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陕西省汉中市食品动物源性大肠埃希菌mcr-1携带菌株流行特征和分子传播机制

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中国热带医学 2024年

作者：陶浚齐翁蕊侯轩张微王辉牟建邓明惠周梦蓉辜依海三二〇一医院微生物免疫科浙江大学

目的了解陕西省汉中市食品动物源性大肠埃希菌多黏菌素耐药基因mcr-1的流行特征和分子传播机制，掌握陕西省汉中市mcr-1阳性大肠埃希菌的流行现状，为防控大肠埃希菌多黏菌素耐药基因mcr-1在社区和医院的传播提供科学依据。方法 2019... 详细信息

目的了解陕西省汉中市食品动物源性大肠埃希菌多黏菌素耐药基因mcr-1的流行特征和分子传播机制，掌握陕西省汉中市mcr-1阳性大肠埃希菌的流行现状，为防控大肠埃希菌多黏菌素耐药基因mcr-1在社区和医院的传播提供科学依据。方法 2019年11月-2020年5月于陕西省汉中市7家不同大型超市随机采集冷冻整鸡和猪肉馅，对其进行大肠埃希菌分离鉴定。通过PCR方法筛查mcr-1基因，对mcr-1阳性菌株通过微量肉汤稀释法进行药敏试验，基于全基因组测序、S1-脉冲电场凝胶电泳（pulsed-fieldgelelectrophoresis，PFGE）和Southernblot对mcr-1进行定位。结果 7家不同大型超市共随机采集到159份样本中检出77株大肠埃希菌，检出11株携带mcr-1的菌株，阳性率为14.29%（11/77）。11株mcr-1阳性菌均为多重耐药菌，对多黏菌素类的MIC≥2mg/L（11/11），对氨苄西林、链霉素、四环素和氯霉素耐药率为100%（11/11），且均为产超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrumbeta-lactamases，ESBLs）菌株；对碳青霉烯类和头孢西丁均敏感，对喹诺酮类药物环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为90.91%。在10株mcr-1阳性菌质粒上杂交到了mcr-1，质粒大小分布约为60kb和220kb。11株mcr-1阳性大肠埃希菌属于9个ST型，含一个新的ST型。所有菌株除携带多黏菌素耐药基因mcr-1外，至少还携带一个ESBLs基因，以blaCTX-M-55为主（8/11，72.73%）。携带mcr-1的质粒分型为IncI2（5/11，45.45%）和IncHI2（5/11，45.45%），一株菌mcr-1位于染色体。结论本研究检出的mcr-1阳性大肠埃希菌均为多重耐药菌且产ESBLs，以blaCTX-M-55为主，mcr-1可通过质粒和染色体传播。

关键词：食品动物源性大肠埃希菌 mcr-1 多黏菌素多重耐药

miR-515-5p靶向ITLN2对子宫内膜基质细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第1期44卷 44-50页

作者：刘庄孙颖王钦张琳李泽武济宁医学院附属医院生殖医学科济宁272029 济宁医学院附属医院麻醉科济宁272029

目的探讨微小RNA-515-5p(miR-515-5p)是否可靶向内凝集素2(lectin 2,ITLN2)影响子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)的增殖、迁移和侵袭。方法收集2020年12月至2021年12月期间在济宁医学院附属医院生殖医学科就诊治疗的24例EMT患者的在位内膜和异位内膜组织及18例行腹腔镜手术的非EMT患者的正常内膜组织。RT-qPCR检测内膜组织miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting法检测内膜组织中ITLN2蛋白表达量。原代分离、培养EMT患者的ESCs,利用Lipofectamine 2000试剂转染ESCs,并将其分为空白组、miR-515-5p抑制剂组、miR-515-5p抑制剂阴性对照(negative control,NC)组,CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕愈合和Transwell实验分别评估细胞迁移、侵袭能力;双荧光素酶报告基因检测miR-515-5p和ITLN2的靶向关系;RT-qPCR技术检测各组细胞miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting技术检测ITLN2、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白相对表达量。结果EMT患者在位和异位子宫内膜组织miR-515-5p相对表达量显著高于正常子宫内膜组织(均P生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测,ITLN2为miR-515-5p的潜在靶基因。结论降低miR-515-5p水平可抑制EMT患者ESCs增殖、迁移和侵袭,这可能与靶向提高ITLN2表达进而降低炎症因子水平有关。

关键词：子宫内膜异位症微小RNA-515-5p 内凝集素2 子宫内膜基质细胞增殖迁移侵袭

CircCCND1调节miR-340-5p/TGIF1轴对H446肺癌细胞恶性生物学行为的影响

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中国肺癌杂志 2024年第3期27卷 161-169页

作者：董怡朱翠敏柳新赵继伟李青山承德医学院附属医院肿瘤科承德067000

背景与目的肺癌是常见的肺部恶性肿瘤,探究肺癌发生发展的分子机制是当前研究的热点。环状RNA细胞周期蛋白D1 (circular RNA Cyclin D1,CircCCND1)在肺癌中高表达,可能是治疗肺癌的潜在靶点。本研究旨在探讨CircCCND1调节miR-340-5p/... 详细信息

背景与目的肺癌是常见的肺部恶性肿瘤,探究肺癌发生发展的分子机制是当前研究的热点。环状RNA细胞周期蛋白D1 (circular RNA Cyclin D1,CircCCND1)在肺癌中高表达,可能是治疗肺癌的潜在靶点。本研究旨在探讨CircCCND1调节miR-340-5p/转化生长因子β诱导因子同源框1 (transforming growth factor β-induced factor homeobox 1,TGIF1)轴对肺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B及人肺癌H446细胞中CircCCND1、miR-340-5p及TGIF1 mRNA表达。将体外培养的H446细胞分为对照组、CircCCND1 siRNA组、miR-340-5p mimics组、阴性对照组、CircCCND1 siRNA+miR-340-5p inhibitor组,检测细胞增殖、线粒体膜电位、凋亡、迁移和侵袭情况,以及各组细胞CircCCND1、miR-340-5p、TGIF1 mRNA、BCL2相关X蛋白(BCL2-associated X protein,Bax)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved Caspase-3)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、TGIF1蛋白表达,并验证miR-340-5p与CircCCND1、TGIF1的靶向关系。结果与BEAS-2B细胞相比,H446细胞CircCCND1、TGIF1 mRNA升高,miR-340-5p表达降低(P生物学行为的抑制作用。CircCCND1可能靶向下调miR-340-5p,miR-340-5p可能靶向下调TGIF1。结论敲低CircCCND1可抑制肺癌H446细胞恶性行为,其作用可能是通过调控miR-340-5p/TGIF1轴实现的。

关键词： CircCCND1 miR-340-5p/TGIF1 肺肿瘤恶性生物学行为

多参数流式细胞术检测人骨髓标本中非肿瘤性异常细胞表型研究

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中华检验医学杂志 2024年第7期47卷 740-746页

作者：陈曼王榕周静傅旻婧赵玮同格乐王爱先宫美维王卉河北燕达陆道培医院检验科廊坊065201 贵州医科大学检验医学院临床微生物与免疫学教研室贵阳550000 北京陆道培医院病理与医学检验科北京100176

目的:分析多参数流式细胞术(MFC)检测骨髓标本中非肿瘤性异常表型相关疾病,包括意义不明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)、单克隆B细胞增多症(MBL)、Fcγ受体Ⅲ类B(FcγRⅢB)缺失、CD36缺失等的表型特征。方法:回顾性观察性研究。选取2020... 详细信息

目的:分析多参数流式细胞术(MFC)检测骨髓标本中非肿瘤性异常表型相关疾病,包括意义不明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)、单克隆B细胞增多症(MBL)、Fcγ受体Ⅲ类B(FcγRⅢB)缺失、CD36缺失等的表型特征。方法:回顾性观察性研究。选取2020年1月3日至2024年3月31日于河北燕达陆道培医院进行骨髓白血病/淋巴瘤一步法MFC筛查肿瘤性疾病的24 864例患者。收集患者一般临床资料以及MFC结果。根据年龄分为<45岁组(11 495例)、45~<60岁组(5 322例)、≥60岁组(7 081例);按疾病性质分为良性疾病组(8 336例)、恶性疾病组(15 562例)、其他组(966例)。分析各组骨髓标本中非肿瘤性异常表型的发生情况。结果:MGUS、MBL、FcγRⅢB缺失、CD36缺失的发生率分别为0.072%(18/24 864)、0.511%(127/24 864)、0.221%(55/24 864)、0.004%(1/24 864)。恶性疾病组MBL的发病率低于良性疾病组( P<0.001),MGUS的发病率高于良性疾病组( P=0.034)。良性疾病组中各疾病类型的MBL发生率比较,差异有统计学意义( P<0.001),其中全血细胞减少患者中MBL发生率最高为2.72%(48/1 765);恶性疾病组中,各疾病类型的MBL、MGUS发生率比较,差异均有统计学意义( P均<0.001),其中骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性疾病患者发生率均最高,分别为1.95%(3/154)、1.30%(2/154)。结论:应用MFC进行白血病/淋巴瘤一步法检测的非肿瘤性异常细胞表型特征存在一定差异,对疾病的筛查具有一定的借鉴意义。

关键词：流式细胞术意义不明的单克隆免疫球蛋白血症单克隆B细胞增多症 Fcγ受体Ⅲ类B缺失

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结直肠癌中自然杀伤细胞表型及功能初探

上海交通大学学报（医学版） 2024年第6期44卷 713-722页

作者：冯昫皎刘健悦戚炀炀孙晶沈蕾上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海市免疫学研究所上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科上海市微创外科临床医学中心上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院免疫与疾病研究中心上海200025

目的·初步探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肿瘤组织中免疫微环境的组成,分析自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)在CRC中的比例、表型及功能特征。方法·收集CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和匹配的CRC患者外周血样本... 详细信息

目的·初步探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肿瘤组织中免疫微环境的组成,分析自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)在CRC中的比例、表型及功能特征。方法·收集CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和匹配的CRC患者外周血样本,消化组织制备成单细胞悬液,使用流式细胞术检测各类免疫细胞比例,通过t-SNE(t-distributed stochastic neighbor embedding)降维与统计学分析,描述CRC肿瘤免疫微环境的特征。运用流式细胞术检测肿瘤组织和癌旁组织中NK细胞表面活化分子的表达情况,包括CD16、CD27、CD69、晚期活化标志人类白细胞抗原-DR(human leukocyte antigen-DR,HLA-DR)、细胞耗竭标志T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域3(T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3,TIM-3)。运用流式细胞术探究CD38分子在NK细胞上的表达水平,描述CD38highNK细胞的表型特征。利用细胞刺激试剂盒激活NK细胞,通过流式细胞术胞内染色检测NK细胞的功能,包括细胞因子γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)的表达水平。结果·收集25例CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和15例匹配的CRC患者外周血样本。CRC肿瘤组织中包含T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及髓系细胞等免疫细胞。与癌旁组织相比,肿瘤组织中T淋巴细胞(P=0.000)和髓系细胞(P=0.026)的比例显著升高,NK细胞(P=0.007)的比例显著降低,B淋巴细胞比例差异无统计学意义。与癌旁组织相比,肿瘤组织中NK细胞表面CD27(P=0.000)、CD69(P=0.001)表达水平显著降低,同时CD16(P=0.008)、HLA-DR(P=0.000)和TIM-3(P=0.024)的表达水平显著升高,呈现晚期活化和耗竭表型。NK细胞按CD38的表达水平可分为CD38highNK和CD38lowNK 2个亚群。与癌旁组织相比,肿瘤组织CD38highNK(P=0.003)比例显著降低,CD38lowNK比例差异无统计学意义。相比CD38lowNK,CD38highNK的CD27高表达,CD16、NKp46、CD57、CD94、HLA-DR和CD158a低表达(均P=0.000),处于早期分化和未活化的状态。肿瘤浸润的NK细胞与癌旁组织相比,分泌细胞因子IFN-γ(P=0.032)、TNF-α(P=0.042)和GM-CSF(P=0.019)的水平显著降低,表明NK细胞杀伤功能受损。结论·CRC患者肿瘤组织中NK细胞浸润减少,早期分化状态的CD38highNK细胞亚群下降,分泌细胞因子的能力下降并呈现耗竭表型。这些结果提示NK细胞在CRC中功能受损,介导的抗肿瘤免疫应答下降。

关键词：自然杀伤细胞结直肠癌 CD38

LncRNA SNHG3/miR-339-5p/PPIB轴对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

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中国老年学杂志 2024年第16期 4044-4049页

作者：李萍张月晓符皓时军利李炳庆承德医学院附属医院消化内科承德医学院附属医院营养科

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)3/miR-339-5p/肽酰脯氨基顺反异构酶(PPI)B轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法以SW620细胞为实验对象，分为：SW620组(未处理的SW620细胞)、si-NC组、si-SNHG3组... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)3/miR-339-5p/肽酰脯氨基顺反异构酶(PPI)B轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法以SW620细胞为实验对象，分为：SW620组(未处理的SW620细胞)、si-NC组、si-SNHG3组、si-SNHG3+NC inhibitor组、si-SNHG3+miR-339-5p inhibitor组、si-SNHG3+pcDNA组、si-SNHG3+pcDNA PPIB组。荧光原位杂交实验和双荧光素酶报告基因检测LncRNA SNHG3、miR-339-5p、PPIB三者的靶向关系；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LncRNA SNHG3、miR-339-5p、PPIB表达；CCK-8检测SW620细胞活性；Transwell试验检测SW620细胞迁移、侵袭；Western印迹检测E-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子(Snail)表达。结果与NC组相比，CRC组LncRNA SNHG3、PPIB相对表达量显著升高，miR-339-5p相对表达量显著下降(P生物学行为。

关键词：长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG3)/miR-339-5p/肽酰脯氨基顺反异构酶(PPI)B轴结直肠癌增殖迁移侵袭

双歧杆菌BB-12后生元对口腔变形链球菌的抑制作用

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中国微生态学杂志 2024年第9期 1031-1034+1040页

作者：谷巍兰玲莉杨光承德医学院附属医院口腔科

目的探讨双歧杆菌BB-12后生元对口腔变形链球菌的抑制作用，为预防和治疗口腔疾病提供新思路。方法本研究将双歧杆菌BB-12后生元与口腔变形链球菌共培养，按不同培养模式分为Control组(变形链球菌阳性对照组)、A组(变形链球菌+双歧杆... 详细信息

目的探讨双歧杆菌BB-12后生元对口腔变形链球菌的抑制作用，为预防和治疗口腔疾病提供新思路。方法本研究将双歧杆菌BB-12后生元与口腔变形链球菌共培养，按不同培养模式分为Control组(变形链球菌阳性对照组)、A组(变形链球菌+双歧杆菌组)、B组(变形链球菌+灭活双歧杆菌组)和C组(变形链球菌+发酵双歧杆菌组)。收集培养24 h后的各组菌体，Trizol法提取菌体总RNA，荧光定量PCR法检测葡糖基转移酶gtfB、gtfC基因、果糖基转移酶ftf基因、葡聚糖结合蛋白gbpB、gbpC基因和组氨酸激酶ciaH、comD基因的表达量。结果与Control组比较，其余3组的口腔变形链球菌gtfB、gtfC、ftf、gbpB、gbpC、ciaH、comD基因表达量均显著降低(均P0.05)。结论双歧杆菌BB-12后生元可能通过下调变形链球菌中与生物膜形成等相关基因的表达，抑制口腔变形链球在口腔黏膜上形成生物膜，防止口腔疾病的发生。

关键词：双歧杆菌BB-12 后生元口腔变形链球菌抑制作用

金荞麦提取物通过ROS/MAPK信号通路途径对结直肠癌细胞抗肿瘤作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 91-98页

作者：许光亚周文月周森林时政成都大学临床医学院/附属医院基础医学院食品与生物工程学院成都610106

目的:探讨金荞麦对人结直肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响,明确其可能的作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞活性,计算半数抑制率(IC50);设置空白组、金荞麦组(2、4、8 mg·L^(-1)),采用克隆形成实验观察金... 详细信息

目的:探讨金荞麦对人结直肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响,明确其可能的作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞活性,计算半数抑制率(IC50);设置空白组、金荞麦组(2、4、8 mg·L^(-1)),采用克隆形成实验观察金荞麦对HCT-116细胞增殖的影响;用流式细胞术检测金荞麦对细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法(Wester blot)检测自噬相关蛋白表达;Wester blot检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化(p)-p38、p-ERK、p-JNK等蛋白的表达;流式细胞仪和荧光显微镜分析活性氧(ROS)的变化,并用ROS清除剂(NAC)进行验证。结果:与空白组比较,金荞麦组HCT-116细胞活性明显降低(P<0.05,P<0.01);金荞麦组HCT-116细胞凋亡率显著升高(P<0.01);自噬相关蛋白泛素结合蛋白(p62)表达降低,自噬特异性基因(Beclin1)、自噬微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)表达明显增强(P<0.05,P<0.01)。与金荞麦组比较,金荞麦+NAC组细胞凋亡率显著降低(P<0.01),相关自噬蛋白Beclin1表达显著降低(P<0.01)、LC3B蛋白表达显著降低(P<0.01)。金荞麦组MAPK通路相关蛋白ERK、JNK表达明显降低(P<0.05,P<0.01),p-ERK、p-JNK表达明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论:金荞麦可抑制HCT-116细胞增殖,诱导细胞凋亡及自噬,作用机制与ROS/MAPK信号通路途径有关。

关键词：金荞麦结直肠癌细胞凋亡自噬活性氧丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路

再生障碍性贫血骨髓微环境脂肪化相关lncRNA的筛选与鉴定

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中国实验血液学杂志 2024年第2期32卷 610-616页

作者：刘磊张环环张现宁刘路路陈明台济宁医学院附属医院血液科山东济宁272000 济宁医学院附属医院手术室山东济宁272000 济宁医学院附属医院医学研究中心山东济宁272000

目的:系统筛选与鉴定再生障碍性贫血(再障,AA)骨髓微环境脂肪化相关的长非编码RNA(lncRNA)。方法:通过生物信息学分析ChIPBase中PPARγ和C/EBPα的ChIP-Seq数据,筛选PPARγ和C/EBPα共转录调控的候选lncRNA,并在骨髓间充质干细胞(BM-MSC... 详细信息

目的:系统筛选与鉴定再生障碍性贫血(再障,AA)骨髓微环境脂肪化相关的长非编码RNA(lncRNA)。方法:通过生物信息学分析ChIPBase中PPARγ和C/EBPα的ChIP-Seq数据,筛选PPARγ和C/EBPα共转录调控的候选lncRNA,并在骨髓间充质干细胞(BM-MSC)的体外成脂分化模型、敲低PPARγ和C/EBPα表达的BM-MSC以及临床再障BM-MSC样本中通过qRT-PCR验证候选lncRNA的表达。结果:qRT-PCR检测结果显示,成脂分化转录因子PPARγ和C/EBPα在再障来源BM-MSC中均显著高表达,敲低二者表达可以显著抑制再障BM-MSC的成脂分化能力;PPARγ和C/EBPα以结合位点依赖性的方式转录调控LINC01230启动子活性;与对照相比,LINC01230在再障BM-MSC中异常高表达。结论:PPARγ和C/EBPα在再障BM-MSC中异常表达,可能通过转录激活LINC01230促进再障BM-MSC成脂分化,并在一定程度上介导再障骨髓微环境脂肪化的发生。

关键词：再生障碍性贫血骨髓间充质干细胞 PPARγ C/EBPα 长非编码RNA