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补中益气汤通过调节Nrf2/PPARγ/GPX4通路抑制铁死亡改善自身免疫性甲状腺炎小鼠甲状腺损伤

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 10-18页

作者：刘子玉赵卓陈怡然曹慧敏陈丝王智民高天舒杨潇辽宁省中医药研究院沈阳110034 辽宁中医药大学附属第二医院沈阳110034 辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032

目的:基于核因子E2相关性因子2(Nrf2)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)通路探讨补中益气汤改善自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠铁死亡的作用机制。方法:将120只SPF级8周龄NOD.H-2h4小鼠按随机数字表法分为... 详细信息

目的:基于核因子E2相关性因子2(Nrf2)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)通路探讨补中益气汤改善自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠铁死亡的作用机制。方法:将120只SPF级8周龄NOD.H-2h4小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组及西药组,各20只,除空白组外,采用经典的高碘水(0.05%碘化钠)喂养,8周后制成AIT模型。补中益气汤低、中、高剂量组分别予4.78、9.56、19.12 g·kg^(-1)补中益气汤灌胃,西药组给予3.033×10^(-5) g·kg^(-1)硒酵母片混悬液灌胃,空白组及模型组给予等体积蒸馏水灌胃,连续8周后实施取材。苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠甲状腺组织病理形态;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)含量;试剂盒检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用免疫荧光检测甲状腺组织中GPX4定位表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-timePCR)检测甲状腺组织Nrf2、PPARγ、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、溶质载体家族3成员2(SLC3A2)、溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)、GPX4 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测甲状腺组织Nrf2、PPARγ、SLC7A11、SLC3A2、LPCAT3、GPX4蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠光镜下可见甲状腺组织内明显的淋巴细胞浸润现象,血清中TGAb、TPOAb含量显著升高(P<0.01),MDA水平显著升高,SOD水平显著降低(P<0.01);甲状腺组织中Nrf2、PPARγ、SLC7A11、SLC3A2、GPX4表达显著降低(P<0.01),LPCAT3的表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,补中益气汤各剂量组及西药组小鼠光镜下甲状腺组织内的淋巴细胞浸润程度减轻,血清中TPOAb、TGAb含量明显降低(P<0.05,P<0.01),MDA水平明显降低、SOD水平明显升高(P<0.05,P<0.01);甲状腺组织中Nrf2、PPARγ、SLC7A11、SLC3A2、GPX4表达明显升高、LPCAT3的表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与西药组比较,补中益气汤各剂量组甲状腺组织中Nrf2、PPARγ、SLC7A11、SLC3A2、GPX4、LPCAT3表达总体趋势差异明显(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤可有效改善AIT的炎症损伤,其作用机制可能与调控Nrf2/PPARγ/GPX4抑制铁死亡进程有关。

关键词：补中益气汤自身免疫性甲状腺炎铁死亡核因子E2相关性因子2(Nrf2)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)信号通路

补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎小鼠Fas/FADD/Caspase-8细胞凋亡信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 27-34页

作者：李晓晖赵卓陈怡然曹慧敏陈丝王智民高天舒刘子玉杨潇辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032 辽宁中医药大学附属第二医院沈阳110034 辽宁省中医药研究院沈阳110034

目的:探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)模型小鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)/Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)/胱天蛋白酶-8(Caspase-8)细胞凋亡信号通路的影响。方法:SPF级8周龄NOD.H-2h4小鼠120只,其中100只饲以高碘水(0.0... 详细信息

目的:探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)模型小鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)/Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)/胱天蛋白酶-8(Caspase-8)细胞凋亡信号通路的影响。方法:SPF级8周龄NOD.H-2h4小鼠120只,其中100只饲以高碘水(0.05%NaI)喂养,8周后制成AIT模型,按随机数字表法分为模型组、补中益气汤低、中、高剂量组(4.78、9.56、19.12 g·kg^(-1))、西药(硒酵母片)组(3.033×10^(-5) g·kg^(-1)),每组20只,另设20只空白组小鼠。依据分组连续给药8周后取材,原位末端标记法(TUNEL)检测小鼠甲状腺细胞凋亡情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测甲状腺组织中Fas、FADD、Caspase-8、Caspase-3 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测甲状腺组织Fas、FADD、Caspase-8、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、活化的(cleaved)Caspase-8、cleaved Caspase-3蛋白的表达并应用免疫组织化学染色法检测甲状腺组织Fas、Caspase-3蛋白定位表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠荧光显微镜下凋亡细胞阳性表达较多,Fas、FADD、Caspase-8、Caspase-3、cleaved Caspase-8、cleaved Caspase-3的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠荧光显微镜下甲状腺凋亡细胞阳性表达减少,Fas、FADD、Caspase-8、Caspase-3、cleaved Caspase-8、cleaved Caspase-3的表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤可有效改善AIT小鼠甲状腺细胞凋亡,改善炎性损伤,其机制可能与抑制Fas/FADD/Caspase-8信号通路有关。

关键词：补中益气汤自身免疫性甲状腺炎细胞凋亡肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)

补中益气汤通过miR-155/Ndfip1/Pten轴调控Th17细胞改善自身免疫性甲状腺炎的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 19-26页

目的:探讨补中益气汤通过微小RNA-155(miR-155)/Nedd4家族相互作用蛋白1(Ndfip1)/磷酸酯酶与张力蛋白同源物(Pten)轴调控辅助性T细胞17(Th17)改善自身免疫性甲状腺炎(AIT)的作用机制。方法:将100只SPF级8周龄NOD.H-2h4小鼠饲以高碘水(0.... 详细信息

目的:探讨补中益气汤通过微小RNA-155(miR-155)/Nedd4家族相互作用蛋白1(Ndfip1)/磷酸酯酶与张力蛋白同源物(Pten)轴调控辅助性T细胞17(Th17)改善自身免疫性甲状腺炎(AIT)的作用机制。方法:将100只SPF级8周龄NOD.H-2h4小鼠饲以高碘水(0.05%碘化钠)喂养,8周后制成AIT模型,按随机数字表法分为模型组、补中益气汤低、中、高剂量组(4.78、9.56、19.12 g·kg^(-1))、西药组(硒酵母片3.033×10^(-5) g·kg^(-1)),每组20只,另设20只空白组小鼠,空白组及模型组灌胃等体积蒸馏水。连续给药8周后,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠甲状腺组织miR-155-5p、Ndfip1、Pten、蛋白质酪氨酸激酶1(Jak1)、信号传导和转录激活因子3(Stat3)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、白细胞介素-17(IL-17)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠甲状腺组织Ndfip1、Pten、Jak1、Stat3、RORγt、IL-17蛋白的表达;免疫组化法检测小鼠甲状腺组织中Ndfip1、Pten蛋白表达;流式细胞术检测小鼠脾脏Th17细胞比例。结果:与空白组比较,模型组小鼠脾脏Th17细胞比例显著升高(P<0.01),miR-155-5p、Jak1、Stat3、RORγt、IL-17的表达显著升高(P<0.01),Ndfip1、Pten的表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠脾脏Th17细胞比例降低(P<0.05,P<0.01),miR-155-5p、Jak1、Stat3、RORγt、IL-17的表达明显减少(P<0.05,P<0.01),Ndfip1、Pten的表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤可改善AIT小鼠自身免疫失常,其机制可能与通过miR-155调控Ndfip1/Pten轴进而调控Th17细胞分化有关。

关键词：补中益气汤自身免疫性甲状腺炎(AIT) 辅助性T细胞17(Th17) 微小RNA-155(miR-155) Nedd4家族相互作用蛋白1(Ndfip1) 磷酸酯酶与张力蛋白同源物(Pten)

补中益气汤调控TLR4/NF-κB/AIM2信号通路改善自身免疫性甲状腺炎小鼠甲状腺炎症损伤的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 1-9页

作者：赵卓金哲李铮铮郭宣麟李佳韵高彤然李品王智民尹远平刘子玉杨潇辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属第二医院沈阳110034 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032 辽宁省中医药研究院沈阳110034

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎性小体信号通路探索补中益气汤改善自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠炎症损伤的作用机制。方法:选用基因易感8周龄NOD.H-2h4小鼠120只,随机分为空白组、模型... 详细信息

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎性小体信号通路探索补中益气汤改善自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠炎症损伤的作用机制。方法:选用基因易感8周龄NOD.H-2h4小鼠120只,随机分为空白组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组(4.78、9.56、19.12 g·kg^(-1))、西药组(硒酵母片,3.033×10^(-5) g·kg^(-1))。各组AIT模型小鼠自由饮用0.05%碘化钠水溶液8周,建立AIT模型,空白组自由饮用蒸馏水。依据分组灌胃各给药组小鼠药液8周后取材,肉眼观察甲状腺组织肿胀情况,称量脾脏质量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测甲状腺组织高迁移率族蛋白1(HMGB1)、TLR4、AIM2、NF-κB p65、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测甲状腺组织HMGB1、TLR4、AIM2、NF-κB p65、磷酸化(p)-NF-κB p65、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白的表达,免疫荧光染色观察小鼠甲状腺组织HMGB1、AIM2、NF-κB p65的蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠甲状腺组织明显肿胀,脾脏质量明显增加,甲状腺组织HMGB1、TLR4、NF-κB p65、AIM2、ASC、Caspase-1、IL-1β表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,补中益气汤各剂量组小鼠甲状腺组织肿胀情况好转,脾脏质量明显下降,甲状腺组织HMGB1、TLR4、AIM2、NF-κB p65、p-NF-κB p65、ASC、Caspase-1、IL-1β表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤可有效改善AIT的炎症损伤,调控TLR4/NF-κB/AIM2炎性小体信号通路的异常活化可能是其干预机制之一。

关键词：补中益气汤 Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎性小体自身免疫性甲状腺炎炎症

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从肝脾论治多汗症

北京中医药大学学报 2024年第4期47卷 490-495页

作者：王梦真罗玥刘子玉郭风宜尹远平杨潇辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属第二医院辽宁省中医药研究院

多汗症是由于汗液分泌量超过机体体温调节及体内平衡所需导致全身或局部出汗量异常增多的疾病,归属于中医学“汗证”范畴,由阴阳失衡、津液疏泄失常所致。与众医家从心、肺、肾论治汗证不同,本文基于肝脾两脏探讨多汗症的病因病机,阐释... 详细信息

多汗症是由于汗液分泌量超过机体体温调节及体内平衡所需导致全身或局部出汗量异常增多的疾病,归属于中医学“汗证”范畴,由阴阳失衡、津液疏泄失常所致。与众医家从心、肺、肾论治汗证不同,本文基于肝脾两脏探讨多汗症的病因病机,阐释调和肝脾对于汗证的重要意义,提出肝郁脾弱、营卫不和、阴阳失衡为其关键病机。临证多从肝脾入手,以疏肝解郁、健脾养血、调荣益卫为主要治疗原则,重视脏腑气血关联,健脾益气以固其本,疏肝解郁以调其气,脾运得健则益气有源,气畅血和则汗泄有道。方选逍遥散化裁,以肝木、脾土为主论治,补养后天,调畅气机,滋养五脏,调和气血,身强而神自安,气足而汗自止,肝脾同调,升降相因,五脏自和。

关键词：多汗症汗证调和肝脾逍遥散

补中益气汤对AIT小鼠Th17/Treg免疫失衡及Notch1信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 19-27页

作者：赵卓宋囡刘子玉李品罗玥张鹏坤王智民尹远平高天舒金哲杨潇辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032 辽宁中医药大学附属第二医院沈阳110034

目的:探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫失衡及果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)信号通路的影响。方法:将60只8周龄NOD.H-2^(h4)小鼠,随机分为正常组、模型组、西药组(硒酵母片,... 详细信息

目的:探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫失衡及果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)信号通路的影响。方法:将60只8周龄NOD.H-2^(h4)小鼠,随机分为正常组、模型组、西药组(硒酵母片,32.5 mg·kg^(-1))、补中益气汤低、中、高剂量组(4.78、9.56、19 g·kg^(-1)),每组10只。正常组饲以蒸馏水,其余各组饲以含0.05%碘化钠水8周,自发形成AIT动物模型后,依据分组灌胃给药8周麻醉处死小鼠。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)含量;苏木素-伊红(HE)染色法观察甲状腺组织改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测甲状腺组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、白细胞介素(IL)-17、叉头样转录因子3(FoxP3)、IL-10、Notch1、发状分裂相关增强子1(Hes1)mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠甲状腺结构破坏严重,淋巴细胞明显浸润,血清TGAb、FT3及FT4含量显著升高,TSH含量显著降低(P<0.01),RORγt、IL-17、Notch1、Hes1 mRNA及蛋白表达水平明显升高,FoxP3、IL-10 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠甲状腺结构破坏及淋巴细胞浸润程度有所改善,血清TGAb、FT3及FT4含量显著降低,TSH含量升高,RORγt、IL-17、Notch1、Hes1 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度降低,FoxP3、IL-10 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度升高(P<0.05,P<0.01),以补中益气汤中剂量组干预效果最为显著。结论:补中益气汤可缓解AIT小鼠甲状腺结构损伤,其机制可能与改善Th17/Treg免疫细胞异常分化,抑制Notch1信号通路激活有关。

关键词：补中益气汤自身免疫性甲状腺炎辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg) 果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)信号通路炎症

以麻黄为主药系列经方在儿童过敏性疾病辨治中的运用

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中华中医药学刊 2024年

作者：徐丽辽宁省中医药研究院辽宁中医药大学附属第二医院

以麻黄为主药系列经方在儿童过敏性疾病辨治中的运用。儿童过敏性疾病多年来是临床治疗的难点，以麻黄为主药系列方治疗本病临床疗效确切肯定。针对儿童过敏性疾病的正气不足，肺脾肾功能低下，痰饮等伏邪宿根停留于体内，外邪引动而发... 详细信息

以麻黄为主药系列经方在儿童过敏性疾病辨治中的运用。儿童过敏性疾病多年来是临床治疗的难点，以麻黄为主药系列方治疗本病临床疗效确切肯定。针对儿童过敏性疾病的正气不足，肺脾肾功能低下，痰饮等伏邪宿根停留于体内，外邪引动而发病。麻黄为治疗咳喘之圣药，通过合理的配伍，麻黄与杏仁宣降相成，麻黄与石膏寒温并举，麻黄与附子温通表里。为了确保疗效，我们要重视遵循经方的原配伍比例、剂量、组方、煎服法和调护法。此外，还要明确麻黄类方及方证应用，即对方证，抓主证。以麻黄为主药系列经方恰似天空中一颗璀璨的明珠依然熠熠生辉。

关键词：麻黄经方过敏性鼻炎支气管哮喘儿童过敏性疾病

补肾活血方联合常规西药治疗射血分数中间值心衰气虚血瘀证患者129例随机对照临床观察

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中医杂志 2024年第4期65卷 376-381页

作者：张艳何佳张伟宋婷婷辽宁中医药大学附属医院辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学附属第四医院辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属第二医院

目的评价补肾活血方治疗射血分数中间值心衰(HFmrEF)气虚血瘀证的临床疗效。方法将HFmrEF气虚血瘀证患者277例随机分为治疗组139例、对照组138例,对照组给予常规西药治疗,治疗组在对照组基础上加用补肾活血方,两组均治疗8周。比较治疗... 详细信息

目的评价补肾活血方治疗射血分数中间值心衰(HFmrEF)气虚血瘀证的临床疗效。方法将HFmrEF气虚血瘀证患者277例随机分为治疗组139例、对照组138例,对照组给予常规西药治疗,治疗组在对照组基础上加用补肾活血方,两组均治疗8周。比较治疗前后两组患者左心室射血分数(LVEF)、N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)水平、心功能分级、明尼苏达心力衰竭生活质量评分、焦虑评分、抑郁评分,以及治疗后6个月主要不良心血管事件发生率、再住院率情况。结果治疗组脱落10例、对照组脱落6例,实际完成治疗组129例、对照组132例。与本组治疗前比较,两组患者治疗后LVEF升高、NT-pro BNP水平降低(P0.05);治疗组再住院率(14.73%,19例/129例)低于对照组(30.30%,40例/132例)(P院率。

关键词：慢性心力衰竭气虚血瘀补肾活血方心肾相关

基于态靶医学探讨毒热理论以痈论治胃溃疡活动期

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 217-227页

作者：陈力铭刘国政杨硕李言孙阳阳边玥凝赵一霖肖景东辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属第四医院沈阳110101 辽宁中医药大学附属医院沈阳110000

“态靶医学”是仝小林院士基于现代医学发展现状提出的中医诊疗理论体系。胃溃疡活动期作为胃癌前状态,对人们的健康产生了巨大影响,国医大师周学文教授针对胃溃疡活动期创新性地提出“毒热”病因理论,对临床诊疗起到重要的指导作用。... 详细信息

“态靶医学”是仝小林院士基于现代医学发展现状提出的中医诊疗理论体系。胃溃疡活动期作为胃癌前状态,对人们的健康产生了巨大影响,国医大师周学文教授针对胃溃疡活动期创新性地提出“毒热”病因理论,对临床诊疗起到重要的指导作用。文章以“态靶医学”理论体系为框架对国医大师周学文教授基于“毒热”理论运用消痈溃得康治疗胃溃疡活动期的理、法、方、药进行再次阐发。确立胃溃疡“胃痈”之中医病名,认为胃溃疡因“毒”而生,以“毒热”为本,疾病过程中“毒”“热”“虚”“瘀”态并存,将其病机发展分为毒热蕴结期、毒热伤正期、正虚毒恋期3个阶段。周学文教授基于胃溃疡“内痈”的定位提出“以痈论治”胃溃疡活动期,将外科治法“消”“托”“补”引入胃溃疡活动期的治疗中,将“清热解毒、消痈生肌”作为疾病基本治法,对于不同阶段,又对清热解毒法、托腐生肌法、健脾和胃法的使用各有侧重,并创立出能够态靶同调胃溃疡活动期的“以痈论治”代表方剂消痈溃得康。

关键词：态靶医学胃溃疡活动期毒热理论以痈论治消痈溃得康