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血府逐瘀汤对肺动脉内皮细胞间质转化的影响及机制

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中国药理学通报 2024年第1期40卷 155-161页

作者：曾作梅王昕玥田雷瑜崔力丹郭健陈俞材北京中医药大学中医学院北京100050

目的研究血府逐瘀汤对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)内皮间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition, EndMT)的影响,并从TGF-β1/Smad信号通路进一步分析其作用机制。方法采用TGF-β1(5μg·L^(-1))建立EndMT细胞模型。实验分组为正常组,模型组(TGF-β1,5μg·L^(-1)),血府逐瘀汤低、中、高浓度组(3、10、30 mg·L^(-1)XFZYD+5μg·L^(-1)TGF-β1),SB 431542阳性药组(5μmol·L^(-1)SB 431542+5μg·L^(-1)TGF-β1)。观察细胞形态,鬼笔环肽染色观察细胞骨架,免疫荧光法观察内皮细胞标志物-血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)和间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。蛋白免疫印迹法检测血府逐瘀汤对CD31、α-SMA、Snail、p-Smad2、p-Smad1/5蛋白表达的影响。结果 TGF-β1刺激后,细胞形态由鹅卵石形向梭形转变。CD31、p-Smad1/5表达明显减少,α-SMA、p-Smad2、Snail表达则显著升高。血府逐瘀汤干预后,与模型组相比,细胞形态不同程度的接近于正常组,CD31和p-Smad1/5表达呈上升趋势,α-SMA、p-Smad2、Snail表达呈下降趋势。结论血府逐瘀汤可以减轻大鼠肺微血管内皮细胞发生内皮间质转化,其作用可能是通过影响TGF-β1/Smad信号通路实现的。

关键词：血府逐瘀汤肺微血管内皮细胞内皮间质转化 TGF-β1 TGF-β1/Smad信号通路肺动脉高压

穿山龙薯蓣皂苷通过调控自噬治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型的机制

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 645-651页

作者：江涛由涌夏东帅薄思涵王永为高亚贤宋鸿儒承德医学院基础医学院免疫学教研室河北承德067000 承德医学院基础医学院解剖学教研室河北承德067000 河北北方学院医学检验学院免疫学教研室河北张家口075000

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫... 详细信息

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫的50只小鼠随机分组为CIA模型组、雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组,另有10只小鼠注射等量生理盐水作为对照组。在对小鼠进行连续14天灌胃治疗并观察各组小鼠足爪的炎症程度,取下各组小鼠脾、腹股沟淋巴结和踝关节、膝关节,对踝关节、膝关节进行HE染色,检测各组淋巴结、脾组织中mRNA和蛋白质水平的相关自噬指标。结果与CIA模型组相比,穿山龙薯蓣皂苷高剂量组关节炎指数(AI)评分降低(P<0.05);雷公藤组及穿山龙薯蓣皂苷组足爪厚度差值减小(P<0.01)。与对照组相比,CIA模型组体质量明显下降(P<0.01);小鼠膝关节滑膜和足爪踝关节HE染色结果显示CIA模型组对比对照组出现免疫细胞浸润、骨质侵蚀、软骨破坏和滑膜增生的症状;雷公藤组与穿山龙薯蓣皂苷中、高剂量组对CIA模型有不同程度的治疗作用,可以减轻和预防症状。与CIA模型组相比,雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷治疗组中LC3、Beclin-1的mRNA水平和蛋白水平的表达升高,p62的mRNA水平和蛋白水平的表达降低。结论穿山龙薯蓣皂苷可能通过抑制自噬对CIA模型小鼠起到治疗作用。

关键词：穿山龙薯蓣皂苷自噬类风湿性关节炎胶原诱导性关节炎 p62 LC3 Beclin-1

基于细胞焦亡与免疫相关基因构建及验证肝细胞癌预后风险模型

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中国免疫学杂志 2024年第5期40卷 981-991页

作者：谢彬任婷婷贵州医科大学医学检验学院临床生化教研室贵阳550004

目的:利用生物信息学方法构建并验证细胞焦亡与免疫相关基因的肝细胞癌预后风险模型,根据其风险评分探索免疫相关性特征,以指导个性化免疫治疗。方法:从TCGA、GEO官网分别下载TCGA-LIHC和GSE14520基因表达谱,从INNATEDB和IMMPORT官网下... 详细信息

目的:利用生物信息学方法构建并验证细胞焦亡与免疫相关基因的肝细胞癌预后风险模型,根据其风险评分探索免疫相关性特征,以指导个性化免疫治疗。方法:从TCGA、GEO官网分别下载TCGA-LIHC和GSE14520基因表达谱,从INNATEDB和IMMPORT官网下载免疫相关基因。以TCGA为训练组,GEO为测试组,对训练组细胞焦亡基因表达谱采用Cox回归分析,筛选预后相关基因进行共识聚类分组,提取分组间差异基因与免疫相关基因的交集基因,对交集基因应用单因素Cox和Lasso回归分析,得到预后相关风险评分模型。根据训练组风险中位值划分高低风险组,利用测试组验证模型可行性,最后探索训练组富集分析(GO、KEGG、GSEA)、免疫相关性分析及模型基因蛋白表达情况。结果:共筛选出9个可靠的风险模型基因(ICAM1、S100P、FABP3、CCL20、HRG、IGHM、SPP1、C4BPA、C6)。GO富集分析显示风险差异基因主要参与各种代谢过程。KEGG富集分析显示风险差异基因主要参与补体和凝血级联信号通路。GSEA富集分析显示高风险组与致癌途径的激活密切相关。在免疫浸润、免疫相关通路及免疫检查点中发现高低风险组具有显著差异。HPA数据库证明ICAM1、S100P、SPP1模型基因免疫组化表达存在明显差异。结论:9个基因组成的风险模型可能成为肝细胞癌发生、发展及预后相关的潜在生物标志物,并为优化肝细胞癌的诊治提供新线索。

关键词：肝细胞癌细胞焦亡免疫相关基因预后免疫浸润

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经典名方左归饮的历史沿革与关键信息考证

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：冀迅孙晓霞时洋凯魏凯峰刘涛南京中医药大学中医学院

左归饮出自明代张介宾所著《景岳全书》，于2023年被收录于《古代经典名方目录（第二批）》。该研究遵循《古代经典名方关键信息考证原则》对古今文献中左归饮的方名源流、配伍组成、药物的基原、炮制、剂量、煎煮法、功效主治等关键信... 详细信息

左归饮出自明代张介宾所著《景岳全书》，于2023年被收录于《古代经典名方目录（第二批）》。该研究遵循《古代经典名方关键信息考证原则》对古今文献中左归饮的方名源流、配伍组成、药物的基原、炮制、剂量、煎煮法、功效主治等关键信息进行考证。研究发现左归饮古今配伍组成、药物剂量与炮制、煎煮服用方法等基本沿用原方。左归饮原方剂量换算成现代剂量为熟地黄41.03 g、山药7.46 g、枸杞子7.46 g、炙甘草3.73 g、茯苓5.595 g、山茱萸5.595 g；方中药物基原基本清晰，熟地黄选用玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa 新鲜或干燥块根炮制加工而成；山药选用薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita 的干燥根茎；枸杞子选用茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum 的干燥成熟果实；茯苓选用多孔菌科真菌茯苓Poria cocos的干燥菌核；山茱萸选用山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis 的干燥成熟果肉；炙甘草选用豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis 的干燥根和根茎。其服用方法为上诸药加水600 mL，煎至140 mL，空腹服用。左归饮功擅滋阴补肾，主治治肾阴不足、阴衰阳盛证，如腰酸遗泄，盗汗，口燥咽干，口渴欲饮，舌光红，脉细数等。古今多用于治疗多种以肾阴虚证为主的内、妇科以及神经、循环、生殖系统疾病。但现代文献对左归饮的现代应用研究及治疗机制研究不多，且市场未见规范化左归饮制剂，开发利用程度不高，仍有很大的研究空间。

关键词：经典名方左归饮功效主治煎服法文献考证基原肾阴虚临床应用

艾灸联合贝那普利对慢性心力衰竭大鼠心肌内质网应激相关蛋白磷酸化表达的影响

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针刺研究 2024年第3期49卷 231-237页

作者：汪恒夏冉高兵李凌基王祝朱梦王茎安徽中医药大学针灸推拿学院合肥230038 安徽中医药大学中医学院合肥230038 新安医学重点实验室合肥230038

目的:观察艾灸“心俞”“肺俞”联合贝那普利对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及心肌组织中蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核启动因子2α(eIF2α)蛋白磷酸化的影响,探讨艾灸联合贝那普利防治CHF的潜在机制。方法:采用腹腔注射盐酸多柔... 详细信息

目的:观察艾灸“心俞”“肺俞”联合贝那普利对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及心肌组织中蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核启动因子2α(eIF2α)蛋白磷酸化的影响,探讨艾灸联合贝那普利防治CHF的潜在机制。方法:采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、艾灸组、药物组、艾药组,并设立空白组,每组10只。艾灸组予以艾条温和灸双侧“心俞”“肺俞”,每次20 min;药物组予以贝那普利(0.86 mg/kg)灌胃治疗;艾药组艾灸上述穴位同时予以贝那普利灌胃治疗。各组均每日治疗1次,连续干预3周。超声心动图检测大鼠心脏射血分数(EF)、左室内径缩短率(FS);HE染色法观察心肌组织病理变化;ELISA法检测大鼠血清B型脑钠肽(BNP)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量;Western blot法检测大鼠心肌组织磷酸化(p)-PERK、p-eIF2α的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠EF、FS降低(P<0.01);血清BNP和AngⅡ含量升高(P<0.01);p-PERK、p-eIF2α蛋白表达水平升高(P<0.01);镜下可见心肌细胞排列紊乱,出现不同程度的细胞肿胀、空泡、炎性浸润等改变。与模型组比较,艾灸组、药物组及艾药组大鼠EF、FS升高(P<0.01);血清BNP和AngⅡ含量降低(P<0.01);p-PERK、p-eIF2α蛋白表达水平降低(P<0.01);镜下可见治疗后各组大鼠心肌细胞损伤减轻。艾药联合治疗效果优于艾灸组和药物组。结论:艾灸联合贝那普利能够改善CHF,其机制与降低心肌p-PERK、p-eIF2α的蛋白表达水平,抑制心肌内质网应激反应相关。

关键词：艾灸慢性心力衰竭心功能内质网应激

基于Rho/ROCK信号通路探讨麻黄细辛附子汤对小鼠树突状细胞迁移的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：范淑月吴璐蔚孙彤彤倪钰莹高婧崔颖刘敏北京中医药大学中医学院

目的：探讨麻黄细辛附子汤对小鼠树突状细胞(DCs)迁移的抑制作用及其潜在机制。方法：分离并培养小鼠骨髓源性DCs，显微镜观察不同时期细胞形态变化，流式细胞术检测CD11c＋比例，鉴定DCs纯度；麻黄细辛附子汤(1、2、5、10、20、40、50... 详细信息

目的：探讨麻黄细辛附子汤对小鼠树突状细胞(DCs)迁移的抑制作用及其潜在机制。方法：分离并培养小鼠骨髓源性DCs，显微镜观察不同时期细胞形态变化，流式细胞术检测CD11c＋比例，鉴定DCs纯度；麻黄细辛附子汤(1、2、5、10、20、40、50、100 mg·mL-1)处理细胞24 h，细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测麻黄细辛附子汤对细胞增殖的影响，筛选给药浓度；脂多糖(LPS)造模后，将DCs分为空白组、模型组、麻黄细辛附子汤组(2、4、8 mg·mL-1)，流式细胞术检测各组细胞表面分子CD80、CD86、主要组织相容性复合物Ⅱ分子(MHC-Ⅱ)表达；Trans-well小室观察细胞迁移情况；酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞表面趋化因子C-C-基元受体7(CCR7)、趋化因子C-X-C-基元受体4(CXCR4)含量；免疫荧光法(IF)检测细胞微丝骨架中纤维肌动蛋白(F-actin)表达；实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(ROCK1)mRNA表达；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RhoA、ROCK1蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达显著升高(P室数量显著增加(P室数量减少(P<0.05)，CCR7、CXCR4含量减少(P<0.05，P<0.01)，F-actin表达显著降低(P<0.01)，RhoA、ROCK1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01，P<0.05)。结论：麻黄细辛附子汤可以抑制小鼠DCs迁移，其作用机制可能与降低Rho/ROCK信号通路活性影响细胞骨架改变有关。

关键词：麻黄细辛附子汤 Rho/ROCK信号通路变应性鼻炎树突状细胞细胞迁移

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《伤寒杂病论》“饮食如故”涵义浅析

北京中医药大学学报 2024年

作者：成佳琳李长香任梓林兰芯郑雨晓韩金华王雪茜北京中医药大学中医学院

《伤寒杂病论》中共有5条涉及“饮食如故”的条文。医家们对此类条文进行注解时，多将“饮食如故”解释为饮食正常或胃气未受疾病影响，忽略饮食如故的真实意义及其在临床鉴别诊断中的作用。本文通过整理归纳“饮食如故”相关条文，结... 详细信息

《伤寒杂病论》中共有5条涉及“饮食如故”的条文。医家们对此类条文进行注解时，多将“饮食如故”解释为饮食正常或胃气未受疾病影响，忽略饮食如故的真实意义及其在临床鉴别诊断中的作用。本文通过整理归纳“饮食如故”相关条文，结合《说文解字》及古今医家对“饮食如故”条文的注解，探究其背后的涵义。笔者认为“饮食如故”作为兼症，当理解为“饮食同之前一样”，因其存在于多种疾病中，故不可一味引申为“饮食正常”。其次“饮食如故”在临床鉴别诊断中发挥两种作用：一方面为提示病邪性质：胃里空虚，无实无饮阻滞气机，或胃肠积滞化热，但尚未形成燥屎；另一方面，当中焦成为疾病的致病因素之一时，“饮食如故”可提示胃气尚存，排除中焦影响。

关键词：伤寒杂病论饮食如故病邪病位

敲除组织蛋白酶K基因改善高脂饮食小鼠缺血性血管生成

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生理学报 2024年第1期76卷 45-51页

作者：王心怡王旭何震杰陈士票李伟健崔仁善姜海英浙江中医药大学基础医学院杭州310000 嘉兴大学医学院嘉兴314000 延边大学生理学教研室延吉133000

本文旨在探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,Cat K)对高脂饮食小鼠缺血性血管生成的作用及机制。利用高脂饮食Cat K基因敲除(Cat K^(-/-))小鼠制备单侧下肢缺血模型,利用激光多普勒血流测定仪观察缺血后不同时间段血流恢复程度;免疫组织化学... 详细信息

本文旨在探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,Cat K)对高脂饮食小鼠缺血性血管生成的作用及机制。利用高脂饮食Cat K基因敲除(Cat K^(-/-))小鼠制备单侧下肢缺血模型,利用激光多普勒血流测定仪观察缺血后不同时间段血流恢复程度;免疫组织化学染色法观察缺血下肢新生毛细血管数量;免疫印迹法检测胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)、p-Akt、Akt及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等信号蛋白表达。首先观察高脂饮食对野生型小鼠缺血性血管生成的影响。野生型小鼠随机分为对照组和高脂饮食组,分别以普通饲料或60%高脂肪饲料饲养16周。结果表明,与对照组相比,高脂饮食组小鼠体重明显增加,缺血下肢血流恢复程度明显减弱,血浆Cat K浓度及缺血侧骨骼肌中Cat K基因表达显著升高(P<0.05)。接着利用野生型和Cat K^(-/-)高脂饮食小鼠进一步观察Cat K对高脂肪负荷下缺血性血管生成的作用及机制。结果表明,Cat K^(-/-)小鼠缺血下肢的血流恢复程度明显强于野生型小鼠,缺血14天后缺血下肢的CD31阳性细胞显著增多(P<0.05);同时观察到Cat K^(-/-)小鼠缺血侧骨骼肌IRS-1、p-Akt及VEGF蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。上述结果提示,敲除Cat K基因可能通过IRS-1-Akt-VEGF信号通路改善高脂饮食小鼠缺血性血管生成过程。

关键词：组织蛋白酶K 高脂肪血管生成胰岛素受体底物-1

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨补肾活血方对血管性痴呆大鼠突触可塑性的影响

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世界科学技术-中医药现代化 2024年

作者：杨帆赵若熙陈园春景佳星刘海叶高飞马文璨于文涛河北中医学院针灸推拿学院河北省心脑血管病中医药防治重点实验室河北中医学院基础医学院河北中医学院研究生学院河北省中医针灸优势病症国际联合研究中心

目的：观察补肾活血方对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响，并探讨其改善血管性痴呆(VD)大鼠突触可塑性的可能机制。方法：SD大鼠40只，随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补肾活血方组，每组10只。除假手术组外，均采用两血管阻断法(2... 详细信息

目的：观察补肾活血方对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响，并探讨其改善血管性痴呆(VD)大鼠突触可塑性的可能机制。方法：SD大鼠40只，随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补肾活血方组，每组10只。除假手术组外，均采用两血管阻断法(2-VO)复制大鼠VD模型，补肾活血方组以10.14 g·kg-1体重给予补肾活血方药液灌胃，尼莫地平组大鼠以11 mg·kg-1体重尼莫地平药液灌胃。假手术组、模型组均以10 mL·kg-1体重灌服生理盐水，每日1次，连续28 d。对各组大鼠进行Morris水迷宫实验，以观察它们的学习和记忆能力；尼氏染色法观察大鼠大脑的海马病理形态变化；透射电子显微镜(TEM)观察脑海马神经元和突触超微结构变化；免疫组化测定海马CA1区突触素(SYN)及突触后密度蛋白95(PSD-95)表达；高尔基染色法(Golgi)观察海马神经元树突形态；Western blot和反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测大鼠海马组织磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路蛋白及mRNA表达情况。结果：与假手术组相比，VD大鼠的学习和记忆能力降低，海马神经元病理损伤明显，神经元树突分支异常。海马组织中SYN、PSD-95蛋白表达降低(P<0.05)，PI3K、Akt、p-Akt和mTOR的蛋白和mRNA表达下降(P<0.05)，补肾活血方可减轻VD大鼠学习记忆损伤，改善海马神经元及突触形态，提高突触标志蛋白SYN和PSD-95表达以及信号分子PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白和mRNA表达(P<0.05)。结论：补肾活血方可以提高VD大鼠学习记忆能力，这可能与该方药调节PI3K/Akt/mTOR信号通路，改善突触可塑性有关。

关键词：补肾活血方血管性痴呆海马突触可塑性 PI3K/Akt信号通路