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DNA指纹图技术及其在实验动物学中的应用

实验动物科学与管理 2003年第3期20卷 37-38,41页

作者：战大伟陈振文军事医学科学院实验动物中心北京100071

实验动物要求具有明确的遗传背景,实验动物的遗传质量直接影响生物医学研究结果的准确性、重复性与科学性,遗传质量监测是保证实验动物遗传质量的重要措施[1].现在实验动物的遗传质量监测运用生化标记等表型检测方法,存在灵敏度低等局限... 详细信息

实验动物要求具有明确的遗传背景,实验动物的遗传质量直接影响生物医学研究结果的准确性、重复性与科学性,遗传质量监测是保证实验动物遗传质量的重要措施[1].现在实验动物的遗传质量监测运用生化标记等表型检测方法,存在灵敏度低等局限性.随着分子生物学技术的发展,DNA分子标记技术的出现,为实验动物遗传物质DNA的直接检测带来了新的可行的技术方法.

关键词： DNA指纹图实验动物遗传检测近交系封闭群

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纳米TiO_2影响细胞生长活性的尺寸效应

毒理学杂志 2009年第6期23卷 442-445页

作者：孟金萍孙淑华张以河王艳蓉杨旭吕凤柱刘云波中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国地质大学材料科学与工程学院(北京)

目的不同尺寸纳米TiO2(5、10、15和60 nm)暴露于不同组织来源细胞(HPF、ESF、U251、HB),探讨纳米TiO2对细胞生长活性的影响,探讨不同尺寸、不同浓度纳米TiO2粒子与细胞生长之间的相关性,分析纳米TiO2的细胞生物学效应。方法不同尺寸、... 详细信息

目的不同尺寸纳米TiO2(5、10、15和60 nm)暴露于不同组织来源细胞(HPF、ESF、U251、HB),探讨纳米TiO2对细胞生长活性的影响,探讨不同尺寸、不同浓度纳米TiO2粒子与细胞生长之间的相关性,分析纳米TiO2的细胞生物学效应。方法不同尺寸、不同浓度纳米TiO2暴露不同组织来源的体外培养细胞,使用MTT方法检测细胞生长活性,计算细胞半致死量,并运用SPSS10.0软件进行统计学分析。结果10 nm以上的TiO2粒子暴露能显著抑制肺来源(HPF)和神经来源的细胞(U251)生长活性,对皮肤(ESF)和膀胱组织(HB)来源细胞生长活性抑制较弱;5 nmTiO2颗粒对细胞生长活性基本无抑制作用,相反,还观察到对HPF、ESF、HB细胞有增强细胞生长的情况。结论在本试验条件下,纳米TiO2对细胞生长活性的影响有尺寸效应,纳米TiO2暴露所导致的生物学效应有细胞间差异,其对HPF、U251细胞影响较明显,对ESF、HB影响较弱。

关键词：纳米TiO2 生长活性噻唑蓝法

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沙皮犬MC1R基因的克隆与序列分析

广东农业科学 2014年第23期41卷 127-130页

作者：刘满清刘清神方梅霞谢亮聂庆华华南农业大学动物科学学院/广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室广东广州510642 暨南大学医学院实验动物中心广东广州510632

黑素皮质素1型受体（melanocortin 1 receptor,MC1R）基因在哺乳动物中具有调节细胞黑色素形成的作用,被认为是影响犬毛色的重要候选基因.用PCR技术对沙皮犬MC1R基因序列进行扩增,获得沙皮犬MC1R基因序列1 333 bp,包含完整的MC1R基因开... 详细信息

黑素皮质素1型受体（melanocortin 1 receptor,MC1R）基因在哺乳动物中具有调节细胞黑色素形成的作用,被认为是影响犬毛色的重要候选基因.用PCR技术对沙皮犬MC1R基因序列进行扩增,获得沙皮犬MC1R基因序列1 333 bp,包含完整的MC1R基因开放阅读框954 bp,编码317个氨基酸.该序列与鸡、鼠、犬、人等6种动物MC1R基因CDS序列有70.1％～98.3％的同源性,相应氨基酸序列的同源性达61.1％～96.9％.系统发育树分析结果表明,沙皮犬与已报道的黄金猎犬亲缘最近,与鸡的亲缘关系最远。

关键词：沙皮犬黑素皮质素1型受体(MC1R)基因序列分析

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中草药治疗母兔乳腺炎

中兽医学杂志 1995年第3期 20-20页

作者：徐铭山东滨州医学院实验动物中心

中草药治疗母兔乳腺炎徐铭山东滨州医学院实验动物中心（２５６６０３）乳腺炎是哺乳期母兔的常见病，多发于产后１～３周。常因母兔营养过盛引起乳房积乳，或因乳头受伤导致细菌感染而发病。临床以乳房红肿、充血、发热，食欲减退，体... 详细信息

中草药治疗母兔乳腺炎徐铭山东滨州医学院实验动物中心（２５６６０３）乳腺炎是哺乳期母兔的常见病，多发于产后１～３周。常因母兔营养过盛引起乳房积乳，或因乳头受伤导致细菌感染而发病。临床以乳房红肿、充血、发热，食欲减退，体温升高，拒绝哺乳为主症。近年来，笔...

关键词：母兔草药治疗山东滨州医学院实验动物中心乳腺炎乳房红肿食欲减退

表达猪源流感病毒HA基因重组伪狂犬病毒的构建

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中国人兽共患病学报 2009年第10期25卷 953-957页

作者：李敏向华张丽黄元王贵平宣华广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广州510640 吉林大学畜牧兽医学院长春130062 军事医学科学院实验动物中心北京100071

目的获得共表达H1N1和H3N2亚型猪源流感病毒(SIV)HA基因的重组伪狂犬病毒(PRV)。方法克隆H1N1以及H3N2亚型SIV的HA基因,将HA基因与PUC-TK转移载体进行酶切、连接来构建pUC-P-H1A-H3A重组表达质粒,用脂质体将其转染已感染PRV亲本病毒的V... 详细信息

目的获得共表达H1N1和H3N2亚型猪源流感病毒(SIV)HA基因的重组伪狂犬病毒(PRV)。方法克隆H1N1以及H3N2亚型SIV的HA基因,将HA基因与PUC-TK转移载体进行酶切、连接来构建pUC-P-H1A-H3A重组表达质粒,用脂质体将其转染已感染PRV亲本病毒的Vero细胞,使其在Vero细胞内与PRV基因组发生同源重组。运用RT-PCR、间接免疫荧光等方法检测外源基因重组情况及其在Vero细胞内的表达,并通过Western-blot对表达产物进行免疫原性鉴定。结果实验结果显示,外源基因HA已重组入PRV基因组,并在Vero细胞中有效表达,且所表达蛋白具有免疫原性。结论HA基因重组PRV的构建成功为SIVHA基因重组PRV活载体疫苗的研究奠定了初步基础。

关键词： SIV HA基因 TK 重组PRV

apoE/LDLR双基因缺失幼龄小鼠主动脉中动脉粥样硬化相关基因的表达

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生理学报 2008年第1期60卷 43-50页

作者：戴学栋尹苗荆文杜会芹叶红燕商允菊张晾邹艳艳曲志萍潘杰山东师范大学生命科学学院山东省动物抗性生物学重点实验室济南250014 济南市中心医院医学实验室诊断中心济南250013

利用RT-PCR以及实时定量RT-PCR检测11个动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)相关基因在1、2和3月龄的载脂蛋白E (apolipoprotein E, aopE)/低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor, LDLR)双基因缺失(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠主动脉中的表达变化,同时应用血生化指标和病理形态学观察AS 早期病变特点,探讨apoE和LDLR 基因联合缺失引发的血脂代谢紊乱和血管炎症损伤的关系以及AS 的炎症反应机制。结果显示,apoE-/-/LDLR-/-小鼠IL-1β、TLR2、MCP-1、ICAM-1、VCAM-1、GM-CSF、CD36和 ET-1表达在1月龄时较同龄野生型(wild type, WT)小鼠显著上调(P<0.05, P<0.01),PDGF-α和TNF-α表达在2 月龄时较同龄WT 小鼠显著上调,除ET-1表达在2龄时以及TLR2、VCAM-1和ICAM-1表达在3月龄时降至WT小鼠水平以外,其余各基因表达随年龄增长继续升高(P<0.05, P<0.01),其中 MCP-1 表达在 2 月龄时达到峰值。NF-κB在各年龄段apoE-/-/LDLR-/-小鼠中的表达与同龄WT 小鼠相比均无显著差异。各年龄段apoE-/-/LDLR-/- 小鼠血清TC、TG、LDL、HDL、TNF-α、IL-1β和 ox-LDL含量均显著高于同龄WT小鼠(P<0.05, P<0.01),并随年龄增长逐渐升高。apoE-/-/LDLR-/-小鼠1月龄时主动脉内膜出现少量的散在的脂质沉积,随着年龄增长病变区域增多,脂质沉积增厚。上述结果提示:apoE 和LDLR 双基因缺失形成的高脂血症可能通过刺激主动脉中炎症基因时序表达,起始并扩大病变部位的炎症反应,共同促进AS的发生发展。

关键词： apoEE^-/-/LDLRE^-/-小鼠动脉粥样硬化主动脉 RT-PCR 动脉粥样硬化相关基因

DNA指纹图及RAPD技术在比格犬群体遗传检测中的应用

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实验动物科学 2003年第Z1期23卷 145-147页

作者：战大伟陈振文李瑞生欧阳兆和军事医学科学院实验动物中心北京100071

With small somatotype, gentle temperament, balanced hematological and blood biochemical index, Beagle was ideal for laboratory use. Since 1980, beagle has been introducted into our country. They were successfully bred and multiplied in Guangdong , Shanghai and Beijing . But the control of heredity, balance of gene frequency, gene diversity and gene differentiation and protection of idioplasm has not been well studied. Falk & Holsinger(1991)point out: we can not protect what were unknowed. For operative preventing the inbreeding diminution , gene segregation and differentiation, the DFP and randomly amplified polymorphic (RAPD) technique were applied to assess the genetic variation and colony heredity structural analysis among the population of three internal beagle centers and Marshell beagle in America. The experimental exponent of the heredity analysis in different colony were from Guangdong, Shanghai, Beijing and Marshell (Amereca), and they were not relative. The experimental exponent of the different generation were from Beijing colony, and they were direct maternal side in different generation, but each individual were no relative in the same generation. The heredity structive relatio on different colony and internal colony were analyzed with Phyltools6.0 and SAS6.12 software. The dendrogram of UPGMA based on Nei’s genetic identity of four colony wre constructed. The result showed: There were average distinguished bands 9.8±1.789 in America colony, 10.2±0.837 in Guangdong colony, 10 8±1 483 in Shanghai colony,11.2±2.280 in Beijing colony,and there were 10.5 average bands in the four colonies. The bands owned by both were 0.204 in America colony, 0.294 in Guangdong colony, 0.370 in Shanghai and 0.267 in Beijing respectively. The similarity coefficient were 0.508—0.557(average 0.526). there were no marked difference in the four different area colony. The dendrogram of UPGMA based on Nei’s genetic distance coefficient was drawn: the gene distance of colony betwee

关键词： DNA指纹图遗传多样性比格犬 RAPD 封闭群

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溃疡性结肠炎动物模型的研究进展

新疆医科大学学报 2009年第11期32卷 1619-1620页

作者：连军毛新民孙建新新疆医科大学医学实验动物中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011

溃疡性结肠炎（UC）又称非特异性溃疡性结肠炎，是一种病因不明的大肠黏膜的慢性炎症和溃疡性病变。临床以腹痛、腹泻、粘液便、血便等为主要表现。有资料统计，该病发病率和患病率在我国有明显增加趋势。由于小病原因不明，治疗棘手，... 详细信息

溃疡性结肠炎（UC）又称非特异性溃疡性结肠炎，是一种病因不明的大肠黏膜的慢性炎症和溃疡性病变。临床以腹痛、腹泻、粘液便、血便等为主要表现。有资料统计，该病发病率和患病率在我国有明显增加趋势。由于小病原因不明，治疗棘手，因此被世界卫生组织列为现代难治病之一。由于在病人身上进行研究受到一定的限制，因此，选择建立合适的动物模型，探讨其病因、病理、中西医治疗机制以及中西医药物的开发与研制等具有重要意义。现将近些年这方面的研究进展做一综述。

关键词：溃疡性结肠炎动物模型研究进展

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聚合酶链反应在动物细菌病检测中的应用

辽宁畜牧兽医 1997年第2期 41-42页

作者：田克恭遇秀玲军事医学科学院实验动物中心北京100071

聚合酶链反应(PCR)是一种体外酶促扩增DNA新技术,具有特异性和敏感性高,快速高效等优点。自Saiki等人(1985)报道以来,已广泛应用于生物学研究的各个领域。本文就近年来PCR在动物细菌病检测中的研究进展概述如下。1 结核分枝杆菌:Pao等(1... 详细信息

聚合酶链反应(PCR)是一种体外酶促扩增DNA新技术,具有特异性和敏感性高,快速高效等优点。自Saiki等人(1985)报道以来,已广泛应用于生物学研究的各个领域。本文就近年来PCR在动物细菌病检测中的研究进展概述如下。1 结核分枝杆菌:Pao等(1990)利用PCR进行DNA扩增以检测未经培养的临床标本结核分枝杆菌DNA。结果能检出0.1pg(约含40个细菌)DNA,且不受细胞中DNA的干扰。未经培养的284份标本,PCR检测阳性118份,而培养结果呈阳性的仅49份。Eisenach等(1990)对结核分枝杆菌染色体DNA片段的特定序列(123bp)进行PCR扩增,检测临床样本及分离株。

关键词：家畜细菌病检测聚合酶链反应