/μL。通过设置不同RPA引物,该方法可用于现场快速检测多种RNAi转基因作物。

关键词： RNAi转基因作物重组酶聚合酶扩增可视化检测 SYBR Green I

AtMET1基因在84K杨中的遗传转化及诱导表达分析

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林业科学研究 2020年第3期33卷 63-69页

作者：吴晓娟鲁俊倩常英英钟姗辰苏晓华张冰玉林木遗传育种国家重点实验室国家林业和草原局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091

[目的]研究拟南芥甲基化转移酶基因AtMET 1在银腺杨84K(Populus alba×P. glandulosa ‘84K’)中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系、进而实现杨树品种改良等奠定基础。[方法]以白杨派优良品种84K杨的无菌苗叶片为受体材料,... 详细信息

[目的]研究拟南芥甲基化转移酶基因AtMET 1在银腺杨84K(Populus alba×P. glandulosa ‘84K’)中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系、进而实现杨树品种改良等奠定基础。[方法]以白杨派优良品种84K杨的无菌苗叶片为受体材料,采用农杆菌介导法将化学诱导启动子与AtMET1基因导入84K杨基因组中;经潮霉素筛选获得抗性植株,通过常规PCR检测、DNA测序等方法对抗性植株进行鉴定。通过化学诱导剂17-β-雌二醇对随机挑选的1个转基因株系离体叶片进行诱导处理,处理时间为0、3、6、12、24、48、96、144 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外源基因AtMET1表达量变化。[结果]本研究共获得了潮霉素抗性芽648个,经生根筛选获得18株抗性植株,经分子检测证实全部为转基因植株,分别标号为AM-1~18#。qRT-PCR结果显示:化学诱导剂17-β-雌二醇处理3 h时,目的基因AtMET1的表达量即达到最大值,随后在处理6 h时表达量下降,处理12 h时有所回升,处理24 h后表达量降低至不足12 h时的一半。[结论]化学诱导剂17-β-雌二醇能迅速有效地调控转基因杨树中AtMET1基因的表达,为进一步研究MET1基因在杨树基因组甲基化调控方面的作用机制奠定基础,也为今后杨树化学诱导表达研究及品种改良提供新思路、新方法。

关键词：甲基化基因 84K杨转基因植株 17-β-雌二醇化学诱导表达

转AtDME1基因‘84K’杨的获得及目的基因诱导表达分析

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北京林业大学学报 2020年第6期42卷 26-32页

作者：吴晓娟鲁俊倩常英英钟姗辰苏晓华张冰玉林木遗传育种国家重点实验室国家林业与草原局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091

【目的】DNA甲基化是一种重要的表观遗传标记,在植物生长发育、环境响应等过程中发挥重要作用。本研究将拟南芥去甲基化基因AtDME1导‘84K’杨基因组中,通过化学诱导表达实验,研究AtDME1基因在转基因杨树中的诱导表达特性,为建立杨树甲... 详细信息

【目的】DNA甲基化是一种重要的表观遗传标记,在植物生长发育、环境响应等过程中发挥重要作用。本研究将拟南芥去甲基化基因AtDME1导‘84K’杨基因组中,通过化学诱导表达实验,研究AtDME1基因在转基因杨树中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系,进而实现杨树品种改良等奠定良好基础。【方法】以白杨派优良品种84K杨无菌苗叶片为受体材料,采用农杆菌介导法将化学诱导启动子与AtDME1基因导入‘84K’杨;经过潮霉素筛选、常规PCR检测及DNA测序等方法对抗性植株进行鉴定。通过化学诱导剂17-β-雌二醇对随机挑选的1个转基因株系离体叶片进行诱导处理,处理时间为0、3、6、12、24、48、96、144 h,采用qRT-PCR检测处理叶片中外源基因AtDME1的表达量变化。【结果】本研究中,潮霉素分化筛选共获得了抗性芽224个,经生根筛选获得6株抗性植株,经分子检测证实这6株抗性植株均为转AtDME1基因植株,扩繁后分别标号为转基因AD-1~6。qRT-PCR检测结果显示,化学诱导剂17-β-雌二醇处理3 h时,目的基因AtDME1的表达量基本达到最大值,效果持续至12 h后逐渐减弱。【结论】化学诱导剂17-β-雌二醇能迅速有效地调控转基因杨树中AtDME1基因的表达,为进一步研究DME1基因在杨树基因组甲基化调控方面的作用机制奠定基础,也为杨树化学诱导表达特性的研究做好了铺垫。

关键词： 84K杨转基因植株去甲基化基因化学诱导表达

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温拌沥青混合料在草帽山隧道道面的应用

公路 2010年第7期55卷 91-94页

作者：秦永春黄颂昌徐剑李峰腾飞交通运输部公路科学研究院道路结构与材料交通行业重点实验室(北京) 北京市100088 中交一航局城市交通工程有限公司天津市300457

为解决隧道道面铺装沥青混合料时沥青烟气过大的问题,采用温拌混合料技术是一条有效途径。通过室内混合料设计及性能检验,基于表面活性剂的温拌沥青混合料在有效降低混合料温度的同时仍然保持了良好的性能,可满足现行规范要求并可达到... 详细信息

为解决隧道道面铺装沥青混合料时沥青烟气过大的问题,采用温拌混合料技术是一条有效途径。通过室内混合料设计及性能检验,基于表面活性剂的温拌沥青混合料在有效降低混合料温度的同时仍然保持了良好的性能,可满足现行规范要求并可达到相应热拌沥青混合料的性能要求。在隧道内摊铺温拌混合料时,排放出的沥青烟气大大减少;工后检测表明,温拌沥青混合料路面质量可满足规范要求。

关键词：隧道道路工程沥青烟气温拌沥青混合料减少烟气排放

沥青路面含砂雾封层预防性养护技术工程应用研究

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公路交通科技（应用技术版） 2017年第8期13卷 54-57页

作者：平树江郭勇郭盛薄占顺崔坤荣交通运输部公路科学研究院北京100088 道路结构与材料交通行业重点实验室(北京) 北京100088 山东省交通工程监理咨询公司山东济南250014

结合含砂雾封层预防性养护技术在国道干线一级公路沥青路面工程中的应用,分析了含砂雾封层的防渗水、防老化和性能持久性作用机理,系统总结了沥青路面含砂雾封层施工质量控制要点,对含砂雾封层实施前后及工后6个月沥青路面抗滑、抗渗性... 详细信息

结合含砂雾封层预防性养护技术在国道干线一级公路沥青路面工程中的应用,分析了含砂雾封层的防渗水、防老化和性能持久性作用机理,系统总结了沥青路面含砂雾封层施工质量控制要点,对含砂雾封层实施前后及工后6个月沥青路面抗滑、抗渗性能指标进行跟踪检测分析。结果表明,与普通雾封层比较,含砂雾封层除能增强路表沥青层黏结力,提高沥青路面抗渗性能,从而保护沥青路面、抑制沥青路面渗水及沥青老化引发的沥青层各类病害的发生与发展,提高沥青路面使用性能,延长路面使用寿命,还能在不影响沥青层其他路用性能的基础上,有效降低沥青层抗滑性能衰减幅度、保证交通行车安全;在适宜的沥青路面上,雾封层是沥青路面早期预防性养护最简易、可靠、有效、费用效益比最优的一种养护技术。

关键词：含砂雾封层沥青路面预防性养护抗滑构造深度沥青老化渗水系数

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现浇混凝土楼面开裂分析

建筑结构 2019年第24期49卷 113-118,124页

作者：邱斌赵宝生胡韶懿王纪伟董桂红云南省建筑结构与新材料企业重点实验室昆明650223 昆明市建筑工程结构安全和新技术重点实验室昆明650223 云南省建筑科学研究院昆明650223

通过对云南某厂房现浇混凝土楼面开裂原因进行理论计算并与实际检测结果进行比对分析,得出如下主要结论:采用的计算模型的分析结果与开裂检测结果吻合较好;通过混凝土拉应力的理论计算可以较准确地分析混凝土楼面开裂原因,必要时通过应... 详细信息

通过对云南某厂房现浇混凝土楼面开裂原因进行理论计算并与实际检测结果进行比对分析,得出如下主要结论:采用的计算模型的分析结果与开裂检测结果吻合较好;通过混凝土拉应力的理论计算可以较准确地分析混凝土楼面开裂原因,必要时通过应力值还可进行各影响开裂因素权重的分析。同时提出如下建议:针对混凝土约束程度建立定量分析方法,以更准确地获得CX值进而更准确地分析混凝土收缩应力;除采用构造措施进行防治外,宜针对沉缩的量化计算方法展开研究,以便更好地防治混凝土沉缩裂缝;实际开裂鉴定工程中宜采取相应的量化计算以有效分析开裂原因及各因素造成开裂的权重;规范在相关部分引入开裂计算的已有成果,以供从业人员参考。

关键词：王铁梦法楼面开裂开裂检测收缩应力沉缩裂缝

高光谱荧光示踪无损检测瓜类作物嫁接苗愈合状态

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农业工程学报 2023年第16期39卷 276-282页

作者：谭佐军蔡霞阿克拜尔江·卡德尔余帆雷红伟高子艺杨硕黄远华中农业大学理学院武汉430070 果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室/华中农业大学园艺林学学院武汉430070 华中农业大学深圳营养与健康研究所武汉430070 中国农业科学院深圳农业基因组研究所和岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心深圳518000 咸宁市农业科学院咸宁437199

为了减少瓜类嫁接苗的愈合管理时间,实现快速准确判别嫁接苗早期愈合状态,促进嫁接苗规模化生产及育苗产业发展。该研究制备了氮硫掺杂碳点,以该碳点为荧光示踪材料,以西瓜嫁接苗为研究对象,利用高光谱荧光成像方法,探究了西瓜嫁接苗早... 详细信息

为了减少瓜类嫁接苗的愈合管理时间,实现快速准确判别嫁接苗早期愈合状态,促进嫁接苗规模化生产及育苗产业发展。该研究制备了氮硫掺杂碳点,以该碳点为荧光示踪材料,以西瓜嫁接苗为研究对象,利用高光谱荧光成像方法,探究了西瓜嫁接苗早期愈合状态无损检测的高光谱荧光示踪成像方法。高光谱荧光示踪图像及光谱分析结果表明,利用氮硫掺杂碳点进行荧光示踪,通过高光谱成像仪对瓜类作物早期愈合状态高通量表型的鉴定,能快速、自动、无损地获取嫁接苗愈合的情况。同时,通过氮硫掺杂碳点处理后第12天,处理组的西瓜嫁接苗相较于对照组,根系增长量提升了78.7%,叶面积增长量提升了61.4%。因此,该研究方法可以提早判别嫁接苗的愈合连通,促使瓜类嫁接苗提早移栽,并且氮硫掺杂碳点处理可以促进嫁接苗叶面积和根系的生长,达到种苗壮苗的作用。

关键词：作物无损检测高光谱瓜类维管束重连愈合碳点