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EGCG对奶牛子宫内膜炎致病菌抗菌作用及网络药理学的研究

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中国预防兽医学报 2024年第4期 411-417页

作者：张泽辉吴运谱崔子寅梁喜才王杏王春田刘明春辽宁中医药大学实验动物医学院沈阳农业大学动物科学与医学学院

为探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对细菌性奶牛子宫内膜炎的治疗作用机制，本研究采用微量肉汤稀释法测定EGCG对4种牛子宫内膜炎致病菌(金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌)标准株的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀... 详细信息

为探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对细菌性奶牛子宫内膜炎的治疗作用机制，本研究采用微量肉汤稀释法测定EGCG对4种牛子宫内膜炎致病菌(金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌)标准株的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)，将各菌液稀释100倍后，采用微量结晶紫法测定EGCG对各菌的最小生物被膜(BF)抑制浓度(MBIC)；基于网络药理学分析并筛选EGCG治疗奶牛子宫内膜炎的核心靶点，并进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路的富集分析，采用AutoDock Tool软件进行EGCG与核心靶点的分子对接验证。结果显示：EGCG对4种子宫内膜炎相关致病菌均有一定的抗菌活性，其中对革兰氏阳性菌的抗菌作用较强；EGCG在1 MIC～2 MIC的浓度范围内均能有效抑制4株标准株BF的形成。通过网络药理学筛选出肿瘤坏死因子(TNF)和基质金属蛋白酶9 (MMP9)等为EGCG治疗子宫内膜炎的核心靶点；GO分析结果显示含胶原的细胞外基质通路可能是EGCG治疗子宫内膜炎的主要通路之一；KEGG富集分析显示转化生长因子-β (TGF-β)、分泌抵抗、雌激素等信号通路在EGCG治疗奶牛子宫内膜炎的机制中发挥关键作用；分子对接验证试验结果显示EGCG可与上述核心靶点稳定结合。上述结果表明EGCG对4种奶牛子宫内膜炎致病菌表现出抗菌活性和抑制其BF形成的作用，初步揭示了EGCG治疗奶牛子宫内膜炎的可能作用靶点及其作用机制，本研究为EGCG在奶牛生产中的临床应用提供了科学依据。

关键词：奶牛子宫内膜炎致病菌 EGCG 网络药理学信号通路

MAOA/FOXA1在前列腺癌神经内分泌化进展中的动态变化特征

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中国实验动物学报 2024年第6期 683-690页

作者：韩昊李惠张彩勤赵菊梅魏晓丽师长宏延安大学基础医学院空军军医大学实验动物中心

目的探索前列腺癌神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation, NED)进展中单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)和叉头框蛋白A1(forkhead box A1,FOXA1)的动态变化特征，为临床神经内分泌型前列腺癌(neuroendocrine prostate cancer, NEPC)的治疗提供新的策略。方法通过恩杂鲁胺(enzalutamide, ENZ)长期持续诱导的方式建立NED的细胞模型和小鼠移植模型；采用Western Blot和Real-time PCR方法检测MAOA、FOXA1在NED中的动态表达；选用GEO数据库分析在多种NED模型中MAOA与FOXA1的动态变化趋势；构建前列腺癌细胞系小鼠移植模型，通过免疫组化分析体内模型中MAOA、FOXA1在NED中的动态表达；通过慢病毒转染干预MAOA,检测MAOA对FOXA1的调控作用。结果 MAOA与FOXA1在NED过程中均呈现先升高后降低的动态变化特征；敲低前列腺癌细胞中MAOA可以导致FOXA1的表达降低，这可能是MAOA通过FOXA1在NED的不同阶段发挥不同作用。结论 MAOA和FOXA1在NED过程中呈先升高后降低的趋势，MAOA的表达能影响FOXA1的水平，MAOA/FOXA1可能在NED过程中发挥动态调控的作用。

关键词：神经内分泌分化恩杂鲁胺 MAOA FOXA1

基于Cx43研究产前应激对子代大鼠睾丸发育的影响及左归丸干预作用

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 197-207页

作者：萧闵曹继刚江晓翠王朝阳龚健陈思易周艳艳赵敏湖北中医药大学实验动物中心湖北武汉430065 湖北中医药大学基础医学院湖北武汉430065

基于缝隙连接蛋白43(connexin 43, Cx43)研究产前应激大鼠影响子代睾丸发育的机制及左归丸的防治作用。制备SD孕鼠40只,随机分为空白对照组、模型组、左归丸高剂量组(18.9 g·kg^(-1))、左归丸低剂量组(9.45 g·kg^(-1))、维生素E组(1.4... 详细信息

基于缝隙连接蛋白43(connexin 43, Cx43)研究产前应激大鼠影响子代睾丸发育的机制及左归丸的防治作用。制备SD孕鼠40只,随机分为空白对照组、模型组、左归丸高剂量组(18.9 g·kg^(-1))、左归丸低剂量组(9.45 g·kg^(-1))、维生素E组(1.44 mg·kg^(-1))。除空白对照组以外,其余各组通过慢性不可预测轻度应激法复制产前应激(prenatal stress, PS)孕鼠模型。采用糖水偏好实验、旷场实验、酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测糖皮质激素(glucocorticoids, GC)含量评估PS孕鼠模型;ELISA法检测血清甲状腺素4(thyroxine 4, T4)、睾酮(testosterone, T)、促卵泡生长激素(follicle-stimulating hormone, FSH)评估肾虚状态及性激素水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色评估睾丸生殖细胞状况;全自动精子分析仪检测精子质量;免疫荧光双染检测子代大鼠睾丸Cx43蛋白、促卵泡激素受体(follicle-stimulating hormone receptor, FSHR)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法(real-time fluorescent quantitative PCR, RT-PCR)检测Cx43、促卵泡生长激素受体(FSHR)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)基因mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot, WB)法检测子代大鼠睾丸Cx43、PI3K、FSHR、Akt蛋白表达。PS诱发子代大鼠睾丸发育障碍,HE染色结果显示,出生当天子代雄鼠睾丸曲精小管数量减少,血清FSH升高,睾丸组织Cx43水平降低,60日龄子代雄鼠睾丸生精功能降低,精子质量下降,血清FSH升高,T降低,睾丸组织Cx43、FSHR、PI3K、Akt蛋白及mRNA水平均降低;而给予左归丸防治后对子代大鼠上述睾丸发育异常及功能障碍均有改善。综上,左归丸可能通过激活PI3K/Akt通路调节睾丸Cx43表达改善PS对子代大鼠睾丸发育及生精功能的影响。

关键词：产前应激连接蛋白43 子代左归丸睾丸发育

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慢性束缚肠道应激损伤小鼠模型的构建与评价

中国实验动物学报 2024年第2期32卷 190-201页

作者：郑建华陈菁青董巧燕法云智邱业峰军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的结合社会心理应激导致炎症性肠病、肠易激综合征等一系列疾病的特点,建立实验性慢性束缚小鼠肠道应激损伤模型,为探讨慢性束缚应激诱导胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法18只雄性SPF级BALB/c小鼠,适应7 d后,根据体重按随... 详细信息

目的结合社会心理应激导致炎症性肠病、肠易激综合征等一系列疾病的特点,建立实验性慢性束缚小鼠肠道应激损伤模型,为探讨慢性束缚应激诱导胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法18只雄性SPF级BALB/c小鼠,适应7 d后,根据体重按随机数字表法分为2组,对照组及慢性束缚应激组。对小鼠进行束缚应激,每天3 h,连续束缚14 d,建立肠道损伤模型。通过观察体重、肠道组织病理形态变化、检测紧密连接蛋白表达、肠上皮细胞凋亡以及炎症细胞因子mRNA表达水平等指标对模型进行评价。结果慢性束缚应激14 d,小鼠表现为体重减轻,十二指肠绒毛高度变短、隐窝结构异常、绒毛/隐窝比下降;结肠黏膜炎性细胞浸润、隐窝结构不规则。蛋白免疫印迹、免疫组化和免疫荧光染色结果显示,慢性束缚应激后小鼠十二指肠和结肠紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1表达显著下降(P<0.05);肠上皮细胞凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3的表达显著增加(P<0.05)。此外,肠道炎症因子和趋化因子mRNA表达结果显示,慢性束缚应激14 d显著提高了小鼠十二指肠IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α、IL-10基因的表达(P<0.05);慢性束缚应激14 d显著提高了小鼠结肠IL-1β、IL-6、MCP-1的表达(P<0.001)。结论利用小鼠行为限制装置对小鼠连续束缚14 d,导致应激小鼠肠道组织结构异常、肠屏障功能障碍、肠上皮细胞凋亡,引发肠道炎症反应,表明慢性束缚应激肠道损伤小鼠模型构建成功。

关键词：慢性束缚应激肠道应激损伤肠道屏障模型评价细胞凋亡炎症反应

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两种呼吸道感染途径建立豚鼠结核模型的比较

中国实验动物学报 2024年第6期 733-742页

作者：李新雨李海凤王煜屈沛杰王俊飞占玲俊中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学研究中心国家动物模型技术创新中心

目的建立不同剂量的滴鼻和气管内定量气溶胶感染途径的豚鼠结核模型，并进行对比分析，为标准化豚鼠呼吸道感染结核模型建立提供基础。方法雌性哈氏豚鼠24只，随机分为6组，每组4只，气管内定量气溶胶和滴鼻途径感染豚鼠均用两个剂量... 详细信息

目的建立不同剂量的滴鼻和气管内定量气溶胶感染途径的豚鼠结核模型，并进行对比分析，为标准化豚鼠呼吸道感染结核模型建立提供基础。方法雌性哈氏豚鼠24只，随机分为6组，每组4只，气管内定量气溶胶和滴鼻途径感染豚鼠均用两个剂量，均分为3个组（A、B、C组，D、E、F组）。气溶胶感染途径分为3组：A组（气溶胶对照组，未感染对照）、B组（气溶胶低剂量感染组，5×10～2 CFU）和C组（气溶胶高剂量感染组，5×10～3 CFU）;滴鼻感染途径也分为3组：D组（滴鼻对照组，未感染对照）、E组（滴鼻低剂量感染组，1×10～4 CFU）和F组（滴鼻高剂量感染组，5×10～4 CFU）。结核菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）感染豚鼠后观察其一般表现，第14天解剖，取肺、脾、肝组织，记录大体病变，用苏木素-伊红（HE）染色分析组织中结核肉芽肿病变，采用抗酸染色分析原位菌的分布和数量，菌分离培养分析脏器荷菌量。结果 4个感染组（B、C、E、F组）豚鼠的肺、脾、肝均有肉眼可见的结核病灶及HE染色后可见结核肉芽肿病变。抗酸染色和荷菌量提示，B、C组的菌主要分布在肺组织，少数分布在脾和肝，荷菌量为104～10～5 CFU/mL;E、F组的菌在肺、脾、肝均有分布，荷菌量为104～10～5 CFU/mL。B、C、E、F组的病变和荷菌量，组间均无显著性差异，但B、C、F组内病理学及病原学指标的标准差较小。结论两个剂量的气溶胶和滴鼻途径均能制备豚鼠急性结核模型，病理学检查和病原学分析表明，气溶胶5×10～2 CFU Mtb即可成功制备该模型，且模型均一性较好；滴鼻途径5×10～4 CFU Mtb也可制备更均一的豚鼠急性结核模型，然而气溶胶5×10～2 CFU比滴鼻途径5×10～4 CFU发展为更严重的急性结核模型。

关键词：结核分枝杆菌豚鼠模型气溶胶滴鼻

火焰原子吸收光谱法测定配合饲料中铜、铁和锰含量的不确定度评定

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饲料工业 2024年第9期45卷 115-120页

作者：朱叶萌黎雄才王刚广东省医学实验动物中心广东佛山528248

研究旨在建立火焰原子吸收光谱法测定配合饲料中铜、铁和锰含量的不确定度评定方法,真实反映测量的置信度和准确性。首先分析测定过程中的不确定度来源,对不确定度分量进行量化,然后通过数学模型计算出饲料中铜、铁和锰含量,合成扩展不... 详细信息

研究旨在建立火焰原子吸收光谱法测定配合饲料中铜、铁和锰含量的不确定度评定方法,真实反映测量的置信度和准确性。首先分析测定过程中的不确定度来源,对不确定度分量进行量化,然后通过数学模型计算出饲料中铜、铁和锰含量,合成扩展不确定度。结果显示:饲料中铜、铁和锰的含量分别为(11±2)、(214±10)、(92±4)mg/kg,不确定度为扩展不确定度,包含因子为2,对应的置信水平是95%。本研究发现样品消解、样品溶液浓度测定和含量重复性测量是影响饲料中铜、铁、锰含量测量中不确定度的主要因素,应特别关注样品的前处理过程、标准工作液的配制,并使待测样品的浓度落在曲线的中间位置,以提高检测准确性。

关键词：不确定度铜铁锰原子吸收光谱法

Adra1a调节LPS诱导的Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞炎症反应

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中国比较医学杂志 2024年第5期34卷 84-91页

作者：米传靓付彬李思迪陈志达郭中坤王可洲山东第一医科大学(山东省医学科学院)实验动物学院(省实验动物中心) 济南250117 济南朋悦实验动物繁育有限公司济南250000

目的探究Adra1a调节LPS诱导的LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-))原代肝细胞炎症反应。方法利用二步灌流法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠原代肝细胞,构建由LPS诱发的原代肝细胞原发炎症模型;采用加入抑制剂哌唑嗪、转染siRNA来下调LBP敲除小鼠原代肝细... 详细信息

目的探究Adra1a调节LPS诱导的LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-))原代肝细胞炎症反应。方法利用二步灌流法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠原代肝细胞,构建由LPS诱发的原代肝细胞原发炎症模型;采用加入抑制剂哌唑嗪、转染siRNA来下调LBP敲除小鼠原代肝细胞Adra1a的表达;抑制剂法将原代肝细胞分为3组分别是对照组A、LPS组A、抑制剂哌唑嗪组,转染siRNA主要是对原代肝细胞进行分组,包括对照组B、LPS组B、si-NC组、si-Adra1a组;将WT型小鼠的原代肝细胞分为两组分别为对照组(空白对照)、LPS组(LPS刺激12 h)。本研究以WT型、Lbp^(-/-)型小鼠原代肝细胞为研究对象利用Western blot方法验证Adra1a在LPS刺激下的变化情况,采用CCK-8、qRT-PCR、Western blot等实验方法验证哌唑嗪及si-Adra1a对Lbp^(-/-)小鼠的原代肝细胞的炎症及存活率的改善情况。结果在LPS刺激下Lbp^(-/-)小鼠的原代肝细胞Adra1a蛋白表达显著升高(P<0.01),而野生型没有显著变化;抑制剂哌唑嗪组及干扰组的细胞存活率显著升高(P<0.01,P<0.05);抑制剂哌唑嗪组及si-Adra1a组的TNF-α、IL-1β炎症因子表达情况显著降低(P<0.01),与细胞损伤及炎症相关的蛋白p-p38、p-ERK、p-JNK的表达量也显著降低(P<0.01)。结论LPS刺激Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞后Adra1a表达上调、炎症信号因子上调,使用哌唑嗪与si-Adra1a特异性降低Adra1a表达后使LPS相关的Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞炎症因子明显下降,可验证敲除LBP导致Adra1a在LPS诱导的炎症调节中参与反应。

关键词：肾上腺素受体α1A型受体 Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞哌唑嗪干扰RNA MAPK信号通路

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腹主动脉瘤动物模型的研究现状与转化应用

中国实验动物学报 2024年第4期32卷 530-538页

作者：夏聪聪刘浩乐侯海雯刘恩岐赵四海西安交通大学医学部实验动物中心西安710061

随着我国人口老龄化趋势加剧,腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)发病率逐渐升高。由于动脉瘤破裂后死亡率极高,该病已经成为危害我国人群健康的重要疾病之一。在组织病理学上,AAA表现为中膜平滑肌细胞耗竭、弹力纤维断裂和退... 详细信息

随着我国人口老龄化趋势加剧,腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)发病率逐渐升高。由于动脉瘤破裂后死亡率极高,该病已经成为危害我国人群健康的重要疾病之一。在组织病理学上,AAA表现为中膜平滑肌细胞耗竭、弹力纤维断裂和退化、细胞外基质降解和血管局部炎症反应等。目前,临床上AAA的治疗多以血管内介入治疗为主,缺乏药物治疗手段,这也与致病机制迄今未被完全阐明有关。目前AAA动物模型主要以啮齿类实验动物(小鼠、大鼠)为主,也有部分中、大型实验动物(如兔、豚鼠、犬和猪等)。在造模方法上,主要包含弹性蛋白酶动脉腔内灌注法、血管紧张素Ⅱ输注法、氯化钙涂抹法和血管组织移植法等。部分药物或手术AAA模型由于前期诱导刺激的停止,诱导后动脉瘤病变趋于稳定。开发允许AAA持续发展,甚至可以在人为刺激下诱导破裂的,更符合人动脉瘤发展规律的模型是今后的造模研究方向之一。实验动物模型是阐明AAA发病机制、开发治疗动脉瘤新药和评价相关治疗策略安全性的重要研究工具。因此,本文综述了目前常用的AAA造模方法和其在临床前转化研究中的应用。

关键词：腹主动脉瘤动物模型猪胰弹性蛋白酶血管紧张素Ⅱ

医学领域应急科技攻关项目的管理创新机制探究

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 102-110页

作者：陈昱君苏美洋伊王清玄高苒中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的应急科技攻关项目凸显“应急”和“攻关”两个关键,即如何高效地取得目标成果。承接此类项目的机构需要制定合理的项目管理机制,为应急科技攻关项目的成功落实保驾护航。本文旨在通过调查研究,调研目前医学领域应急科技攻关项目管... 详细信息

目的应急科技攻关项目凸显“应急”和“攻关”两个关键,即如何高效地取得目标成果。承接此类项目的机构需要制定合理的项目管理机制,为应急科技攻关项目的成功落实保驾护航。本文旨在通过调查研究,调研目前医学领域应急科技攻关项目管理存在的问题,分析可改进的措施,提高科研管理的效率和质量。方法本文结合作者实践经验,调查相关单位的科研管理运行现状,并就科管和科研人员最关心的管理环节开展问卷调研。基于调查反映出来的问题,再组织专家座谈进行论证。结果调研发现(1)目前针对应急科技攻关项目的管理规范鲜有制定;(2)科研人员最关注的是行政审批和项目经费的问题;(3)科管人员最关注的是如何在合法合规的前提下,同时满足上级单位的管理以及科研人员的需求。结论应急科技攻关项目与常规科技项目相比有其特殊之处,在立项审批、经费使用、资源分配和安全等方面可以进行管理优化,本研究针对应急科技攻关项目管理提供创新方案,为各科研单位对此类项目的管理提供有益的经验和借鉴。

关键词：项目管理应急调查研究医学