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秦川牛Snail1克隆、表达特性分析及其对牛脂肪细胞增殖的作用研究

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中国农业科学 2024年第13期57卷 2674-2686页

作者：朱炳霖于嘉莉陈嘉玥田媛万媛刘晨阳王晓宇王苗力成功西北农林科技大学动物科技学院国家肉牛改良中心

【目的】肉牛肌内脂肪沉积与牛肉的风味、多汁性和嫩度密切相关。脂肪沉积过程表现为脂肪细胞的增殖（数量增多）和分化（脂质生成），受到了多基因协同调控。前人研究发现，小鼠中Snail1可以参与肌肉发育和脂质稳态调控，但其在牛脂肪... 详细信息

【目的】肉牛肌内脂肪沉积与牛肉的风味、多汁性和嫩度密切相关。脂肪沉积过程表现为脂肪细胞的增殖（数量增多）和分化（脂质生成），受到了多基因协同调控。前人研究发现，小鼠中Snail1可以参与肌肉发育和脂质稳态调控，但其在牛脂肪生成过程中的作用仍未知，有待进一步研究。【方法】以秦川牛为研究对象，克隆得到Snail1 CDS区序列，构建Snail1时空表达谱，运用生物信息学软件对其功能结构及靶基因进行预测。进一步，通过RNAi干扰结合CCK8、EdU、细胞流式及实时荧光定量PCR等方法探究Snail1对牛脂肪细胞增殖的影响。【结果】秦川牛Snail1与NCBI公布序列相比存在2处碱基同义突变，其在秦川牛新生牛肺、肾周脂肪、小肠呈现较高丰度表达；而在成年牛中，Snail1在肾周脂肪组织中的表达量最高，背最长肌中的表达量次之，肺脏组织中的表达量最低。生物信息学分析发现，Snail1启动子区存在1个651 bp CpG岛及C/EBP、PPARα等与脂肪生成相关的转录因子结合位点。CKⅠ(Ser92/96)、CKⅡ（Ser25/119,Thr89）、CDK1(Ser13/104/112/119/143/183/214/221)、CDK5(Ser105/107）等多个细胞周期相关激酶可能参与了Snail1蛋白的磷酸化修饰。通过对牛已注释基因启动子区提取、靶基因预测及KEGG动态网络构建发现，成脂相关的MAPK、PI3K-Akt、mTOR等信号通路为Snail1参与脂肪生成相关的潜在节点信号通路。进一步，通过RNAi干扰试验对其功能研究表明，Snail1下调促进了牛前体脂肪细胞的增殖，增加了复制期阳性细胞的比例（P<0.01）且促进了G1/S细胞周期转换。RT-qPCR和Western-blot检测表明，干扰Snail1显著上调了促增殖调控基因CCNB1、CCND2、CDK2、CDK4(P<0.05)和蛋白的表达。【结论】Snail1在新生牛肾周脂肪及成年牛肾周脂肪和背最长肌中表达量相对较高。干扰Snail1促进了牛前体脂肪细胞的增殖、G1/S细胞周期转变和CCNB1、CCND2、CDK2、CDK4等增殖相关基因表达；CKⅠ、CKⅡ、CDK1/5等多个细胞周期相关激酶可能通过磷酸化修饰Snail1蛋白进而参与细胞增殖调控，而MAPK、PI3K-Akt、mTOR等为Snail1影响牛脂肪细胞增殖潜在的关键节点通路。研究结果为进一步探究Snail1参与牛脂肪生成作用机制奠定了基础。

关键词：牛 Snail1 脂肪沉积 KEGG动态网络 RNAi 细胞增殖

季节变化对仿刺参Toll样受体信号通路基因表达的影响

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水产科学 2024年第4期43卷 520-530页

作者：肖瑶高杉赵泽龙蒋经伟周遵春辽宁省海洋水产科学研究院农业农村部水产种质资源保护与发掘利用重点实验室辽宁省海洋水产动物种质改良与优良苗种繁育重点实验室辽宁大连116023

为探明季节变化对仿刺参先天性免疫系统中的重要免疫通路——Toll样受体(TLR)信号通路相关基因表达的影响,2018年1—12月,每月中旬从辽宁省海洋水产科学研究院引育种中心的仿刺参单养池塘采集仿刺参样品9只,通过实时荧光定量PCR技术测... 详细信息

为探明季节变化对仿刺参先天性免疫系统中的重要免疫通路——Toll样受体(TLR)信号通路相关基因表达的影响,2018年1—12月,每月中旬从辽宁省海洋水产科学研究院引育种中心的仿刺参单养池塘采集仿刺参样品9只,通过实时荧光定量PCR技术测定仿刺参TLR信号通路主要因子的转录表达水平,同时测定池塘的主要水环境参数,通过皮尔逊相关性分析方法分析仿刺参TLR信号通路主要因子的转录表达与环境因子季节性变化的相关性。试验结果显示,6月Toll、IRAK4、P105、TAK、IκKβ、Rel、TLR3、TBK及IRF8基因的表达水平较低,表明仿刺参体内TLR信号通路的应答能力在夏初较低。通过相关性分析发现,MyD88和TRAF6基因转录表达的季节性变化与溶解氧水平的季节性变化呈显著正相关、TAK基因和TBK基因转录表达的季节性变化与水环境的氧化还原电位呈显著正相关、IRF8基因转录表达与水温呈显著负相关、SARM基因转录表达与水温呈显著正相关,表明池塘环境因子的季节变化影响仿刺参TLR信号通路相关因子的表达。氧化还原电位影响MyD88依赖途径,且是关键环境因子,溶解氧是影响MyD88依赖途径的关键环境因子,而水温是影响MyD88非依赖途径的关键环境因子。

关键词：仿刺参 TLR信号通路 MyD88依赖途径 MyD88非依赖途径转录表达季节性变化

基于无人机多光谱影像的矮林芳樟叶片含水率与叶水势反演

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农业机械学报 2024年第2期55卷 220-230,267页

作者：杨宝城鲁向晖张海娜王倩陈志琪张杰南昌工程学院江西省樟树繁育与开发利用工程研究中心南昌330099 江西省鄱阳湖流域生态水利技术创新中心南昌330029

叶片含水率和叶水势反映植物组织中水分的状态,是衡量植物水分供应和水分利用效率的重要指标。为探究基于不同高度下无人机多光谱影像反演叶片含水率和叶水势模型的差异,本研究在3个飞行高度处理F30、F60、F100(30、60、100 m)下采集多... 详细信息

叶片含水率和叶水势反映植物组织中水分的状态,是衡量植物水分供应和水分利用效率的重要指标。为探究基于不同高度下无人机多光谱影像反演叶片含水率和叶水势模型的差异,本研究在3个飞行高度处理F30、F60、F100(30、60、100 m)下采集多光谱影像数据,通过使用6种光谱反射率+经验植被指数的组合与地面实测数据进行相关性分析,获得不同飞行高度下的光谱反射率+经验植被指数组合与叶片含水率和叶水势的反演模型及其决定系数,以决定系数为依据分别构建支持向量机(SVM)、随机森林(RF)和径向基神经网络(RBFNN)模型,分析不同飞行高度无人机多光谱影像反演芳樟叶片含水率和叶水势的精度。结果发现:3个飞行高度下,基于RF模型的反演精度均高于SVM模型和RBFNN模型。F30处理对叶片含水率与叶水势反演效果均优于F60和F100处理。F30处理对叶片含水率反演的敏感光谱反射率+植被指数组合为红光波段反射率(R)、红边1波段反射率(RE1)、红边2波段反射率(RE2)、近红外波段反射率(NIR)、增强型植被指数(EVI)、土壤调节植被指数(SAVI)。RF模型训练集的R2、RMSE、MRE分别为0.845、0.548%、0.712%;测试集的R2、RMSE、MRE分别为0.832、0.683%、0.897%。对叶水势反演的敏感光谱反射率+植被指数组合为R、RE2、NIR、EVI、SAVI、花青素反射指数(ARI)。RF模型训练集的R2、RMSE、MRE分别为0.814、0.073 MPa、3.550%;测试集的R2、RMSE、MRE分别为0.806、0.095 MPa、4.250%。研究结果表明飞行高度30 m与RF方法分别为反演叶片含水率和叶水势的最优光谱获取高度与最优模型构建方法。本研究可为基于无人机平台的矮林芳樟水分监测提供技术支持,并可为筛选无人机多光谱波段与经验植被指数、实现植物长势参数快速估测提供应用参考。

关键词：矮林芳樟叶片含水率叶水势无人机多光谱飞行高度

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新型生物脱氮技术及其相关酶系的研究进展

海洋科学 2024年第6期48卷 106-117页

作者：王馥容张雨冯诗语王宇航郑伊宁张家豪王连顺卢亚楠王丽谷晶丛玉婷杨国军王华大连海洋大学水产与生命学院辽宁大连116023 大连海洋大学设施渔业教育部重点实验室辽宁大连116023 辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心辽宁大连116023

水中氮素浓度过高会导致水体富营养化,而新型生物脱氮技术有多种耦合手段,可以针对不同的氨氮浓度进行使用,因此在水体氮素污染处理领域具有广阔的应用前景。本文系统介绍了新型生物脱氮技术的反应通路、研究进展及优缺点;并对不同反应... 详细信息

水中氮素浓度过高会导致水体富营养化,而新型生物脱氮技术有多种耦合手段,可以针对不同的氨氮浓度进行使用,因此在水体氮素污染处理领域具有广阔的应用前景。本文系统介绍了新型生物脱氮技术的反应通路、研究进展及优缺点;并对不同反应路径中生物脱氮酶的作用机制、酶活测定和研究现状等进行了系统的阐述,最后对新型生物脱氮通路上的生物脱氮酶进行总结归纳,对生物脱氮酶的未来提出展望。本综述旨在为提高新型生物脱氮技术在水体氮素处理中的效率及相关生物脱氮酶的研究提供理论依据。

关键词：厌氧氨氧化硝化反硝化酶学性质生物脱氮酶

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水产无脊椎动物性腺发育调控研究进展

水产研究 2024年第3期11卷 167-176页

作者：黄凯悦陈艺蒙霍忠明秦艳杰大连海洋大学水产与生命学院辽宁大连辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心辽宁大连

水产无脊椎动物种类繁多,是人类重要的食物来源,具有重要的生态和经济价值,研究水产无脊椎动物的性腺发育调控机制对探究其人工繁育技术、规模化养殖以及遗传育种具有重要意义。本文从类固醇激素、性别决定与分化基因的分子调控及环境方... 详细信息

水产无脊椎动物种类繁多,是人类重要的食物来源,具有重要的生态和经济价值,研究水产无脊椎动物的性腺发育调控机制对探究其人工繁育技术、规模化养殖以及遗传育种具有重要意义。本文从类固醇激素、性别决定与分化基因的分子调控及环境方面,综述了近年来水产无脊椎动物性腺发育调控相关的研究进展,旨在为水产无脊椎动物繁殖调控提供参考。Because of their abundance and diversity, aquatic invertebrates provide as significant food sources for humans as well as having significant ecological and commercial significance. Investigating the mechanisms governing gonadal development in aquatic invertebrates is crucial for understanding Investigating the mechanisms governing gonadal development in aquatic invertebrates is crucial for understanding artificial breeding methods, large-scale aquaculture and genetic breeding. In order to serve as a reference for future research of a similar nature, we reviewed the state of the art in this paper regarding the regulation of gonadal development in aquatic invertebrates as it relates to steroid hormones, the environment, and the molecular regulation of sex-determining and differentiating genes.

关键词：水产无脊椎动物性腺发育类固醇激素基因

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褐藻寡糖的酶法制备及其在水产养殖中的应用

饲料研究 2024年第2期47卷 139-145页

作者：黄哲胡睿同王连顺丛玉婷卢亚楠王丽王华杨国军大连海洋大学水产与生命学院辽宁大连116023 设施渔业教育部重点实验室(大连海洋大学) 辽宁大连116023 辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心辽宁大连116023

褐藻寡糖(AOS)是一类由2~10个单糖分子经相同或不同糖苷键连接而成的低分子量聚合物。褐藻胶裂解酶是酶法制备AOS的重要工具,酶法制备的AOS在纯度、性能、结构方面优于其他方法制备的AOS。文章综述了褐藻胶裂解酶的来源、结构及酶学性质... 详细信息

褐藻寡糖(AOS)是一类由2~10个单糖分子经相同或不同糖苷键连接而成的低分子量聚合物。褐藻胶裂解酶是酶法制备AOS的重要工具,酶法制备的AOS在纯度、性能、结构方面优于其他方法制备的AOS。文章综述了褐藻胶裂解酶的来源、结构及酶学性质,总结了酶法制备的AOS在饲料添加剂、微藻培育、免疫调节、抗氧化和抗菌等水产养殖方面的应用,对褐藻胶裂解酶的研究方向以及AOS在水产养殖中的应用前景进行了展望,为褐藻胶裂解酶、AOS在水产养殖中的应用提供参考。

关键词：褐藻寡糖褐藻胶裂解酶酶法制备水产养殖生物活性免疫调节

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重金属汞胁迫下菲律宾蛤仔GPx和GST基因表达分析

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安徽农业科学 2024年第10期52卷 113-119页

作者：郑志龙闫路路闫喜武秦艳杰大连海洋大学水产与生命学院辽宁大连116023 辽宁省贝类良种繁育工程技术中心辽宁大连116023

为研究重金属汞胁迫下菲律宾蛤仔谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)和谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GST)基因的表达情况,用汞对指示生物菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)进行单一慢性暴露试验,分别在0、12、24 h以及2、3、4、5、6、7和8 d时检测菲律宾蛤仔内脏团和鳃中GPx和GST基因的表达情况。结果表明,菲律宾蛤仔内脏团中GPx和GST基因的表达量都呈现波动变化趋势,分别在24和12 h时表达量最高(P0.05),3 d时GST基因表达量最低(P<0.05);GPx基因在鳃中的表达量在8 d时最高(P<0.05);鳃中GST基因的表达量在5 d时最高(P<0.05)。以上结果表明汞暴露在短期内能够诱导GPx和GST基因进行不同程度的表达,但其随着时间的延长呈明显的抑制作用。该研究结果为揭示重金属汞对菲律宾蛤仔的毒性机理提供了理论依据。

关键词：重金属汞菲律宾蛤仔谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽-S-转移酶

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规模化猪场生物安全体系构建

吉林畜牧兽医 2024年第10期 28-30页

作者：田忠华吉林省肉牛产业促进中心

生物安全体系是指为了有效控制疫病传入猪场，而建立的一系列预防措施和评估手段。生物安全体系建设的主要内容一般包括三个方面：既要有效防止外来病原的传入，又要有效控制本场内病原的扩散传播，同时还要防止本场内的病原外泄，传播...

生物安全体系是指为了有效控制疫病传入猪场，而建立的一系列预防措施和评估手段。生物安全体系建设的主要内容一般包括三个方面：既要有效防止外来病原的传入，又要有效控制本场内病原的扩散传播，同时还要防止本场内的病原外泄，传播到其他猪场。对于一个规模化的猪场应该建立套适合本场的完善的生物安全控制措施，在各项措施基础上建立生物安全体系，并有效运行和长期坚持。1饲养环境1.1场址选择与建场

关键词：

低盐条件下副溶血弧菌侵染对菲律宾蛤仔存活、消化腺组织及免疫基因表达的影响

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江西水产科技 2024年第3期 6-11页

作者：陈俊影王宇航李双李云志刘莉君李东东张贺霍忠明闫喜武大连海洋大学水产与生命学院辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心辽宁大连116023

为探究低盐条件下副溶血弧菌胁迫对蛤仔存活、消化腺组织及基因表达的影响,开展了不同盐度和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)双因素互作胁迫对菲律宾蛤仔的影响研究。结果表明,在盐度和副溶血弧菌浓度分别为16‰-10^(8)CFU/mL、16... 详细信息

为探究低盐条件下副溶血弧菌胁迫对蛤仔存活、消化腺组织及基因表达的影响,开展了不同盐度和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)双因素互作胁迫对菲律宾蛤仔的影响研究。结果表明,在盐度和副溶血弧菌浓度分别为16‰-10^(8)CFU/mL、16‰-10^(7)CFU/mL和16‰-10^(6)CFU/mL条件下处理蛤仔48 h的死亡率为100%。对蛤仔消化腺组织的切片观察发现,低盐条件下,相对于对照组(0 h),弧菌感染组中消化腺组织随时间的增加内腺管结构开始逐渐排列松散,大量的腺管出现上皮细胞脱落,管腔内可见脱落的上皮细胞,炎症细胞浸润面积逐渐增多。利用荧光定量PCR检测蛤仔消化腺中免疫基因时序表达发现基因在低盐和弧菌双重胁迫下Rho GTP、CD-MPR、Big Defensin、CfC1qDC、RpLysBp和PGRPs基因被显著诱导表达,表明低盐条件下这些免疫基因响应了副溶血弧菌的侵染。

关键词：菲律宾蛤仔副溶血弧菌盐度消化腺组织切片免疫基因