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AQPs在心血管疾病中的作用及中医药研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 262-271页

作者：王雪薇张艳袁子阳辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032

水通道蛋白(AQPs)在人体水液平衡、能量代谢、细胞信号传导、细胞迁移及细胞增殖等相关的疾病中发挥着重要作用,其功能障碍与心血管疾病密切相关,对AQPs的调节和功能的研究不仅将为心血管疾病诊断和预后提供新思路,还会促进潜在治疗策... 详细信息

水通道蛋白(AQPs)在人体水液平衡、能量代谢、细胞信号传导、细胞迁移及细胞增殖等相关的疾病中发挥着重要作用,其功能障碍与心血管疾病密切相关,对AQPs的调节和功能的研究不仅将为心血管疾病诊断和预后提供新思路,还会促进潜在治疗策略的开发。文章整合了近年来的国内外研究成果,简述了AQPs在哺乳动物心血管系统中的定位和表达,综述了与心血管疾病相关的AQP1、AQP4、AQP7、AQP9和AQP2在心血管组织中的生理、病理作用及调控机制,从中西医结合的角度出发,探讨了水通道蛋白与中医学中水液代谢的相关性,为传统中医理论提供了现代生物学的解释,有助于深化对中医理论的科学理解,为中医特定脏腑功能提供可能的分子机制。此外,总结中药复方/单味中药靶向AQPs相关信号通路来治疗心血管疾病的研究进展,讨论了中医药如何通过调节AQPs的表达来治疗相关疾病,这为中医药的现代化研究和应用提供了分子层面的证据,并强调在心血管疾病治疗中中医药与水通道蛋白相结合的调控机制的关键作用,为中医药治疗水液代谢失常类疾病的临床应用提供潜在的分子靶点和新的科学依据,将传统中医理论与现代生物学紧密结合,为未来研究提供新方向。

关键词：水通道蛋白(AQPs) 中医药心血管疾病水液代谢平衡心力衰竭

基于“肾气热”探讨绝经后骨质疏松的病机与辨治

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北京中医药大学学报 2024年第3期47卷 412-416页

作者：顾海立于冬冬辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院

绝经后骨质疏松是一种骨代谢疾病,常发生于女性绝经后,属临床难治性疾病。根据绝经后骨质疏松的临床表现,可将其归属于中医学“骨痿”“骨枯”等范畴。本文基于“肾气热”理论对绝经后骨质疏松的病因病机进行阐释,提出阴虚津少、阴不涵... 详细信息

绝经后骨质疏松是一种骨代谢疾病,常发生于女性绝经后,属临床难治性疾病。根据绝经后骨质疏松的临床表现,可将其归属于中医学“骨痿”“骨枯”等范畴。本文基于“肾气热”理论对绝经后骨质疏松的病因病机进行阐释,提出阴虚津少、阴不涵阳为发病基础,阳亢内热、热薄骨干为中心环节,阴阳互损、骨骼枯槁为终末转归。基于以上病机,发病早期治以滋阴生津、补气养血,方以益阴增液汤加减;中期治以滋阴清热、补肾填精,方以滋阴清热饮加减;终末期治以阴阳并补、固本培元,方以阴阳双补汤加减。同时,探讨“肾气热”与炎症、免疫反应的关联性,以期为临床治疗绝经后骨质疏松提供新思路。

关键词：绝经后骨质疏松肾气热炎症反应免疫反应滋阴清热

基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨补中益气汤干预NOD.H-2^(h4)小鼠AIT细胞焦亡的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 8-15页

作者：王智民杨潇陈怡然刘子玉刘庆阳高城翰王琛高天舒辽宁中医药大学第一临床学院沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032 辽宁中医药大学附属第二医院沈阳110034 辽宁中医药大学针灸推拿学院沈阳110847 山东中医药大学第一临床医学院济南250199

目的:基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠细胞焦亡的作用机制。方法:60只NOD.H-2h4小鼠分为正常组、模型组、补中益气汤低、中、高剂... 详细信息

目的:基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠细胞焦亡的作用机制。方法:60只NOD.H-2h4小鼠分为正常组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量(4.10、8.19、16.38 g·kg^(-1))组和硒酵母片(0.26 mg·kg^(-1))组,每组10只。除正常组外,其余各组均给予0.05%碘化钠(NaI)灌胃8周造模,继续给药干预8周。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠甲状腺组织病理学改变;免疫组化法检测甲状腺组织中NLRP3、Caspase-1、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测甲状腺组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测甲状腺组织中细胞焦亡相关蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清TPO-Ab、Tg Ab水平显著升高(P<0.01),甲状腺滤泡或增大呈立方状,或破坏萎缩,滤泡周围可见大量淋巴细胞浸润;与模型组比较,给药组TPO-Ab、Tg Ab水平显著降低(P<0.01),滤泡形态结构有所改善,淋巴细胞浸润程度有所减轻,其中补中益气汤中剂量组降低和改善效果最为明显。与正常组比较,模型组小鼠甲状腺组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白阳性产物和mRNA表达显著增加(P<0.01),NLRP3、剪切的(cleaved) Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,给药组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白阳性产物和mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),其中补中益气汤中剂量组降低效果最为明显,给药组NLRP3、cleaved Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤可改善AIT,其机制可能是通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡实现的。

关键词：补中益气汤自身免疫性甲状腺炎细胞焦亡 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路

健脾祛痰方调节M1/M2巨噬细胞极化改善动脉粥样硬化的实验研究

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中国中药杂志 2024年

作者：韩晓萌刘悦赵誉于茂生谭咪辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院

探究健脾祛痰方通过磷酸化激活信号传导和转录激活因子（signal transducer and activator of transcription，STAT）6调节动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）斑块中经典型巨噬细胞（classical activated macrophages，M1）/替代型活化巨噬细胞（alternatively activated macrophages，M2）平衡，减轻炎症反应，提高斑块稳定性，而发挥抗AS的作用机制。采用动脉粥样硬化饲料喂养载脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）-/-小鼠8周建立AS模型，按照随机数字表法将ApoE-/-小鼠分为模型组（Mod组）、健脾祛痰方组(JPQT组，8.97 g·kg-1)和阿托伐他汀钙片组(ATO组，1.3 mg·kg-1)，每组10只。另设10只以普通饲料喂养的相同周龄雄性C57BL/6J小鼠为空白组（Con组）。JPQT组和ATO组连续灌胃给药8周，Con组和Mod组给予等量生理盐水灌胃。持续监测小鼠体质量，取血后比较各组小鼠血清总胆固醇（total cholesterol，TC）和甘油三酯（triglyceride，TG）水平。苏木素-伊红（hematoxylin-eosin staining，HE）染色、油红O染色观察主动脉组织斑块形成情况；酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测促炎因子白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-12和抗炎因子IL-10的表达水平；免疫荧光检测主动脉分化簇（cluster of differentiation，CD）86和CD206的阳性表达；Western blot检测主动脉诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、精氨酸酶1（arginase 1，Arg1）、STAT6及p-STAT6的蛋白表达水平。与Con组相比，Mod组小鼠体质量和血脂水平增加，主动脉结构紊乱，有明显AS斑块形成，并伴随大量脂质沉积，血清促炎因子IL-6、IL-12水平以及CD86、iNOS蛋白水平显著上升，血清抗炎因子IL-10水平以及CD206、Arg-1、p-STAT6/STAT6水平显著降低；与Mod组比较，各药物干预组小鼠体质量、血脂代谢情况均得到改善，主动脉结构改善较为明显，脂质堆积减少，血清促炎因子IL-6、IL-12水平以及CD86、iNOS蛋白水平显著下降，血清抗炎因子IL-10水平以及CD206、Arg-1、p-STAT6／STAT6水平显著上升。综上，健脾祛痰方可通过调节M1/M2巨噬细胞极化失衡，改善AS，其机制可能与激活STAT6信号传导密切相关。

关键词：动脉粥样硬化 STAT6 健脾祛痰方巨噬细胞极化

慢性阻塞性肺疾病发病机制及中药调节作用研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：邹吉宇王天娇臧凝子刘勇明庞立健王琳琳吕晓东辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院

慢性阻塞性肺疾病（COPD）作为一种可以预防和干预但却无法彻底根治的慢性呼吸系统疾病，其发病率和死亡率逐年增加，或合并一种或多种并发症，但目前却尚无特异性治疗方法。因此，COPD的医疗保健问题紧迫突出，而中医药通过多机制、多... 详细信息

慢性阻塞性肺疾病（COPD）作为一种可以预防和干预但却无法彻底根治的慢性呼吸系统疾病，其发病率和死亡率逐年增加，或合并一种或多种并发症，但目前却尚无特异性治疗方法。因此，COPD的医疗保健问题紧迫突出，而中医药通过多机制、多通路、多靶点延缓COPD疾病进展，故探索COPD发病机制、寻找中医治疗途径与有效方药是临床亟待解决的关键问题。中医学将COPD归属到“咳嗽”、“喘证”、“肺胀”等范畴，认为本虚贯穿疾病始终，触犯外邪、气机逆乱、痰瘀酝生则显标实。现代医学对COPD发病机制的研究主要包括炎症反应、氧化应激、自噬失调和衰老等方面，并且研究发现中药单体、单味药及复方可通过抑制炎症、降低氧化损伤、纠正自噬及延缓衰老等途径改善COPD，但目前尚未有研究直观梳理COPD各发病机制及其相互作用关系。同时，中药治疗COPD相关作用研究主要集中在单纯探索单一机制、单一通路，并未多机制、多通路、多靶点联合，并且将COPD各发病机制与中药调控作用和信号通路对应整理总结的研究也少之又少。本研究首次结合国内外最新文献以图、文、表相结合的形式阐述COPD各发病机制及其相互联系并梳理中药单体、单味药及复方调节COPD的信号通路、作用靶点及作用机制，以期为COPD的深入研究及中医药系统治疗COPD提供新的思路与方案。

关键词：慢性阻塞性肺疾病(COPD) 发病机制中药信号通路炎症反应氧化应激自噬失调衰老

基于System Xc(-)/GSH/GPX4抗氧化功能轴探讨眼针改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞铁死亡的作用机制

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针刺研究 2024年

作者：曹亚荣马贤德樊程程张新宇王奡王圣澎孙梦月王哲张威辽宁中医药大学附属医院辽宁中医药大学

目的：观测眼针对急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑缺血半暗带皮质组织中抗氧化功能轴-系统XC-谷胱甘肽-谷胱甘肽过氧化物酶4[System Xc(-)/GSH/GPX4]的影响，探讨眼针改善CIRI大鼠神经细胞铁死亡的作用机制。方法：SD大鼠随机分为假... 详细信息

目的：观测眼针对急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑缺血半暗带皮质组织中抗氧化功能轴-系统XC-谷胱甘肽-谷胱甘肽过氧化物酶4[System Xc(-)/GSH/GPX4]的影响，探讨眼针改善CIRI大鼠神经细胞铁死亡的作用机制。方法：SD大鼠随机分为假手术组、模型组、眼针组和抑制剂组，每组12只。改良线栓法复制CIRI大鼠模型；眼针组针刺双侧“上焦区”“肝区”“下焦区”“肾区”。抑制剂组腹腔注射GPX4抑制剂RSL3(10 mg/kg)。Garcia J H评分法评估大鼠神经功能损伤程度、TTC染色观察脑组织梗死情况、HE染色观察脑组织神经元形态；透射电子显微镜观察线粒体结构；试剂盒检测MDA(丙二醛)、GSH、亚铁离子(Fe2+)和活性氧(ROS)的含量；Western blot法检测溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、溶质载体家族3成员2(SLC3A2)和GPX4的蛋白表达量；RT-PCR法检测SLC7A11、GPX4的mRNA表达。结果：与假手术组相比，模型组大鼠神经功能损伤严重(P<0.01)；线粒体呈典型铁死亡改变；铁死亡相关：Fe2+、ROS、MDA含量显著增加(P<0.01)；GSH含量，SLC7A11、SLC3A2、GPX4的表达量显著降低(P<0.01)。眼针治疗后神经功能损伤减轻(P<0.01)；线粒体损伤减轻；铁死亡相关蛋白含量显著降低(P<0.01)；功能轴相关指标的含量和相对表达量升高(P<0.01，P<0.05)。抑制剂组大鼠神经功能损伤加重(P<0.01)；线粒体损伤加重；铁死亡相关蛋白含量增加(P<0.01，P<0.05)；功能轴相关指标的含量和相对表达量降低(P<0.01，P<0.05)。结论：眼针可通过调控System Xc(-)-GSH-GPX4抗氧化功能轴来改善CIRI大鼠神经细胞铁死亡。

关键词：眼针脑缺血再灌注损伤(CIRI) 铁死亡抗氧化功能轴缺血半暗带

基于网络药理学及分子对接探讨开心散改善阿尔茨海默病的作用机制研究

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：何晓明王晓彤闵冬雨王欣欣程美佳刘勇明鞠业涛杨雅丽袁常斌于畅洋张力辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院

目的：基于网络药理学、分子对接及动物实验验证，探讨开心散治疗阿尔茨海默病（AD）的作用机制。方法：①采用TCMSP数据库和ETCM数据库获取开心散的活性成分及靶点；利用GeneCards、OMIM、TTD、PharmGKB和DrugBank数据库获取AD的相关... 详细信息

目的：基于网络药理学、分子对接及动物实验验证，探讨开心散治疗阿尔茨海默病（AD）的作用机制。方法：①采用TCMSP数据库和ETCM数据库获取开心散的活性成分及靶点；利用GeneCards、OMIM、TTD、PharmGKB和DrugBank数据库获取AD的相关靶点；对开心散的活性成分作用靶点与AD相关靶点取交集（共同靶点）；STRING 数据库对共同靶点进行网络互作分析，构筑蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络；应用Cytoscape 内的CytoNCA插件筛选出核心靶点；Metascape平台执行基因本体（GO）功能富集分析及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析；借助Cytoscape 3.8.2建立“药物-活性成分-靶点”互作网络；AutoDock Vina进行分子对接；②利用东莨菪碱（SCOP）造模，腹腔注射，每日1次。将32只雄性C57/BL6小鼠随机分为空白对照（CON）组（0.9%氯化钠，n=8）、模型（SCOP）组(3 mg·kg-1·d-1，n=8)、阳性对照组(SCOP 3 mg·kg-1·d-1+ Donepezil 3 mg·kg-1·d-1，n=8)、开心散组(SCOP 3 mg·kg-1·d-1+开心散 6.5 g·kg-1·d-1，n=8)。各组小鼠0.9%氯化钠、开心散或Donepezil灌胃给药，一天2次，连续14 d。采用Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力；苏木素-伊红（HE）染色法观察小鼠海马CA1区病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定小鼠血清乙酰胆碱（ACh）与乙酰胆碱酯酶（AChE）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠海马中信号转导和转录激活因子3（STAT3）、NF-κB p65蛋白表达水平。结果：①共得到开心散73种活性成分，筛选出开心散对治疗AD的潜在作用靶点（共同靶点）578个；关键活性成分：山柰酚、吉九里香碱等；潜在核心靶点：STAT3、NF-κB p65等；GO功能富集分析得到3 124条生物功能、254条细胞构件、461条分子功能；KEGG通路富集分析获得248条通路，主要涉及癌症相关通路、TRP通路、cAMP通路、NF-κB通路等；分子对接显示，关键活性成分与目标靶点结合力较稳定。②Morris水迷宫实验表示开心散可以改善SCOP诱导的小鼠学习记忆能力；HE染色及ELISA检测结果表明开心散对小鼠中枢神经损伤有改善；Western blot实验检测表明开心散对SCOP模型小鼠海马组织中NF-κB p65磷酸化与STAT3磷酸化水平有下调作用。结论：开心散可以改善SCOP模型小鼠的认知障碍功能，并且可能通过调节NF-κB p65、STAT3等靶点来参与NF-κB信号通路等，减少海马神经元损伤从而发挥治疗AD的作用。

关键词：开心散阿尔茨海默病网络药理学分子对接东莨菪碱作用机制实验验证

基于冠状动脉CT血管成像影像组学的稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证鉴别研究

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北京中医药大学学报 2024年第4期47卷 545-554页

作者：魏东升齐佳杰刘孝生李路珍李涵刘雨婷邓成康戴旭赵宝英张哲辽宁中医药大学第一临床学院沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁中医药大学附属医院

目的应用影像组学技术构建稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证鉴别诊断模型。方法收集2021年1月—2022年1月辽宁中医药大学附属医院91例行冠状动脉CT血管成像的稳定型心绞痛患者,其中痰瘀互结证47例、气虚血瘀证44例,采用分层随机抽样... 详细信息

目的应用影像组学技术构建稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证鉴别诊断模型。方法收集2021年1月—2022年1月辽宁中医药大学附属医院91例行冠状动脉CT血管成像的稳定型心绞痛患者,其中痰瘀互结证47例、气虚血瘀证44例,采用分层随机抽样方法将患者按照7∶3的比例分为训练集(64例)与测试集(27例),使用3D-slicer软件提取冠状动脉周围脂肪组织(PCAT)图像影像组学特征。使用主成分分析可视化痰瘀互结证与气虚血瘀证影像组学特征分布情况。采用最小绝对收缩和选择算子回归分析及支持向量机递归特征消除进行特征筛选,使用Logistics多因素回归算法构建鉴别诊断模型,在训练集与测试集中应用接受者操作特征(ROC)曲线对模型进行验证,评价影像组学特征鉴别痰瘀互结证与气虚血瘀证的效能。使用Spearman相关分析进行鉴别特征与临床理化数据的相关性分析。结果3D-slicer软件共提取出837个PCAT图像影像组学特征。主成分分析中第一主成分和第二主成分分别解释了77.9%和8.1%的总体变异,两证候组间存在较为明显的分离趋势。经过特征筛选,7个影像组学特征用于构建痰瘀互结证与气虚血瘀证的鉴别诊断模型。训练集中鉴别诊断模型的ROC曲线下面积(AUC)为0.844,测试集中AUC为0.834。Spearman相关性分析表明,鉴别特征与心肌肌钙蛋白I、中性粒细胞、甘油三酯、总胆固醇及白细胞具有明显相关性。结论基于PCAT的CT影像组学模型对稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证具有较高的鉴别作用。

关键词：稳定型心绞痛影像组学冠状动脉CT血管成像鉴别诊断痰瘀互结证气虚血瘀证

小柴胡汤在恶性肿瘤全程管理中的应用研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 219-231页

作者：赵越王文萍李晓斌王华伟曹莹辽宁中医药大学研究生学院沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032

恶性肿瘤已超过中风及冠心病跃升成为全球70岁前的主要死因,其发病率正逐年增长,严重影响我国人民生活水平及社会经济发展。外科手术、放射治疗、化学治疗、靶向治疗、免疫治疗是西医干预肿瘤的主要手段,对延长患者生存期具有重要意义,... 详细信息

恶性肿瘤已超过中风及冠心病跃升成为全球70岁前的主要死因,其发病率正逐年增长,严重影响我国人民生活水平及社会经济发展。外科手术、放射治疗、化学治疗、靶向治疗、免疫治疗是西医干预肿瘤的主要手段,对延长患者生存期具有重要意义,但存在不良反应多、易耐药等弊端。中医药在肿瘤治疗中的疗效确切、应用广泛,成为了近年的研究热点。小柴胡汤出自《伤寒杂病论》,由柴胡、黄芩、人参、半夏、炙甘草、生姜、大枣组成,具有和解少阳、调和寒热阴阳、疏肝解郁之功效。该方及以其为基础变化的方药被广泛应用于肿瘤的各个阶段。该研究对近10年来小柴胡汤在肿瘤领域的国内外研究进行总结,探究小柴胡汤在阻断癌前病变、控制恶性肿瘤发展、降低干预后不良反应发生、缓解常见并发症上的作用及机制,以期拓展临床用药思路。

关键词：小柴胡汤恶性肿瘤癌症全程管理癌前病变