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大肠杆菌耐药基因TD-PCR检测方法的建立及应用

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中国预防兽医学报 2024年第3期46卷 269-277页

作者：潘永王可人李婷杨莉李刚张亚楠徐景峨贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳550005 遵义市农业农村局贵州遵义563000 广东省现代农业装备研究所广东广州510635

为建立一种检测大肠杆菌主要耐药基因(ARG)的通用降落PCR(TD-PCR)方法,本研究参考大肠杆菌标准菌株K12 MG1655 yeeJ基因序列设计合成不同Tm值引物、不同产物长度引物、不同长度引物,并参考Gen Bank中登录的β-内酰胺酶、氨基糖苷类、酰... 详细信息

为建立一种检测大肠杆菌主要耐药基因(ARG)的通用降落PCR(TD-PCR)方法,本研究参考大肠杆菌标准菌株K12 MG1655 yeeJ基因序列设计合成不同Tm值引物、不同产物长度引物、不同长度引物,并参考Gen Bank中登录的β-内酰胺酶、氨基糖苷类、酰胺醇类、喹诺酮类和黏菌素类部分ARG序列设计合成共29对引物。以大肠杆菌标准菌株K12 MG1655总DNA为模板,采用TD-PCR和普通PCR方法,分别利用不同Tm值引物(P1~P8)、不同产物长度引物(P9~P16)、不同长度的引物(P17~P22)分别扩增yeeJ基因,均用于检测TD-PCR方法的特异性;利用引物P5扩增yeeJ基因,根据目的条带平均亮度值,对TD-PCR方法的扩增产物量分析。不同Tm值引物的扩增结果显示,TD-PCR方法中利用8对不同Tm值引物扩增后均出现目的条带,且均无非特异性条带,而普通PCR方法仅有部分引物扩增后出现目的条带,表明以不同Tm值引物扩增时,TD-PCR方法特异性更强,且适用引物Tm值范围较广。不同产物长度扩增结果显示,TD-PCR方法中利用8对引物扩增后均出现相应目的条带,且无非特异条带,而普通PCR方法虽然均出现目的条带,但部分引物扩增后还出现了非特异性条带,表明以不同产物长度引物扩增时,TD-PCR方法的特异性更强。不同长度的引物扩增结果显示,TD-PCR方法中利用6对不同长度的引物扩增后均出现目的条带,且无非特异条带,而普通PCR方法在52℃退火温度时引物P22出现非特异性扩增,表明TD-PCR方特异性更强。扩增产物量分析结果显示,TD-PCR和普通PCR方法扩增的目的条带平均亮度值均随反应总循环数的增加而上升,但普通PCR方法扩增的产物目的条带平均亮度值始终高于TD-PCR,表明TD-PCR方法的扩增产物量低于普通PCR。以24株临床分离的鹅源大肠杆菌总DNA为模板,采用TD-PCR和普通PCR方法,分别对β-内酰胺酶、氨基糖苷类、酰胺醇类、喹诺酮类和黏菌素类共29种ARG进行检测。结果显示,TD-PCR方法对其中25种ARG的检测结果与普通PCR相同,二者符率为100%;而对另外4种ARG检测结果显示,与普通PCR相比,TD-PCR方法的非特异条带明显减少,且无假阳性。表明TD-PCR在检测ARG方面比普通PCR具有更强的特异性。本研究建立了一种特异性较强的检测大肠杆菌主要ARG的TD-PCR通用方法,为细菌耐药性的研究提供了便捷高效的检测技术手段。

关键词：大肠杆菌耐药基因 TD-PCR 特异性

菌酶复合物对饲喂小麦型饲粮蛋鸡生产性能、蛋品质、蛋成分和养分表观代谢率的影响

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饲料研究 2024年第8期47卷 54-60页

作者：郭志有韩学鸿王清海李超王坤张柏林山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261061 遵义师范学院贵州遵义523006

试验旨在探究菌酶复合物对饲喂小麦型饲粮蛋鸡生产性能、蛋品质、蛋成分和养分表观代谢率的影响。试验选用360只京红蛋鸡,随机分为3组,每组10个重复,每个重复12只蛋鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型饲粮,小麦组利用10%小麦替换对照组饲粮中同... 详细信息

试验旨在探究菌酶复合物对饲喂小麦型饲粮蛋鸡生产性能、蛋品质、蛋成分和养分表观代谢率的影响。试验选用360只京红蛋鸡,随机分为3组,每组10个重复,每个重复12只蛋鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型饲粮,小麦组利用10%小麦替换对照组饲粮中同等比例玉米,菌酶复合物组在小麦组饲粮的基础上添加0.02%的菌酶复合物。预试期3 d,正式试验期28 d。结果显示,对照组、小麦组和菌酶复合物组蛋鸡的生产性能、蛋品质和蛋成分无显著差异(P>0.05)。随着试验时间增加,小麦组的蛋黄叶黄素含量逐渐降低。第22、25、28 d,小麦组的蛋黄叶黄素含量显著低于对照组(P0.05),而菌酶复合物组蛋鸡对粗蛋白和磷的表观代谢率显著高于对照组和小麦组(P<0.05)。研究表明,使用10%小麦替代玉米不会影响蛋品质和蛋成分,但会降低蛋黄颜色和叶黄素含量,菌酶复合物能够增加小麦组的蛋黄叶黄素含量,改善蛋黄颜色,提高蛋鸡养分表观代谢率。

关键词：菌酶复合物蛋鸡生产性能蛋品质蛋成分叶黄素养分表观代谢率

糖尿病肾病模型:动物模型、二维细胞模拟及三维类器官模型

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中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3632-3640页

作者：钱足平陈勇冉燕达静静查艳遵义医科大学贵州省遵义市563000 贵州省人民医院肾内科贵州省贵阳市550002

背景:近几年来,人类多能干细胞衍生的肾类器官及糖尿病肾病啮齿动物模型取得了一定的进展。然而,由于糖尿病肾病发病受环境因素及遗传因素共同作用,发病机制复杂,并且对于此类患者的临床治疗方法需要因人而异。因此,需要开发更灵活和综... 详细信息

背景:近几年来,人类多能干细胞衍生的肾类器官及糖尿病肾病啮齿动物模型取得了一定的进展。然而,由于糖尿病肾病发病受环境因素及遗传因素共同作用,发病机制复杂,并且对于此类患者的临床治疗方法需要因人而异。因此,需要开发更灵活和综合的方法,从而发现强有力的临床前证据,以支持对糖尿病肾病患者进行更有针对性的干预。目的:从动物模型、二维细胞培养模拟及三维类器官模型等方面综述了糖尿病肾病模型的研究进展,为进一步的研究提供线索和思路。方法:以“糖尿病,糖尿病肾病,糖尿病肾病模型,糖尿病肾病动物模型,类器官,肾脏类器官,糖尿病肾病细胞模型,糖尿病肾病病证结合动物模型”为中文检索词,“Diabetes,diabetic nephropathy,diabetic kidney diseases,diabetic nephropathy models,diabetic nephropathy animal models,organoids,diabetic and organoids,diabetic and kidney organoids,kidney organoids,diabetic nephropathy cell models,diabetic nephropathy syndrome combined animal models”为英文检索词,检索中国知网及PubMed数据库,最终纳入101篇文献进行综述分析。结果与结论:糖尿病肾病体内模型和体外模型是深入研究糖尿病肾病发病机制的有力工具。动物模型可以观察到多系统之间的相互作用;二维细胞培养操作简便且成本较低;新兴的肾类器官填补了二维和整体水平之间的空白,无种属差异且一定程度模拟了人肾脏的复杂性。随着类器官技术的不断发展,肾类器官有望为探索糖尿病肾病的发病机制、病理生理过程和药物筛选提供一个新的视角。

关键词：糖尿病肾病肾脏类器官糖尿病肾病类器官细胞模型动物模型中医病证结合糖尿病肾病模型工程化组织构建

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黔北遵义地区地热水化学特征及成因

中国岩溶 2024年第1期43卷 72-83页

作者：罗伟杨仕江彭静袁余洋李生红曾祥建张信遵义师范学院工学院贵州遵义563006 贵州省有色金属和核工业地质勘查局三总队贵州遵义563000

黔北遵义地区地热资源丰富,但研究程度低,成因机制不明,制约了区内地热资源的合理开发利用。文章以遵义地区天然温泉和地热井为研究对象,采集了6组地热水样进行水化学组分、氢氧同位素分析,探讨了该地区地热水的成因。结果表明:研究区... 详细信息

黔北遵义地区地热资源丰富,但研究程度低,成因机制不明,制约了区内地热资源的合理开发利用。文章以遵义地区天然温泉和地热井为研究对象,采集了6组地热水样进行水化学组分、氢氧同位素分析,探讨了该地区地热水的成因。结果表明:研究区地热水水化学类型为SO_(4)-Ca·Mg、Cl·SO_(4)-Na·Ca、HCO_(3)-Ca·Mg、HCO_(3)-Na·Ca及HCO_(3)-Ca·Na·Mg型,有益元素主要有Sr、Li、H_(2)SiO_(3)、F。地热水中的Ca^(2+)、Mg^(2+)、HCO_(3)^(-)主要来源于白云石、方解石的溶解;盐津桥和坛厂地热水中的Ca^(2+),除来自于白云石、方解石的溶解外,可能有富石膏白云岩或膏盐层中石膏溶解产生的Ca^(2+)加入;地热水中SO_(2)^(4-)离子主要来源于石膏的溶解。四川含盐盆地古卤水的注入导致盐津桥地热水富Na^(+)、K^(+)、Cl^(-)。地热水的补给来源为大气降水,补给区位于研究区中部的大娄山一带,补给高程为1310.0~1391.2 m,补给区年平均气温为4.4~8.3℃。利用二氧化硅温标估算的热储温度为53~95℃,地热水循环深度为1372~2633 m。硅-焓模型估算的地热水冷水混入比例为76%~92%。区内地下水在大娄山区接受大气降水入渗补给,经深循环并受深部热流加热后,沿导水断裂上升至地表,形成天然低温温泉,或在背斜核部断裂带附近经人工钻探形成地热井。

关键词：地热水水化学氢氧同位素遵义地区贵州北部

贵州北部马鬃岭铝土矿床中富锂铝质粘土岩碎屑锆石U-Pb年龄、Lu-Hf同位素特征及其对锂源的制约

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地质与勘探 2024年第2期60卷 277-293页

作者：罗伟李生红袁余洋湛波杨仕江彭静遵义师范学院工学院贵州遵义563006 贵州省有色金属和核工业地质勘查局三总队贵州遵义563000

为研究贵州北部马鬃岭铝土矿床中富锂铝质粘土岩的物源体系及其锂的来源,对出露于大竹园组顶部的该类岩石进行了锆石U-Pb定年、Lu-Hf同位素及锆石微量元素分析。分析结果表明富锂铝质粘土岩中碎屑锆石普遍发育岩浆振荡环带,为造山作用/... 详细信息

为研究贵州北部马鬃岭铝土矿床中富锂铝质粘土岩的物源体系及其锂的来源,对出露于大竹园组顶部的该类岩石进行了锆石U-Pb定年、Lu-Hf同位素及锆石微量元素分析。分析结果表明富锂铝质粘土岩中碎屑锆石普遍发育岩浆振荡环带,为造山作用/弧作用相关的岩浆岩类锆石。碎屑锆石U-Pb年龄从早泥盆世到太古宙(411~3001 Ma)均有分布,具627~879 Ma和925~1018 Ma两个主峰及539~602 Ma一个次峰。ε_(Hf)(t)值为-27.61~7.03之间,二阶段模式年龄(t_(DM2))分布在1242~3387 Ma之间。结合碎屑锆石U-Pb-Hf同位素、微量元素特征及区域地质对比,认为富锂铝质粘土岩中碎屑锆石最主要的初始物源区为南岭-云开地体、江南造山带西段新元古代岩浆岩,其锂可能来源于江南造山带西段桂北-黔东地区860~750 Ma的基性岩。

关键词：富锂铝质粘土岩碎屑锆石 Lu-Hf同位素 U-Pb年龄马鬃岭铝土矿贵州北部地区

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小胶质细胞在糖尿病视网膜病变视网膜神经血管单元中的作用

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国际眼科杂志 2024年第5期24卷 731-736页

作者：陈志王子佩李红遵义医科大学贵州省遵义市563003 遵义医科大学附属医院眼科、贵州省眼科医院贵州省遵义市563003 国家眼病临床研究中心贵州省分中心、贵州省眼疾病特色重点实验室贵州省遵义市563003

糖尿病视网膜病变(DR)是工作年龄人群主要致盲眼病,血-视网膜屏障破坏是关键环节。近年研究显示,DR不再是单纯微血管病变,而是视网膜胶质细胞与神经退行性变、微血管病变的共同发展结果。DR病程早期视网膜神经血管单元(RNVU)中神经元的... 详细信息

糖尿病视网膜病变(DR)是工作年龄人群主要致盲眼病,血-视网膜屏障破坏是关键环节。近年研究显示,DR不再是单纯微血管病变,而是视网膜胶质细胞与神经退行性变、微血管病变的共同发展结果。DR病程早期视网膜神经血管单元(RNVU)中神经元的损伤可能早于血管内皮的变化,胶质细胞的激活加重血管屏障功能障碍。视网膜小胶质细胞是常驻视网膜的局部免疫细胞,参与长期高糖诱导的慢性炎症反应、高糖诱导其分泌多种炎症因子,破坏血-视网膜屏障结构、增加神经元凋亡、改变Müller细胞胶质化等,影响视网膜局部稳态平衡。RNVU作为一个单元结构研究,近年来受到越来越多的关注,本文将针对小胶质细胞在RNVU中的作用机制、研究进展进行综述。

关键词：小胶质细胞视网膜神经血管单元糖尿病视网膜病变炎症综述

淫羊藿苷对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用机制

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中国组织工程研究 2024年第23期28卷 3654-3660页

作者：肖冬焱何伟肖志滢廖月毛家豪何毅怀蒋智钢遵义医药高等专科学校贵州省遵义市563000 遵义医科大学贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属医院感染科贵州省遵义市563000

背景:淫羊藿苷具有抗炎、抗氧化、免疫调节等功能,可能成为预防和治疗急性肝损伤的潜在药物。目的:分析淫羊藿苷对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制。方法:取32只昆明小鼠,采用随机数字表法分为正常组、模型组、淫羊藿... 详细信息

背景:淫羊藿苷具有抗炎、抗氧化、免疫调节等功能,可能成为预防和治疗急性肝损伤的潜在药物。目的:分析淫羊藿苷对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制。方法:取32只昆明小鼠,采用随机数字表法分为正常组、模型组、淫羊藿苷低剂量组及淫羊藿苷高剂量组,每组8只。正常组、模型组灌胃给予10 mL/kg的生理盐水,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组分别灌胃给予100,200 mg/kg的淫羊藿苷混悬液,1次/d,连续7 d。末次给药后,模型组、淫羊藿苷低剂量组及淫羊藿苷高剂量组通过腹腔注射四氯化碳建立急性肝损伤模型,造模24 h后,检测小鼠肝指数与血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肿瘤坏死因子α及白细胞介素6水平,肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及丙二醛浓度,肝组织病理形态及肝细胞凋亡情况,以及肝组织中混葡萄糖调节蛋白78、内质网应激相关蛋白、混合谱系激酶域样蛋白及Caspase-3的蛋白表达。结果与结论:①与正常组比较,模型组小鼠肝指数与血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肿瘤坏死因子α及白细胞介素6水平均升高(P均<0.05);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组小鼠上述指标均降低(P均<0.05);②与正常组比较,模型组小鼠肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性降低(P均<0.05),丙二醛水平升高(P<0.05);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组小鼠超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性升高(P均<0.05),丙二醛水平降低(P<0.05);③苏木精-伊红与TUNEL染色显示,模型组小鼠肝组织结构破坏严重,肝细胞大面积坏死,肝细胞凋亡率较高;淫羊藿苷低剂量组及淫羊藿苷高剂量组小鼠肝组织结构破坏程度及肝细胞坏死面积明显轻于模型组,肝细胞凋亡率低于模型组(P<0.05);④Western blot检测显示,与正常组比较,模型组小鼠肝组织内葡萄糖调节蛋白78、内质网应激相关蛋白、混合谱系激酶域样蛋白Caspase-3的蛋白表达升高(P均<0.05);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组小鼠肝组织内上述指标蛋白表达降低(P均<0.05);⑤结果表明,淫羊藿苷对四氯化碳诱导的急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗炎、抗氧化、调节内质网应激及减轻程序性坏死有关。

关键词：淫羊藿苷急性肝损伤抗炎抗氧化内质网应激程序性坏死

电子健康技术在心力衰竭患者居家管理中的应用进展

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中国全科医学 2024年第26期27卷 3212-3217页

作者：陈科君杨怡菲宫静杨滨旭周静遵义医科大学第二附属医院贵州省遵义市563000 遵义医科大学贵州省遵义市563000

心力衰竭是一种严重危害全球居民健康的心血管疾病,具有慢性、迁延性的病程特点,以居家为核心的有效管理是控制症状和改善患者预后的关键。电子健康(e-health)技术是心力衰竭居家管理研究领域的热点之一,具有突破时间、空间壁垒的优势,... 详细信息

心力衰竭是一种严重危害全球居民健康的心血管疾病,具有慢性、迁延性的病程特点,以居家为核心的有效管理是控制症状和改善患者预后的关键。电子健康(e-health)技术是心力衰竭居家管理研究领域的热点之一,具有突破时间、空间壁垒的优势,能够实现居家患者健康状态连续监测、智能评估、动态管理。本文对心力衰竭患者居家管理e-health相关研究进行系统梳理,探讨其在心力衰竭患者药物管理、运动康复、症状管理、风险预测以及其他方面的应用价值,同时对e-health系统数字包容性欠佳、运转体系不完善、数据安全存在风险等局限进行分析及展望,旨在为创新心力衰竭患者居家管理模式提供借鉴。

关键词：心力衰竭电子健康居家管理移动医疗综述

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4级肺栓塞临床概率评分对老年急性肺栓塞的预测价值研究

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中国全科医学 2024年第9期27卷 1062-1067,1081页

作者：曾令聪张龙举周玲张伟代梦黄银黄毅遵义医科大学第三附属医院呼吸与危重医学科贵州省遵义市563000 遵义医科大学贵州省遵义市563000 贵州省遵义市第四人民医院 563000

背景老年人是发生急性肺栓塞(APE)的高危人群,而老年APE早期患者识别及诊断困难,积极寻找一种对老年疑似APE患者的最优预测方法,已成为必须面对的医学问题。目的探讨4级肺栓塞临床概率评分(4PEPS)在老年疑似APE患者中的预测价值。方法收... 详细信息

背景老年人是发生急性肺栓塞(APE)的高危人群,而老年APE早期患者识别及诊断困难,积极寻找一种对老年疑似APE患者的最优预测方法,已成为必须面对的医学问题。目的探讨4级肺栓塞临床概率评分(4PEPS)在老年疑似APE患者中的预测价值。方法收集2017—2021年于遵义医科大学第三附属医院完成螺旋CT肺动脉造影(CTPA)检查的老年(年龄≥60岁)住院患者的基本信息及相关临床数据。参照2018年《肺血栓栓塞症诊治与预防指南》CTPA诊断肺栓塞标准,将研究对象分为APE组和非APE组。分别采用4PEPS、Standard算法、年龄校正的D-二聚体(AADD)算法、YEARS算法及PEGeD算法对研究对象进行APE预测,根据预测结果分为阳性组和阴性组,统计各预测方法的真阳性人数、真阴性人数、假阳性人数、假阴性人数。计算5种预测方法的效能评价指标并对其预测价值进行比较。结果1193例完成CTPA检查的老年住院患者中,男608例(50.96%),女585例(49.04%),中位年龄为74(68,81)岁,APE患者323例(27.07%),非APE患者870例(72.93%);老年APE与非APE患者性别、年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。4PEPS、AADD算法、Standard算法、YEARS算法及PEGeD算法预测老年疑似APE患者的灵敏度分别为95.05%、97.83%、98.76%、97.21%、97.83%,特异度分别为31.84%、18.16%、12.87%、22.41%、22.41%,正确率分别为48.95%、39.73%、36.13%、42.67%、42.83%,Youden指数分别为0.27、0.16、0.12、0.20、0.20。4PEPS、Standard算法、YEARS算法及PEGeD算法对比AADD算法的净重新分类指数(NRI)分别为0.218、-0.087、0.073、0.085,其中4PEPS对比AADD算法的NRI差异有统计学意义(P<0.05)。结论4PEPS预测老年疑似APE患者的特异度、正确率、Youden指数较高,总体预测价值明显优于其余4种方法,可能是老年APE患者的最优预测方法。

关键词：肺栓塞急性肺栓塞 4级肺栓塞临床概率评分螺旋CT肺动脉造影老年人预测价值