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寻常性银屑病患者皮肤菌群差异研究

临床皮肤科杂志 2024年第7期53卷 393-399页

作者：秦欢熊琦马龙徐运娥黄洋晏文王玉遵义医科大学基础医学院微生物学教研室贵州遵义563000 遵义医科大学附属医院皮肤科贵州遵义563000 遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563000

目的:阐明贵州地区银屑病患者皮损样本、正常皮肤样本及健康人群皮肤样本之间皮肤定植微生物的差异。方法:纳入15例寻常性银屑病患者及6例健康志愿者,采集患者皮损样本、正常皮肤样本及志愿者健康皮肤样本微生物,提取DNA并扩增细菌、真... 详细信息

目的:阐明贵州地区银屑病患者皮损样本、正常皮肤样本及健康人群皮肤样本之间皮肤定植微生物的差异。方法:纳入15例寻常性银屑病患者及6例健康志愿者,采集患者皮损样本、正常皮肤样本及志愿者健康皮肤样本微生物,提取DNA并扩增细菌、真核微生物、真菌、古细菌扩增子,采用16S rDNA基因测序,分析微生物组成及丰度。结果:银屑病患者皮损部位微生物多样性较银屑病患者正常皮肤微生物高;组成成分分析发现其组成与正常皮肤表面微生物分离,呈现明显的聚类趋势。与银屑病患者正常皮肤微生物组成比较,银屑病患者皮损部位特异性高分布的菌群包括梭状芽胞杆菌纲-梭菌目-瘤胃菌科、梭状芽胞杆菌纲-梭菌目-毛螺旋菌科以及拟杆菌纲-拟杆菌目-拟杆菌科;而微生物低丰度菌群为乳杆菌目-乳酸细菌科以及假单胞菌目-莫拉菌科。结论:相比于银屑病患者正常皮肤定植的微生物,皮损部位微生物呈现特征性改变,提示差异性分布菌群可能是银屑病潜在的生物标志物。

关键词：银屑病皮肤微生物 16S rDNA 生物标志物

基于转录组学测序探讨高氧性急性肺损伤发生机制中的信号通路

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中华危重病急救医学 2024年第1期36卷 33-39页

作者：覃松王小勤任颖聪冯帮海刘君亚余虹郑杰陈华军邢周雄梅鸿遵义医科大学附属医院重症医学科贵州遵义563000 遵义医科大学第二附属医院儿科贵州遵义563000 遵义市中医院重症医学科贵州遵义563000

目的观察高氧性急性肺损伤(HALI)时转录组学的变化并进行验证,进一步明确HALI时的通路变化。方法将12只健康雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为常氧组和HALI组,每组6只。常氧组小鼠置于室内正常饲养;HALI组置于高氧箱吸入95%氧气构建H... 详细信息

目的观察高氧性急性肺损伤(HALI)时转录组学的变化并进行验证,进一步明确HALI时的通路变化。方法将12只健康雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为常氧组和HALI组,每组6只。常氧组小鼠置于室内正常饲养;HALI组置于高氧箱吸入95%氧气构建HALI动物模型。高氧暴露72 h后取肺组织进行转录组学测序,然后将测序所得的数据进行差异基因分析及京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)通路富集分析。另取肺组织,苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)对转录组学分析筛选出的HALI相关信号通路中的关键分子进行验证。结果转录组学分析显示,与常氧组比较,高氧暴露可引起小鼠肺组织中537个差异基因表达,包括239个上调基因和298个下调基因。进一步KEGG通路富集分析筛选出富集最显著的20条信号通路,排名前3位的信号通路分别为铁死亡信号通路、肿瘤抑制基因p53信号通路和谷胱甘肽(GSH)代谢信号通路;其中,铁死亡信号通路相关基因包括上调基因血红素加氧酶-1(HO-1)和下调基因溶质载体家族7成员11(SLC7A11),p53信号通路相关基因包括上调基因p53和下调基因鼠双微基因2(MDM2),GSH代谢信号通路相关基因为上调基因谷氧还蛋白1(Grx1)。光镜下显示,常氧组小鼠肺泡结构正常;HALI组小鼠肺泡隔增宽增厚,肺泡腔缩小或消失。通过RT-RCR和Western blotting进一步证实,与常氧组相比,HALI组小鼠肺组织HO-1、p53 mRNA和蛋白表达明显上调〔HO-1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.16±0.17比1.00±0.00,HO-1蛋白(HO-1/β-actin):1.05±0.01比0.79±0.01,p53 mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.52±0.13比1.00±0.00,p53蛋白(p53/β-actin):1.12±0.02比0.58±0.03,均P<0.05〕,Grx1、MDM2、SLC7A11 mRNA和蛋白表达明显下调〔Grx1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.53±0.05比1.00±0.00,Grx1蛋白(Grx1/β-actin):0.54±0.03比0.93±0.01,MDM2 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.48±0.03比1.00±0.00,MDM2蛋白(MDM2/β-actin):0.57±0.02比1.05±0.01,SLC7A11 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.50±0.06比1.00±0.00,SLC7A11蛋白(SLC7A11/β-actin):0.72±0.03比0.98±0.01,均P<0.05〕。结论HALI与铁死亡、p53、GSH代谢信号通路密切相关,靶向上述信号通路中的关键靶点可能是防治HALI的重要策略。

关键词：转录组学铁死亡 p53 谷胱甘肽代谢高氧性急性肺损伤

MTB Hsp60重组蛋白对巨噬细胞趋化功能的影响

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中国病原生物学杂志 2024年第2期19卷 157-161,171页

作者：卫麟娜高雪涵董品志吴荧浓王海燕罗军敏覃明遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563000 遵义医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室

目的研究结核分枝杆菌H37Rv重组热休克蛋白60(Heat shock protein 60 of Mycobacterium tuberculosis,MTB Hsp60)对巨噬细胞(RAW264.7)趋化功能的影响。方法MTB Hsp60重组蛋白(100 ng/mL)刺激巨噬细胞24 h后,采用实时荧光定量PCR检测下列趋化因子如单核细胞趋化蛋白1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1,CCL2)、巨噬细胞炎症蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α,CCL3)、巨噬细胞炎症蛋白1β(Macrophage inflammatory protein-1β,MIP-1β,CCL4)、调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(Regulation of Activation,Expression and Secretion by Normal T Cells,RANTES,CCL5)和单核细胞趋化蛋白5(Monocyte chemotactic protein-5,MCP-5,CCL12)的mRNA表达;ELISA法检测细胞培养上清液中趋化因子CCL2、CCL3、CCL4、CCL5和CCL12的分泌水平;Western bolt检测巨噬细胞表面趋化因子受体CC基序趋化因子受体1(C-C motif chemokine receptor 1,CCR1)、CCR2和CCR5的蛋白表达;流式细胞术检测表达趋化因子受体CCR1、CCR2、CCR5的巨噬细胞;Transwell实验检测巨噬细胞的趋化功能。结果100 ng/mL MTB Hsp60重组蛋白刺激巨噬细胞24 h后,其趋化因子CCL2、CCL3、CCL4及CCL12的mRNA表达水平无明显差异,但CCL5的mRNA水平显著上调(P<0.05);巨噬细胞表面主要的趋化因子受体CCR1、CCR2蛋白表达水平显著增高(P<0.05),而其表面CCR5蛋白的变化不明显;流式细胞术检测结果显示,与未处理组相比,处理组中CCR1^(+)、CCR2^(+)巨噬细胞数量明显增加(P<0.05),而CCR5^(+)巨噬细胞数量无明显差异;Transwell实验表明,经过MTB Hsp60重组蛋白处理后的巨噬细胞有更明显的被募集的趋势(P<0.05);而上清液中趋化因子CCL2、CCL3、CCL4、CCL5及CCL12的释放水平无明显变化。结论MTB Hsp60重组蛋白能上调巨噬细胞中趋化因子CCL5的mRNA表达水平,能增加巨噬细胞表面趋化因子受体CCR1和CCR2的表达,并且能增强巨噬细胞的趋化功能。

关键词： MTB Hsp60重组蛋白巨噬细胞趋化因子趋化因子受体

腹侧被盖区-内侧前额叶皮质神经环路在觉醒调控过程中作用的研究进展

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中国医学科学院学报 2024年第3期46卷 402-408页

作者：郝孟楠梁小丽张益遵义医科大学第二附属医院麻醉科贵州遵义563000 遵义医科大学贵州省麻醉与器官保护基础研究重点实验室贵州遵义563000 遵义医科大学麻醉医学院贵州遵义563000

腹侧被盖区(VTA)与内侧前额叶皮层(mPFC)之间存在相互神经投射,并形成环路,近年来的研究显示该环路在睡眠与全身麻醉的觉醒调控中发挥着重要的作用。本文通过对VTA与mPFC的解剖结构、二者中的各种神经元及投射通路在觉醒调控过程中的作... 详细信息

腹侧被盖区(VTA)与内侧前额叶皮层(mPFC)之间存在相互神经投射,并形成环路,近年来的研究显示该环路在睡眠与全身麻醉的觉醒调控中发挥着重要的作用。本文通过对VTA与mPFC的解剖结构、二者中的各种神经元及投射通路在觉醒调控过程中的作用进行综述,期望为睡眠觉醒与全身麻醉机制研究提供新的思路。

关键词：中脑腹侧被盖区内侧前额叶皮层神经环路觉醒

巴西苏木素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄黄质的抑制作用及其机制

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中华医院感染学杂志 2024年第5期34卷 652-657页

作者：周永雯陈泽慧周小仙杨智芳余孟飞刘和兰黎瑞李明哲遵义医科大学附属医院医学检验科贵州遵义563003 遵义医科大学检验医学院贵州遵义563006 遵义医科大学第二附属医院医学检验科贵州遵义563000 遵义医科大学附属医院输血科贵州遵义563003

目的探究巴西苏木素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄黄质(STX)的抑制作用及其机制。方法基于转录组学数据,分析巴西苏木素作用于MRSA后编码STX合成的操纵子crtOPQMN基因变化情况;将不同浓度巴西苏木素(16、32、64μg/ml)与MRSA... 详细信息

目的探究巴西苏木素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄黄质(STX)的抑制作用及其机制。方法基于转录组学数据,分析巴西苏木素作用于MRSA后编码STX合成的操纵子crtOPQMN基因变化情况;将不同浓度巴西苏木素(16、32、64μg/ml)与MRSA共培养:转平板观察菌落、离心沉淀观察菌体颜色变化及酶标仪检测STX含量;逆转录实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测STX合成中主要影响颜色的基因表达水平变化;光谱定量检测STX代谢中间产物变化情况;过氧化氢敏感性试验观察抑菌圈大小及存活菌数量;全血杀伤试验观察存活菌数量。结果调控STX生成的操纵子基因表达均下调,其中主要影响颜色的基因crtM和crtN分别为-6.542479954、-6.107726632;随药物浓度增加,平板菌落及菌沉淀黄色变浅变白,STX含量减少,其中64μg/ml药物对STX抑制率最大,达50%;qRT-PCR结果显示随药物浓度增加crtM和crtN表达量下降;光谱定量结果显示STX代谢中间产物含量随药物浓度增加而减少;过氧化氢敏感性试验结果显示随药物浓度增大,抑菌圈直径增大,存活菌数量减低(P免疫杀伤能力,为开发新型抗毒力药物提供参考。

关键词：巴西苏木素耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄黄质 crt M基因 crt N基因抗氧化抗杀伤

S100A4在肥大细胞的表达及血清S100A4含量的检测对过敏性哮喘的诊断价值

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：莫诗卉陶甜王晨予晏世荣李静吴通前余芳贵州医科大学附属医院临床研究中心贵州医科大学医学检验学院微生物及免疫教研室

目的初步研究S100钙结合蛋白A4（S100A4）是否参与肥大细胞脂质代谢以及对过敏性哮喘的临床意义。方法从基因表达数据集（GEO）数据库中下载过敏性哮喘相关的单细胞RNA（scRNA）表达矩阵GSE213085，使用R包进行数据可视化处理。通过体... 详细信息

目的初步研究S100钙结合蛋白A4（S100A4）是否参与肥大细胞脂质代谢以及对过敏性哮喘的临床意义。方法从基因表达数据集（GEO）数据库中下载过敏性哮喘相关的单细胞RNA（scRNA）表达矩阵GSE213085，使用R包进行数据可视化处理。通过体外培养C57肥大细胞，慢病毒感染肥大细胞建立S100A4低表达的细胞系，实时荧光定量PCR和Westernblot法分别检测S100A4的mRNA和蛋白水平，实时荧光定量PCR检测脂质代谢相关基因ATP柠檬酸合成酶（ACLY）、乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）、CD36、溶质载体家族27A成员6（SCL276）、过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）的mRNA水平。采集过敏性哮喘的患者和健康对照人群外周血，ELISA检测血清S100A4水平，绘制受试者工作特征（ROC）曲线，析S100A4对疾病的诊断效能，并计算曲线下面积（AUC）。结果用scRNA数据集GSE213085鉴定出26225个细胞，提取出肥大细胞进行后续分析，功能富集分析结果表明，肥大细胞特征基因集中于脂质代谢相关的途径。肥大细胞低表达S100A4时，其脂质代谢相关基因ACLY、ACC1、CD36、SCL26α6、PPARα表达下调。ELISA检测显示过敏性哮喘患者血清S100A4较健康对照人群升高，ROC曲线发现，血清S100A4含量对过敏性哮喘具有一定诊断效能（AUC=0.746）。结论 S100A4可能参与肥大细胞脂质代谢调节，血清S100A4检测对过敏性哮喘诊断可能有一定价值。

关键词：过敏性哮喘肥大细胞 S100钙结合蛋白A4(S100A4) 生物信息学分析受试者特征曲线

脱氧核酶催化放大效应在微RNA传感中的研究与应用

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第7期 889-896页

作者：王树急曹汝菲段晓雷遵义医科大学附属医院医学检验科遵义医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

微RNA(microRNAs, miRNAs)是一种与肿瘤等多种疾病的发生发展密切相关的短序列非编码RNA,其具有丰度低、序列同源性高和易降解等特点，因此，miRNAs的高灵敏、高特异检测面临巨大挑战。具有RNA切割活性的脱氧核酶是新兴的一类功能性单链... 详细信息

微RNA(microRNAs, miRNAs)是一种与肿瘤等多种疾病的发生发展密切相关的短序列非编码RNA,其具有丰度低、序列同源性高和易降解等特点，因此，miRNAs的高灵敏、高特异检测面临巨大挑战。具有RNA切割活性的脱氧核酶是新兴的一类功能性单链DNA分子，此类酶能在金属离子的辅助下对核酸底物特异性切割，释放miRNA进行循环再利用，实现信号放大。目前，基于脱氧核酶催化放大检测miRNA的新方法研究是近年来科研人员的重点关注方向之一。本文根据脱氧核酶结合不同的生物传感新技术和新材料，对近年来发展出的基于脱氧核酶催化放大检测miRNAs的新方法进行分类与回顾，归纳为脱氧核酶DNA自组装、脱氧核酶偶联等温扩增以及脱氧核酶结合新型纳米材料的3类方向，并逐一阐述各个方向的基本原理及其在生物传感领域、医学检测方向的最新研究进展与应用实例，旨在为进一步的精准灵敏检测miRNAs新策略研究提供参考。

关键词：微RNA 脱氧核酶 DNA纳米自组装等温扩增纳米材料

交感神经系统在肝硬化及其并发症中的作用研究进展

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中国医学科学院学报 2024年第1期46卷 128-134页

作者：陈相林丁珺程翅喻田遵义医科大学附属医院麻醉科贵州遵义563000 遵义医科大学麻醉与器官保护基础研究省级重点实验室贵州遵义563000

交感神经系统(SNS)在维持器官正常功能和疾病发生发展中起着重要作用。目前研究发现交感神经与肝硬化、肝硬化心肌病和肝肾综合征(HRS)的发生发展密切相关,SNS也许可作为肝脏相关疾病的治疗靶点。为了深入理解交感神经在肝硬化及其并发... 详细信息

交感神经系统(SNS)在维持器官正常功能和疾病发生发展中起着重要作用。目前研究发现交感神经与肝硬化、肝硬化心肌病和肝肾综合征(HRS)的发生发展密切相关,SNS也许可作为肝脏相关疾病的治疗靶点。为了深入理解交感神经在肝硬化及其并发症的作用,本文综述了交感神经在肝硬化、肝硬化心肌病和HRS中的作用研究进展,以此为治疗肝硬化及其并发症提供新思路。

关键词：交感神经肝硬化进展机制

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NFATc1在骨质疏松症中的研究进展

中国骨质疏松杂志 2024年第2期30卷 257-262,274页

作者：党祎姚红林袁能华马亚萍张怡王信遵义医科大学附属医院骨科贵州遵义563003 遵义医科大学附属医院手术室贵州遵义563003 遵义医科大学公共卫生学院贵州遵义563000

骨重塑过程不平衡是骨质疏松症发生的重要机制之一,其主要是由于破骨细胞对骨的重吸收超过了成骨细胞介导的骨形成。NFATc1被证实参与了调控骨吸收过程。笔者综述了NFATc1在破骨细胞中调控的信号通路与分子机制,拟为骨质疏松症提供新的... 详细信息

骨重塑过程不平衡是骨质疏松症发生的重要机制之一,其主要是由于破骨细胞对骨的重吸收超过了成骨细胞介导的骨形成。NFATc1被证实参与了调控骨吸收过程。笔者综述了NFATc1在破骨细胞中调控的信号通路与分子机制,拟为骨质疏松症提供新的治疗思路和潜在的治疗靶点。并得出以下结论:①当骨吸收过程中破骨细胞的介入程度超过成骨细胞的介入程度时,从而导致骨重塑过程失去平衡,而骨质疏松症则将持续发展;②NFATc1在破骨细胞吸收过程中的关键转录调控是通过RANKL-RANK、NF-κB、MAPK和Ca^(2+)信号通路,调控破骨细胞在骨代谢过程中的生成和分化,从而介导破骨细胞过度生成引起的骨形成和骨吸收之间的失衡;③目前抗骨质疏松药物策略并未对该疾病产生非常显著的影响;④关于生物材料靶向NFATc1的研究还处于起步阶段,仍需深入探索。

关键词： NFATc1 骨质疏松破骨细胞信号通路生物材料