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不同感染方式对狂犬病病毒在人二倍体细胞中增殖的影响

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沈阳药科大学学报 2024年第2期41卷 177-181页

作者：甄祖刚周荔葆王野刘春雨张怡轩沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016 辽宁成大生物股份有限公司辽宁沈阳110179

目的考察带毒传代感染、直接吸附感染、混种传代感染三种方式感染人二倍体细胞对狂犬病病毒增殖的影响。方法不同方式感染后,经过细胞工厂生产,获取狂犬病病毒收获液,经过滤澄清、浓缩、纯化、灭活制备疫苗原液。根据《中华人民共和国... 详细信息

目的考察带毒传代感染、直接吸附感染、混种传代感染三种方式感染人二倍体细胞对狂犬病病毒增殖的影响。方法不同方式感染后,经过细胞工厂生产,获取狂犬病病毒收获液,经过滤澄清、浓缩、纯化、灭活制备疫苗原液。根据《中华人民共和国药典》(2020版)检测方法检测收获液病毒滴度及原液抗原含量。结果带毒传代组的收获液病毒滴度为(6.40±0.33)lgLD50·mL^(-1),原液抗原含量为(34.8±1.5)IU·mL^(-1);混种传代感染组的收获液病毒滴度为(6.35±0.18)lgLD50·mL^(-1),原液抗原含量为(34.3±2.1)IU·mL^(-1);直接吸附感染组收获液病毒滴度为(4.71±0.39)lgLD50·mL^(-1),原液抗原含量为(12.6±2.0)IU·mL^(-1)。结论试验证明狂犬病病毒PV株采用混种传代感染的方式感染人二倍体细胞MRC-5细胞,病毒增殖效果良好,毒种代次明确,工艺操作简单,更适合于狂犬疫苗的生产。

关键词：狂犬病病毒人二倍体细胞感染方式抗原含量

弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析

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华中农业大学学报 2024年第1期43卷 210-218页

作者：李响张小涵李美琪陈冉冯颖李林桑晓宇杨娜沈阳农业大学动物科学与医学学院/重要家畜疫病研究教育部重点实验室沈阳110866 辽宁成大生物股份有限公司沈阳110179

为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养... 详细信息

为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养3代获得重组杆状病毒株。结果显示,Sf9细胞在感染后的第3天出现典型的细胞病变;间接免疫荧光和Western blot试验结果表明MIC1重组蛋白质在感染的Sf9细胞中成功可溶性表达;纯化的MIC1重组蛋白质不仅具有结合唾液酸乳糖的能力,同时能够刺激Balb/c小鼠产生较高水平的特异性抗体(>1∶25600)。以上结果表明,通过杆状病毒表达系统可获得具有生物学活性的弓形虫MIC1重组蛋白质。

关键词：弓形虫 MIC1蛋白杆状病毒系统活性分析

9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物中游离多糖去除方法的筛选及优化

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中国生物制品学杂志 2024年第5期37卷 593-597页

作者：陈倩陈中伟马浩亮詹远枫闫瑾孙述学北京成大天和生物科技有限公司北京101111

目的筛选一种有效去除9V型肺炎球菌(Pn9V)多糖蛋白结合物中游离多糖的方法,并进行工艺优化及稳定性验证,以期用于多价肺炎结合疫苗的制备。方法制备Pn9V-CRM197结合物,分别采用分子筛(Sepharose 4FF)、离子交换层析(DEAE Sepharose FF)... 详细信息

目的筛选一种有效去除9V型肺炎球菌(Pn9V)多糖蛋白结合物中游离多糖的方法,并进行工艺优化及稳定性验证,以期用于多价肺炎结合疫苗的制备。方法制备Pn9V-CRM197结合物,分别采用分子筛(Sepharose 4FF)、离子交换层析(DEAE Sepharose FF)、疏水层析(GP-Butyl)及硫酸铵(ammonium sulfate,AS)盐析法去除结合物中的游离多糖,通过比较游离多糖百分比、多糖回收率及蛋白回收率筛选最适方法,并对确定的方法进行工艺优化。连续制备3批结合物,验证工艺的稳定性。结果疏水层析和离子交换层析均可将Pn9V-CRM197结合物的游离多糖降至5%以下,疏水层析多糖及蛋白回收率(34.7%和50.1%)高于离子交换层析(16.2%和25.7%),选择疏水层析去除结合物中的游离多糖。优化的工艺为1.1 mol/L AS上样,注射用水洗脱,层析载量为1.81 mg蛋白/mL填料。连续制备的3批结合物游离多糖去除率、多糖回收率及蛋白回收率良好,且批间一致性高;2~8℃放置6个月,结合物稳定性良好,(25±2)℃放置6个月,游离多糖百分比显著增加(F=5.83 e-32,P=0.003),且>25%,不适宜高温保存。结论建立了有效去除Pn9V蛋白结合物中游离多糖的疏水层析工艺,该工艺稳定性良好,也为其他型别肺炎球菌多糖蛋白结合物游离多糖的去除提供了参考。

关键词：肺炎球菌多糖蛋白结合物游离多糖疏水层析

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磺基水杨酸提取鱼粉中生物胺条件优化研究

中国饲料 2024年第9期 113-117页

作者：史莹吴振洲刘宇彤金俐延赵虹霏邵彩梅禾丰食品股份有限公司辽宁沈阳110000

本实验旨在对磺基水杨酸提取鱼粉中3种生物胺的条件进行优化。通过单因素实验和正交实验考察提取溶液种类、称量质量、提取溶液浓度、超声时间4种因素对生物胺提取效果的影响,并对优化后的条件,进行加标回收率实验及质控样品实验,验证... 详细信息

本实验旨在对磺基水杨酸提取鱼粉中3种生物胺的条件进行优化。通过单因素实验和正交实验考察提取溶液种类、称量质量、提取溶液浓度、超声时间4种因素对生物胺提取效果的影响,并对优化后的条件,进行加标回收率实验及质控样品实验,验证结果的准确性。结果表明:正交实验优选生物胺提取的最佳条件为:称量质量0.5~1.0 g、磺基水杨酸浓度1.0%、超声时间30 min。加标回收率101%~105%,组胺质控样品实测值458 mg/kg,指定值(452.8±64.9)mg/kg,结果可靠。通过磺基水杨酸提取鱼粉中的生物胺、茚三酮作为衍生试剂,氨基酸分析仪检测,达到很好的检测效果,提供了一种简单、快捷的检测方法。

关键词：鱼粉磺基水杨酸生物胺正交实验氨基酸分析仪

HPLC-ELSD同时测定腺梗豨莶草中6个二萜成分的含量

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中国兽医杂志 2024年第1期60卷 144-150页

作者：殷玥张璇呼小娜长春医学高等专科学校药品食品学院吉林长春130000 辽宁天安生物制药股份有限公司辽宁沈阳110000 东北制药集团股份有限公司辽宁沈阳110000

为了研究腺梗豨莶草中6个二萜成分(对映海松烯型二萜:奇任醇、Hythiemoside B和豨莶精醇;对映贝壳杉烷型二萜:对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸和对映-16α氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸)的含量,... 详细信息

为了研究腺梗豨莶草中6个二萜成分(对映海松烯型二萜:奇任醇、Hythiemoside B和豨莶精醇;对映贝壳杉烷型二萜:对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸和对映-16α氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸)的含量,本试验建立了高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定二萜类化合物含量。样品粉碎过筛加甲醇和乙酸乙酯回流提取,蒸发减压除去溶剂,甲醇溶解,0.45μm滤膜滤过,取续滤液进行测定。色谱条件:色谱柱为Waters Symmetry Shield^(TM)RP18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.3%甲酸水溶液-乙腈(v/v),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min。蒸发光散射检测器漂移管温度为103℃,雾化气流速为3.0 L/min。应用该方法测定腺梗豨莶草样品不同部位中6个二萜类化合物的含量,同时比较叶、枝、茎中对映海松烯型二萜、对映贝壳杉型二萜和总二萜含量的差异。结果显示,6个二萜成分在其线性范围内线性关系良好(r≥0.9992);日内和日间精密度相对标准偏差(RSD)均小于3.5%;回收率介于96.5%~101.5%,RSD均小于2.3%;腺梗豨莶草不同部位(叶、枝、茎)的二萜类化合物含量差异较大。结果表明,本试验所建立的HPLC-ELSD方法简便、准确、重复性好,为腺梗豨莶草药材全面的质量评价和临床应用中最佳药用部位的选择提供了参考。

关键词：高效液相色谱法(HPLC) 蒸发光散射检测器(ELSD) 腺梗豨莶草含量测定质量控制

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犬细小病毒悬浮培养工艺研究

现代畜牧兽医 2024年第3期 29-31页

作者：李凤艳陈生雷刘艳霞刘梦成姜斌舒秀伟辽宁益康生物股份有限公司辽宁辽阳111000

研究旨在证明犬细小病毒(CPV)悬浮培养的可能性,提高CPV P6株抗原的病毒含量,降低转瓶生产不同批次间疫苗质量差异,生产质量稳定的疫苗产品。试验利用大孔的纤维编织物BioNOCⅡ型微载体所提供的巨大表面积,实现Vero细胞高密度培养,建立... 详细信息

研究旨在证明犬细小病毒(CPV)悬浮培养的可能性,提高CPV P6株抗原的病毒含量,降低转瓶生产不同批次间疫苗质量差异,生产质量稳定的疫苗产品。试验利用大孔的纤维编织物BioNOCⅡ型微载体所提供的巨大表面积,实现Vero细胞高密度培养,建立了Tide-cell生物反应器大规模培养CPV P6株抗原制备工艺。结果显示:生物反应器Tide-cell载体罐内接入1.0×10^(10)个F81种子细胞,在优化的参数条件下培养,用RPMI 1640培养液经过96 h培养,细胞总数为1.0×10^(11)个;在葡萄糖消耗量约为5 g/(L·h)时,按照病毒感染复数(MOI)=0.02将生产种毒CPV P6株接入Tide-cell微载体细胞培养瓶内,补加含8%血清的RPMI 1640病毒维持液至50 L,调整pH值为7.2~7.3,培养48 h收获,病毒含量至少为10^(7.43)TCID^(50)/mL。

关键词：生物反应器犬细小病毒 CPV P6株微载体疫苗

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花青素类化合物影响淀粉理化性质研究进展

食品工业科技 2024年第1期45卷 343-351页

作者：李斌王琳岳健苏娟杨曙方杨一鋆牛文博边媛媛沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110866 云南山里红生物科技有限公司云南昆明650299 浙江蓝美技术股份有限公司浙江诸暨311800 锦州海关综合技术服务中心辽宁锦州121001

花青素类化合物包括原花青素、花青素、花色苷等。其中,原花青素是一种聚多酚类化合物,花青素和花色苷均属黄酮类化合物。当在酸性介质中加热时,原花青素可产生花青素,花青素可通过糖苷键与糖相结合可产生花色苷。在深色谷物、浆果及蔬... 详细信息

花青素类化合物包括原花青素、花青素、花色苷等。其中,原花青素是一种聚多酚类化合物,花青素和花色苷均属黄酮类化合物。当在酸性介质中加热时,原花青素可产生花青素,花青素可通过糖苷键与糖相结合可产生花色苷。在深色谷物、浆果及蔬菜中,原花青素、花青素、花色苷广泛分布,均具有多种功效。淀粉价格低廉、来源丰富,具有多种功能特性,淀粉基食品的感官品质及营养价值主要由淀粉糊化性质、热力学性质、流变学性质、老化性质及消化性质等变化所决定。对于淀粉与其他化合物共存能够改善淀粉原本性质已有很多研究,但关于花青素类化合物对淀粉性质影响的概述较少。因此,本文综述了花青素类化合物提高淀粉的糊化温度,降低淀粉的糊化焓值,进而影响淀粉的热力学性质,同时降低淀粉的老化焓以及老化率,降低淀粉的消化速率等对淀粉糊化特性、热力学特性、流变学特性、老化特性和消化性质影响的最新研究进展,为利用花青素类化合物等改善淀粉基食品的加工性能、感官和营养品质提供指导。

关键词：花青素类化合物原花青素花青素花色苷淀粉

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绩效激励机制对民营企业经营目标的影响研究

中文科技期刊数据库（全文版）经济管理 2024年第1期 139-142页

作者：王小丽大连医诺生物股份有限公司辽宁大连116600

随着经济全球化的发展脚步加快,促进了企业之间的竞争,在企业经营发展过程中,离不开各个岗位员工的生产力和效率。企业要想留住岗位人才,需采取有效的激励措施,将激励作为企业人力资源管理的首要任务之一,重视对岗位专业人才的培养,通... 详细信息

随着经济全球化的发展脚步加快,促进了企业之间的竞争,在企业经营发展过程中,离不开各个岗位员工的生产力和效率。企业要想留住岗位人才,需采取有效的激励措施,将激励作为企业人力资源管理的首要任务之一,重视对岗位专业人才的培养,通过有效的激励机制来增强员工的凝聚力和向心力,在激励中提高员工的工作积极性,实现企业内部良性循环,同时,在绩效激励机制构建中,还需结合当下形式与企业现状实施针对性调整,保障绩效激励能推动企业经营目标发展,发挥员工潜能和价值,进而让企业实现人才培养的目标。

关键词：绩效激励民营企业经营目标影响

海洋来源低温果胶酶产生菌筛选、鉴定与酶学性质研究

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食品工业科技 2024年第10期45卷 133-140页

作者：赵子琪刘烨瑀于爽迟雪梅金书寒陈立功张庆芳王晓辉大连大学医学院辽宁大连116000 辽宁省海洋微生物工程技术研究中心辽宁大连116622 大连大学生命科学与技术学院辽宁大连116622 深圳市新产业生物医学工程股份有限公司广东深圳518000

目的:从海洋底泥样品中筛选能低温降解果胶的新颖菌株,发掘具有潜在产业化价值的果胶酶。方法:以果胶为唯一碳源,利用透明圈法和3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)从大连渤海湾海泥中筛出一株高产果胶酶菌株。对其进行形态学、生理生化特征分... 详细信息

目的:从海洋底泥样品中筛选能低温降解果胶的新颖菌株,发掘具有潜在产业化价值的果胶酶。方法:以果胶为唯一碳源,利用透明圈法和3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)从大连渤海湾海泥中筛出一株高产果胶酶菌株。对其进行形态学、生理生化特征分析以及16S rDNA序列测定,BLAST同源基因比对后构建系统发育树,并进一步研究其酶学特性。结果:筛选高产果胶酶菌株命名为LY-1,通过16S rDNA序列分析并结合生理生化鉴定确定该菌株为橄榄灰链霉菌(Streptomyces olivogriseus)。菌株LY-1在25℃、180 r/min的条件下培养至24 h时,果胶酶的酶活力为30.56 U/mL。最适酶pH为8.0,最适酶温度为20℃。此外,该酶在60℃孵育2 h仍保持70%以上的酶活性,在pH7.0~9.0范围内稳定性良好,酶活性稳定维持在90%以上。金属离子Cu^(2+)、Ba^(2+)、Mg^(2+)、Ca^(2+)、K+、Co^(2+)促进该酶活性,Mn^(2+)、Zn^(2+)、Hg^(2+)、Na^(+)则抑制该酶活性。结论:菌株LY-1所产的果胶酶具有应用于产业化商用果胶酶的潜力。

关键词：果胶酶筛选鉴定酶学性质

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