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岱衢族大黄鱼种质的AFLP分析

水生生物学报 2005年第4期29卷 413-416页

作者：刘必谦董闻琦王亚军朱世华吴望星宁波大学海洋生物工程浙江省重点实验室宁波315211 奉化市水产病害防治中心宁波315500

根据耳石年轮确定作为研究材料的浙江海区捕捞野生大黄鱼为岱衢族大黄鱼,并用AFLP技术进行种质分析。结果表明岱衢族大黄鱼可分为两类:岱衢族大黄鱼Ⅰ型和岱衢族大黄鱼Ⅱ型,这种划分与文献报道的岱衢族大黄鱼有“春综”和“秋综”两种... 详细信息

根据耳石年轮确定作为研究材料的浙江海区捕捞野生大黄鱼为岱衢族大黄鱼,并用AFLP技术进行种质分析。结果表明岱衢族大黄鱼可分为两类:岱衢族大黄鱼Ⅰ型和岱衢族大黄鱼Ⅱ型,这种划分与文献报道的岱衢族大黄鱼有“春综”和“秋综”两种群之分相吻合。岱衢族大黄鱼Ⅰ型生长速度比岱衢族大黄鱼Ⅱ型要快,海水养殖开发和利用岱衢族大黄鱼应选用岱衢族大黄鱼Ⅰ型作为亲本较好。获得的岱衢族大黄鱼种质AFLP指纹图谱,可以作为鉴定岱衢族大黄鱼的依据。

关键词：大黄鱼岱衢族种质种群鉴定 AFLP

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黑米皮抗氧化活性物质的提取与分离工艺研究

农业工程学报 2005年第6期21卷 135-139页

作者：张名位郭宝江池建伟魏振承徐志宏张雁张瑞芬广东省农业科学院生物技术研究所农业部功能食品重点开放实验室广州510640 华南师范大学生命科学学院广州510630

该研究以总抗氧化能力为活性跟踪指标,应用正交试验研究了黑米皮抗氧化活性物质的提取条件。结果表明,黑米皮抗氧化物提取的最佳浸提条件为:以黑米皮为材料,以60%乙醇为溶剂,料液比1∶4、浸提温度60℃、浸提时间4h。在此条件下,一次浸... 详细信息

该研究以总抗氧化能力为活性跟踪指标,应用正交试验研究了黑米皮抗氧化活性物质的提取条件。结果表明,黑米皮抗氧化物提取的最佳浸提条件为:以黑米皮为材料,以60%乙醇为溶剂,料液比1∶4、浸提温度60℃、浸提时间4h。在此条件下,一次浸提率达71.4%,二次浸提率达85%以上。在去除黑米皮抗氧化提取物中的杂质时,选用石油醚或正己烷进行脱脂处理,对其总抗氧化能力的影响最小。通过静态与动态吸附性能比较,从8种大孔吸附树脂中筛选出对黑米皮抗氧化活性物质吸附性能最好的树脂为NKA-II,其最佳解吸剂为70%乙醇溶液。经NKA-II吸附分离后,黑米皮抗氧化提取物的总抗氧化能力提高4.00倍,总花色苷含量提高4.01倍。

关键词：黑米皮抗氧化活性物质提取

三疣梭子蟹血细胞全长cDNA文库构建及EST初步分析

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海洋渔业 2010年第1期32卷 24-29页

作者：申望叶茂石戈王日昕浙江海洋学院海洋科学学院海洋生物资源及分子工程实验室舟山316004

三疣梭子蟹是我国沿海重要养殖品种之一,近年来养殖病害呈逐年上升趋势,制约了三疣梭子蟹养殖产业的健康可持续发展。为大规模克隆三疣梭子蟹免疫相关基因,研究其免疫基因的功能和免疫机制,奠定三疣梭子蟹病害防治理论基础,采用SMART技... 详细信息

三疣梭子蟹是我国沿海重要养殖品种之一,近年来养殖病害呈逐年上升趋势,制约了三疣梭子蟹养殖产业的健康可持续发展。为大规模克隆三疣梭子蟹免疫相关基因,研究其免疫基因的功能和免疫机制,奠定三疣梭子蟹病害防治理论基础,采用SMART技术构建了三疣梭子蟹血细胞全长cDNA文库。经测定,文库滴度为1.14×107pfu/mL,文库总容量为5.7×107pfu,重组率达到98%,插入片段平均长度为817.5 bp。文库随机测序获得的70个全长cDNA,从中发现18个已知基因和5个未知基因。已知基因主要为多肽/蛋白质合成相关基因,共9个;免疫相关基因4个,分别是抗菌肽hyastatin、C-reactive prote in-1、profilin和m asquerade-like prote in,且4个免疫相关基因共有48个克隆,占测序总克隆的68.6%,表明血细胞中免疫相关基因表达非常活跃。研究结果证实,构建血细胞全长cDNA文库是大规模克隆三疣梭子蟹免疫相关基因的可靠途径,并为深入研究免疫相关基因的功能和免疫机制奠定基础。

关键词：三疣梭子蟹血细胞全长cDNA文库免疫相关基因表达序列标签

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硼钼组合在盐藻生长与物质积累中的作用

硼钼组合在盐藻生长与物质积累中的作用

庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会

作者：郭金耀杨晓玲淮海工学院江苏省海洋生物技术重点实验室

为了探索培养盐藻的微量元素条件,实验研究了微量元素硼、钼的不同浓度组合对盐藻细胞生长与物质积累的影响。结果表明,培养液中适当硼钼浓度的组合对盐藻细胞的生长和物质积累有促进作用,而硼钼浓度过高或过低则都是相对不利的。在试验... 详细信息

为了探索培养盐藻的微量元素条件,实验研究了微量元素硼、钼的不同浓度组合对盐藻细胞生长与物质积累的影响。结果表明,培养液中适当硼钼浓度的组合对盐藻细胞的生长和物质积累有促进作用,而硼钼浓度过高或过低则都是相对不利的。在试验的9种硼钼浓度组合中,以培养液中4mg/L的硼和60μg/L的钼浓度组合对盐藻细胞的生长和物质积累促进作用最好,它可使培养液中的盐藻细胞密度、蛋白质积累量和β-胡萝卜素积累量都达到最高。培养液中6mg/L的硼和80μg/L的钼浓度组合可使单个盐藻细胞中β-胡萝卜素和蛋白质积累量都最高,但可能仅是在硼、钼过多的逆境条件下,盐藻细胞的适应性反应。

关键词：硼钼组合盐藻生长物质积累

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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虾类营养免疫学研究进展

海洋湖沼通报 2007年第4期 167-176页

作者：叶建生马甡王兴强阎斌伦江苏畜牧兽医职业技术学院泰州225300 中国海洋大学水产学院青岛266003 淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室连云港222005

对虾广泛发病和大量死亡是全球虾类养殖业所面临的共同问题。近年来由于疾病的困扰,使我国乃至世界范围的对虾养殖受到严重制约,造成极大的经济损失。所以通过营养免疫学的手段控制虾病成为全球研究热点。正因为如此,世界范围内对虾类... 详细信息

对虾广泛发病和大量死亡是全球虾类养殖业所面临的共同问题。近年来由于疾病的困扰,使我国乃至世界范围的对虾养殖受到严重制约,造成极大的经济损失。所以通过营养免疫学的手段控制虾病成为全球研究热点。正因为如此,世界范围内对虾类的营养免疫学研究空前高涨,也取得了显著的成绩。本文从免疫指标和抗病力两个方面综述了近年来国内外虾类营养免疫学的研究成果,提出了虾类营养免疫学今后的研究方向。

关键词：虾类营养免疫学免疫指标抗病力

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马尾松转录组密码子使用偏好性及其影响因素

林业科学 2020年第4期56卷 74-81页

作者：朱沛煌陈妤朱灵芝李荣季孔庶南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南方现代林业协同创新中心南京210037

【目的】异源表达是植物蛋白功能验证和分子育种的重要手段,而密码子是异源基因高效表达的重要因素,对马尾松转录组基因编码区密码子偏好性分析可以为马尾松分子育种提供一定的理论支持。【方法】利用CodonW、EMBOSS密码子分析软件对马... 详细信息

【目的】异源表达是植物蛋白功能验证和分子育种的重要手段,而密码子是异源基因高效表达的重要因素,对马尾松转录组基因编码区密码子偏好性分析可以为马尾松分子育种提供一定的理论支持。【方法】利用CodonW、EMBOSS密码子分析软件对马尾松转录组进行密码子参数分析和密码子偏好性分析,根据中性绘图、ENc-GC3s、偏倚性分析推测马尾松密码子偏好性的主要形成原因。通过比较高低表达基因样本同义密码子相对使用度(RSCU)筛选马尾松最优密码子,通过密码子使用频率比值分析马尾松与拟南芥、烟草、欧洲山杨、大肠杆菌、酿酒酵母的密码子偏好性差异。【结果】马尾松转录组编码序列(CDS)密码子平均GC含量为44.95%,密码子第3位GC含量为38.95%,尤为偏好A/T。高、低表达基因样本统计分析表明,马尾松转录组RSCU差异较小,筛选出TTA、CAA、TGT、GGT等27个密码子可作为马尾松的最优密码子。中性绘图、ENc-GC3s关联分析以及偏倚分析表明,马尾松密码子偏好性的形成可能主要受突变影响,其次受自然选择等多重因素共同影响。密码子使用频率分析表明马尾松密码子偏好性与烟草、拟南芥和欧洲山杨相比差异较小,与大肠杆菌差异最大,与酿酒酵母差异小于大肠杆菌。【结论】马尾松偏好第3位为A/T的密码子,筛选出27个最优密码子,其中25个密码子第3位为A/T。马尾松密码子使用偏好性形成主要受突变影响,其次受自然选择等多重因素共同影响。烟草可以作为马尾松基因异源表达的优选植物生物体,而微生物中酿酒酵母可能优于大肠杆菌。

关键词：马尾松转录组密码子使用偏好性

重组SEA增强H5亚型禽流感灭活疫苗对肉鸡的免疫效果研究

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中国预防兽医学报 2012年第5期34卷 393-396页

作者：苏文曾显营田国彬杨婧张盼涛王彦妮陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为评价重组葡萄球菌肠毒素A(rSEA)对H5亚型禽流感病毒(AIV)灭活疫苗免疫效果的影响,本研究以原核表达的rSEA为免疫增强剂,制备成含有rSEA高(167μg/0.5 mL)、低(16.7μg/0.5 mL)两种剂量的AIV油乳剂灭活苗,分别免疫7 d龄肉鸡,通过检测... 详细信息

为评价重组葡萄球菌肠毒素A(rSEA)对H5亚型禽流感病毒(AIV)灭活疫苗免疫效果的影响,本研究以原核表达的rSEA为免疫增强剂,制备成含有rSEA高(167μg/0.5 mL)、低(16.7μg/0.5 mL)两种剂量的AIV油乳剂灭活苗,分别免疫7 d龄肉鸡,通过检测免疫鸡AIV HI抗体滴度及外周血CD4+/CD8+值评价其免疫效果。HI抗体检测结果显示,免疫后2周高剂量组HI抗体平均滴度为5.6 log2,低剂量组为4.2 log2,而无rSEA疫苗对照组为2.9 log2(p<0.01);同时在免疫后前4周,rSEA免疫组的HI抗体平均滴度及峰值与对照组相比均差异显著(p<0.05)。T淋巴细胞亚群检测结果显示,肉鸡免疫高剂量rSEA的灭活苗后,其外周血CD4+百分含量及CD4+/CD8+值均显著高于对照组(p<0.05)。上述结果表明,rSEA作为AIV灭活苗免疫增强剂,能够快速诱导较高的HI抗体滴度,同时也可增强细胞免疫反应,有效缩短免疫空白期,使肉鸡短时间内产生较强的免疫应答反应。

关键词：禽流感灭活疫苗 rSEA 免疫增强剂肉鸡

MALDI-TOF质谱、电泳和透射电子显微镜技术研究魟鱼肝铁蛋白H和L亚基特性

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分析化学 2009年第5期37卷 631-636页

作者：黄河清胡晓慧方雪萍曹廷明孔波厦门大学生命科学学院生物化学与生物技术学系海洋与环境科学学院近海海洋科学国家重点实验室化学化工学院化学生物学系

小批量制备质谱纯魟鱼肝铁蛋白(liver ferritin of Dasyatis akajei,DALF),以透射电子显微镜术(TEM)测定DALF、蛋白壳和铁核的分子尺寸。SDS-PAGE技术指出,DALF由H和L两种不同类型的亚基组成。采用肽质量指纹图谱(PMF)技术进一步佐证H和... 详细信息

小批量制备质谱纯魟鱼肝铁蛋白(liver ferritin of Dasyatis akajei,DALF),以透射电子显微镜术(TEM)测定DALF、蛋白壳和铁核的分子尺寸。SDS-PAGE技术指出,DALF由H和L两种不同类型的亚基组成。采用肽质量指纹图谱(PMF)技术进一步佐证H和L亚基类型和同源性。氧化还原剂中性红、劳氏紫、甲基紫精和pH1.5酸度均无法削弱DALF的H-L和L-L亚基之间的相互作用强度、并解吸出L亚基离子,供MALDI-TOF质谱仪分析。通过增加激光强度和降低基质pH途径,可直接分析DALF的H和L亚基的分子量,指出DALF中H-L和L-L亚基之间的相互作用强度明显高于H-H亚基类型。

关键词：铁蛋白亚基类型电镜质谱电泳

伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段的克隆与序列测定

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中国兽医学报 2001年第6期21卷 568-570页

作者：娄高明敖敬群杨林杜伟贤王珣章广东省兽医生物技术重点实验室广东广州510640 中山大学生物防治国家重点实验室广东广州510275

根据已经发表的伪狂犬病病毒 (PRV) Rice株的 g E基因序列 ,设计并合成了 1对引物 ,通过 PCR方法扩增到了PRV闽 A株糖蛋白 g E基因除信号肽以外的全部编码区段 ,并克隆到 p MD18- T载体中 ,转化大肠杆菌 XL1- blue菌株。重组质粒 p MD18... 详细信息

根据已经发表的伪狂犬病病毒 (PRV) Rice株的 g E基因序列 ,设计并合成了 1对引物 ,通过 PCR方法扩增到了PRV闽 A株糖蛋白 g E基因除信号肽以外的全部编码区段 ,并克隆到 p MD18- T载体中 ,转化大肠杆菌 XL1- blue菌株。重组质粒 p MD18- T- FL经酶切和 PCR鉴定证实后 ,进行了序列测定。结果表明 ,重组质粒 p MD18- T- FL含有PRV闽 A株糖蛋白 g E基因除信号肽以外的全部编码区段 ,长 16 74bp。序列比较分析表明 ,此区段与 PRV Rice株相应区段的核苷酸序列同源性为 97.5 % ,氨基酸序列同源性为 94.8%

关键词：伪狂犬病病毒 gE基因去信号肽片段基因克隆序列测定 PCR