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疾病动物模型建模过程中伦理和福利审查

医用生物力学 2024年第1期39卷 1-8页

作者：邢凤英赵勇上海交通大学医学院附属第九人民医院实验动物中心上海200011 上海实验动物研究中心上海201203

建立动物模型是研究各种相应疾病发病机制和治疗手段不可或缺的工具,其伦理和福利的审查是保证科研质量以及促进实验动物科学、合理使用的必要措施。在审查实践中发现,大部分申请者都无法准确理解伦理申请表中的各项内容及其对应的伦理... 详细信息

建立动物模型是研究各种相应疾病发病机制和治疗手段不可或缺的工具,其伦理和福利的审查是保证科研质量以及促进实验动物科学、合理使用的必要措施。在审查实践中发现,大部分申请者都无法准确理解伦理申请表中的各项内容及其对应的伦理原则。因此,一套切实可行的动物实验伦理操作指南十分必要。本文以口腔疾病动物模型为例,从其开展的法律、伦理基础为切入点,将建立口腔疾病动物模型的方法分为物理法、化学法、生物法、联合法,并详述不同建模方法的伦理和福利审查要点和模型评价方法。希望能帮助审查者和项目申请者更好理解并执行伦理审查的要点,最终提高动物模型标准化程度和适用性。

关键词：疾病动物模型伦理审查动物福利模型评价

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医学领域应急科技攻关项目的管理创新机制探究

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 102-110页

作者：陈昱君苏美洋伊王清玄高苒中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的应急科技攻关项目凸显“应急”和“攻关”两个关键,即如何高效地取得目标成果。承接此类项目的机构需要制定合理的项目管理机制,为应急科技攻关项目的成功落实保驾护航。本文旨在通过调查研究,调研目前医学领域应急科技攻关项目管... 详细信息

目的应急科技攻关项目凸显“应急”和“攻关”两个关键,即如何高效地取得目标成果。承接此类项目的机构需要制定合理的项目管理机制,为应急科技攻关项目的成功落实保驾护航。本文旨在通过调查研究,调研目前医学领域应急科技攻关项目管理存在的问题,分析可改进的措施,提高科研管理的效率和质量。方法本文结合作者实践经验,调查相关单位的科研管理运行现状,并就科管和科研人员最关心的管理环节开展问卷调研。基于调查反映出来的问题,再组织专家座谈进行论证。结果调研发现(1)目前针对应急科技攻关项目的管理规范鲜有制定;(2)科研人员最关注的是行政审批和项目经费的问题;(3)科管人员最关注的是如何在合法合规的前提下,同时满足上级单位的管理以及科研人员的需求。结论应急科技攻关项目与常规科技项目相比有其特殊之处,在立项审批、经费使用、资源分配和安全等方面可以进行管理优化,本研究针对应急科技攻关项目管理提供创新方案,为各科研单位对此类项目的管理提供有益的经验和借鉴。

关键词：项目管理应急调查研究医学

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心肌纤维化特殊染色方法比较与优化

中国实验动物学报 2024年第3期32卷 347-354页

作者：王亚恒马嘉昕雷雨张连峰吕丹中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所国家人类疾病动物模型资源库北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所国家动物模型技术创新中心北京100021

目的对目前已有心肌纤维化染色方法进行优化,弥补目前心肌纤维常用染色方法在定量分析中存在的胶原纤维漏读及误读等问题,为心肌纤维化半定量及诊断提供参考。方法利用实验室前期构建的心肌组织特异性cTnT~(R141W)基因突变致扩张型心... 详细信息

目的对目前已有心肌纤维化染色方法进行优化,弥补目前心肌纤维常用染色方法在定量分析中存在的胶原纤维漏读及误读等问题,为心肌纤维化半定量及诊断提供参考。方法利用实验室前期构建的心肌组织特异性cTnT~(R141W)基因突变致扩张型心肌病转基因小鼠模型,制备心脏组织石蜡切片,分别进行马松三色(Masson’s trichrome, Masson)染色法、天狼星红(picric sirius red, PSR)染色法、天狼星红-品红(van Gieson, VG)染色法、天狼星红-固绿(sirius red/fast green staining, SR/FG)染色法染色,利用Image J 2.1.0软件对胶原纤维面积进行定量比较,并从染液浓度、染色时间、酸性溶液预染3个方面对SR/FG染色法进行优化,对后续的胶原纤维定量分析进行应用验证。结果 4种特染方法均可实现胶原纤维的分布观察,其中,优化后的SR/FG染色法,即0.1%天狼星红-苦味酸酸性溶液预染5 min,随后于0.1%天狼星红-苦味酸与0.04%固绿的混合液中染色1 h,在软件识别中具有更低的漏读率和遗失率。结论本文优化后的SR/FG染色法较其他传统胶原纤维特染方法,胶原纤维与心肌组织着色鲜亮、颜色对比明显、稳定性佳、方便快捷,更适用于后续胶原纤维占比定量分析应用。

关键词：心肌纤维化特殊染色方法天狼星红-固绿定量分析

脊髓灰质炎疫苗脑内法猴体神经毒力试验的神经病理研究

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中国比较医学杂志 2024年第6期34卷 47-53页

作者：于品徐艳峰韩云林赵文杰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的探讨脊髓灰质炎疫苗猴体神经毒力试验毒力返强对神经免疫反应的影响及病理机制。方法Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)的原液(≥7000 lgCCID50/L)以及10-1稀释各型脊髓灰质炎疫苗采用脑内法进行神经毒力试验,... 详细信息

目的探讨脊髓灰质炎疫苗猴体神经毒力试验毒力返强对神经免疫反应的影响及病理机制。方法Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)的原液(≥7000 lgCCID50/L)以及10-1稀释各型脊髓灰质炎疫苗采用脑内法进行神经毒力试验,观察脊髓灰质炎的病理变化,并利用免疫组织化学法检测脊髓灰质炎病毒受体CD155以及CD4^(+)T淋巴细胞、CD20^(+)B淋巴细胞和CD68^(+)小胶质细胞的分布。结果发生脊髓灰质炎的猴体出现脊髓炎症细胞浸润,少量神经元变性,脊髓神经元变性坏死、卫星现象、噬神经细胞现象、血管周围炎症细胞袖套状浸润和胶质细胞增生;主要为CD4^(+)T淋巴细胞、CD20^(+)B淋巴细胞和CD68^(+)小胶质细胞大量浸润在血管袖套和增生的胶质结节中;在发生和未发生脊髓灰质炎的猴体中,CD155分布未见明显差别,均表达在神经元和胶质细胞,而血管内皮细胞未见表达。结论脊髓灰质炎疫苗毒力返强导致典型病毒性脑脊髓炎。

关键词：脊髓灰质炎疫苗恒河猴神经毒力试验病理学

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两种呼吸道感染途径建立豚鼠结核模型的比较

中国实验动物学报 2024年第6期32卷 733-742页

作者：李新雨李海凤王煜屈沛杰王俊飞占玲俊中国医学科学院医学实验动物研究所北京100021 北京协和医学院比较医学研究中心北京100021 国家动物模型技术创新中心北京100021

目的建立不同剂量的滴鼻和气管内定量气溶胶感染途径的豚鼠结核模型,并进行对比分析,为标准化豚鼠呼吸道感染结核模型建立提供基础。方法雌性哈氏豚鼠24只,随机分为6组,每组4只,气管内定量气溶胶和滴鼻途径感染豚鼠均用两个剂量,均分为... 详细信息

目的建立不同剂量的滴鼻和气管内定量气溶胶感染途径的豚鼠结核模型,并进行对比分析,为标准化豚鼠呼吸道感染结核模型建立提供基础。方法雌性哈氏豚鼠24只,随机分为6组,每组4只,气管内定量气溶胶和滴鼻途径感染豚鼠均用两个剂量,均分为3个组(A、B、C组,D、E、F组)。气溶胶感染途径分为3组:A组(气溶胶对照组,未感染对照)、B组(气溶胶低剂量感染组,5×10^(2)CFU)和C组(气溶胶高剂量感染组,5×10~3 CFU);滴鼻感染途径也分为3组:D组(滴鼻对照组,未感染对照)、E组(滴鼻低剂量感染组,1×10^(4)CFU)和F组(滴鼻高剂量感染组,5×10^(4)CFU)。结核菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染豚鼠后观察其一般表现,第14天解剖,取肺、脾、肝组织,记录大体病变,用苏木素-伊红(HE)染色分析组织中结核肉芽肿病变,采用抗酸染色分析原位菌的分布和数量,菌分离培养分析脏器荷菌量。结果4个感染组(B、C、E、F组)豚鼠的肺、脾、肝均有肉眼可见的结核病灶及HE染色后可见结核肉芽肿病变。抗酸染色和荷菌量提示,B、C组的菌主要分布在肺组织,少数分布在脾和肝,荷菌量为104~10^(5)CFU/mL;E、F组的菌在肺、脾、肝均有分布,荷菌量为104~10^(5)CFU/mL。B、C、E、F组的病变和荷菌量,组间均无显著性差异,但B、C、F组内病理学及病原学指标的标准差较小。结论两个剂量的气溶胶和滴鼻途径均能制备豚鼠急性结核模型,病理学检查和病原学分析表明,气溶胶5×10^(2)CFU Mtb即可成功制备该模型,且模型均一性较好;滴鼻途径5×10^(4)CFU Mtb也可制备更均一的豚鼠急性结核模型,然而气溶胶5×10^(2)CFU比滴鼻途径5×10^(4)CFU发展为更严重的急性结核模型。

关键词：结核分枝杆菌豚鼠模型气溶胶滴鼻

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高硼暴露通过诱导细胞焦亡加剧鸡肝细胞损伤

畜牧兽医学报 2024年第10期 4747-4759页

作者：何婷刘思颖全锦雯苏伟谦黄江利李玙萌刘忠华余文兰华南农业大学兽医学院华南农业大学实验动物中心

旨在探索硼暴露诱导鸡肝细胞损伤的作用机制。试验选取30只AA肉鸡随机分为对照组（control group, CG）、低硼组（low boron group, LBG）和高硼组（high boron group, HBG）,在基础日粮中分别添加不同剂量硼进行饲喂：基础日粮(硼0 mg... 详细信息

旨在探索硼暴露诱导鸡肝细胞损伤的作用机制。试验选取30只AA肉鸡随机分为对照组（control group, CG）、低硼组（low boron group, LBG）和高硼组（high boron group, HBG）,在基础日粮中分别添加不同剂量硼进行饲喂：基础日粮(硼0 mg·kg-1),低硼日粮(硼120 mg·kg-1)、高硼日粮(硼240 mg·kg-1),处理7及14 d后采集肝组织。使用ICP-MS测定肝组织中的硼含量，全自动血生化分析仪检测ASL及ALT水平，HE染色观察肝组织病理变化，透射电镜观察肝细胞超微结构变化，免疫组化和免疫荧光检测肝细胞焦亡相关蛋白NLRP3及IL-1β定位表达情况，RT-qPCR和Western blot检测NLRP3、Casapse-1、IL-1β、IL-18和GSDMD的mRNA和蛋白表达水平。结果显示，蓄积于肝组织中的硼含量随着硼暴露时间和剂量的增加而增加。此外，14 d-低硼组（14 d-LBG）和高硼组（14 d-HBG）的肝组织结构明显破坏，并且细胞焦亡水平随硼剂量的增加而加剧；与同时间的CG相比，14 d-LBG中NLRP3、Caspase-1、IL-18的mRNA表达水平显著上升（P<0.05）,14 d-HBG的NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18及GSDMD的mRNA和蛋白表达水平显著上升（P<0.05）。高硼暴露可通过诱导细胞焦亡进而造成鸡肝细胞损伤。

关键词：硼细胞焦亡鸡肝细胞

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高校生化教学实验室开放管理模式探索

实验室研究与探索 2024年第9期43卷 229-232,257页

作者：许洁贾松李艳娜浦浒徐磊李姣同济大学医学院实验教学中心上海200331 同济大学医学院实验动物中心上海200331

实验室全面开放是当下高校实验室发展的总体趋势。教学实验室具有仪器数量多、场地面积大、非教学时段闲置等优势却因管理中的诸多问题而无法发挥其重要作用。通过分析目前高校教学实验室开放管理中的具体问题,利用便捷的移动端应用,提... 详细信息

实验室全面开放是当下高校实验室发展的总体趋势。教学实验室具有仪器数量多、场地面积大、非教学时段闲置等优势却因管理中的诸多问题而无法发挥其重要作用。通过分析目前高校教学实验室开放管理中的具体问题,利用便捷的移动端应用,提出了一种低成本、高效率、信息化的开放管理模式。该模式实践后,仪器使用率和实验室利用率得到了显著提升,自助式管理也减轻了日常管理压力,大大提高了共享效益,为医学拔尖创新人才培养提供了优质平台,可望为高校教学实验室的开放管理工作提供新的思路。

关键词：实验室开放实验室管理教学实验室信息化

崇山垂首,溪水默然,翠柏含哀,痛悼吴小闲老师

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中国比较医学杂志 2024年第4期34卷 175-176页

作者：秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

惊闻吴小闲老师于昨日安详离世,享年95岁。闭目之间,那位关注青年成长、热衷于实验动物事业、温文尔雅的吴老师形象浮现眼前。与吴老师相处的日子里,我经历了无数的第一次,这些宝贵的经验丰富了我的职业生涯,更成为我人生中难以忘记的... 详细信息

惊闻吴小闲老师于昨日安详离世,享年95岁。闭目之间,那位关注青年成长、热衷于实验动物事业、温文尔雅的吴老师形象浮现眼前。与吴老师相处的日子里,我经历了无数的第一次,这些宝贵的经验丰富了我的职业生涯,更成为我人生中难以忘记的宝贵财富。历历在目,不觉泪下沾襟,感慨万千。

关键词：青年成长职业生涯老师宝贵财富实验动物事业闭目

基于铁死亡探讨参苓白术散对高尿酸血症小鼠睾丸生精功能的改善作用

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北京中医药大学学报 2024年第8期47卷 1100-1110页

作者：江晓翠萧闵吕银娟王朝阳祝中意郝恒曹继刚湖北中医药大学实验动物中心武汉430065 湖北时珍实验室湖北中医药大学基础医学院

目的基于铁死亡探讨参苓白术散改善高尿酸血症小鼠睾丸生精功能的作用。方法60只BALB/c小鼠按随机数字表平均分为正常组,模型组,参苓白术散高、中、低剂量组(灌胃,20.14、10.07、5.04 g/kg)及3-氨基-4-环己基氨基苯甲酸乙酯(Fer-1)组(... 详细信息

目的基于铁死亡探讨参苓白术散改善高尿酸血症小鼠睾丸生精功能的作用。方法60只BALB/c小鼠按随机数字表平均分为正常组,模型组,参苓白术散高、中、低剂量组(灌胃,20.14、10.07、5.04 g/kg)及3-氨基-4-环己基氨基苯甲酸乙酯(Fer-1)组(尾静脉注射,0.8 mg/kg)。除正常组外,其他各组小鼠通过连续7 d腹腔注射氧嗪酸钾悬液[600 mg/(kg·d)],复制高尿酸血症模型。造模成功后,各组分别给予相应药物,连续14 d。生化法检测血清尿酸,睾丸组织Fe2+、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;测定附睾、睾丸指数;HE染色法评估睾丸生精功能;动物精子全自动分析仪检测精子质量;加强普鲁士蓝染色法检测睾丸组织铁沉积;免疫组化法检测睾丸组织酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达;蛋白免疫印迹检测睾丸组织核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)/GPX4通路相关蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠血清尿酸、睾丸组织MDA、Fe2+含量升高,GSH含量、SOD活性降低,附睾及睾丸指数、睾丸生精功能、精子密度和活动率降低,睾丸组织铁沉积、ACSL4蛋白表达升高,Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、细胞质Nrf2蛋白表达量升高,细胞核Nrf2、HO-1、GPX4、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白表达均降低(P<0.01)。与模型组比较,参苓白术散各剂量组及Fer-1组以上指标均有不同程度改善(P<0.05,P<0.01)。结论参苓白术散可通过Nrf2/HO-1/GPX4信号通路抑制睾丸细胞铁死亡,改善高尿酸血症生精功能障碍小鼠的睾丸生精功能。

关键词：参苓白术散高尿酸血症生精功能障碍核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1/谷胱甘肽过氧化物酶4信号通路铁死亡小鼠