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色氨酸代谢调控肠道应激损伤作用的研究进展

中国实验动物学报 2024年第4期32卷 539-546页

作者：陈菁青郑建华董巧燕张文盛马连素邱业峰军事医学研究院实验动物中心北京100071 北京医药健康科技发展中心北京100035

肠道是动物体内最大的免疫器官,也是机体主要的消化、吸收、代谢场所,维持肠道稳态健康是维护动物机体健康的重要保障。研究表明应激易使肠屏障受损、通透性增加、肠道功能紊乱,引发肠道应激损伤。色氨酸是哺乳动物的一种必需氨基酸,具... 详细信息

肠道是动物体内最大的免疫器官,也是机体主要的消化、吸收、代谢场所,维持肠道稳态健康是维护动物机体健康的重要保障。研究表明应激易使肠屏障受损、通透性增加、肠道功能紊乱,引发肠道应激损伤。色氨酸是哺乳动物的一种必需氨基酸,具有改变肠道菌群组成与代谢,提高肠道黏膜屏障的功能,在维持肠道稳态方面发挥着重要作用。应激状态下大脑和肠道组织色氨酸及其代谢产物含量的异常,提示色氨酸可能在应激反应中具有重要作用。因此,深入探究应激因素的致病机制,揭示色氨酸及其代谢产物对应激动物肠道功能紊乱的调节作用,可为肠道应激损伤提供安全便捷有效的营养防治措施。本文主要就目前应激机制研究进展、肠道应激损伤与色氨酸代谢对肠应激损伤调控作用的研究现状及最新研究进展进行综述。

关键词：应激肠道微生物肠-脑轴色氨酸代谢肠应激损伤

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转基因Fah-/-肝损伤小鼠模型的构建

实验动物科学 2024年第1期41卷 18-24页

作者：代路路王弋龙淑娴严家荣刘月姝姚欣伶楼彩霞邝少松广东省医学实验动物中心佛山528248

目的建立转基因Fah-/-肝损伤小鼠模型,探讨其肝损伤的机制。方法选取SPF级C57BL/6J野生型小鼠作为WT组。取转基因Fah+/-肝损伤杂合子小鼠培育后,根据基因鉴定结果选取6~8周龄的Fah-/-纯合子小鼠24只,分为正常给予NTBC饮水组、停NTBC饮... 详细信息

目的建立转基因Fah-/-肝损伤小鼠模型,探讨其肝损伤的机制。方法选取SPF级C57BL/6J野生型小鼠作为WT组。取转基因Fah+/-肝损伤杂合子小鼠培育后,根据基因鉴定结果选取6~8周龄的Fah-/-纯合子小鼠24只,分为正常给予NTBC饮水组、停NTBC饮水1周组和停NTBC饮水2周组,称量体质量,采血分离血清,进行肝功能生化指标检测,处死动物,取肝组织进行病理学检查、免疫组化检测Fah蛋白酶的表达及采用Western blot方法检测Fah蛋白表达。结果经基因鉴定,成功繁育Fah-/-纯合子小鼠24只,后续用于肝损伤机制研究结果表明,停NTBC 1周组、停NTBC 2周组肝功能生化指标ALT、AST、TBIL与正常给予NTBC组比较显著升高,而ALB显著降低,差异有统计学意义。肝组织病理HE染色结果表明,WT组及正常给予NTBC组肝组织结构正常,而停NTBC组出现肝细胞肥大、坏死及炎性细胞浸润等不同程度的病变,停NTBC时间越长,肝损伤的程度越严重;肝组织免疫组化结果表明,WT组Fah蛋白酶表达为强阳性,正常给予NTBC组Fah蛋白酶表达阴性,停NTBC 1周组和停NTBC 2周组肝细胞Fah蛋白酶表达弱阳性。Fah蛋白表达结果与免疫组化结果基本符合。结论成功建立Fah-/-小鼠模型并对其肝损伤机制研究,为后续研究提供实验数据参考。

关键词： Fah-/-小鼠 NTBC 肝损伤延胡索酸乙酰乙酸水解酶(Fah)

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脓毒症动物模型研究现状及思考

中华预防医学杂志 2024年第2期58卷 171-176页

作者：叶青尚世强浙江大学医学院附属儿童医院实验检验中心杭州310052

感染性疾病是导致儿童死亡的首要原因,脓毒症则是一种全球性导致儿童死亡的重要感染性危重疾病,病死率高,严重威胁儿童的健康。早期诊断已成为治疗严重脓毒症的关键。脓毒症动物模型的建立有助于更好地诊断脓毒症,从而采取干预措施,改... 详细信息

感染性疾病是导致儿童死亡的首要原因,脓毒症则是一种全球性导致儿童死亡的重要感染性危重疾病,病死率高,严重威胁儿童的健康。早期诊断已成为治疗严重脓毒症的关键。脓毒症动物模型的建立有助于更好地诊断脓毒症,从而采取干预措施,改善脓毒症患者的预后。本文就现有脓毒症动物模型的种类及优缺点等进行综述,并提出脓毒症动物模型的优化建议,为实验模型的选择和优化提供参考依据,以促进其“逆向转化”到临床的能力。

关键词：脓毒症动物模型临床转化

CAST/EiJ小鼠外周血和脾中免疫细胞及亚群分析

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中国比较医学杂志 2024年第4期34卷 1-10页

作者：刘琪侯勇志李娜张京京陆佳涵丛喆朱林薛婧中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的探索CAST/EiJ小鼠对多种病原体易感的可能原因,分析CAST/EiJ小鼠外周血和脾内的免疫细胞表型,明确CAST/EiJ小鼠的免疫细胞构成。方法利用流式细胞术,通过细胞表面标记物CD3、CD4、CD8、CD11b、CD11c、CD19、CD27、CD49b和TCRβ检测C... 详细信息

目的探索CAST/EiJ小鼠对多种病原体易感的可能原因,分析CAST/EiJ小鼠外周血和脾内的免疫细胞表型,明确CAST/EiJ小鼠的免疫细胞构成。方法利用流式细胞术,通过细胞表面标记物CD3、CD4、CD8、CD11b、CD11c、CD19、CD27、CD49b和TCRβ检测CAST/EiJ小鼠和C57BL/6J小鼠外周血和脾内经典型树突状细胞(cDCs)、自然杀伤细胞(NK)、B淋巴细胞、T淋巴细胞及其亚群的细胞比例。结果CAST/EiJ小鼠与C57BL/6J小鼠的cDCs细胞比例无明显差异,但cDC1细胞亚群比例偏低;CAST/EiJ小鼠的NK细胞(主要是成熟NK细胞亚群)和T淋巴细胞(主要是CD8+T细胞)比例都显著低于C57BL/6J小鼠,而CAST/EiJ小鼠的B淋巴细胞比例高于C57BL/6J小鼠。结论CAST/EiJ小鼠中NK和T淋巴细胞比例显著低于C57BL/6J小鼠。

关键词： CAST/EiJ小鼠 C57BL/6J小鼠经典型树突状细胞自然杀伤细胞 B淋巴细胞 T淋巴细胞

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仙甲汤抑制IL-6/JAK2/STAT3信号通路改善大鼠前列腺增生

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中国中西医结合杂志 2024年第7期44卷 856-863页

作者：刘祺萧闵江晓翠蔚文垚陈思易姜兴宇曹继刚湖北省中医院泌尿外科武汉430061 湖北中医药大学实验动物中心武汉430065 湖北中医药大学基础医学院武汉430065

目的基于白细胞介素(IL)-6介导的炎症反应,探讨仙甲汤改善大鼠前列腺增生(BPH)的作用及机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、仙甲汤高、中、低剂量组、非那雄胺组,每组6只。除空白组外,每组皮下注射丙酸睾酮(5 mg/kg)... 详细信息

目的基于白细胞介素(IL)-6介导的炎症反应,探讨仙甲汤改善大鼠前列腺增生(BPH)的作用及机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、仙甲汤高、中、低剂量组、非那雄胺组,每组6只。除空白组外,每组皮下注射丙酸睾酮(5 mg/kg)连续30天制备BPH模型。造模完成后,仙甲汤高、中、低剂量组分别给予仙甲汤27.18、13.59、6.80 g/kg灌胃,非那雄胺组给予非那雄胺0.45mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水,连续30天。测量大鼠体重、前列腺湿重及体积并计算前列腺指数;HE染色法观察前列腺组织病理学变化;甲苯胺蓝染色法观察前列腺组织肥大细胞并计数;ELISA法检测前列腺组织IL-6、IL-10含量;Western Blot检测前列腺组织酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、磷酸化JAK2(p-JAK2)、转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)表达;Real-time PCR检测前列腺组织IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达。结果空白组大鼠前列腺组织中腺体饱满、规则;模型组大鼠前列腺腺体不规则,腺上皮细胞增生,基质内出现纤维组织增生,并有炎性细胞浸润;干预组出现不同程度好转。与空白组比较,模型组大鼠前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数、IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白及IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达升高,前列腺组织IL-10含量降低(P<0.01)。与模型组比较,仙甲汤高、中剂量组和非那雄胺组前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数,IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白及IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达降低,前列腺组织IL-10含量升高(P<0.05,P<0.01);仙甲汤低剂量组大鼠前列腺体积、湿重、STAT3 mRNA表达下降(P<0.05,P<0.01)。与非那雄胺组比较,仙甲汤高剂量组大鼠前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数、IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达降低,前列腺组织IL-10含量升高(P<0.05,P<0.01)。结论仙甲汤能显著改善大鼠BPH,其机制可能与抑制IL-6/JAK2/STAT3通路过度激活有关。

关键词：仙甲汤前列腺增生炎症反应白细胞介素6 酪氨酸蛋白激酶2 转录激活因子3 中药复方

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细胞外囊泡传递CRISPR/Cas9系统的研究进展

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中国生物工程杂志 2024年第6期44卷 1-10页

作者：刘琨刘炎青黄楠杨希郎巧利葛良鹏方仁东西南大学动物医学院动物健康与动物性食品安全国际联合实验室重庆400715 重庆市畜牧科学院重庆404100

CRISPR/Cas9系统能高效便捷的进行基因编辑,在多个领域深受青睐并广泛使用,其传递方法引起国内外大量研究学者的关注。细胞外囊泡(EVs)作为天然的纳米级载体,来源广泛,是一种极具吸引力的CRISPR/Cas9系统传递载体。与常规病毒载体或非... 详细信息

CRISPR/Cas9系统能高效便捷的进行基因编辑,在多个领域深受青睐并广泛使用,其传递方法引起国内外大量研究学者的关注。细胞外囊泡(EVs)作为天然的纳米级载体,来源广泛,是一种极具吸引力的CRISPR/Cas9系统传递载体。与常规病毒载体或非病毒载体相比,EVs在安全性、容量、穿透力、靶向性和改造潜力等方面都具有明显优势,有望成为传递CRISPR/Cas9系统的最佳载体。总结了CRISPR/Cas9系统常见的传递策略和加载方式,将EVs与其他载体进行比较,并对EVs传递CRISPR/Cas9系统的优势及国内外研究进展、应用等进行综述,以期为基因编辑递送领域的发展提供帮助。

关键词： CRISPR/Cas9 基因组编辑细胞外囊泡纳米载体

H10亚型禽流感病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

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中国兽医学报 2024年第5期44卷 893-899页

作者：张雅馨毛秋艳刘朔周婉婷周淑宁彭程李金平刘华雷蒋文明格日勒图内蒙古农业大学兽医学院浙江农林大学动物科技学院/动物医学院中国动物卫生与流行病学中心青岛农业大学动物医学院

从NCBI和GISAID数据库中下载H10亚型禽流感病毒的HA基因序列信息,与本实验室保存毒株的序列进行比对、分析、筛选,选择其共同保守区域设计荧光引物和探针,优化反应体系和条件,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示,该方法具... 详细信息

从NCBI和GISAID数据库中下载H10亚型禽流感病毒的HA基因序列信息,与本实验室保存毒株的序列进行比对、分析、筛选,选择其共同保守区域设计荧光引物和探针,优化反应体系和条件,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示,该方法具有高度特异性,与其他几种禽源性病毒均无交叉反应;敏感性可达到1.7×10^(2)拷贝/μL,比普通RT-PCR敏感10倍;批内和批间重复的变异系数(Cv)均小于1.4%,稳定性较好;分别使用鸡胚接种病毒分离法、本研究建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR和普通RT-PCR检测鸡感染试验的拭子和组织样品,结果显示病毒分离法与本研究建立的实时荧光定量PCR方法的总符合率为94.44%,而与普通RT-PCR方法的总符合率为90.74%,实时荧光定量PCR的阳性检出率比RT-PCR更高。结果表明,建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法具有较好的特异性、敏感性和稳定性,有助于H10亚型禽流感病毒的临床检测和监测,对其防控具有一定意义。

关键词： H10亚型禽流感病毒 TaqMan探针实时荧光定量PCR HA基因

三七皂苷R1调控Nrf2介导的铁死亡途径改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化

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中草药 2024年第15期 5135-5144页

作者：张梦萧闵蔡婷李晶晶全毅红樊光辉湖北中医药大学中医临床学院华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院湖北中医药大学实验动物中心深圳大学附属华南医院

目的探究三七皂苷R1对高脂诱发的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的治疗作用及机制。方法高脂喂养雄性ApoE-/-小鼠12周建立AS模型，将其随机分为模型组及三七皂苷R1低、高剂量（25、35 mg/kg）组... 详细信息

目的探究三七皂苷R1对高脂诱发的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的治疗作用及机制。方法高脂喂养雄性ApoE-/-小鼠12周建立AS模型，将其随机分为模型组及三七皂苷R1低、高剂量（25、35 mg/kg）组和铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（Fer-1,1 mg/kg）组。以相同周龄的雄性C57BL/6J小鼠作为对照组，给予普通饲料饲养。给药5周后采用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglycerides,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）水平；苏木素-伊红（HE）染色和油红O染色观察主动脉粥样斑块程度；加强普鲁士蓝染色法评估斑块铁沉积；生化试剂盒检测主动脉超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）活力及谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平；免疫组化法检测主动脉4-羟基壬烯醛（4-hydroxynonenal,4-HNE）表达；Western blotting检测主动脉核因子E2相关因子2（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、溶质载体家族7成员11（solute carrier family 7 member 11,SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）及4-HNE蛋白表达；qRT-PCR法检测主动脉Nrf2、Gpx4、前列腺素内过氧化物合酶2（prostaglandin-endoperoxide synthase 2,Ptgs2）mRNA表达。结果三七皂苷R1低、高剂量组及Fer-1组不同程度地影响ApoE-/-小鼠的血脂水平（P<0.05、0.01），明显减轻主动脉粥样斑块程度，抑制铁沉积（P<0.01），提高SOD、GSH抗氧化能力（P<0.05、0.01），减少脂质过氧化MDA水平和4-HNE蛋白表达（P<0.05、0.01），上调铁死亡相关核Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白及Nrf2、Gpx4 mRNA的表达（P<0.01），下调Ptgs2 mRNA的表达（P<0.01），以三七皂苷R1高剂量组效果最为显著。结论三七皂苷R1改善ApoE-/-小鼠脂代谢紊乱，抑制动脉粥样斑块形成，具有抗AS的作用，其机制可能与减少斑块铁沉积、激活Nrf2/SLC7A11/GPX4通路减少脂质过氧化，抑制铁死亡有关。

关键词：三七皂苷R1 动脉粥样硬化铁死亡核因子E2相关因子2/溶质载体家族7成员11/谷胱甘肽过氧化物酶4通路脂质过氧化

市售天然橡胶胶乳和人工合成聚氨酯材质避孕套的生物安全性研究

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四川大学学报（医学版） 2024年第4期55卷 958-963页

作者：殷漫邓曌曦苗娅莉张晓梅成都上锦南府医院/四川大学华西医院上锦医院麻醉手术中心成都611730 四川大学华西基础医学与法医学院实验动物中心成都610041 四川大学华西第二医院妇产科成都610041

目的调查研究市售天然橡胶胶乳和人工合成聚氨酯材质避孕套的生物安全性。方法天然橡胶胶乳避孕套品牌A1、品牌A2,聚氨酯避孕套品牌B1、品牌B2,购自成都大型连锁药店,每个品牌避孕套随机选3个包装。参照国家标准检测避孕套浸提液对小... 详细信息

目的调查研究市售天然橡胶胶乳和人工合成聚氨酯材质避孕套的生物安全性。方法天然橡胶胶乳避孕套品牌A1、品牌A2,聚氨酯避孕套品牌B1、品牌B2,购自成都大型连锁药店,每个品牌避孕套随机选3个包装。参照国家标准检测避孕套浸提液对小鼠成纤维细胞L-929的毒性反应,对避孕套对兔阴道和阴茎的刺激反应进行大体观察和组织病理学(HE染色)评价(每个品牌用3只兔),以及评价避孕套对豚鼠皮肤的致敏作用;制备避孕套浸提液,并连续灌注SD大鼠阴道30 d(每个品牌用5只大鼠),观察浸提液对大鼠生殖系统(子宫)的影响。结果品牌A1、品牌A2的浸提液体积分数为100%、50%时,具有明显的细胞毒性,其光密度(optical density, OD)值低于空白对照组和品牌B1、品牌B2浸提液组(P0.05)。品牌A1组兔阴道有3例、品牌A2组兔阴道有1例出现充血;品牌A1组有2例、品牌A2组有1例兔阴茎在实验过程出现短暂极轻微红斑;组织病理学检查发现,品牌A1有3例、品牌A2有2例兔阴道组织有炎细胞散在浸润,固有层内血管轻微充血,品牌A1有1例兔阴茎真皮内见毛细血管周围小灶性淋巴细胞,品牌A2组兔阴茎组织未见明显病理改变。3例品牌A1组和2例品牌A2组大鼠子宫有充血。聚氨酯品牌组兔阴道均未见明显充血和明显病理改变,兔阴茎未见红斑和明显病理改变,大鼠子宫均未见明显充血。4组浸提液对豚鼠皮肤均未产生明显致敏现象。结论不同材质、不同品牌避孕套的生物安全性存在明显差异,避孕套上市后的产品质量需要得到监管部门更多的关注。

关键词：避孕套天然橡胶胶乳人工合成聚氨酯生物安全性评价