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基于山羊痘病毒融合蛋白的间接ELISA检测方法的建立及初步应用

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中国动物传染病学报 2025年

作者：肖琨王永璇田芬彭郁霖胡鹏飞程振涛六盘水市动物疫病预防控制中心贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室盘州市动物疫病预防控制中心

为建立山羊痘病毒（GTPV）间接ELISA检测方法，本研究表达出了GTPV 059-P32-L1R融合蛋白作为检测抗原，优化各试验条件并进行评价。结果显示，重组059-P32-L1R蛋白以包涵体形式表达，经Western blot鉴定可知其具有良好的抗原性。经优化... 详细信息

为建立山羊痘病毒（GTPV）间接ELISA检测方法，本研究表达出了GTPV 059-P32-L1R融合蛋白作为检测抗原，优化各试验条件并进行评价。结果显示，重组059-P32-L1R蛋白以包涵体形式表达，经Western blot鉴定可知其具有良好的抗原性。经优化后的间接ELISA方法中，059-P32-L1R蛋白的包被浓度为0.5 μg/mL；阳性血清1:800稀释后，OD450仍大于0.344，敏感性好；对GTPV具有特异性；批内及批间的重复变异系数均小于10.9%；与商用试剂盒检测符合率达95.8%。本研究成功表达出GTPV重组059-P32-L1R融合蛋白，并建立了间接ELISA检测方法，为GTPV的防控技术研究提供了工具与参考。

关键词：山羊痘病毒原核表达酶联免疫吸附试验融合蛋白

上海5家宠物医院环境不动杆菌的耐药性检测及一株皮特不动杆菌的测序分析

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微生物学通报 2025年第2期 725-735页

作者：张玉杰王晓旭徐锋沈莉萍鞠龚讷唐聪圣齐新永徐平王建上海市动物疫病预防控制中心

【背景】不动杆菌属(Acinetobacter)细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境... 详细信息

【背景】不动杆菌属(Acinetobacter)细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境样品，经细菌分离、纯化后利用细菌鉴定质谱仪鉴定分离株种属，并通过微量肉汤稀释法检测不动杆菌属分离株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)，并对其中1株耐碳青霉烯类分离菌进行基因组测序及遗传特征分析。【结果】730份环境样品共分离获得124株革兰氏阴性菌，经鉴定14株属于不动杆菌属，其中9株为鲁氏不动杆菌(A. lwoffii)。14株不动杆菌均对米诺环素敏感，但其中2株皮特不动杆菌(A. pittii)和2株鲁氏不动杆菌为碳青霉烯类多重耐药不动杆菌，5株鲁氏不动杆菌对复方新诺明耐药，1株约氏不动杆菌(A. johnsonii)对环丙沙星耐药。基因组测序结果表明，碳青霉烯类多重耐药皮特不动杆菌携带NDM-1、OXA-500和OXA-727等相关耐药基因，多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)结果表明分离株为ST1037型，单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)分析该菌株与来源于浙江省的临床尿液分离株A. pittii AP43的进化距离最近。【结论】上海市5家宠物医院环境中的不动杆菌分离株耐药率较低(<40%)，存在多重耐药现象(5株不动杆菌分别耐≥3种药物)且皮特不动杆菌携带多种耐药基因。

关键词：宠物医院不动杆菌属碳青霉烯耐药性测序

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果园养鸡的优势及鸡的饲养管理

中国畜牧业 2025年第1期 66-67页

作者：袁晓娟刘铭英倪定琴吴冬梅贵州省黔东南州动物疫病预防控制中心贵州省凯里市动物疫病预防控制中心

随着人们生活水平的提高和社会文明的进步,规模化笼养鸡及产品药残难以控制、疫病威胁严重、污染破坏生态环境等问题日益凸显,而以回归大自然的林下生态养鸡因其品质优、风味佳,越来越受到消费者的青睐。国内外亦越来越重视和提倡发展... 详细信息

随着人们生活水平的提高和社会文明的进步,规模化笼养鸡及产品药残难以控制、疫病威胁严重、污染破坏生态环境等问题日益凸显,而以回归大自然的林下生态养鸡因其品质优、风味佳,越来越受到消费者的青睐。国内外亦越来越重视和提倡发展生态养鸡,这说明之后的养鸡业发展会越来越重视产品质量、生态环境和动物福利方向。

关键词：生态养鸡动物福利笼养鸡生态环境药残饲养管理产品质量疫病

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舍饲肉羊腹泻原因及综合防治

中国畜牧业 2025年第2期 90-91页

作者：吕玉新贵州省兴义市农业农村局动物疫病预防控制中心

随着市场需求的增加,肉羊养殖规模不断扩大,舍饲肉羊腹泻问题频发,严重时可导致羊只生长迟缓、体质下降甚至死亡,给养殖户带来巨大的经济损失。肉羊腹泻的发病原因较多,管理不善、营养不平衡、环境条件恶劣、传染病原侵袭等均可诱发该病... 详细信息

随着市场需求的增加,肉羊养殖规模不断扩大,舍饲肉羊腹泻问题频发,严重时可导致羊只生长迟缓、体质下降甚至死亡,给养殖户带来巨大的经济损失。肉羊腹泻的发病原因较多,管理不善、营养不平衡、环境条件恶劣、传染病原侵袭等均可诱发该病,并且单一因素诱发的腹泻比较少见,一般是由集中致病菌一起联合作用的结果,这也给治疗带来一定的难度,其复杂性和多变性要求养殖者具备综合性的诊断与防治能力。笔者旨在通过分析肉羊舍饲腹泻的主要原因,并针对诱发原因提出有效的防治措施。

关键词：传染病原舍饲肉羊腹泻原因诱发原因羊腹泻综合防治管理不善防治措施

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非洲猪瘟的防范风险点及防控方法研究

吉林畜牧兽医 2025年第2期46卷 40-42页

作者：梁均杨贤浩贵州省天柱县动物疫病预防控制中心贵州天柱556699

非洲猪瘟虽然传染力强、死亡率高,但是根据流行情况而言,这种疫病并非是不可防不可控的,只要有关部门、基层养殖人员对非洲猪瘟疫情能够正确认识,在日常防范中从细节处入手,就能最大程度控制非洲猪瘟的传播。本文笔者根据近几年在基层... 详细信息

非洲猪瘟虽然传染力强、死亡率高,但是根据流行情况而言,这种疫病并非是不可防不可控的,只要有关部门、基层养殖人员对非洲猪瘟疫情能够正确认识,在日常防范中从细节处入手,就能最大程度控制非洲猪瘟的传播。本文笔者根据近几年在基层的防控经验,首先分析非洲猪瘟的防范风险点,其次从几个方面深入探究非洲猪瘟的防治方法,以供同行参考。

关键词：非洲猪瘟防范风险点防治

某规模猪场突发猪伪狂犬病和猪圆环混合感染的诊断与防控

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畜禽业 2025年第1期36卷 56-60页

作者：石兴林汪忠荣田珂高潇祎张人俊王彬潘靖贵州省黄平县农业农村局贵州黄平556100 黔东南州动物疫病预防控制中心贵州凯里556000 贵州农业职业学院贵州贵阳551400 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳550008 贵州大学动物科学院贵州贵阳550025

为摸清某猪场母猪流产、产弱仔数增加的原因,采集了空怀、产弱仔、流产母猪、断奶仔猪和种公猪的血清以及弱仔组织,应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测、细菌分离培养和荧光PCR法检测,汇总分析检测结... 详细信息

为摸清某猪场母猪流产、产弱仔数增加的原因,采集了空怀、产弱仔、流产母猪、断奶仔猪和种公猪的血清以及弱仔组织,应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测、细菌分离培养和荧光PCR法检测,汇总分析检测结果。结果显示:猪伪狂犬病gE抗体阳性率生产母猪为83.96%、种公猪为33.33%、断奶仔猪为63.24%;非洲猪瘟、猪瘟和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测均为阴性,2头弱仔病猪和2头屡配不孕母猪均呈现猪圆环病2型核酸阳性;细菌分离培养未见病原菌。经过综合分析、流行病学调查和实验室检测综合诊断,引起母猪屡配不孕、弱仔数增加的原因是猪伪狂犬病野毒和猪圆环病毒2型混合感染。建议该猪场采取全群接种猪伪狂犬基因缺失疫苗和猪圆环病毒2型疫苗,对屡配不孕的母猪进行淘汰,在猪场分步实施伪狂犬病和猪圆环病2型净化,对全场进行合理消毒,健全生物安全管理措施。

关键词：繁殖障碍猪伪狂犬病猪圆环病毒2型检测诊断

鸭疫里默氏杆菌对季铵盐类消毒剂耐药性的研究进展

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养禽与禽病防治 2025年第1期 2-7页

作者：包涛涛慕江静陈敏杨先富吴通奎汪忠荣姜艳贵州省黔东南州动物疫病预防控制中心贵州凯里556000 贵州省凯里市农业农村局贵州凯里556000

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA),是一种危害养鸭业严重的细菌性病原,由于其血清型众多且不同血清型间缺乏交又保护,抗生素的预防以及治疗一直被用于控制该菌传播,但不合理的抗生素使用也导致了多重耐药菌甚至超级细菌的... 详细信息

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA),是一种危害养鸭业严重的细菌性病原,由于其血清型众多且不同血清型间缺乏交又保护,抗生素的预防以及治疗一直被用于控制该菌传播,但不合理的抗生素使用也导致了多重耐药菌甚至超级细菌的出现。为此,养殖场户在生产环节通过使用消毒剂防控细菌性疾病且已取得较好防控效果。季铵盐类化合物(Quaternary ammonium compounds,QACs)消毒剂是临床上应用广泛且效果较好的一种消毒剂,可以较好杀灭病原微生物,但不规范选用消毒剂也易产生耐消毒剂菌株,且消毒剂与抗生素耐药可共传播。本文就RA概述、RA耐药机制、QACs简介、QACs抗菌作用机制以及RA对QACs消毒剂抗性研究进展做一论述,旨在为临床RA消毒剂抗性研究提供一定文献参考。

关键词：鸭疫里默氏杆菌季铵盐消毒剂耐药

基于猪流行性腹泻病毒S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法的建立

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中国兽医科学 2025年第1期55卷 73-79页

作者：柴茂马震原杨海波王淑娟赵雪丽刘影王东方王翠谢彩华闫若潜河南省动物疫病预防控制中心河南省重大动物疫病监测预警及防控重点实验室河南商郑州450000

为建立基于猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法,利用真核表达系统表达PEDV S蛋白主要抗原区,将纯化的S蛋白免疫小鼠后制备抗PEDV S蛋白的单克隆抗体,经各组分和反应条件优化,建立了检测PEDV S蛋白抗体的竞争ELISA方... 详细信息

为建立基于猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法,利用真核表达系统表达PEDV S蛋白主要抗原区,将纯化的S蛋白免疫小鼠后制备抗PEDV S蛋白的单克隆抗体,经各组分和反应条件优化,建立了检测PEDV S蛋白抗体的竞争ELISA方法。结果表明,表达的S蛋白大小为92 k Da,制备出IgG1亚类的抗S蛋白单克隆抗体5B3D6,建立的竞争ELISA方法S/N临界值为0.400,样品检测时间短(55 min),重复性稳定(变异系数小于10%),特异性强(无交叉反应),与血清中和试验的总符合率高(97.08%)。该方法为PEDV抗体评估和猪流行性腹泻防控提供了有力支撑。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白单克隆抗体竞争ELISA

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猪水肿病的诊疗和防控策略研究

吉林畜牧兽医 2025年第1期46卷 67-69页

作者：梁均罗杰贵州省天柱县动物疫病预防控制中心贵州天柱556699 贵州省天柱县农业农村局畜牧业发展中心 556699

水肿病是猪养殖时常见的一类急性散发性传染病,具有传染性强、危害性大、致死率高等特征,对猪只健康危害甚大,如果没有及时得到治疗,病猪易死亡并造成极大的经济损失。同时也为养殖户带来消极影响。因此,做好猪水肿病的防治工作具有现... 详细信息

水肿病是猪养殖时常见的一类急性散发性传染病,具有传染性强、危害性大、致死率高等特征,对猪只健康危害甚大,如果没有及时得到治疗,病猪易死亡并造成极大的经济损失。同时也为养殖户带来消极影响。因此,做好猪水肿病的防治工作具有现实意义。本文以天柱县为例,着重对猪水肿病的诊疗方法和防控策略展开了深入研究。

关键词：猪水肿病症状治疗方法防控策略