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针刀治疗膝骨关节炎大鼠的转录组测序及实验验证

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中国组织工程研究 2025年第20期29卷 4239-4248页

作者：刘彦彤王世轩赵双利魏巍王东海姜宗坤刘洪飞辽宁中医药大学辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤一科辽宁省沈阳市110034 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤四科辽宁省沈阳市110034 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤二科辽宁省沈阳市110034

背景:针刀治疗膝骨关节炎临床疗效确切,但针刀干预膝骨关节炎在转录组水平上的调节机制仍未明确。目的:通过针刀干预骨关节炎大鼠,对软骨样本进行转录组测序和生物信息学分析并加以验证,揭示针刀干预骨关节炎大鼠的作用机制。方法:采用... 详细信息

背景:针刀治疗膝骨关节炎临床疗效确切,但针刀干预膝骨关节炎在转录组水平上的调节机制仍未明确。目的:通过针刀干预骨关节炎大鼠,对软骨样本进行转录组测序和生物信息学分析并加以验证,揭示针刀干预骨关节炎大鼠的作用机制。方法:采用随机数字表法将48只SD大鼠随机分为针刀组、模型组和假手术组,每组16只。针刀组、模型组采用内侧半月板失稳术建立骨关节炎模型,造模6周后针刀组大鼠每周进行1次针刀治疗,共治疗4周。治疗4周后,对各组大鼠膝关节进行Micro CT扫描,对关节软骨进行苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色及Mankin评分,采用Elisa法检测血清炎症因子水平,对软骨样本进行转录组测序,采用R软件进行差异基因生物信息学分析,采用蛋白互作网络和Cytoscape软件筛选核心靶点并进行RT-qPCR验证。结果与结论:①相较于假手术组,模型组大鼠关节软骨表面粗糙不平、关节间隙狭窄,关节表层结构破坏,Mankin评分升高,血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13水平显著上升(P<0.05);与模型组相比,针刀组大鼠关节软骨表面较为光滑,关节间隙增宽,关节表面轻微不规则,Mankin评分降低,血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13水平显著降低(P<0.05)。②基因本体论及京都基因组和基因组百科全书分析涉及蛋白分解代谢、自噬、丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt信号通路等,蛋白互作网络及Cytoscape筛选出共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子4个关键基因。③模型组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均低于假手术组(P<0.05),针刀组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均高于模型组(P<0.05)。④针刀干预可能作用于丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt等信号通路来促进软骨修复,并与共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子基因的表达密切相关。

关键词：膝骨关节炎针刀骨关节炎模型内侧半月板韧带失稳术转录组测序差异基因动物实验实验验证工程化组织构建

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人脐带间充质干细胞共培养联合人参皂苷Rg1对心力衰竭细胞模型的影响

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6625-6633页

作者：任疏桐郝苗刘越侯平全娟花辽宁中医药大学辽宁省沈阳市110000 沈阳市第四人民医院中医科辽宁省沈阳市110031 沈阳医学院中医教研室辽宁省沈阳市110031 辽宁中医药大学附属医院辽宁省沈阳市110000 广东医科大学附属医院广东省湛江市524000

背景:目前,如何促进细胞扩增、减少细胞损失、提高细胞归巢率、减少细胞凋亡是人脐带间充质干细胞临床前研究的主要问题。人参皂苷Rg1可在体外或体内促进间充质干细胞在不同微环境中的增殖、分化,其可能是提高人脐带间充质干细胞移植效... 详细信息

背景:目前,如何促进细胞扩增、减少细胞损失、提高细胞归巢率、减少细胞凋亡是人脐带间充质干细胞临床前研究的主要问题。人参皂苷Rg1可在体外或体内促进间充质干细胞在不同微环境中的增殖、分化,其可能是提高人脐带间充质干细胞移植效率的候选药物。目的:探讨人脐带间充质干细胞共培养联合人参皂苷Rg1对戊巴比妥钠诱导的心衰细胞模型的影响。方法:将H9C2细胞分为5组:对照组、戊巴比妥钠组、人脐带间充质干细胞组、人参皂苷Rg1组、人脐带间充质干细胞+人参皂苷Rg1组。对照组H9C2细胞用正常DMEM培养基培养24 h,其他组H9C2细胞用含0.8%戊巴比妥钠的DMEM培养基培养7 min构建心衰细胞模型。建模后,分别用人脐带间充质干细胞、人参皂苷Rg1单独或共同处理。采用CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,按试剂盒说明检测Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性,ELISA测定上清液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6水平,RT-qPCR测定细胞中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6、Bax和Bcl-2 mRNA表达,Western blot测定细胞中Bax、Bcl-2、Toll样受体4、p65和p-p65蛋白表达。结果与结论:①与戊巴比妥钠组比较,人脐带间充质干细胞组、人参皂苷Rg1组和人脐带间充质干细胞+人参皂苷Rg1组H9C2细胞活力和EdU阳性率升高,TUNEL阳性率以及Bax mRNA和蛋白表达降低,Bcl-2 mRNA和蛋白表达升高,Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性降低,Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性升高,H9C2细胞上清液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6水平降低,H9C2细胞中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6 mRNA表达降低,Toll样受体4和p-p65蛋白表达降低,差异均有显著性意义(P<0.05);②与人脐带间充质干细胞组和人参皂苷Rg1组比较,人脐带间充质干细胞+人参皂苷Rg1组上述指标进一步改善(P<0.05)。结果表明:人脐带间充质干细胞联合人参皂苷Rg1提高了戊巴比妥钠诱导的心衰细胞活力,并抑制了Toll样受体4/核因子κB通路介导的炎症。

关键词：人脐带间充质干细胞 H9C2细胞心力衰竭人参皂苷Rg1 戊巴比妥钠 Toll样受体4 核因子κB

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探讨开心散改善阿尔茨海默病的作用机制

中国实验方剂学杂志 2025年第1期 20-29页

作者：何晓明王晓彤闵冬雨王欣欣程美佳刘勇明鞠业涛杨雅丽袁常斌于畅洋张力辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院

目的：基于网络药理学、分子对接及动物实验验证，探讨开心散治疗阿尔茨海默病（AD）的作用机制。方法：(1)采用中药系统药理数据分析平台（TCMSP）和中医药百科全书（ETCM）数据库获取开心散的活性成分及靶点；利用GeneCards、在线人... 详细信息

目的：基于网络药理学、分子对接及动物实验验证，探讨开心散治疗阿尔茨海默病（AD）的作用机制。方法：(1)采用中药系统药理数据分析平台（TCMSP）和中医药百科全书（ETCM）数据库获取开心散的活性成分及靶点；利用GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、TTD、PharmGKB和DrugBank数据库获取AD的相关靶点；对开心散的活性成分作用靶点与AD相关靶点取交集（共同靶点）；STRING数据库对共同靶点进行网络互作分析，构筑蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络；应用Cytoscape内的CytoNCA插件筛选出核心靶点；Metascape平台执行基因本体（GO）功能富集分析及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析；借助Cytoscape 3.8.2建立“药物-活性成分-靶点”互作网络；AutoDock Vina进行分子对接；(2)利用东莨菪碱（SCOP）造模，腹腔注射，每日1次。将32只雄性C57/BL6小鼠随机分为空白（CON）组（0.9%氯化钠，n=8）、模型（SCOP）组（3mg·kg-1·d-1,n=8）、盐酸多奈哌齐组（SCOP3mg·kg-1·d-1+盐酸多奈哌齐3mg·kg-1·d-1,n=8）、开心散组（SCOP 3 mg·kg-1·d-1+开心散6.5 g·kg-1·d-1,n=8）。各组小鼠0.9%氯化钠、开心散或盐酸多奈哌齐灌胃给药，2次/d，连续14 d。采用Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力；苏木素-伊红（HE）染色法观察小鼠海马CA1区病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定小鼠血清乙酰胆碱（ACh）与乙酰胆碱酯酶（AChE）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠海马中信号转导和转录激活因子3(STAT3)、核转录因子（NF）-κB p65蛋白表达水平。结果：(1)共得到开心散73种活性成分，筛选出开心散对治疗AD的潜在作用靶点（共同靶点）578个；关键活性成分：山柰酚、吉九里香碱等；潜在核心靶点：STAT3、NF-κB p65等；GO功能富集分析得到3 124条生物功能、254条细胞构件、461条分子功能；KEGG通路富集分析获得248条通路，主要涉及癌症相关通路、TRP通路、环磷酸腺苷（cAMP）通路、NF-κB通路等；分子对接显示，关键活性成分与目标靶点结合力较稳定。(2)Morris水迷宫实验表示开心散可以改善SCOP诱导的小鼠学习记忆能力；HE染色及ELISA检测结果表明开心散对小鼠中枢神经损伤有改善；Western blot检测表明开心散对SCOP模型小鼠海马组织中NF-κB p65磷酸化与STAT3磷酸化水平有下调作用。结论：开心散可以改善SCOP模型小鼠的认知障碍功能，并且可能通过调节NF-κB p65、STAT3等靶点来参与NF-κB信号通路等，减少海马神经元损伤从而发挥治疗AD的作用。

关键词：开心散阿尔茨海默病网络药理学分子对接东莨菪碱作用机制实验验证

“四相调气”针法治疗颈源性头痛探析:基于从“气机升降”理论

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亚太传统医药 2025年第1期21卷 70-73页

作者：刘盼成泽东陈以国刘紫薇辽宁中医药大学针灸推拿学院辽宁沈阳110847

气机升级出入是人体进行生命活动的基础。人体之气运行于周身,时刻推动着人体的各种生理活动。颈源性头痛是一种常见的慢性疾患,归属于继发性头痛,基于气机升降理论,从整体出发,调理中焦气机,使得脏腑气机有序运行,脏腑气血充足,阴阳调... 详细信息

气机升级出入是人体进行生命活动的基础。人体之气运行于周身,时刻推动着人体的各种生理活动。颈源性头痛是一种常见的慢性疾患,归属于继发性头痛,基于气机升降理论,从整体出发,调理中焦气机,使得脏腑气机有序运行,脏腑气血充足,阴阳调和,濡养局部筋肉及脑窍,从而有效治疗颈源性头痛。通过探讨“四相调气”针法治疗颈源性头痛的临床疗效,旨在为临床治疗颈源性头痛提供新的思路。

关键词：颈源性头痛病因病机脾胃气机升降四相调气脏腑气机

中医药调节肠道菌群治疗多囊卵巢综合征研究进展

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辽宁中医药大学学报 2025年第1期 174-179页

作者：李秋颖周游刘一徐淑颖陈莹张阳王丽娜辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院

多囊卵巢综合征作为一种女性最常见的内分泌疾病，其伴有的胰岛素抵抗，高雄激素血症以及不孕等临床表现严重影响女性的心理及生活。但其病机尚不明确，近年来宏观基因组学等技术的发展，肠道菌群被发现通过改变肠道通透性、参与免疫炎... 详细信息

多囊卵巢综合征作为一种女性最常见的内分泌疾病，其伴有的胰岛素抵抗，高雄激素血症以及不孕等临床表现严重影响女性的心理及生活。但其病机尚不明确，近年来宏观基因组学等技术的发展，肠道菌群被发现通过改变肠道通透性、参与免疫炎症反应、代谢以及肠脑轴等多种途径参与多囊卵巢综合征的发生发展，因此可以通过调节肠道菌群来治疗多囊卵巢综合征。而中医药治疗多囊卵巢综合征有明显疗效，大量研究证实中医药可以通过调节肠道菌群结构，改善肠道屏障，降低炎症损伤，增强肠道黏膜免疫来治疗多囊卵巢综合征。本文总结了近年来研究发现的多囊卵巢综合征患者肠道菌群的改变，参与多囊卵巢综合征发病机制以及中药复方和中药单体通过调节肠道菌群治多囊卵巢综合征的研究，为防治多囊卵巢综合征以及中医药的使用提供参考。

关键词：多囊卵巢综合征肠道菌群中医药

基于超星学习通探讨中医基础理论教学模式改革

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中国中医药现代远程教育 2025年第2期23卷 169-171页

作者：张冰冰尚德阳李佳邓洋洋杨芳孙鑫石岩辽宁中医药大学中医学院中医基础理论教研室辽宁沈阳100847

中医基础理论属于中医学专业基础课中的核心主干课程,是中医院校各专业学生学习中医药学其他各门基础课程和临床课程必修的专业基础理论课程。在传统教学模式下,该课程的重点、难点问题教学效果受限。因此辽宁中医药大学结合超星学习通... 详细信息

中医基础理论属于中医学专业基础课中的核心主干课程,是中医院校各专业学生学习中医药学其他各门基础课程和临床课程必修的专业基础理论课程。在传统教学模式下,该课程的重点、难点问题教学效果受限。因此辽宁中医药大学结合超星学习通平台,对中医基础理论教学模式进行改革,以提高学生学习兴趣、培养其自主学习能力并加深对教学内容的理解和掌握,提高了教学效果。

关键词：超星学习通中医基础理论教学改革

基于指纹图谱结合化学计量分析地骨皮饮片质量评价研究及主要成分含量测定

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辽宁中医药大学学报 2025年第1期27卷 45-50页

作者：庞童奇单雨薇李世征吕延伟袁媛辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110032 辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心辽宁沈阳110847

目的建立11种产地地骨皮指纹图谱,并对地骨皮中地骨皮乙素、地骨皮甲素、东莨菪苷、肉桂酸的含量进行含量测定。方法以Kromasil 100-5C18(4.6 mm×250 mm,5μm)作为该实验的色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.3%三氟乙酸水溶液(B)进行梯度洗脱;... 详细信息

目的建立11种产地地骨皮指纹图谱,并对地骨皮中地骨皮乙素、地骨皮甲素、东莨菪苷、肉桂酸的含量进行含量测定。方法以Kromasil 100-5C18(4.6 mm×250 mm,5μm)作为该实验的色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.3%三氟乙酸水溶液(B)进行梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;紫外检测波长:278 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果20批地骨皮中地骨皮乙素含量范围为(1.5475±1.4817)%,地骨皮甲素含量范围为(0.3737±0.3069)%,东莨菪苷含量范围为(0.0291±0.0247)%,因肉桂酸含量过低且部分产地未检测出肉桂酸,所以不予标注含量范围。11种产地地骨皮共标出8个共有峰,相似度均在0.895以上,通过聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析对20批不同来源的地骨皮进行了区分。结论该实验建立的地骨皮指纹图谱分析方法可信度高,方法学考察符合规定。通过指纹图谱与含量测定相结合,应用化学计量分析方法建立了地骨皮质量评价模型,为更好地促进地骨皮在中医临床方面的应用做出了贡献。

关键词：地骨皮指纹图谱含量测定化学计量分析

蛇床子素对APP/PS1双转基因AD小鼠的治疗作用

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中国新药杂志 2017年第21期26卷 2573-2577页

作者：王雅萌教亚男闫宇辉李少恒宋捷王玉莹李秀丽杨静娴辽宁中医药大学药理教研室大连116000

目的:研究蛇床子素对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠的治疗作用。方法:将6月龄的雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组与蛇床子素组,同月龄的雄性C57BL/6小鼠作为阴性对照组;水迷宫法检测各组小鼠的学习记忆能力;HE及尼氏染色... 详细信息

目的:研究蛇床子素对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠的治疗作用。方法:将6月龄的雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组与蛇床子素组,同月龄的雄性C57BL/6小鼠作为阴性对照组;水迷宫法检测各组小鼠的学习记忆能力;HE及尼氏染色法检测小鼠脑组织病理损伤情况;免疫荧光组织化学法检测各组小鼠脑组织中Aβ蛋白的表达。结果:与模型组相比,蛇床子素组可以改善AD小鼠的学习记忆能力,减轻小鼠脑组织病理损伤,降低小鼠脑组织内Aβ蛋白表达。结论:蛇床子素对APP/PS1小鼠具有一定的治疗作用,其可以减轻脑内病理损伤,提高小鼠的学习与记忆能力,可能与降低Aβ表达有关。

关键词：蛇床子素阿尔茨海默病学习记忆能力 APP/PS1双转基因小鼠

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信息化背景下学生实验室管理工作创新研究

中国中医药现代远程教育 2025年第1期23卷 203-206页

作者：王建波曲怡薛亚楠辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学高等中医药教育研究及评价中心辽宁沈阳110847

实验室科学化管理是实现其可持续发展与实验室和谐的重要保障,信息化是其中的重要一环。在实验室管理工作过程中,引入信息化的管理模式,有助于突破陈旧管理模式,解决高校仪器设备种类繁多、耗材分布广泛等难题。因此实验室人员应该充分... 详细信息

实验室科学化管理是实现其可持续发展与实验室和谐的重要保障,信息化是其中的重要一环。在实验室管理工作过程中,引入信息化的管理模式,有助于突破陈旧管理模式,解决高校仪器设备种类繁多、耗材分布广泛等难题。因此实验室人员应该充分认识到管理工作中信息化手段的重要性,优化实验教学效率,保障学生实践教学的有序进行。实现以完善实验室信息化为主体,促进安全教育、仪器操作、设备管理信息化建设的“一体三翼”信息化建设,对高校开展学生信息化管理、推动教学科研工作发展有重要意义。

关键词：信息化建设高校实验室学生管理