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苓桂术甘汤联合基质金属蛋白酶响应型多柔比星逐级靶向脂质体抗原发性肝癌作用研究

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1155-1163页

作者：孔亮曹慧敏郭睿博张璐李学涛贾连群辽宁中医药大学药学院大连116600 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847

目的:探讨苓桂术甘汤联合基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)响应型多柔比星(doxorubicin,DOX)逐级靶向脂质体抗原发性肝癌的协同增效作用。方法:以HepG2细胞为体外细胞模型,利用在线SynergyFinder软件分析苓桂术甘汤联合MM... 详细信息

目的:探讨苓桂术甘汤联合基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)响应型多柔比星(doxorubicin,DOX)逐级靶向脂质体抗原发性肝癌的协同增效作用。方法:以HepG2细胞为体外细胞模型,利用在线SynergyFinder软件分析苓桂术甘汤联合MMP酶响应型DOX逐级靶向脂质体的协同指数;50只3周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分为2组,空白对照组(n=10)和造模组(n=40)。采用腹腔注射二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)和高脂饮食相结合建立原发性肝癌小鼠模型,模型制备成功后将小鼠分为模型组(Model)、苓桂术甘汤组(LGZGT)、脂质体组(Lip)及联合干预组(LGZGT+Lip),各治疗组小鼠分别灌胃给予苓桂术甘汤,腹腔注射给予脂质体,其余各组予等量生理盐水,连续8周。考察小鼠体重、肝脏指数;甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)水平,谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、γ-谷氨酰转移酶(γ-glutamyl transferase,γ-GT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性;苏木素伊红(hematoxylin eosin,HE)染色、马松(Masson)染色观察肝脏病理变化;免疫组织化学染色、原位末端标记法(terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)染色观察肿瘤细胞增殖、凋亡情况。结果:两药联合协同指数评分结果显示,两药联合应用零相互作用效力(zero interaction potency,ZIP)值为2.697,具有协同增效作用。体内药效学结果显示,苓桂术甘汤,脂质体及联合干预后,均能降低小鼠肝脏指数、AFP和CEA表达水平以及ALT,AKP,AST,γ-GT活性,改善肝脏病理损伤、肝纤维化,抑制肝癌细胞增殖及促进肝癌细胞凋亡,且LGZGT+Lip组的干预能力最强。结论:苓桂术甘汤与MMP响应型DOX逐级靶向脂质体联合应用于原发性肝癌的治疗,具有协同增效作用,为临床原发性肝癌的治疗提供了新思路。

关键词：苓桂术甘汤基质金属蛋白酶多柔比星逐级靶向脂质体原发性肝癌协同增效

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中药治疗糖尿病作用机制研究进展

世界科学技术-中医药现代化 2024年

作者：李红艳戴思思吴威周佳欣陈智慧杨关林张会永辽宁中医药大学中医藏象理论及应用国家教育部重点实验室珠海科技学院辽宁中医药大学附属医院

糖尿病（Diabetes mellitus,DM）是以长期高血糖为主要特征的内分泌代谢性疾病，严重威胁着人类的健康与生活质量，随着我国生活质量的提高以及不健康的生活方式，DM发病率持续升高并趋于年轻化，深入开展降血糖治疗的研究刻不容缓。DM... 详细信息

糖尿病（Diabetes mellitus,DM）是以长期高血糖为主要特征的内分泌代谢性疾病，严重威胁着人类的健康与生活质量，随着我国生活质量的提高以及不健康的生活方式，DM发病率持续升高并趋于年轻化，深入开展降血糖治疗的研究刻不容缓。DM以胰岛素的绝对或相对不足为病理基础，目前尚无根治手段，西医多采用注射胰岛素或口服降糖药物对症治疗，虽然效果显著，但长期使用易产生毒副作用。中药治疗DM具有多途径、多靶点的优势，通过促进胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗、调节糖脂代谢、抗氧化应激等发挥降血糖作用，其疗效显著且毒副反应少。近年来，有关中药及复方对DM动物模型的作用机制研究较多，笔者通过回顾近年来相关文献，对单味中药、中药复方、中药有效成分降血糖作用机制及其相关实验设计等进行系统梳理，从促进胰岛素分泌、抑制糖异生、促进糖原合成、改善胰岛素抵抗、抑制糖苷酶活性、缓解氧化应激损伤、抑制炎症反应和调节肠道菌群等方面对中药降血糖的作用机制研究及实验设计进行归纳总结，以期为中药降血糖更广泛的临床应用及其深入的药效学机制研究提供参考。

关键词：单味药中药复方糖尿病降血糖作用机制

基于“痰湿不孕”探讨多囊卵巢综合征的辨治思路

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辽宁中医杂志 2024年

作者：王亚男李佳吴兆利丛培玮辽宁中医药大学研究生学院辽宁中医药大学针灸推拿学院辽宁中医药大学中医脏象理论及应用国家教育部重点实验室

多囊卵巢综合征是育龄期女性常见的以内分泌系统紊乱为临床特点的一组综合征。本文通过对“痰湿不孕”理论的系统阐释，深入梳析痰湿与多囊卵巢综合征疾病发生的内在关系，认为痰湿贯穿多囊卵巢综合征病程始终，与肝脾肾有密切的关系，... 详细信息

多囊卵巢综合征是育龄期女性常见的以内分泌系统紊乱为临床特点的一组综合征。本文通过对“痰湿不孕”理论的系统阐释，深入梳析痰湿与多囊卵巢综合征疾病发生的内在关系，认为痰湿贯穿多囊卵巢综合征病程始终，与肝脾肾有密切的关系，而痰湿壅塞胞宫是本病发生的关键环节，从而阐述“化痰祛湿”为治疗本病的重要原则。本文从肾虚之痰湿、脾虚之痰湿、肝郁之痰湿、痰湿之瘀阻四个方面对该病进行临证分析论治，并通过一则验案进一步梳理辨治思路，以期为临床提供参考。

关键词：多囊卵巢综合征痰湿不孕辨治

基于“痰湿不孕”探析多囊卵巢综合征的发病机制

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中华中医药学刊 2024年

作者：李佳王亚男吴兆利丛培玮辽宁中医药大学中医脏象理论及应用国家教育部重点实验室辽宁中医药大学针灸推拿学院辽宁中医药大学研究生学院

基于对古代中医“痰湿不孕”理论的阐释，探讨痰湿与多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome， PCOS）的关系，从中西医角度，深入阐析多囊卵巢综合征的发病机制。认为“窠囊之痰”的产生是多囊卵巢形成的特征表现，痰湿阻塞胞宫是... 详细信息

基于对古代中医“痰湿不孕”理论的阐释，探讨痰湿与多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome， PCOS）的关系，从中西医角度，深入阐析多囊卵巢综合征的发病机制。认为“窠囊之痰”的产生是多囊卵巢形成的特征表现，痰湿阻塞胞宫是多囊卵巢综合征的发病关键。痰湿可引发卵巢多囊样的改变和下丘脑-垂体-卵巢轴（hypothalamic-pituitary-ovarianaxis，HPOA）的调控失常，造成机体激素代谢紊乱、糖脂异常，并且诱导氧化应激，同时激发铁死亡。上述机制相互作用，进而影响胞宫生殖功能，卵泡发育障碍，最终导致多囊卵巢综合征的发生。

关键词：多囊卵巢综合征痰湿不孕发病机制

基于铁死亡探讨“阳气亏虚，脾肾虚冷”与年龄相关疾病内在联系及附子的应用相关研究进展

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中华中医药学刊 2024年

作者：张美菱王琪格王杰裘雪莹宋囡隋国媛贾连群辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室

衰老是细胞持续丢失，组织与器官功能逐步发生退行性改变的生物学过程，在此过程中发病率随年龄增长呈指数级上升的一类疾病称为年龄相关疾病（age related diseases ，ARDs）。人至中年，阳气渐衰，脾肾虚冷为甚，虚与痰瘀毒交织，是A... 详细信息

衰老是细胞持续丢失，组织与器官功能逐步发生退行性改变的生物学过程，在此过程中发病率随年龄增长呈指数级上升的一类疾病称为年龄相关疾病（age related diseases ，ARDs）。人至中年，阳气渐衰，脾肾虚冷为甚，虚与痰瘀毒交织，是ARDs发生的关键病机。铁死亡属于铁依赖性非凋亡程序性死亡，年龄相关的铁稳态和氧化还原失衡使其在ARDs发生发展中成为关键环节，是从脾肾论治ARDs现代生物学内涵的重要组成部分，包含“脾阳不足，运化无主”与线粒体铁稳态失衡相关性、“肾阳失煦，元气失化”与氧化还原失衡相关性两个方面。以铁死亡为切入点丰富中医理论对ARDs的认识，并对于近年来附子在临床及基础研究中的进展进行总结，旨在为衰老水平相关疾病的中西医机制研究提供新思考。

关键词：年龄相关性疾病阳气亏虚,脾肾虚冷铁死亡机制附子

基于EETs介导的细胞焦亡探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响

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中国药房 2024年第12期35卷 1437-1442页

作者：赵娜隋国媛孟嘉伟吕美君贾连群辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847

目的探讨化瘀祛痰方对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响及机制。方法将30只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组[20 g/(kg·d)]和瑞舒伐他汀组[1.55 mg/(kg·d)],每组10只,另取10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。ApoE-/-小鼠喂... 详细信息

目的探讨化瘀祛痰方对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响及机制。方法将30只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组[20 g/(kg·d)]和瑞舒伐他汀组[1.55 mg/(kg·d)],每组10只,另取10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。ApoE-/-小鼠喂饲高脂饲料12周复制AS模型。造模成功后,各组小鼠灌胃相应药物或生理盐水,每日1次,连续4周。末次给药后,检测各组小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、5,6-环氧二十碳三烯酸(5,6-EET)、8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18水平,主动脉组织中核因子κB抑制蛋白(IκB)、核因子κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平和IκB、NF-κB、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白质(ASC)、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、IL-1β、IL-18蛋白表达水平,并观察主动脉组织形态学变化。结果与模型组比较,化瘀祛痰方组及瑞舒伐他汀组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-18水平,主动脉组织中IκB、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平以及IκB、NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),血清中5,6-EET、8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET水平均显著升高(P<0.05);主动脉粥样斑块明显减少。结论化瘀祛痰方可能通过EETs介导细胞焦亡发挥抗AS作用。

关键词：化瘀祛痰方动脉粥样硬化细胞焦亡环氧二十碳三烯酸

基于miR-34a/SIRT1/PGC-1α通路探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的作用机制

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时珍国医国药 2024年第1期35卷 17-20页

作者：王翊丞贾连群隋国媛王杰张琦王琪格蔡浩冉辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的以miR-34a/SIRT1/PGC-1α信号通路为切入点探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法将C57BL/6J野生型小鼠7只作为空白对照组,21只ApoE^(-/-)AS小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、瑞舒伐他汀组,每组7只。... 详细信息

目的以miR-34a/SIRT1/PGC-1α信号通路为切入点探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法将C57BL/6J野生型小鼠7只作为空白对照组,21只ApoE^(-/-)AS小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、瑞舒伐他汀组,每组7只。空白对照组小鼠给予正常饮食,模型组、辛伐他汀组和化瘀祛痰方组小鼠给予高脂饲料。8周后,辛伐他汀组和化瘀祛痰方组小鼠灌胃相应药物;空白对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水。全自动生化分析仪测定肝脏TC、TG、 HDL、 LDL水平;试剂盒检测肝脏游离脂肪酸含量;HE染色法,油红O染色观察肝脏组织形态学变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定miR-34a、SIRT1、PPAR-α、PGC-1α及CPT1AmRNA表达水平;Western Blot检测各组小鼠肝脏SIRT1、PPAR-α、PGC-1α、CPT1A蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组ApoE^(-/-)小鼠血清、TG、TC及LDL-C水平升高(P<0.05),HDL-C水平降低(P<0.05);游离脂肪酸含量升高;脂质沉积明显,肝细胞肿胀严重,存在大量脂滴;miR-34a基因表达水平降低(P<0.05),SIRT1、PPAR-α、PGC-1α、CPT1A蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,化瘀祛痰方组以及瑞舒伐他汀组ApoE^(-/-)小鼠血清TG、TC和LDL-C水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05);游离脂肪酸含量降低;脂质沉积情况改善,肝脏细胞肿胀明显减轻,脂滴分布明显减少;游离脂肪酸含量下降;miR-34a基因表达水平升高(P<0.05);SIRT1、PPAR-α、PGC-1α和CPT1AmRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论化瘀祛痰方可能通过调控miR-34a/SIRT1/PGC-1α信号通路促进ApoE^(-/-)AS小鼠脂肪酸β氧化,改善ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积情况,进而防治动脉粥样硬化的发生发展。

关键词：动脉粥样硬化脂肪酸β氧化 miR-34a SIRT1 化瘀祛痰方

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基于冠状动脉CT血管成像影像组学的稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证鉴别研究

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北京中医药大学学报 2024年第4期47卷 545-554页

作者：魏东升齐佳杰刘孝生李路珍李涵刘雨婷邓成康戴旭赵宝英张哲辽宁中医药大学第一临床学院沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁中医药大学附属医院

目的应用影像组学技术构建稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证鉴别诊断模型。方法收集2021年1月—2022年1月辽宁中医药大学附属医院91例行冠状动脉CT血管成像的稳定型心绞痛患者,其中痰瘀互结证47例、气虚血瘀证44例,采用分层随机抽样... 详细信息

目的应用影像组学技术构建稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证鉴别诊断模型。方法收集2021年1月—2022年1月辽宁中医药大学附属医院91例行冠状动脉CT血管成像的稳定型心绞痛患者,其中痰瘀互结证47例、气虚血瘀证44例,采用分层随机抽样方法将患者按照7∶3的比例分为训练集(64例)与测试集(27例),使用3D-slicer软件提取冠状动脉周围脂肪组织(PCAT)图像影像组学特征。使用主成分分析可视化痰瘀互结证与气虚血瘀证影像组学特征分布情况。采用最小绝对收缩和选择算子回归分析及支持向量机递归特征消除进行特征筛选,使用Logistics多因素回归算法构建鉴别诊断模型,在训练集与测试集中应用接受者操作特征(ROC)曲线对模型进行验证,评价影像组学特征鉴别痰瘀互结证与气虚血瘀证的效能。使用Spearman相关分析进行鉴别特征与临床理化数据的相关性分析。结果3D-slicer软件共提取出837个PCAT图像影像组学特征。主成分分析中第一主成分和第二主成分分别解释了77.9%和8.1%的总体变异,两证候组间存在较为明显的分离趋势。经过特征筛选,7个影像组学特征用于构建痰瘀互结证与气虚血瘀证的鉴别诊断模型。训练集中鉴别诊断模型的ROC曲线下面积(AUC)为0.844,测试集中AUC为0.834。Spearman相关性分析表明,鉴别特征与心肌肌钙蛋白I、中性粒细胞、甘油三酯、总胆固醇及白细胞具有明显相关性。结论基于PCAT的CT影像组学模型对稳定型心绞痛痰瘀互结证与气虚血瘀证具有较高的鉴别作用。

关键词：稳定型心绞痛影像组学冠状动脉CT血管成像鉴别诊断痰瘀互结证气虚血瘀证

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化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢的影响

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中华中医药学刊 2024年第2期42卷 93-97,I0019页

作者：赵娜隋国媛王杰曹慧敏陈丝贾连群辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的基于CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢探讨化瘀祛痰方防治血脂异常的机制。方法32只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只。除空白对照组外,其他各组给予高脂饲料喂饲,建立高脂血症模型。于第13周开始,... 详细信息

目的基于CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢探讨化瘀祛痰方防治血脂异常的机制。方法32只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只。除空白对照组外,其他各组给予高脂饲料喂饲,建立高脂血症模型。于第13周开始,化瘀祛痰方组给予化瘀祛痰方灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀灌胃,空白对照组、模型组给予相应体积的生理盐水灌胃,每日1次,灌胃4周。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平;HE染色观察肝脏组织病理变化;Elisa检测各组大鼠肝脏14,15-环氧二十碳三烯酸(14,15-epoxyeicosatrienoic acid,14,15-EET)水平;Real time RT-PCR检测肝脏组织细胞色素P450表氧化酶2J3(Cytochrome P450 oxidase 2J3,CYP2J3)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(Carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1)mRNA水平;Western blot法检测肝脏组织CYP2J3、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-actived protein kinase,AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACC)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、CPT-1蛋白水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.05);肝脏脂质沉积显著,可见大量脂滴;肝脏组织内14,15-EET含量显著降低(P<0.01);肝脏CYP2J3、CPT-1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC显著降低(P<0.01)。与模型组比较,经化瘀祛痰方及辛伐他汀干预后,大鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著降低(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平显著升高(P<0.05);肝脏脂质沉积情况明显改善,脂滴数明显减少;肝脏组织内14,15-EET水平显著升高(P<0.01);肝脏CYP2J3、CPT-1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01),p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论化瘀祛痰方可有效改善高脂血症大鼠血脂异常,减轻肝脏脂质沉积情况,其机制可能与CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢密切相关。

关键词：血脂异常环氧二十碳三烯酸脂肪酸代谢化瘀祛痰方

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