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大黄素促进自噬改善脓毒症模型小鼠的心肌损伤

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中国组织工程研究 2025年

作者：田勇周庆罗传权胡红梅麻长林杨蕾韦林铜仁市人民医院重症医学科

背景：大黄素具有抗炎、抗病毒及抗氧化应激等多种药理活性，对脓毒症心肌损伤有一定的保护作用，但作用机制尚不清楚。目的：探讨大黄素是否可通过促进自噬来改善脓毒症小鼠心肌损伤。方法：将32只雄性昆明小鼠分为假手术组4只、假手术... 详细信息

背景：大黄素具有抗炎、抗病毒及抗氧化应激等多种药理活性，对脓毒症心肌损伤有一定的保护作用，但作用机制尚不清楚。目的：探讨大黄素是否可通过促进自噬来改善脓毒症小鼠心肌损伤。方法：将32只雄性昆明小鼠分为假手术组4只、假手术+大黄素组4只、模型组8只、模型+大黄素组8只、大黄素+3-甲基腺嘌呤组8只。采用盲肠结扎穿孔术构建脓毒症小鼠心肌损伤模型，在造模前1 h腹腔注射3-甲基腺嘌呤(10 mg/kg)，在造模前30 min腹腔注射大黄素(20 mg/kg)，其余各组在相同的时间点注射等量的生理盐水。所有小鼠在术后24 h留取血液及心肌样本。ELISA检测血清中心肌损伤标志物脑钠肽、心肌肌钙蛋白I水平，Western blot检测心肌组织中LC3B、Beclin-1及p62的蛋白表达，苏木精-伊红染色观察心肌组织的病理变化，超声评估小鼠心脏功能。结果与结论：(1)与假手术组相比，假手术+大黄素组血清脑钠肽、心肌肌钙蛋白I水平和心肌自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62蛋白表达均无统计学差异(P> 0.05)；(2)与假手术+大黄素组相比，模型组血清脑钠肽、心肌肌钙蛋白I水平均显著升高(P 0.05)；(6)以上结果表明，大黄素预处理可通过促进自噬改善脓毒症小鼠的心肌损伤和心肌功能障碍。

关键词：大黄素脓毒症脓毒症心肌损伤心功能自噬炎症反应保护作用工程化组织构建

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铁死亡与骨质疏松症

中国组织工程研究 2025年第3期29卷 554-562页

作者：杨城李玮民冉栋成许嘉木吴王祥胥家福陈晶晶蒋光福王春庆贵州医科大学临床医学院贵州省贵阳市550004 贵州省人民医院骨科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院急诊外科贵州省贵阳市550004

背景:已证实铁死亡与多种骨骼肌肉疾病密切相关,例如类风湿关节炎、骨肉瘤、骨质疏松症等。而铁死亡和骨质疏松症的病理生理机制有待进一步研究和阐明,以拓宽对铁代谢和骨质疏松症的认识,为今后阐明骨质疏松的新机制、开发治疗骨质疏松... 详细信息

背景:已证实铁死亡与多种骨骼肌肉疾病密切相关,例如类风湿关节炎、骨肉瘤、骨质疏松症等。而铁死亡和骨质疏松症的病理生理机制有待进一步研究和阐明,以拓宽对铁代谢和骨质疏松症的认识,为今后阐明骨质疏松的新机制、开发治疗骨质疏松的新技术和新药提供研究思路。目的:对铁死亡在骨质疏松症中的研究现状展开综述,为未来研究骨质疏松症的具体分子机制提供一条新方向,为骨质疏松症的治疗策略提供更有效、更好的选择。方法:由第一作者应用计算机检索2000-2024年出版的文献,以“铁死亡,铁代谢,骨质疏松,成骨细胞,破骨细胞,骨代谢,信号通路,肌肉骨骼,综述”等为中文检索词检索中国知网、万方和维普数据库;以“ferroptosis,iron metabolism,osteoporosis,osteoblast,osteoclast,bone metabolism,signal pathway,musculoskeletal,review”等为英文检索词检索PubMed数据库,按照入选标准最终共纳入68篇文献。结果与结论:①铁死亡是近年来发现的一种新的细胞死亡类型,通常伴随着细胞死亡过程中的大量铁积累和脂质过氧化,其发生具有铁依赖性,这与目前研究较热的几种细胞死亡方式(例如细胞焦亡、坏死性凋亡、铜死亡、自噬)有明显的区别。②细胞内铁稳态表现为铁的吸收、输出、利用和储存之间的平衡。人体的铁调节系统包括全身调节和细胞内调节,系统调节的主要因子是肝分泌产生的铁调节激素,细胞调节依赖于铁调节蛋白/铁反应元件系统;当然,细胞内铁稳态还可以由其他因素控制,例如缺氧、细胞因子和激素等。③脂质过氧化反应会对生物膜(质膜和内部细胞器膜)、脂蛋白和其他含脂质的分子造成氧化损伤。多不饱和脂肪酸磷脂是脂质过氧化的重要靶点,游离多不饱和脂肪酸是脂质氧化的重要底物,可与磷脂双分子层结合,导致过度氧化,从而引发脂质凋亡。④多项研究表明,通过不同的方式使成骨细胞铁超载,致细胞内不稳定的亚铁不断积累并产生活性氧和脂质过氧化物,造成成骨细胞铁死亡,最终引起骨形成减少影响骨稳态发生骨质疏松。⑤破骨细胞是由单核巨噬细胞系或骨髓间充质干细胞在核因子κB配体受体激活因子诱导下融合形成的大型多核细胞,具有骨吸收功能。铁离子可通过产生细胞内脂质活性氧促进破骨细胞分化和骨吸收,而铁螯合剂在体外可以抑制破骨细胞形成进而影响骨质疏松症的发生发展。

关键词：铁死亡铁代谢骨质疏松成骨细胞破骨细胞骨代谢信号通路综述

单纯性支气管扩张症与支气管扩张症-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征患者的病原菌对比研究

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中国全科医学 2025年第6期28卷 729-736页

作者：吴俊张玲顾东伟郑磊赵祝香赵子文安徽省马鞍山市人民医院呼吸与危重症医学科 243000 安徽省马鞍山市人民医院检验科 243000 华南理工大学附属第二医院广州市第一人民医院呼吸与危重症医学科广东省广州市510180

背景我国慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)及支气管扩张症(简称支扩)患者数量庞大,均为高发病率、高病死率的慢性呼吸系统疾病。支气管扩张症-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征(BCOS)作为一种特殊临床亚型虽常见但易被忽略。感染常是其急性恶化... 详细信息

背景我国慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)及支气管扩张症(简称支扩)患者数量庞大,均为高发病率、高病死率的慢性呼吸系统疾病。支气管扩张症-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征(BCOS)作为一种特殊临床亚型虽常见但易被忽略。感染常是其急性恶化的诱因,但相关病原学研究相对匮乏。目的分析单纯性支气管扩张症(BE)与BCOS患者病原菌分布、耐药性特点,比较两者差异。为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法选取2016年1月—2023年1月在马鞍山市人民医院呼吸与危重医学科住院的支扩患者584例为研究对象,根据是否合并慢阻肺将患者分为两组:BE组(未合并慢阻肺,335例)和BCOS组(合并慢阻肺,249例)。回顾性分析患者病原菌构成、药敏结果及变迁,分析两组病原菌分布及耐药性差异。结果584例支扩患者共分离299株病原菌,BE组分离病原菌146株,其中革兰阴性菌87株(59.59%),革兰阳性菌3株(2.05%),分枝杆菌9株(6.16%),真菌47株(32.19%);BCOS组分离病原菌153株,其中革兰阴性菌80株(52.29%),革兰阳性菌1株(0.65%),分枝杆菌2株(1.31%),真菌70株(45.75%);BCOS组患者白色念珠菌构成比高于BE组(χ^(2)=5.274,P=0.022)。两组铜绿假单胞菌耐药率分别为:亚胺培南10.64%、25.53%,哌拉西林他唑巴坦6.98%、15.91%,环丙沙星12.77%、21.28%,阿米卡星2.13%、2.13%;两组肺炎克雷伯菌耐药率分别为:亚胺培南0、14.29%,哌拉西林他唑巴坦0、14.29%,环丙沙星15.38%、35.71%,阿米卡星0、7.14%;BCOS组铜绿假单胞菌对氨苄西林舒巴坦耐药率低于BE组(P=0.026)。BCOS组患者产超广谱β内酰胺酶肠杆菌科(χ^(2)=4.357,P=0.037)及耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌分离率均高于BE组(χ^(2)=5.593,P=0.018)。2016—2022年支扩患者分离铜绿假单胞菌株数均最高,呈先降后升趋势;分离肺炎克雷伯菌株数在2021、2022年明显升高,仅次于铜绿假单胞菌;2020—2022年分离分枝杆菌株数及2021—2022年分离曲霉菌株数均呈上升趋势。结论BCOS作为一种特殊表型,其病原菌分布、耐药性有其自身特点,值得关注。铜绿假单胞菌目前是BE及BCOS患者常见分离致病菌,近年来分离肺炎克雷伯菌株数仅次于铜绿假单胞菌。分离分枝杆菌、曲霉菌株数较前亦明显上升,应引起重视,尤其是BE患者。

关键词：支气管扩张症肺疾病,慢性阻塞性支气管扩张症-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征铜绿假单胞菌肺炎克雷伯菌抗药性

SD大鼠乳鼠原代皮质神经元和小胶质细胞同时提取并培养的实验方法

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1395-1400页

作者：何龙才宋文学明江陈光唐王军浩廖益东崔君拴徐卡娅贵州医科大学贵州省贵阳市550004 贵阳市第一人民医院贵州省贵阳市550002 贵州医科大学附属医院神经外科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院高压氧科贵州省贵阳市550004

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质... 详细信息

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质神经元及小胶质细胞的方法。方法:取24 h内新生SD大鼠乳鼠,将大脑取出放入装有DMEM的培养皿中,去除软脑膜后备用。同一脑组织,先提取原代神经元,再将剩余脑组织用于提取小胶质细胞,整个过程在冰上操作。原代皮质神经元提取培养步骤:镊子夹取2.0-3.0 mm厚度大脑皮质组织置于培养皿,用木瓜蛋白酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈互相粘连的组织悬液,吸上清细胞悬液,过滤、分装到15 mL离心管中,离心并重悬后将细胞接种于左旋多聚赖氨酸包被的6孔板爬片上放入细胞培养箱,每隔1 d观察神经元形态,第7天进行MAP2和β-Tubulin免疫荧光染色鉴定。小胶质细胞提取培养步骤:夹取上一步取皮质后剩余脑组织,厚度8-10 mm,置于培养皿,用胰酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈匀浆,然后将匀浆转移到培养瓶中培养,第14天将培养瓶封口后进行恒温水平摇床振荡2 h,小胶质细胞脱落于上清中;取纯化后的小胶质细胞继续培养3 d进行Iba1免疫荧光染色鉴定。结果与结论:(1)神经元培养24 h后贴壁、胞体变大,部分神经元长出突触;培养到第3,5天时胞体进一步增大,大部分神经元已呈突触形态,部分神经元成团生长;第7天时,神经元突触延长增粗并互相连接成网。经β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色鉴定为神经元。(2)小胶质细胞培养第1天换液后可见细胞贴壁生长;第3,5,7天时细胞密度均较小,细胞形态呈高亮椭圆或圆形,但已基本成团块状生长于其他细胞上层;第10天时小胶质细胞密度明显增大;第14天时小胶质细胞呈致密团块状生长于其他细胞上层,此时可进行分离纯化。取分离纯化后细胞再培养至第3天,经Iba1免疫荧光鉴定为小胶质细胞,且纯度大于95%。(3)结果表明,经此法提取并培养获得的原代皮质神经元和小胶质细胞纯度高、形态好、成活率高。

关键词：原代皮质神经元小胶质细胞 SD大鼠细胞提取细胞培养

糖尿病肾病模型:动物模型、二维细胞模拟及三维类器官模型

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中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3632-3640页

作者：钱足平陈勇冉燕达静静查艳遵义医科大学贵州省遵义市563000 贵州省人民医院肾内科贵州省贵阳市550002

背景:近几年来,人类多能干细胞衍生的肾类器官及糖尿病肾病啮齿动物模型取得了一定的进展。然而,由于糖尿病肾病发病受环境因素及遗传因素共同作用,发病机制复杂,并且对于此类患者的临床治疗方法需要因人而异。因此,需要开发更灵活和综... 详细信息

背景:近几年来,人类多能干细胞衍生的肾类器官及糖尿病肾病啮齿动物模型取得了一定的进展。然而,由于糖尿病肾病发病受环境因素及遗传因素共同作用,发病机制复杂,并且对于此类患者的临床治疗方法需要因人而异。因此,需要开发更灵活和综合的方法,从而发现强有力的临床前证据,以支持对糖尿病肾病患者进行更有针对性的干预。目的:从动物模型、二维细胞培养模拟及三维类器官模型等方面综述了糖尿病肾病模型的研究进展,为进一步的研究提供线索和思路。方法:以“糖尿病,糖尿病肾病,糖尿病肾病模型,糖尿病肾病动物模型,类器官,肾脏类器官,糖尿病肾病细胞模型,糖尿病肾病病证结合动物模型”为中文检索词,“Diabetes,diabetic nephropathy,diabetic kidney diseases,diabetic nephropathy models,diabetic nephropathy animal models,organoids,diabetic and organoids,diabetic and kidney organoids,kidney organoids,diabetic nephropathy cell models,diabetic nephropathy syndrome combined animal models”为英文检索词,检索中国知网及PubMed数据库,最终纳入101篇文献进行综述分析。结果与结论:糖尿病肾病体内模型和体外模型是深入研究糖尿病肾病发病机制的有力工具。动物模型可以观察到多系统之间的相互作用;二维细胞培养操作简便且成本较低;新兴的肾类器官填补了二维和整体水平之间的空白,无种属差异且一定程度模拟了人肾脏的复杂性。随着类器官技术的不断发展,肾类器官有望为探索糖尿病肾病的发病机制、病理生理过程和药物筛选提供一个新的视角。

关键词：糖尿病肾病肾脏类器官糖尿病肾病类器官细胞模型动物模型中医病证结合糖尿病肾病模型工程化组织构建

sFlt-1、D-乳酸、LDH表达在急性重症胰腺炎合并感染临床诊断的价值研究

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黑龙江医药科学 2025年第01期 114-117页

作者：王誉翔许明陈钰信阳市人民医院重症医学科信阳市中心医院重症医学科

目的：探讨急性重症胰腺炎(SAP)合并感染患者可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、D-乳酸、乳酸脱氢酶(LDH)表达在该合并症中的临床诊断价值及菌群分布与耐药性。方法：选取2021年12月至2023年11月信阳市人民医院急诊科收治的SAP患... 详细信息

目的：探讨急性重症胰腺炎(SAP)合并感染患者可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、D-乳酸、乳酸脱氢酶(LDH)表达在该合并症中的临床诊断价值及菌群分布与耐药性。方法：选取2021年12月至2023年11月信阳市人民医院急诊科收治的SAP患者80例进行回顾分析，根据SAP是否合并感染分组，分成A组(SAP)、B组(SAP合并感染),判断急性重症胰腺炎合并感染患者sFlt-1、D-乳酸、LDH表达在临床诊断的价值研究及菌群分布与耐药性。结果：(1)A、B组的BMI、HDL-C、LDL-C、FBG、BUN、TC、TG及hs-CRP、D-二聚体等指标表达水平相比无显著差异(P>0.05)。(2)A组的sFlt-1、D-乳酸、LDH表达水平较B组更低，差异显著(P<0.05)。(3)单项诊断时，sFlt-1、D-乳酸、LDH的AUC值各0.876、0.765、0.812,SEN各82.43%、83.05%和83.45%,SPE各79.54%、76.43%、80.00%,而3种联合诊断时的AUC、SEN、SPE各0.937、91.44%和91.23%。(4)80例SAP合并感染患者合计分离出201株菌株，葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、淋球菌、脑膜炎球菌及其他各占27.86%、19.40%、20.40%、14.43%、10.45%和7.46%,其中血压或中心静脉导管、坏死组织、腹部脓液、腹腔引流及胆汁各占17.41%、27.86%、17.91%、24.38%、12.44%。(5)5-氟胞嘧啶、两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑及伏立康唑等5类药物在葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、淋球菌、脑膜炎球菌及其他菌种中合计占比各82.59%、90.55%、54.73%、76.62%、98.51%。结论：在SAP合并感染患者的早期诊断中sFlt-1、D-乳酸、LDH联合诊断的价值更高，临床应用价值较好。同时SAP合并感染患者在临床治疗时的菌群分布及对相关药物的耐药性各异。

关键词：急性重症胰腺炎 sFlt-1 D-乳酸 LDH

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌治疗药物在人工关节感染的临床综合评价

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医药导报 2025年

作者：刘心如李梦露龚金红王禹基苏丹周鑫叠商晶晶南京医科大学附属常州第二人民医院药学部大连医科大学药学院南京医科大学附属常州第二人民医院骨科

目的多方位评价耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）治疗药物在人工关节感染中的综合价值，解决人工关节MRSA感染难题。方法通过文献调研，检索相关文献，筛选归纳出符合要求的临床研究。应用层次分析法，收集临床综合评价证据，以评价... 详细信息

目的多方位评价耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）治疗药物在人工关节感染中的综合价值，解决人工关节MRSA感染难题。方法通过文献调研，检索相关文献，筛选归纳出符合要求的临床研究。应用层次分析法，收集临床综合评价证据，以评价指南为准则进行不同维度的评价；运用德尔菲法与层次分析法结合专家匿名问卷评价，对数据进行比对分析。结果成功建立了治疗人工关节感染治疗药物的临床综合评价指标模型，采用yaahp分析软件对各方向的临床综合评价证据进行评分；通过该软件分析权重计算MRSA治疗药物万古霉素、达托霉素及利奈唑胺各级指标的最终临床综合评价权重，得出利奈唑胺临床综合评价得分最高。结论在人工关节MRSA感染的治疗药物中，利奈唑胺临床综合价值更高，可为人工关节MRSA感染的临床治疗提供参考依据。

关键词：临床综合评价耐甲氧西林金黄色葡萄球菌层次分析法德尔菲法人工关节感染

IABP对脓毒性休克合并心肌损伤患者血流动力学指标及短期预后的影响

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黑龙江医药科学 2025年第01期 83-84页

作者：徐龙庆张蛟高延秋新乡医学院郑州大学附属郑州中心医院呼吸重症医学科荥阳市人民医院呼吸重症医学科

目的：探究主动脉内球囊反搏术(IABP)对脓毒性休克合并心肌损伤患者的影响。方法：根据治疗方法的不同将荥阳市人民医院2021年6月至2024年1月重症监护病房住院的50例脓毒性休克合并心肌损伤患者分为观察组29例和对照组21例。对照组接受... 详细信息

目的：探究主动脉内球囊反搏术(IABP)对脓毒性休克合并心肌损伤患者的影响。方法：根据治疗方法的不同将荥阳市人民医院2021年6月至2024年1月重症监护病房住院的50例脓毒性休克合并心肌损伤患者分为观察组29例和对照组21例。对照组接受常规治疗，观察组接受IABP治疗，比较两组血流动力学指标、心肌损伤标志物水平及短期预后。结果：治疗后，观察组平均动脉压(MAP)显著高于对照组(P0.05)。结论：IABP治疗脓毒性休克合并心肌损伤患者能有效改善患者血流动力学，减轻心肌损伤程度，提高7 d存活率，对患者14 d、28 d存活率影响较小。

关键词：脓毒性休克脓毒性心肌损伤主动脉内球囊反搏血流动力学预后

绿原酸对中性粒细胞功能及胞外诱捕网形成的影响及机制

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中国药理学通报 2025年第1期41卷 101-107页

作者：杨运刘娅王翠彭春红贵州中医药大学第二临床医学院贵州贵阳550025 七星关区中医妇幼集团医院贵州毕节551700 毕节市中医医院贵州毕节551700 贵州医科大学临床医学院贵州贵阳550025 贵州省人民医院呼吸与危重医学科贵州贵阳550002 国家卫健委肺脏免疫性疾病重点实验室贵州贵阳550002

目的探究绿原酸(chlorogenic acid,CGA)对中性粒细胞(neutrophil,NEU)功能及中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成的影响及机制。方法从小鼠骨髓中分离并纯化NEU;将NEU与CGA共培养,通过CCK-8法筛选共培养适合的干预浓度;检测NEU迁移能力、髓过氧化物酶(MPO)以及脱颗粒弹性蛋白酶(NE)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平观察CGA对NEU功能的影响;免疫荧光法观察NETs的主要结构组蛋白H3及DNA骨架,以及检测NEU释放的游离DNA(cf-DNA)含量,观察NETs的形成情况;检测NEU产生的活性氧(ROS)水平,以确定CGA是否影响NEU释放NETs过程中的ROS的生成。结果CGA在浓度为100、200、400μmol·L^(-1)时对NEU活性有明显抑制作用(P<0.01)。与空白组(Blank)相比,CGA(100、200、400μmol·L^(-1))干预后,细胞迁移能力及MPO、NE、MMP-9分泌量增加(P<0.05),组蛋白H3及DNA骨架、cf-DNA的释放量明显增加(P<0.01),细胞产生的ROS也明显增加(P<0.01),上述作用在一定范围内具有浓度依赖性。结论CGA能够增强NEU功能及促进NETs的形成,可能与促进细胞内ROS水平增加有关。

关键词：绿原酸中性粒细胞胞外诱捕网免疫抗菌活性氧