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水貂阿留申病毒的微滴式数字PCR方法的建立及初步应用

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中国预防兽医学报 2024年第2期46卷 164-170页

作者：蔡晓庆姜世金张金叶孙圣福王贵升山东省动物疫病与预防控制中心山东济南250100 山东农业大学山东泰安271018 北京市华都峪口禽业有限责任公司北京平谷101200 潍坊市动物疫病预防控制中心山东潍坊261061

为建立水貂阿留申病毒(AMDV)微滴式数字PCR (ddPCR)检测方法,本研究根据AMDV VP2基因的保守区设计特异性引物和探针,通过PCR扩增AMDV VP2基因并克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒p MD19-T-AMDV,并经PCR和测序鉴定后利用该质粒标准品作为... 详细信息

为建立水貂阿留申病毒(AMDV)微滴式数字PCR (ddPCR)检测方法,本研究根据AMDV VP2基因的保守区设计特异性引物和探针,通过PCR扩增AMDV VP2基因并克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒p MD19-T-AMDV,并经PCR和测序鉴定后利用该质粒标准品作为模板,通过各反应条件的优化,初步建立了检测AMDV的ddPCR方法。分别以AMDV、水貂肠炎细小病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒、水貂流感病毒基因组为模板,按照本研究建立的ddPCR方法检测,评估其特异性;将1.43×10^(7)拷贝/μL~1.43×10^(0)拷贝/μL的重组质粒标准品作为模板,采用优化后的ddPCR和文献中的荧光定量PCR (qPCR)检测,评估该方法的敏感性;分别以不同浓度的重组质粒标准品作为模板,采用优化后的ddPCR分别进行批内和批间重复性试验,以变异系数(CV)评估该方法的重复性。优化结果显示,该方法的最佳引物终浓度为400 nmol/L (1.2μL)、探针终浓度为200 nmol/L (0.6μL)、退火温度为60℃。特异性试验结果显示,该方法仅可检测到AMDV和质粒标准品,而其他相关病毒均为阴性结果。敏感性试验结果显示,该方法对重组质粒标准品的检测限为1.43拷贝/μL,qPCR对质粒标准品的检测限为1.43×10^(2)拷贝/μL,前者比后者的敏感性高100倍。重复性试验结果,批内和批间重复性试验的变异系数均小于3%。对采集的70份病貂肝脏、脾、肾脏、环境拭子、肛拭子样品进行ddPCR和qPCR检测,结果显示,ddPCR对AMDV的检出率为24.28%(17/70);qPCR的检出率为15.7%(11/70),二者的阳性符合率为64.7%,阴性符合率为89.83%,总符合率为91.42%。上述结果表明,本研究建立的ddPCR方法特异性强、敏感性高和重复性好,可以检测各种临床样品及含量极低样品中的AMDV,为AMDV早期感染的检测、流行病学调查及AMD的防控提供有力技术手段。

关键词：微滴式数字PCR 检测水貂阿留申病毒

2023年成都地区猪圆环病毒3型流行病学调查及遗传进化分析

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中国畜牧兽医 2024年第10期 4531-4539页

作者：黄云川范磊林鑫雷玉王兴丽徐志文岳建国成都市动物疫病预防控制中心四川农业大学动物医学院

[目的]调查分析成都地区猪圆环病毒3型(PCV3)的流行与分子遗传进化情况。[方法]试验于2023年1月至2023年12月从成都地区4家无害化处置场采集病死猪组织样品2 113份,采用实时荧光定量PCR法检测病料组织PCV3感染情况。设计3对引物对阳性... 详细信息

[目的]调查分析成都地区猪圆环病毒3型(PCV3)的流行与分子遗传进化情况。[方法]试验于2023年1月至2023年12月从成都地区4家无害化处置场采集病死猪组织样品2 113份,采用实时荧光定量PCR法检测病料组织PCV3感染情况。设计3对引物对阳性样品的PC V3基因组序列进行PCR扩增并测序。通过在线软件拼接PCV3基因组序列、截取ORF2基因序列并推导其氨基酸序列(Cap),进行相似性比对并构建遗传进化树,分析Cap氨基酸序列突变情况。[结果]组织病料检测结果显示,2 113份病死猪组织样品的PCV3阳性率为27.21%(575/2 113)。根据PCR扩增测序结果拼接获得了15株PCV3基因组序列。相似性比对分析显示,15株PCV3核苷酸序列相似性为97.2%～100%,ORF2基因核苷酸序列相似性为97.2%～100%,Cap氨基酸序列相似性为96.7%～100%。遗传进化树结果显示,12株PCV3属于PCV3a亚型,3株属于PCV3c亚型。15株Cap氨基酸序列中共13株发生了突变,共存在13个突变位点。[结论]成都地区PCV3主要为PCV3a和PCV3c亚型,基因组相似性高,序列较保守,Cap氨基酸突变位点主要集中在抗原表位。本试验结果提示该地区需制定科学的防控政策,防止病毒蔓延。

关键词：猪圆环病毒3型(PCV3) 流行病学分子遗传进化

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发酵柴胡茎叶对蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道健康的影响

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动物营养学报 2024年第3期36卷 1628-1640页

作者：王磊卿郝科阳马慧张封东冯嘉李景河向玉军侯红斌闵育娜西北农林科技大学动物科技学院杨陵712100 铜川市动物卫生监督所铜川629000 旬邑县动物疫病预防控制中心旬邑711300

本试验旨在研究饲粮中添加发酵柴胡茎叶对蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道健康的影响。选取384只35周龄京粉6号蛋鸡,随机分为4组,每组8个重复,每个重复12只鸡。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加5%(TM5%组)、10%(TM... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中添加发酵柴胡茎叶对蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道健康的影响。选取384只35周龄京粉6号蛋鸡,随机分为4组,每组8个重复,每个重复12只鸡。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加5%(TM5%组)、10%(TM10%组)和15%发酵柴胡茎叶(TM15%组)的试验饲粮。预试期2周,正试期12周。结果表明:1)与CON组相比,TM5%、TM10%和TM15%组的37~48周龄平均蛋重显著提高(P<0.05),TM5%和TM10%组的41~44周龄和45~48周龄平均蛋重显著提高(P<0.05),TM10%组的蛋壳厚度显著提高(P<0.05)。2)与CON组相比,TM15%组的十二指肠绒毛高度和绒隐比显著提高(P<0.05)。3)与CON组相比,TM5%、TM10%和TM15%组的十二指肠和空肠超氧化物歧化酶(SOD)活性显著提高(P<0.05),TM10%和TM15%组的十二指肠和空肠丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),TM10%和TM15%组的十二指肠和回肠过氧化氢酶(CAT)活性显著提高(P<0.05),TM10%组的十二指肠和空肠总抗氧化能力(T⁃AOC)显著提高(P<0.05)。4)与CON组相比,TM5%、TM10%和TM15%组的盲肠微生物Chao1、Observed⁃Otus和Shannon指数显著提高(P<0.05),盲肠另支菌属(Alistipes)相对丰度显著降低(P<0.05);TM15%组的盲肠未分类的梭菌纲UCG⁃014(Clostridia_UCG⁃014_unclassified)相对丰度显著降低(P<0.05),沙特尔沃思菌属(Shuttleworthia)和普雷沃氏菌科UCG⁃001(Prevotellaceae_UCG⁃001)相对丰度显著升高(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加发酵柴胡茎叶可以调节肠道微生物区系,改善肠道形态和抗氧化性能,提高蛋重和蛋壳厚度。结合生产性能、蛋品质和肠道抗氧化性能,蛋鸡饲粮中发酵柴胡茎叶的适宜添加水平为10%。

关键词：发酵柴胡茎叶蛋鸡生产性能蛋品质肠道微生物

2023 年茂名地区高致病性猪蓝耳病监测情况与分析

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农家科技 2024年第9期 73-75页

作者：黄伟智茂名市动物疫病预防控制中心

高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征(俗称蓝耳病)病毒变异株引起的急性高致死性猪疫病,临床表现为不同年龄的猪体温升高,可达41℃以上;躯体发红或出现斑块、耳朵发蓝或黑色坏死斑;眼结膜炎、眼睑水肿;咳嗽、气喘等呼吸道症状;部分... 详细信息

高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征(俗称蓝耳病)病毒变异株引起的急性高致死性猪疫病,临床表现为不同年龄的猪体温升高,可达41℃以上;躯体发红或出现斑块、耳朵发蓝或黑色坏死斑;眼结膜炎、眼睑水肿;咳嗽、气喘等呼吸道症状;部分猪后躯无力、不能站立或共济失调等神经症状。高致病性猪蓝耳病在茂名地区对养猪业造成较大影响,近年因疫苗的有效应用,及猪场防疫措施扎实,该病得到有效遏制,但自该病不再纳入强制免疫病种后,免疫密度及免疫抗体合格率一直不高,存在流行风险。现将茂名地区该病2023年监测数据与历年数据作出对比分析,并提出预警及防控措施,以降低该病在茂名地区的流行风险。

关键词：高致病性猪蓝耳病动物疫病监测

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动物疫病净化政策解读以及评估注意事项

养禽与禽病防治 2024年第1期 39-44页

作者：魏巍中国动物疫病预防控制中心北京100000

1动物疫病净化政策解读2021年5月1日修订施行的《动物防疫法》,明确将“净化消灭”纳入动物防疫的方针和要求,随后农业农村部、中国动物疫病预防控制中心分别推出了相应的指导意见与工作文件,意味着我国从法律到行政管理再到组织实施3... 详细信息

1动物疫病净化政策解读2021年5月1日修订施行的《动物防疫法》,明确将“净化消灭”纳入动物防疫的方针和要求,随后农业农村部、中国动物疫病预防控制中心分别推出了相应的指导意见与工作文件,意味着我国从法律到行政管理再到组织实施3个层面已建立了完备的动物疫病净化的政策体系,也标志着我国的动物疫病净化工作进入了新的起点。

关键词：疫病净化动物防疫《动物防疫法》工作文件政策解读动物疫病预防控制注意事项新的起点

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蛋鸡脱肛的发生原因、临床症状与防治措施

畜牧兽医科技信息 2024年第8期 195-197页

作者：李娜刘君毕节市动物疫病预防控制中心

蛋鸡脱肛是在养殖业中常见的一种疾病类型，该疾病严重影响着蛋鸡的生产性能和福利。疾病发生还可能导致蛋的质量下降，甚至会危及蛋鸡的生命。养殖过程中，应结合养殖实际，对蛋鸡脱肛的发生原因、临床症状进行分析，并做好科学防控，... 详细信息

蛋鸡脱肛是在养殖业中常见的一种疾病类型，该疾病严重影响着蛋鸡的生产性能和福利。疾病发生还可能导致蛋的质量下降，甚至会危及蛋鸡的生命。养殖过程中，应结合养殖实际，对蛋鸡脱肛的发生原因、临床症状进行分析，并做好科学防控，降低疾病可能对养殖工作造成的威胁。基于此，本文对蛋鸡脱肛的发生原因、临床症状等进行了探究，并提出了具体的防治措施。本文旨在通过探究，能够为相关疾病的防控起到一定参考作用。

关键词：蛋鸡脱肛发生原因临床症状防治措施

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关于奶牛酮病的病因及诊断治疗分析

新农民 2024年第4期 123-125页

作者：李云鹏绥芬河市动物疫病预防控制中心

本文详细分析我国奶牛酮病的基本情况、病因、发病机理以及患病类型，通过采用观察法、生化法进行诊断，并给予针对性的预防和治疗措施，以供同仁参考。

关键词：奶牛酮病诊断治疗

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奶牛创伤性网胃炎的诊断与治疗探究

新农民 2024年第9期 105-107页

作者：李云鹏绥芬河市动物疫病预防控制中心

创伤性网胃炎是现阶段奶牛养殖产业中较为常见的一类胃部疾病，其主要发病机理为饲料营养价值低且混有小而尖锐的异物，奶牛误食后将导致异物刺入或刺穿网胃壁，使得网胃出现炎症，影响奶牛正常发育、产奶，该病不具备季节性或传染性特... 详细信息

创伤性网胃炎是现阶段奶牛养殖产业中较为常见的一类胃部疾病，其主要发病机理为饲料营养价值低且混有小而尖锐的异物，奶牛误食后将导致异物刺入或刺穿网胃壁，使得网胃出现炎症，影响奶牛正常发育、产奶，该病不具备季节性或传染性特征。基于此，文章主要从病因、发病原理、症状、诊断、治疗措施、预防等方面进行综合分析，以期充分掌握奶牛创伤性网胃炎的实际诊断及治疗方式，做到早发现早医治，降低奶牛死亡率，进一步保障奶牛养殖人员的实际经济效益。

关键词：奶牛创伤性网胃炎诊断与治疗

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福州市兽医实验室发展变化趋势及工作方向

中国动物检疫 2024年第9期41卷 41-44页

作者：邱艳红福州市动物疫病预防控制中心

为全面了解2014年以来福州市辖区兽医实验室发展状况,对全市兽医系统实验室及第三方兽医实验室的资质状况、生物安全级别、人员素质水平、硬件设施、检测能力和检测量等6方面基本情况进行汇总分析。针对基层专职检测人员偏少、仪器设备... 详细信息

为全面了解2014年以来福州市辖区兽医实验室发展状况,对全市兽医系统实验室及第三方兽医实验室的资质状况、生物安全级别、人员素质水平、硬件设施、检测能力和检测量等6方面基本情况进行汇总分析。针对基层专职检测人员偏少、仪器设备维护保养不到位、检测队伍能力建设亟待加强、第三方兽医实验室管理不规范等方面问题,提出进一步优化实验室配置、加强仪器设备管理、完善教育培训机制、健全监督管理制度等未来工作方向,以期为全市动物疫病防控工作打下坚实基础,为兽医实验室改革发展提供参考。

关键词：福州市兽医实验室能力提升